前列腺組織間質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)及臨床意義

1、前列腺組織間質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)及臨床意義摘要目的：研究前列腺增生癥(BPH)組織間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的相關(guān)臨床意義。方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)和細(xì)胞計數(shù)方法對前列腺組織各類間質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行定量測定，并與BPH患者各項(xiàng)臨床參數(shù)進(jìn)行相關(guān)分析。結(jié)果：BPH組織中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞明顯增多，其中平滑肌細(xì)胞數(shù)與IPSS呈正相關(guān)，與平均尿流率和最大尿流率呈明顯負(fù)相關(guān)，成纖維細(xì)胞數(shù)與前列腺體積呈明顯正相關(guān)。結(jié)論：平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞增殖在BPH發(fā)病過程和臨床表現(xiàn)中具有重要作用。關(guān)鍵詞前列腺增生癥間質(zhì)細(xì)胞免疫組織化學(xué) The expression of prostatic mesenchymal cells and its

2、clinical significanceChen JieZhou XichaiYe Zhangqunet alDepartment of Urology,Attached Tongji Hospital of Tongji Medical Uni versity,Wuhan,430030AbstractPurpose：To study on the expression of prostatic mesenchymal cells and its clinical significance in patients with BPH.Methods：Quantitation of prosta

3、tic mesenchymal cells was studied by immunohistochemical and cell count methods,and the correlation an alysis of it was made with clinical parameters of BPH patients.Results：It was found that the amount of smooth muscle cells and fibroblasts in BPH group was larger than that in normal prostate tissu

4、e.In BPH group,the amount of sommth muscle cells was negativelly related to AFR and PFR of BPH patien ts,but positively related to IPSS of them,and the amount of fibroblasts was posi tively related to prostatic volume of BPH patients.Conclusions：It was suggested that the proliferation of smooth musc

5、le cells and fibroblasta play very important roles on the clinical manifestation of BPH patients.Key wordsBPHMesenchymal cellsImmunohistochemistry間質(zhì)成分在前列腺增生癥(BPH)發(fā)病中的作用日漸引起人們的重視，但有關(guān)各類間質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量、間質(zhì)細(xì)胞在正常前列腺(NP)和增生前列腺的差異性表達(dá)情況以及BPH組織中間質(zhì)細(xì)胞數(shù)量與BPH患者臨床癥狀之間的關(guān)系尚無全面系統(tǒng)的研究。為此，我們運(yùn)用免疫組織化學(xué)鏈霉菌素-生物素免疫酶標(biāo)染色法(LSAB法)對20例NP標(biāo)

6、本和20例BPH標(biāo)本進(jìn)行了上述有關(guān)研究，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。1材料與方法1.1組織標(biāo)本NP標(biāo)本為武漢地區(qū)19951996年因意外死亡的尸檢前列腺標(biāo)本，共20例，均經(jīng)組織學(xué)檢查證實(shí)為無明顯病理改變的正常前列腺。BPH標(biāo)本為我科19951996年手術(shù)摘除(恥骨上經(jīng)膀胱途徑)的增生前列腺，共20例，均經(jīng)病理檢查診斷為BPH，并有完整病歷資料。標(biāo)本取自于膀胱頸至精阜尾端連線的中點(diǎn)處，經(jīng)10%甲醛溶液固定，石蠟包埋，4m連續(xù)切片5張，3張行免疫組織化學(xué)染色，1張行HE染色復(fù)查，1張作陰性對照。1.2臨床參數(shù)20例BPH患者年齡、前列腺體積、國際前列腺癥狀評分(IPSS)、最大尿流率(PFR)及平均尿流率(

7、AFR)見表1。表1BPH患者有關(guān)臨床參數(shù)臨床參數(shù)均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差范圍年齡(歲)65.376.185875前列腺體積(cm3)71.5934.6139.8188.7IPSS(分)20.444.11626PFR(ml/s)8.132.523.219.7AFR(ml/s)3.341.281.86.1 1.3主要試劑選用LSAB試劑盒、鼠抗人Actin單克隆抗體(1100)、鼠抗人Desmin單克隆抗體(1100)及鼠抗人Vimentin單克隆抗體(1100)，均為美國Dako公司產(chǎn)品。1.4免疫組織化學(xué)染色免疫組織化學(xué)染色采用LSAB法。切片常規(guī)脫蠟，逐級水化。用0.3%H2O2阻斷內(nèi)源性過氧化酶30m

8、in，小牛血清封閉30min，再在37下依次加入一抗、二抗(生物素標(biāo)記兔抗鼠IgG)及HRP標(biāo)記鏈霉菌素蛋白復(fù)合物各30min，DAB顯色，逐級脫水，透明封片。用PBS代替一抗作陰性對照。1.5結(jié)果判定由2名高年資病理醫(yī)師行雙盲法閱片，觀察Vimentin、Desmin、Actin陽性細(xì)胞的分布及形態(tài)，判別平滑肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、纖維細(xì)胞的免疫組織化學(xué)特征。同時對每張切片隨機(jī)觀察5個高倍視野，對間質(zhì)細(xì)胞總數(shù)、平滑肌細(xì)胞數(shù)、成纖維細(xì)胞數(shù)、纖維細(xì)胞數(shù)進(jìn)行計數(shù)，取其均數(shù)作為該例標(biāo)本的間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)、平滑肌細(xì)胞指數(shù)、成纖維細(xì)胞指數(shù)和纖維細(xì)胞指數(shù)。1.6統(tǒng)計學(xué)處理運(yùn)用SAS軟件系統(tǒng)行t檢驗(yàn)及相關(guān)分析。2結(jié)

9、果2.1間質(zhì)細(xì)胞在BPH和NP標(biāo)本中的差異性表達(dá)BPH標(biāo)本和NP標(biāo)本中各類間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)的均數(shù)及檢驗(yàn)結(jié)果見表2。表2BPH和NP標(biāo)本各類間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)統(tǒng)計表細(xì)胞指數(shù)BPH標(biāo)本(s)NP標(biāo)本(s)P值間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)1651375120.01平滑肌細(xì)胞指數(shù)57111750.01成纖維細(xì)胞指數(shù)8991380.01纖維細(xì)胞指數(shù)21748140.01 由表2得知，與NP標(biāo)本比較，BPH標(biāo)本間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)、平滑肌細(xì)胞指數(shù)及成纖維細(xì)胞指數(shù)明顯增加，而纖維細(xì)胞指數(shù)則減少，且均具有顯著性差異(P0.01)。2.2BPH標(biāo)本各類間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)相關(guān)分析BPH標(biāo)本中間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)與平滑肌細(xì)胞指數(shù)、成纖維細(xì)胞指數(shù)以及纖維細(xì)胞指數(shù)均

10、有較強(qiáng)的相關(guān)性，其中與成纖維細(xì)胞指數(shù)和平滑肌細(xì)胞指數(shù)呈正相關(guān)(r=0.826和0.684，P0.01)，與纖維細(xì)胞指數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.584，P0.01)。2.3BPH標(biāo)本各類間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)與BPH患者臨床參數(shù)的相關(guān)分析間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)與前列腺體積呈明顯正相關(guān)(r=0.553，P0.05)，與年齡、IPSS、PFR及AFR則無相關(guān)性。平滑肌細(xì)胞指數(shù)則與IPSS呈明顯正相關(guān)(r=0.652，P0.01)，與PFR和AFR呈明顯負(fù)相關(guān)(r=-0.831和-0.719，P0.01)，與前列腺體積及年齡無相關(guān)性。成纖維細(xì)胞指數(shù)與前列腺體積呈明顯正相關(guān)(r=0.732，P0.01)，與患者年齡、IPSS、

11、PFR及AFR則無相關(guān)性。纖維細(xì)胞指數(shù)與患者各項(xiàng)臨床參數(shù)之間未發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。3討論BPH為一老年常見病，其發(fā)病機(jī)制至今尚未明了。近年來業(yè)已證明BPH以間質(zhì)增生為主17。因此，對前列腺間質(zhì)成分的研究成為熱門，但其研究多集中在間質(zhì)成分面積定量測定和細(xì)胞外基質(zhì)的表達(dá)方面19，對間質(zhì)細(xì)胞數(shù)目的定量分析及其相關(guān)臨床意義則研究較少。本研究著重對各類間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)與BPH患者各項(xiàng)臨床參數(shù)進(jìn)行了相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)、成纖維細(xì)胞指數(shù)與前列腺體積有明顯正相關(guān)，其中成纖維細(xì)胞的相關(guān)系數(shù)高于間質(zhì)細(xì)胞相關(guān)系數(shù)，這與成纖維細(xì)胞能旺盛分泌細(xì)胞外基質(zhì)有關(guān)。因?yàn)榍傲邢袤w積的增大取決于兩大因素：細(xì)胞數(shù)目增多；細(xì)胞外基質(zhì)明顯增加

12、。本研究發(fā)現(xiàn)成纖維細(xì)胞的增加為BPH發(fā)生過程中的一個重要組織病理學(xué)特點(diǎn)，因?yàn)槌衫w維細(xì)胞指數(shù)與間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)相關(guān)性最強(qiáng)，高于平滑肌細(xì)胞指數(shù)和纖維細(xì)胞指數(shù)，這能很好地解釋為什么間質(zhì)細(xì)胞指數(shù)與前列腺體積也有相關(guān)性。平滑肌細(xì)胞指數(shù)與前列腺體積無明顯相關(guān)性，說明前列腺體積主要取決于非肌肉成分的影響，這與Deering等4應(yīng)用面積定量測定的研究結(jié)果一致。本研究還發(fā)現(xiàn)BPH標(biāo)本中平滑肌細(xì)胞指數(shù)明顯增加，而且平滑肌細(xì)胞指數(shù)與IPSS、AFR和PFR均有相關(guān)性，其中與IPSS呈正相關(guān)，與AFR和PFR呈負(fù)相關(guān)。成纖維細(xì)胞指數(shù)及纖維細(xì)胞指數(shù)與上述三項(xiàng)臨床參數(shù)則無相關(guān)性。這表明動力性因素在BPH患者的臨床表現(xiàn)中占有主

13、導(dǎo)地位，因?yàn)锽PH組織平滑肌細(xì)胞明顯增加，而該細(xì)胞表面富含1受體，可通過受體的激活產(chǎn)生收縮，進(jìn)而直接影響前列腺部尿道的阻力。而前列腺體積的增大則不一定會直接影響前列腺部尿道阻力，除非十分典型的壓迫尿道的側(cè)葉和中葉增生。近年來的臨床實(shí)踐10表明，1受體阻滯劑的應(yīng)用對于改善BPH患者的IPSS和尿流率有明顯作用，這亦說明動力性因素是影響B(tài)PH臨床癥狀的主要因素。迄今為止，BPH的各種治療方法都不盡完善。本研究表明，在BPH發(fā)病過程中，平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞明顯增加，并分別與BPH患者的臨床癥狀和前列腺體積有明顯相關(guān)性。因此，如何抑制此兩類細(xì)胞增生、增殖，可能為BPH臨床研究的一個重要方向。作者簡介

14、：陳杰：研究生(現(xiàn)在同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院老年外科)作者單位：同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院泌尿外科(武漢，430030)參考文獻(xiàn)1Bafrtsch G,Muller HR,Oberholzer M,et al.Light microscopic stereological analysis of the normal human prostate and of benign prostatic hyperplasia.J Urol,1979,122：4874932Bartsch G,Frick J,Ruegy I,et al.Electron microscopic stereological

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