炮制方式對(duì)何首烏有效成份阻礙的研究

1、炮制方式對(duì)何首烏有效成份阻礙的研究【關(guān)鍵詞】何首烏；，高效液相色譜法；，醋酸鎂比色法摘要：目的考察炮制時(shí)刻對(duì)何首烏中有效成份2,3,5,4四羥基二苯乙烯208D葡萄糖甘（簡(jiǎn)稱二苯乙烯甘）和慈醍類化合物含量的阻礙。方式何首烏別離采納黑豆汁拌蒸0,2,4,6,8,10hoHPLC測(cè)定炮制飲片中二苯乙烯甘的含量；醋酸鎂比色法別離測(cè)定炮制飲片中游離蔥醍和總蔥醍的含量。結(jié)果用黑豆汁拌蒸的何首烏飲片10h內(nèi)二苯乙烯首含量隨炮制時(shí)刻先慢慢上升而后下降，以6h為峰；游離蔥醍含量慢慢升高，總慈醒含量沒(méi)有顯著性轉(zhuǎn)變。結(jié)論應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)何首烏飲片的炮制時(shí)刻。關(guān)鍵詞：何首烏；高效液相色譜法；醋酸鎂比色法Influenceof

2、ProcessMethodsonContentsofChemicalComponentinRadixPolygoniMultifIoriAbstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofdifferenttimeofprocessingRadixPolygonumMutiflorumonthecontentsofchemicalcomponents2,3,5,4-stilbeneglucosideandanthraquinonewereinvestigated.MethodsSteamedwithblackbeansaucefor0,2,4,6,8,lOhr

3、espectively.HPLCwasusedtodeterminethecontentof2,3,5,4-stilbeneglucoside.Thecolorimetrywithmagnesiumacetateascolor-developingreagentwasapplied.Thecontentoffreeandtotalanthraquinoneweredetermined.Resultslntheprocessofblackbeansaucestewing,thecontentof2,3,5,4-stilbeneglueosideincreasedwithprocessingtim

4、e,6hreachedthemostandthendecreased.Thecontentoffreeanthraquinoneincreasedwithprocessingtimeandtotalanthraquinonealmostunchanged.ConclusionTheprocessingofRadixPolygonumMutiflorumshouldbestandardizedtoavoidsignificantvariationofchemicalcontents.Keywords：RadixPolygon!MultifIori；HPLC；Magnesiumacetatecol

5、orimetryspectrophotometricmethod何首烏為蓼科植物何首烏PolygonummultiflorumThunb.的干燥塊根，為經(jīng)常使用中藥。生品具有解毒、消癰、潤(rùn)腸通便之功效。制首烏具有補(bǔ)肝腎、益精血、烏須發(fā)、增強(qiáng)免疫力、改善經(jīng)歷障礙及抗衰老等功效lo何首烏中要緊有效成份為意醒類和二苯乙烯化合物。結(jié)合意醍具有瀉下作用，何首烏經(jīng)炮制后結(jié)合意醍慢慢轉(zhuǎn)為無(wú)瀉下作用的游離意醒2o二苯乙烯甘具有抗衰老、降低膽固醇、提高免疫功能、防治動(dòng)脈硬化及保肝等作用，在何首烏中的含量較高?，F(xiàn)有的炮制方式有多種，但各類方式均未標(biāo)準(zhǔn)其炮制時(shí)刻。炮制時(shí)刻的長(zhǎng)短對(duì)其各個(gè)成份的含量阻礙較大，探明其在炮

6、制前后要緊成份轉(zhuǎn)變是很有必要的。本實(shí)驗(yàn)選擇中國(guó)藥典中規(guī)定的黑豆汁拌蒸法，考察不同時(shí)刻的黑豆汁拌蒸工藝對(duì)何首烏中要緊化學(xué)成份的阻礙。1器材日本島津高效液相色譜儀，SPD10VAP型紫外檢測(cè)器；FA2004電子天平；UV2201型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（日本Shimadzu）；AS3120型超聲波清洗器（奧特賽思儀器）。何首烏藥材由吉林敖東藥業(yè)集團(tuán)股分提供，經(jīng)鑒定均為蓼科植物何首烏的干燥塊根。實(shí)驗(yàn)樣品為實(shí)驗(yàn)室自制的何首烏生飲片，經(jīng)黑豆汁拌蒸0,2,4,6,8,10h的飲片。黑豆汁拌蒸法：取黑豆適量（1/10何首烏的量），加適量的水煎煮2次，用200目篩絹濾出，歸并濾液，濃縮至約黑豆的倍。將黑豆汁加入

7、何首烏飲片中，拌勻，浸潤(rùn)24h,掏出浸潤(rùn)后的何首烏適量作為Oh飲片單放，其余的按2,4,6,8,10h進(jìn)行蒸制。二苯乙烯昔（供含量測(cè)定用，中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)）；1,8-二羥基意醒對(duì)照品（供含量測(cè)定用，中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)08299702）；乙月青為色譜純（美國(guó)Fisher公司）；水為重蒸儲(chǔ)水，其余試劑均為分析純。2方式與結(jié)果蔥醍的含量測(cè)定對(duì)照品溶液的制備周密稱取經(jīng)105干燥至恒重的1,8-二羥基意醒對(duì)照品mg,置25nli容量瓶中，甲醇溶解并定容，作為對(duì)照品溶液。供試品溶液的制備取各何首烏飲片粉末(過(guò)80目篩)g,周密稱定，置50ml容量瓶中，加入氯仿40ml,超聲處置40m

8、in,放冷，用氯仿稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液1。另取各何首烏飲片粉末(過(guò)80目篩)g,周密稱定，置150ml錐形瓶中，加30ml氯仿和30ml硫酸(mol・L-l),水浴回流水解2h,放冷，水解液置分液漏斗中，分取氯仿層于50nli容量瓶中，水層用氯仿洗滌(5mlX3),洗液并入容量瓶中，并用氯仿稀釋至刻度,搖勻，過(guò)濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液2。線性關(guān)系考察周密吸取“項(xiàng)下的對(duì)照品溶液，一ml置10ml容量瓶中，置水浴上蒸干，放冷，將殘?jiān)胢ol・L-1醋酸鎂-甲醇溶液溶解并定容，以mol・LT醋酸鎂-甲醇溶液

9、為空白，在510nm測(cè)定吸光度，以吸光度(Y)為縱坐標(biāo)，濃度(X,Ug・mbl)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為：Y=9X+6(r=9),說(shuō)明1,8-二羥基蔥醍在Ug范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。周密度實(shí)驗(yàn)周密吸取“項(xiàng)下的對(duì)照品溶液ml,按醋酸鎂比色法測(cè)定5次，測(cè)得吸光度的RSD為九回收率實(shí)驗(yàn)周密稱取己知含量的樣品5份，每份g,置50ml容量瓶中，加入1ml對(duì)照品溶液，再加入氯仿40ml,超聲處置40min。放冷，氯仿定容，搖勻，過(guò)濾。周密吸取續(xù)濾液8ml,置10ml容量瓶中，水浴蒸干，放冷，得殘?jiān)０创姿徭V比色法測(cè)定，計(jì)算1,8一二羥基慈能的回收率。結(jié)果其平均回收率為%+%（n

10、=5）。測(cè)定方式與結(jié)果周密吸取“項(xiàng)下的供試品溶液18ml,置10ml容量瓶中，水浴蒸干，放冷，得殘?jiān)０创姿徭V比色法在510nm測(cè)定吸光度，計(jì)算游離慈醍的含量，結(jié)果見(jiàn)表1。周密吸取“項(xiàng)下的供試品溶液24ml,置10ml容量瓶中，蒸干，放冷，得殘?jiān)?。按醋酸鎂比色法在510nm測(cè)定吸光度，計(jì)算樣品中總蔥醍的含量。由此，總蔥醍含量減去游離慈醍含量，即得結(jié)合慈配含量。結(jié)果見(jiàn)表1。二苯乙烯昔的含量測(cè)定色譜條件3色譜柱：C18-PAQmmX250mm,5Um）；流動(dòng)相：乙月青-水（25：75）；檢測(cè)波長(zhǎng)：320nm；流速：ml/min。對(duì)照品溶液的制備周密稱取二苯乙烯甘對(duì)照品適量，加稀乙醇溶解制成&

11、;#12539;ml-1的溶液，作為對(duì)照品溶液。供試品溶液的制備取各何首烏飲片粉末（過(guò)80目篩）g,周密稱定，置錐形瓶中，周密加入稀乙醇25ml,稱定重量。加熱回流30min,放冷，再稱重，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過(guò)Um微孔濾膜，取續(xù)濾液作為供試品溶液。線性關(guān)系考察周密吸取對(duì)照品溶液2,4,6,8,10,12,14,16,20注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積值，以色譜峰面積積分值為縱坐標(biāo)（Y）,以進(jìn)樣量（X,ug）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得線性方程為Y=4X106X+218758,r=9（n=9）,說(shuō)明二苯乙烯首在Ug范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。周密度實(shí)驗(yàn)周密吸取對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，10U1/次，

12、測(cè)得峰面積積分值的1口為。重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)周密稱取同一何首烏飲片5份，按“項(xiàng)下的方式處置，進(jìn)樣，測(cè)得供試品中二苯乙烯甘含量的1口為。穩(wěn)固性實(shí)驗(yàn)取何首烏飲片，按“項(xiàng)下的方式處置，別離在0,4,8,16,24h進(jìn)樣，測(cè)定峰面積積分值的1。為,說(shuō)明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)固?；厥章蕦?shí)驗(yàn)周密稱取己知二苯乙烯甘含量的何首烏粉末5份，置錐形瓶中，別離周密加入對(duì)照品溶液2ml,按“項(xiàng)下的方式處置，進(jìn)樣，測(cè)定峰面積積分值，計(jì)算二苯乙烯甘回收率為,RSD為（"5）。樣品的含量測(cè)定周密吸取各供試品溶液10U1,進(jìn)樣，測(cè)定峰面積積分值，計(jì)算樣品中二苯乙烯甘含量。結(jié)果見(jiàn)表lo表1不同炮制時(shí)刻何首烏中有效成份的含量測(cè)

13、定結(jié)果（略）3討論關(guān)于炮制后何首烏中有效成份含量轉(zhuǎn)變己有報(bào)導(dǎo)4,但均是以制后結(jié)合意能幾乎轉(zhuǎn)變成游離意醒為炮制目的，因此選定的炮制時(shí)刻長(zhǎng)（一樣大于12h）,且時(shí)刻距離也專門(mén)大。依照吉林敖東藥業(yè)集團(tuán)股分“安神補(bǔ)腦液的第2次開(kāi)發(fā)”的需要，本文第一次己2h為距離時(shí)刻探討了黑豆汁拌蒸10h之內(nèi)的有效成份含量的轉(zhuǎn)變。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，用黑豆汁拌蒸不同時(shí)刻意醍含量有不同，蒸制210h,游離慈醍的含量隨炮制時(shí)刻的延長(zhǎng)慢慢升高，但總蔥醍含量只略有下降，無(wú)顯著性不同，說(shuō)明結(jié)合蔥醍在炮制進(jìn)程中慢慢轉(zhuǎn)變成游離意醒。經(jīng)多次（呼6）實(shí)驗(yàn)測(cè)得黑豆汁拌蒸10h時(shí)己有的結(jié)合慈能轉(zhuǎn)變成游離意醍。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，用黑豆汁拌蒸不同時(shí)刻（010h）,何首烏飲片中二苯乙烯首的含量隨炮制時(shí)刻先慢慢升高而后慢慢降低,至6h時(shí)含量最高（略低于生品）。本實(shí)驗(yàn)還探討了傳統(tǒng)工藝炮制品（九蒸九曬）中二苯乙烯甘的含量，其結(jié)果為：傳統(tǒng)工藝炮制品生品黑豆汁拌蒸品。實(shí)驗(yàn)中發(fā)覺(jué)蒸制時(shí)刻的長(zhǎng)短與其顏色也有著重要的關(guān)系，蒸制時(shí)刻短，顏色暗淡無(wú)光澤；蒸制時(shí)刻越長(zhǎng)，其顏色慢慢烏黑發(fā)亮。實(shí)驗(yàn)中也意外地發(fā)覺(jué)