甾體及其苷類

1、第八章第八章 甾體及其苷類甾體及其苷類STEROIDES AND GLUCOSIDESSection One IntroductionSection One Introduction 天然廣泛存在的一類化學(xué)成分，種類很多，天然廣泛存在的一類化學(xué)成分，種類很多，包括動(dòng)植物甾醇（也稱固醇）、膽酸、維生素包括動(dòng)植物甾醇（也稱固醇）、膽酸、維生素D D、動(dòng)物激素、腎上腺皮質(zhì)激素、動(dòng)物激素、腎上腺皮質(zhì)激素、 植物強(qiáng)心苷、蟾酥植物強(qiáng)心苷、蟾酥毒素、甾體生物堿、甾體藥物、昆蟲激素等。雖毒素、甾體生物堿、甾體藥物、昆蟲激素等。雖然這些成分來(lái)源不同、生理活性不同，但它們的然這些成分來(lái)源不同、生理活性不同，但它們

2、的化學(xué)結(jié)構(gòu)中都具有甾體母核化學(xué)結(jié)構(gòu)中都具有甾體母核-環(huán)戊烷駢多氫菲。環(huán)戊烷駢多氫菲。這類成分涉及到生理、保健、節(jié)育、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、這類成分涉及到生理、保健、節(jié)育、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)等多方面，對(duì)動(dòng)植物的生命活動(dòng)起著重要畜牧業(yè)等多方面，對(duì)動(dòng)植物的生命活動(dòng)起著重要的作用。的作用。一、甾體的定義一、甾體的定義 又名又名類固醇化合物（類固醇化合物（steroidssteroids），因其），因其結(jié)構(gòu)中結(jié)構(gòu)中都具有環(huán)戊烷駢多氫菲的甾核，都具有環(huán)戊烷駢多氫菲的甾核，19361936年給這類化合年給這類化合物提出一個(gè)總稱物提出一個(gè)總稱“甾體化合物甾體化合物”，“甾甾”字很形象字很形象化地表示了這類化合物的骨架，

3、即在含有四個(gè)稠合化地表示了這類化合物的骨架，即在含有四個(gè)稠合環(huán)環(huán)“田田”字上面連有三個(gè)支鏈字上面連有三個(gè)支鏈“”。C10C10、C13C13上各有一個(gè)甲基，稱為角甲基。上各有一個(gè)甲基，稱為角甲基。 C17C17位有側(cè)鏈。位有側(cè)鏈。ABCD10135891714二、甾類成分的顏色反應(yīng)二、甾類成分的顏色反應(yīng) 甾類成分在無(wú)水條件下，用酸處理，能產(chǎn)生甾類成分在無(wú)水條件下，用酸處理，能產(chǎn)生各種顏色反應(yīng)，用這些反應(yīng)來(lái)初步鑒別該類成各種顏色反應(yīng)，用這些反應(yīng)來(lái)初步鑒別該類成分或供比色分析。分或供比色分析。v1.Liebermann-burchard1.Liebermann-burchard反應(yīng)反應(yīng) 樣品溶于冰

4、醋樣品溶于冰醋酸，加濃硫酸酸，加濃硫酸- -醋酐醋酐(1:20)(1:20)，產(chǎn)生紅，產(chǎn)生紅 紫紫 藍(lán)藍(lán) 綠綠 污綠等顏色變化，最后褪色。污綠等顏色變化，最后褪色。 v2.Salkowski2.Salkowski反應(yīng)反應(yīng) 樣品溶于氯仿，沿管樣品溶于氯仿，沿管壁滴加濃硫酸，氯仿層顯血紅色或青色，壁滴加濃硫酸，氯仿層顯血紅色或青色，硫酸層顯綠色熒光。硫酸層顯綠色熒光。v3.3.三氯化銻或五氯化銻反應(yīng)三氯化銻或五氯化銻反應(yīng) 將樣品醇將樣品醇溶液點(diǎn)于溶液點(diǎn)于 濾紙上，噴以濾紙上，噴以20%20%三氯化銻三氯化銻（或五氯化銻）氯仿溶液（不應(yīng)含乙醇（或五氯化銻）氯仿溶液（不應(yīng)含乙醇和水）干燥后，和水）干燥

5、后，60-7060-70加熱，顯黃色、加熱，顯黃色、灰藍(lán)色、灰紫色斑點(diǎn)?；宜{(lán)色、灰紫色斑點(diǎn)。Section TwoSteroides Section oneSection one Cardiac Glycosides Cardiac Glycosides 一、定義一、定義 強(qiáng)心苷（強(qiáng)心苷（cardiac glycosidescardiac glycosides）是存在于）是存在于植物中具有強(qiáng)心作用的甾體苷類化合物，由強(qiáng)植物中具有強(qiáng)心作用的甾體苷類化合物，由強(qiáng)心苷元和糖縮合而產(chǎn)生的一類苷。心苷元和糖縮合而產(chǎn)生的一類苷。 目前臨床應(yīng)用的有二、三十種，用于治療目前臨床應(yīng)用的有二、三十種，用于治療充血

6、性心力衰竭及節(jié)律障礙等心臟疾病，充血性心力衰竭及節(jié)律障礙等心臟疾病，如西地蘭、地高辛、毛地黃毒苷等如西地蘭、地高辛、毛地黃毒苷等。 但強(qiáng)心苷類能興奮延髓催吐化學(xué)感受區(qū)而但強(qiáng)心苷類能興奮延髓催吐化學(xué)感受區(qū)而引起惡心、嘔吐等胃腸道反應(yīng)；且有劇毒，引起惡心、嘔吐等胃腸道反應(yīng)；且有劇毒，若超過安全劑量時(shí)，可使心臟中毒而停止若超過安全劑量時(shí)，可使心臟中毒而停止跳動(dòng)。跳動(dòng)。 其中某些強(qiáng)心苷對(duì)動(dòng)物腫瘤有效，主要是其中某些強(qiáng)心苷對(duì)動(dòng)物腫瘤有效，主要是細(xì)胞毒細(xì)胞毒作用。作用。二、化學(xué)結(jié)構(gòu)和分類二、化學(xué)結(jié)構(gòu)和分類（一）苷元部分（一）苷元部分1.1.基本結(jié)構(gòu)基本結(jié)構(gòu) 強(qiáng)心苷是由強(qiáng)心苷元（強(qiáng)心苷是由強(qiáng)心苷元（card

7、iac aglyconecardiac aglycone）與糖與糖（sugarsugar）二部分構(gòu)成。二部分構(gòu)成。甲型甲型強(qiáng)心苷元強(qiáng)心苷元： C C1717位上連五元不飽和內(nèi)酯環(huán)，即位上連五元不飽和內(nèi)酯環(huán)，即- -內(nèi)內(nèi)酯酯-強(qiáng)心甾烯型。強(qiáng)心甾烯型。以強(qiáng)心甾（以強(qiáng)心甾（cardenolidecardenolide）為）為母核命名。母核命名。OOOHHHOROOOHHO3514甲型毛地黃毒苷元H202223213,14 -二羥基-5 -強(qiáng)心甾-20(22)-烯乙型強(qiáng)心苷元乙型強(qiáng)心苷元 C C1717位上連六元不飽和內(nèi)酯環(huán)，即位上連六元不飽和內(nèi)酯環(huán)，即，-雙烯雙烯-內(nèi)酯，分為海蔥甾二烯和蟾蜍甾二烯。

8、內(nèi)酯，分為海蔥甾二烯和蟾蜍甾二烯。以海蔥甾（以海蔥甾（scillanolidescillanolide）或蟾蜍甾）或蟾蜍甾(bufanolide(bufanolide) )為母核命名。為母核命名。OOHHHOROrOOHHOOr乙型海蔥苷元20212223243,14 -二羥基海蔥甾4,20,22-三烯（二）糖部分（二）糖部分 構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖又構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖又2020多種，根據(jù)多種，根據(jù)C C2 2位上位上有無(wú)有無(wú)-OH-OH分為分為-OH-OH糖及糖及-去氧糖兩類。后去氧糖兩類。后者主要見于強(qiáng)心苷。者主要見于強(qiáng)心苷。v1.1.- -羥基糖羥基糖 除廣泛分布于植物界的除廣泛分布于植物界的D-D

9、-葡萄糖、葡萄糖、L-L-鼠李鼠李糖外，還有：糖外，還有：（1 1）6-6-去氧糖如：去氧糖如：L-L-夫糖、夫糖、D-D-雞納糖等。雞納糖等。（2 2）6-6-去氧糖甲醚如：去氧糖甲醚如：L-L-黃夾糖、黃夾糖、D-D-洋地黃洋地黃糖等。糖等。v2. 2. - -去氧糖去氧糖（1 1）2,6-2,6-二去氧糖如：二去氧糖如： D-D-洋地黃毒糖等。洋地黃毒糖等。（2 2）2,6-2,6-二去氧糖甲醚如：二去氧糖甲醚如：L-L-夾竹桃糖、夾竹桃糖、 D-D-加拿大麻糖等。加拿大麻糖等。 OOOH,OHH,OHH,OHHOOHCH3OHHOHOCH3CH3OCH3D-洋地黃毒糖L-夾竹桃糖D-加

10、拿大麻糖（三）構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖對(duì)強(qiáng)心（三）構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖對(duì)強(qiáng)心 作用的影響作用的影響構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖數(shù)目和種類不同，對(duì)強(qiáng)心苷構(gòu)成強(qiáng)心苷的糖數(shù)目和種類不同，對(duì)強(qiáng)心苷活性影響不同?；钚杂绊懖煌甲型強(qiáng)心苷元及其苷的毒性規(guī)律一般為：甲型強(qiáng)心苷元及其苷的毒性規(guī)律一般為： 苷元苷元 二糖苷二糖苷 三糖苷三糖苷 單糖苷的毒性次序?yàn)椋簡(jiǎn)翁擒盏亩拘源涡驗(yàn)椋?葡萄糖苷葡萄糖苷 甲氧基糖苷甲氧基糖苷6-6-去氧糖苷去氧糖苷 2, 6-2, 6-去氧糖苷去氧糖苷v乙型強(qiáng)心苷元及其苷的毒性規(guī)律一般為：乙型強(qiáng)心苷元及其苷的毒性規(guī)律一般為： 苷元苷元 單糖苷單糖苷 二糖苷二糖苷v乙型強(qiáng)心苷元的毒性乙型強(qiáng)心苷元的毒性 相應(yīng)的

11、甲型強(qiáng)心苷元相應(yīng)的甲型強(qiáng)心苷元（四）糖和苷元的連接方式（四）糖和苷元的連接方式 強(qiáng)心苷中，多數(shù)是幾種糖結(jié)合成低聚糖形強(qiáng)心苷中，多數(shù)是幾種糖結(jié)合成低聚糖形式再與苷元的式再與苷元的C C3 3-OH-OH結(jié)合成苷，少數(shù)為雙糖結(jié)合成苷，少數(shù)為雙糖苷或單糖苷。糖和苷的連接方式有三種：苷或單糖苷。糖和苷的連接方式有三種：v 型型: :苷元苷元-(2,6-(2,6-去氧糖去氧糖) )X X-(D-(D-葡萄糖葡萄糖) )Y Yv 型型: :苷元苷元-(6-(6-去氧糖去氧糖) )X X-(D-(D-葡萄糖葡萄糖) )Y Yv 型：苷元型：苷元- -（D-D-葡萄糖）葡萄糖）Y Y 一般初生苷其末端多為葡萄

12、糖。一般初生苷其末端多為葡萄糖。（五）結(jié)構(gòu)舉例（五）結(jié)構(gòu)舉例OOOH（D-洋地黃毒糖）3O洋地黃毒苷甲型強(qiáng)心苷HR1R2狄高辛(digitoxin)(digoxin)R1R2HOHOHHOHOHC綠海蔥苷OO乙型強(qiáng)心苷glc(scilliglaucoside)四、強(qiáng)心苷的理化性質(zhì)四、強(qiáng)心苷的理化性質(zhì)（一）理化性質(zhì)（一）理化性質(zhì)1. 1. 性狀：性狀：強(qiáng)心苷多為無(wú)色結(jié)晶或無(wú)強(qiáng)心苷多為無(wú)色結(jié)晶或無(wú)定形粉末，中性物質(zhì)，有旋光性，定形粉末，中性物質(zhì)，有旋光性，C C17 17 側(cè)鏈為側(cè)鏈為 - -構(gòu)型的構(gòu)型的味苦，味苦，-構(gòu)型味不構(gòu)型味不苦，但無(wú)效。對(duì)粘膜有刺激性?？?，但無(wú)效。對(duì)粘膜有刺激性。2 2溶

13、解度溶解度 強(qiáng)心苷的溶解性與所連糖的種類和數(shù)目強(qiáng)心苷的溶解性與所連糖的種類和數(shù)目有關(guān)，一般可溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等有關(guān)，一般可溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等極性溶劑；難溶于乙醚、苯、石油醚等非極極性溶劑；難溶于乙醚、苯、石油醚等非極性溶劑。性溶劑。 弱親脂性苷微溶于氯仿弱親脂性苷微溶于氯仿- -乙醇乙醇(2:1)(2:1)，親，親脂性苷微溶于乙酸乙酯、含水氯仿、氯仿脂性苷微溶于乙酸乙酯、含水氯仿、氯仿- -乙醇（乙醇（3:13:1）。）。 3 3水解反應(yīng)水解反應(yīng) 水解反應(yīng)是研究強(qiáng)心苷組成的常用水解反應(yīng)是研究強(qiáng)心苷組成的常用方法，分化學(xué)方法和生物方法兩大類，方法，分化學(xué)方法和生物方法兩大類，化學(xué)

14、方法主要有酸水解、堿水解和乙?；瘜W(xué)方法主要有酸水解、堿水解和乙酰解；生物方法主要有酶水解。糖部分不解；生物方法主要有酶水解。糖部分不同，其水解產(chǎn)物難易及產(chǎn)物均不同。同，其水解產(chǎn)物難易及產(chǎn)物均不同。（二）苷鍵的水解（二）苷鍵的水解 1.1.酸水解酸水解A.A. 溫和酸水解：溫和酸水解： 用稀酸（用稀酸（0.02-0.05mol/L) 0.02-0.05mol/L) 的鹽酸的鹽酸或硫酸在含水醇中經(jīng)短時(shí)間（半小時(shí)至或硫酸在含水醇中經(jīng)短時(shí)間（半小時(shí)至數(shù)小時(shí)）加熱回流，可使數(shù)小時(shí)）加熱回流，可使型強(qiáng)心苷水型強(qiáng)心苷水解成苷元和糖。解成苷元和糖。主要水解苷元和主要水解苷元和-去氧糖之間的苷鍵或去氧糖之間的苷

15、鍵或 -去氧糖與去氧糖與-去氧糖之間的糖鍵。去氧糖之間的糖鍵。而而-去氧糖與葡萄糖之間的糖鍵不易切斷。去氧糖與葡萄糖之間的糖鍵不易切斷。對(duì)苷元影響較小，不會(huì)引起脫水反應(yīng)。對(duì)苷元影響較小，不會(huì)引起脫水反應(yīng)。但不適于但不適于1616位有甲酰基的洋地黃強(qiáng)心苷類，位有甲?；难蟮攸S強(qiáng)心苷類， 在此種條件下，在此種條件下，1616位甲?；鉃榱u基，位甲?；鉃榱u基， 得不到原生苷元。得不到原生苷元。B.B. 強(qiáng)烈酸水解強(qiáng)烈酸水解 用較濃酸（用較濃酸（3%-5%3%-5%）長(zhǎng)時(shí)間加熱回流）長(zhǎng)時(shí)間加熱回流或同時(shí)加壓，可水解或同時(shí)加壓，可水解型和型和型強(qiáng)心苷，型強(qiáng)心苷，得到定量的葡萄糖?？伤獾玫蕉康钠?/p>

16、萄糖?？伤?羥基糖。羥基糖。 因?yàn)橐驗(yàn)槲坏牧u基阻礙了苷原子的質(zhì)子化，位的羥基阻礙了苷原子的質(zhì)子化，使水解較困難。使水解較困難。 但此法常引起苷元失去但此法常引起苷元失去1 1分子或數(shù)分子分子或數(shù)分子水水, ,形成脫水苷元，即次生苷。形成脫水苷元，即次生苷。2.2.酶水解法酶水解法 含強(qiáng)心苷的植物中，有水解葡萄糖的酶，含強(qiáng)心苷的植物中，有水解葡萄糖的酶，無(wú)水解無(wú)水解-去氧糖的酶，所以能水解除去分去氧糖的酶，所以能水解除去分子中的葡萄糖而保留子中的葡萄糖而保留-去氧糖。去氧糖。 蝸牛酶（一種混合酶，蝸牛腸管消化液蝸牛酶（一種混合酶，蝸牛腸管消化液經(jīng)處理而得）幾乎能水解所有的苷鍵，能將經(jīng)處理而得）

17、幾乎能水解所有的苷鍵，能將強(qiáng)心苷分子的糖逐步水解，直至獲得苷元，強(qiáng)心苷分子的糖逐步水解，直至獲得苷元，常用來(lái)研究強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)。常用來(lái)研究強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)。紫花洋地黃苷紫花洋地黃苷A A紫花苷酶紫花苷酶洋地黃毒苷洋地黃毒苷+D-+D-葡萄糖葡萄糖紫花洋地黃苷紫花洋地黃苷B B紫花苷酶紫花苷酶羥基洋地黃毒苷羥基洋地黃毒苷+D-+D-葡萄糖葡萄糖3.3. 堿水解法堿水解法 強(qiáng)心苷的苷鍵為縮醛結(jié)構(gòu)，可被酸或強(qiáng)心苷的苷鍵為縮醛結(jié)構(gòu)，可被酸或酶水解，而不被堿水解。堿試劑主要使分酶水解，而不被堿水解。堿試劑主要使分子中的?；?、內(nèi)酯環(huán)裂開、子中的?；狻?nèi)酯環(huán)裂開、2020（2222）轉(zhuǎn)位及苷元異構(gòu)化等。轉(zhuǎn)

18、位及苷元異構(gòu)化等。（1 1）?；乃猓；乃?在強(qiáng)心苷的苷元或糖基上常有?；嬖?，在強(qiáng)心苷的苷元或糖基上常有?；嬖?，一般可用堿試劑處理使酯鍵水解脫去?；?。一般可用堿試劑處理使酯鍵水解脫去?；aHCONaHCO3 3,KHCO,KHCO3 3-使使-去氧糖上的?；パ跆巧系孽；?，而水解，而-羥基糖及苷元上的?；嗖槐涣u基糖及苷元上的酰基多不被水解；水解； Ca(OH)Ca(OH)2 2,Ba(OH),Ba(OH)2 2-使使-去氧糖、去氧糖、-羥羥基糖及苷元上的酰基水解；基糖及苷元上的?；?；NaOHNaOH堿性太強(qiáng)，不但使所有?；猓€堿性太強(qiáng)，不但使所有?；?，還使內(nèi)酯

19、環(huán)破裂，故很少使用。使內(nèi)酯環(huán)破裂，故很少使用。（2 2）內(nèi)酯環(huán)的水解）內(nèi)酯環(huán)的水解 NaOHNaOH或或KOHKOH的水溶液使內(nèi)酯環(huán)開裂，的水溶液使內(nèi)酯環(huán)開裂，酸化后又閉環(huán)。但在強(qiáng)心苷的醇溶液中酸化后又閉環(huán)。但在強(qiáng)心苷的醇溶液中加加NaOHNaOH或或KOHKOH內(nèi)酯環(huán)開裂，酸化后不能內(nèi)酯環(huán)開裂，酸化后不能閉環(huán)。閉環(huán)。 甲型強(qiáng)心苷在醇性甲型強(qiáng)心苷在醇性KOHKOH溶液中，通過內(nèi)溶液中，通過內(nèi)酯環(huán)的雙鍵轉(zhuǎn)移和質(zhì)子轉(zhuǎn)移形成酯環(huán)的雙鍵轉(zhuǎn)移和質(zhì)子轉(zhuǎn)移形成C22C22活性亞活性亞甲基，甲基，C14C14羥基質(zhì)子對(duì)羥基質(zhì)子對(duì)C20C20的親電性加成作的親電性加成作用而生成內(nèi)酯型異構(gòu)化苷，再經(jīng)皂化作用用而生

20、成內(nèi)酯型異構(gòu)化苷，再經(jīng)皂化作用開環(huán)而生成開鏈型異構(gòu)化苷。開環(huán)而生成開鏈型異構(gòu)化苷。OOOHOOOHOOOHKOHEtOH20212214OCOOHCHOHO異構(gòu)化物（A）異構(gòu)化物（B）乙型強(qiáng)心苷在醇性乙型強(qiáng)心苷在醇性KOHKOH溶液中，不發(fā)生雙鍵溶液中，不發(fā)生雙鍵轉(zhuǎn)移，但內(nèi)酯環(huán)開裂生成酯，再脫水形成轉(zhuǎn)移，但內(nèi)酯環(huán)開裂生成酯，再脫水形成開鏈型異構(gòu)化苷。開鏈型異構(gòu)化苷。OOHOHKOH20212214COOCH3CHO異構(gòu)化物CH3OHCHOHCOOCH3-H2O五顏色反應(yīng)五顏色反應(yīng)強(qiáng)心苷顏色反應(yīng)很多，根據(jù)顏色反應(yīng)發(fā)生強(qiáng)心苷顏色反應(yīng)很多，根據(jù)顏色反應(yīng)發(fā)生在分子的不同部位可分為在分子的不同部位可分為

21、三類：三類：（一）作用于甾體母核的反應(yīng)：（一）作用于甾體母核的反應(yīng)： 1.Liebermann-burchard1.Liebermann-burchard反應(yīng)反應(yīng) 2.Salkowski2.Salkowski反應(yīng)反應(yīng) 3.3.三氯化銻或五氯化銻反應(yīng)三氯化銻或五氯化銻反應(yīng) （二）作用于（二）作用于,不飽和內(nèi)酯環(huán)的反應(yīng)：不飽和內(nèi)酯環(huán)的反應(yīng)： 甲型強(qiáng)心苷在堿性醇溶液中，發(fā)生雙鍵甲型強(qiáng)心苷在堿性醇溶液中，發(fā)生雙鍵轉(zhuǎn)移，生成活性亞甲基，故可與活性亞甲基轉(zhuǎn)移，生成活性亞甲基，故可與活性亞甲基試劑作用而顯色。試劑作用而顯色。 乙型強(qiáng)心苷無(wú)此類反應(yīng)。乙型強(qiáng)心苷無(wú)此類反應(yīng)。1.Legal1.Legal反應(yīng)（亞硝

22、酰鐵氰化鈉試劑）：反應(yīng)（亞硝酰鐵氰化鈉試劑）： 取樣品取樣品1-2mg1-2mg，溶于，溶于2-32-3滴吡啶中，加一滴滴吡啶中，加一滴3%3%亞硝酰鐵氰化鈉溶液和一滴亞硝酰鐵氰化鈉溶液和一滴2mol/L NaOH2mol/L NaOH溶液，溶液，樣品液呈深紅色并漸漸褪去。樣品液呈深紅色并漸漸褪去。2.Raymond2.Raymond反應(yīng)（間二硝基苯試劑）反應(yīng)（間二硝基苯試劑）： 取樣品約取樣品約1mg1mg，以少量的，以少量的50%50%乙醇溶解后加入乙醇溶解后加入0.1ml1%0.1ml1%間二硝基苯乙醇溶液，搖勻后再加入間二硝基苯乙醇溶液，搖勻后再加入0.2ml20%NaOH0.2ml2

23、0%NaOH溶液，呈紫紅色。溶液，呈紫紅色。3.Kedde3.Kedde反應(yīng)反應(yīng)（3,5-3,5-二硝基苯甲酸試劑）二硝基苯甲酸試劑） 取樣品的甲醇或乙醇溶液于試管中，加取樣品的甲醇或乙醇溶液于試管中，加入入3,5-3,5-二硝基苯甲酸試劑二硝基苯甲酸試劑3-43-4滴，產(chǎn)生紅或滴，產(chǎn)生紅或紫紅色。紫紅色。4.Baljet4.Baljet反應(yīng)（堿性苦味酸試劑）反應(yīng)（堿性苦味酸試劑） 取樣品的甲醇或乙醇液于試管中，加入取樣品的甲醇或乙醇液于試管中，加入堿性苦味酸試劑數(shù)滴，呈現(xiàn)橙或橙紅色。有堿性苦味酸試劑數(shù)滴，呈現(xiàn)橙或橙紅色。有時(shí)需放置時(shí)需放置15min15min后顯色。后顯色。 （三）作用于（三

24、）作用于-去氧糖的反應(yīng)去氧糖的反應(yīng)1. Keller-kiliani(K1. Keller-kiliani(K-K)-K)反應(yīng)反應(yīng) 此反應(yīng)是此反應(yīng)是-去氧糖的特征反應(yīng)，對(duì)去氧糖的特征反應(yīng)，對(duì)游離的游離的-去氧糖或或在反應(yīng)條件下能水解去氧糖或或在反應(yīng)條件下能水解出出-去氧糖的強(qiáng)心苷都可顯色。取樣品去氧糖的強(qiáng)心苷都可顯色。取樣品1mg1mg溶于溶于5ml5ml冰乙酸中，加一滴冰乙酸中，加一滴20%20%三氯化鐵三氯化鐵水溶液，傾斜試管，沿試管壁加入水溶液，傾斜試管，沿試管壁加入5ml5ml濃硫濃硫酸，若有酸，若有-去氧糖存在，乙酸層漸呈藍(lán)或去氧糖存在，乙酸層漸呈藍(lán)或藍(lán)綠色。但若不顯色，不能說明無(wú)藍(lán)

25、綠色。但若不顯色，不能說明無(wú)-去氧去氧糖。糖。2.2.噸氫醇反應(yīng)噸氫醇反應(yīng): : 取樣品加入噸氫醇試劑，置取樣品加入噸氫醇試劑，置 沸水浴中沸水浴中3min3min呈紅色呈紅色。3.3.過碘酸過碘酸- -對(duì)硝基苯胺反應(yīng)：對(duì)硝基苯胺反應(yīng)：樣品反應(yīng)后呈樣品反應(yīng)后呈深深 黃色黃色斑點(diǎn)，紫外燈下為棕色背底上現(xiàn)斑點(diǎn)，紫外燈下為棕色背底上現(xiàn)黃色黃色 熒光熒光斑點(diǎn)。斑點(diǎn)。4.4.對(duì)對(duì)- -硝基苯肼反應(yīng)：硝基苯肼反應(yīng)：樣品反應(yīng)后呈紅色或紫樣品反應(yīng)后呈紅色或紫 紅色。對(duì)紅色。對(duì)-去氧糖和葡萄糖結(jié)合的，去氧糖和葡萄糖結(jié)合的，K-KK-K 反應(yīng)陰性的也可呈陽(yáng)性反應(yīng)。反應(yīng)陰性的也可呈陽(yáng)性反應(yīng)。5.5.對(duì)對(duì)- -二甲氨

26、基苯甲醛反應(yīng)：二甲氨基苯甲醛反應(yīng)：樣品反應(yīng)后呈樣品反應(yīng)后呈灰灰 紅色紅色斑點(diǎn)。斑點(diǎn)。五、強(qiáng)心苷的提取分離五、強(qiáng)心苷的提取分離 強(qiáng)心苷含量很低，多與糖類、皂苷、色強(qiáng)心苷含量很低，多與糖類、皂苷、色素、鞣質(zhì)等共存，這些成分的存在可影響強(qiáng)素、鞣質(zhì)等共存，這些成分的存在可影響強(qiáng)心苷在溶劑中的溶解度。同時(shí)，強(qiáng)心苷的原心苷在溶劑中的溶解度。同時(shí)，強(qiáng)心苷的原生苷和次生苷共存，且很多結(jié)構(gòu)相似的苷同生苷和次生苷共存，且很多結(jié)構(gòu)相似的苷同存，故提取較難。存，故提取較難。 因酸堿可使強(qiáng)心苷發(fā)生水解、脫水和異因酸堿可使強(qiáng)心苷發(fā)生水解、脫水和異構(gòu)化，故提取分離時(shí)應(yīng)注意構(gòu)化，故提取分離時(shí)應(yīng)注意控制酸堿性控制酸堿性。一、提

27、取一、提取原生苷原生苷: :抑制酶的活性抑制酶的活性( (冷凍干燥、快速提取、冷凍干燥、快速提取、快速干燥快速干燥) )MeOHMeOH、70%EtOH70%EtOH提取。提取。次生苷次生苷: :利用酶的活性利用酶的活性, ,EtOHEtOH、EtOAcEtOAc提取。提取。二、純化二、純化 1. 1. 用乙醚、氯仿脫脂；用乙醚、氯仿脫脂； 2. 2. 用鉛鹽法除去水溶性雜質(zhì)；用鉛鹽法除去水溶性雜質(zhì)； 3. 3. 吸附法吸附法三、分離三、分離 常用方法：重結(jié)晶、逆流分配法、層析法常用方法：重結(jié)晶、逆流分配法、層析法毛花洋地黃粗粉用5倍量的熱乙醇（60 70%V/V）浸漬滲漉，滲漉近完時(shí)再加2倍

28、量冷乙醇（70%）滲漉藥渣醇液加碳酸鈉調(diào)PH至中性，在60以下減壓回收乙醇至含醇量為10-20%，于15以下靜置析膠，過夜，次日吸取上清液上清液膠狀物（葉綠素、樹脂等）減壓回收乙醇至無(wú)醇味濃縮液 冷后，用0.4倍量氯仿提取1次水液氯仿液回收氯仿殘?jiān)渲⑸氐龋┘右掖贾梁剂?2%，用水液量的0.3倍氯仿提取2次水液氯仿液糖類等水溶性雜質(zhì)）（水液回收氯仿，抽松抽松物加適量甲醇，加熱回流至全溶。常壓回收甲醇至剩余量為抽松物的0.3-0.4倍濃縮液加入抽松物重量的0.04倍蒸餾水，再加入少量晶種，搖勻，靜置48小時(shí)以上，待結(jié)晶析出結(jié)晶的濃縮液加入適量的乙醚-丙酮（2:1），攪拌成漿狀，靜置過夜，

29、抽濾，結(jié)晶以適量乙醚-丙酮（1:1）洗滌，揮散溶劑后，100烘干粗總苷（主要含毛花洋地黃苷甲、乙和丙）Steroidal SaponinsSteroidal Saponins 一、概述一、概述1.1.定義定義 具有螺甾烷類化合物結(jié)構(gòu)母核的一類皂苷具有螺甾烷類化合物結(jié)構(gòu)母核的一類皂苷。2.2.分布分布 主要分布薯蕷科、百合科、玄參科、菝契主要分布薯蕷科、百合科、玄參科、菝契科、龍舌蘭科等單子葉植物中。科、龍舌蘭科等單子葉植物中。3.3.生物活性生物活性抗生育：殺滅精子、抗早孕抗生育：殺滅精子、抗早孕 主要用作合成甾體避孕藥和激素類藥物的主要用作合成甾體避孕藥和激素類藥物的原料。原料。降血糖降血糖

30、: :偽原知母皂苷偽原知母皂苷AA和原知母皂苷和原知母皂苷AA降低膽固醇和免疫調(diào)節(jié)降低膽固醇和免疫調(diào)節(jié)抗真菌、殺蟲等抗真菌、殺蟲等防治心腦血管疾?。悍乐涡哪X血管疾病：地奧心血康膠囊地奧心血康膠囊含含8 8種由黃山藥中提種由黃山藥中提取的甾體皂苷，總量在取的甾體皂苷，總量在90%90%以上，治療冠以上，治療冠心病。心病。心腦舒通心腦舒通由蒺藜果實(shí)中提取的總甾體由蒺藜果實(shí)中提取的總甾體皂苷，用于心腦血管疾病的防治。皂苷，用于心腦血管疾病的防治。盾葉冠心寧盾葉冠心寧從盾葉薯蕷中提取的水溶從盾葉薯蕷中提取的水溶性皂苷。性皂苷。二、化學(xué)結(jié)構(gòu)二、化學(xué)結(jié)構(gòu)（一）結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（一）結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 1.1.分子具螺縮酮的

31、結(jié)構(gòu)分子具螺縮酮的結(jié)構(gòu) 2. A/B 2. A/B 順、反順、反;B/C,C/D;B/C,C/D反反 3. C3. C10,10, C C1313具具 -CH-CH3 3 4. C 4. C3 3有有-OH-OH取代取代 5. C5. C5 5、C C6 6有時(shí)具雙鍵；有時(shí)具雙鍵；C C1212有時(shí)具羰基有時(shí)具羰基 6. 6. 分子中有三個(gè)分子中有三個(gè)* *C:C:* *C C2020、* *C C2222、* *C C2525OORO123456789101112131415161718192021222324252627（二）結(jié)構(gòu)分類（二）結(jié)構(gòu)分類 甾體皂苷的皂苷元基本骨架屬于螺甾甾體皂苷

32、的皂苷元基本骨架屬于螺甾(spirostane(spirostane）的衍生物，依照螺甾烷結(jié)構(gòu)）的衍生物，依照螺甾烷結(jié)構(gòu) 中中C25C25的構(gòu)型和環(huán)的環(huán)合狀態(tài)，可將其分為的構(gòu)型和環(huán)的環(huán)合狀態(tài)，可將其分為四種類型。四種類型。OORO1234567891011121314151617181920212223242526271 1螺甾烷醇類（螺甾烷醇類（spirostanolsspirostanols）C25C25為為S S構(gòu)構(gòu)型。型。OOHO1234567891011121314151617181920212223242526272 2異螺甾烷醇類（異螺甾烷醇類（isospirostanolsis

33、ospirostanols) ) C25 C25為為R R構(gòu)型構(gòu)型OOHO1234567891011121314151617181920212223242526273 3呋甾烷醇類（呋甾烷醇類（furostanolsfurostanols） F F環(huán)為開鏈衍生物環(huán)為開鏈衍生物OOHHO123456789101112131415161718192021222324252627OH4 4變形螺甾烷醇類（變形螺甾烷醇類（pseudo-pirostanolspseudo-pirostanols） F F環(huán)為五元四氫呋喃環(huán)環(huán)為五元四氫呋喃環(huán)OHO12345678910111213141516171819

34、2021222324252627OCH2OH（1 1）分子中含有）分子中含有A,B,C,D,E,FA,B,C,D,E,F六個(gè)環(huán)，六個(gè)環(huán)，A,B,A,B, C,D C,D為甾體母核為甾體母核-環(huán)戊烷多氫菲，環(huán)戊烷多氫菲，C22C22 是是E E環(huán)和環(huán)和F F環(huán)共有的碳原子，以螺縮酮環(huán)共有的碳原子，以螺縮酮 的形式相聯(lián)。的形式相聯(lián)。（2 2）一般）一般B/C B/C 和和C/DC/D環(huán)稠合為反式（環(huán)稠合為反式（8,8, 9,13,14) 9,13,14)，而，而A/BA/B環(huán)有順式或反環(huán)有順式或反 式（式（55或或55）。）。（3 3）分子中有含有多個(gè)羥基，大多在）分子中有含有多個(gè)羥基，大多在C3

35、C3位位 有羥基取代。多數(shù)為有羥基取代。多數(shù)為-型，少數(shù)為型，少數(shù)為 -型。羰基和雙鍵也是常見取代基。型。羰基和雙鍵也是常見取代基。甾體皂苷元共有甾體皂苷元共有2727個(gè)碳原子組成個(gè)碳原子組成: : （4 4） 在甾體皂苷元的在甾體皂苷元的E,FE,F環(huán)中有環(huán)中有3 3個(gè)手性碳個(gè)手性碳原子，為原子，為C20,C22,C25 C20,C22,C25 。 C20C20甲基為甲基為型，即型，即C20C20- -甲基位于甲基位于E E環(huán)平環(huán)平面的背面，對(duì)面的背面，對(duì)E E環(huán)來(lái)說是環(huán)來(lái)說是型，但對(duì)型，但對(duì)F F環(huán)來(lái)說環(huán)來(lái)說是是型。型。 C22C22也為也為型。型。 C25C25甲基有兩種構(gòu)型，當(dāng)甲基有兩

36、種構(gòu)型，當(dāng)C25C25甲基位于環(huán)甲基位于環(huán)平面上的直立鍵時(shí)為平面上的直立鍵時(shí)為型，其絕對(duì)構(gòu)型為型，其絕對(duì)構(gòu)型為L(zhǎng) L型型（25S,25L,25F,Neo25S,25L,25F,Neo）; ; S S型即為螺旋甾烷，型即為螺旋甾烷，由其衍生的皂苷為螺甾烷醇皂苷類由其衍生的皂苷為螺甾烷醇皂苷類（spirostanol saponinsspirostanol saponins）。當(dāng)當(dāng)C25C25甲基位于環(huán)平面下的平伏鍵時(shí)為甲基位于環(huán)平面下的平伏鍵時(shí)為型，其絕對(duì)構(gòu)型為型，其絕對(duì)構(gòu)型為D D型（型（25R25R，25D,25F,Iso25D,25F,Iso）. .R R型即為異螺旋甾烷。由其衍生的皂苷為

37、型即為異螺旋甾烷。由其衍生的皂苷為異螺甾烷醇苷皂苷類異螺甾烷醇苷皂苷類(isospirotanol (isospirotanol saponinssaponins) )。兩者互為異構(gòu)體，常共存于植物體內(nèi)，兩者互為異構(gòu)體，常共存于植物體內(nèi)，25R25R型較穩(wěn)定型較穩(wěn)定（5 5）甾體皂苷分子中不含羧基，呈中性，）甾體皂苷分子中不含羧基，呈中性，故又稱中性皂苷。故又稱中性皂苷。（三）結(jié)構(gòu)舉例（三）結(jié)構(gòu)舉例OOOOHOHOOOOHOOOHOHglcglcgalaOCH2OH薯蕷皂苷元H劍麻皂苷元薤白苷丁紐替皂苷元2三、甾體皂苷的理化性質(zhì)三、甾體皂苷的理化性質(zhì)1.1.性狀性狀 甾體皂苷元有較好晶形。皂苷

38、多為甾體皂苷元有較好晶形。皂苷多為無(wú)定形粉末，味苦而辛辣，對(duì)人體黏膜有無(wú)定形粉末，味苦而辛辣，對(duì)人體黏膜有強(qiáng)烈的刺激性；皂苷多具旋光性，且多為強(qiáng)烈的刺激性；皂苷多具旋光性，且多為左旋。左旋。2 2. .溶解性溶解性 甾體皂苷元能溶于親脂性溶劑；甾體皂苷元能溶于親脂性溶劑；不溶于水。皂苷一般可溶于水、稀醇易溶不溶于水。皂苷一般可溶于水、稀醇易溶于熱水、稀醇，難溶于石油醚、苯、乙醚于熱水、稀醇，難溶于石油醚、苯、乙醚等親脂性溶劑。等親脂性溶劑。3. 3. 表面活性及溶血作用表面活性及溶血作用 甾體皂苷多具甾體皂苷多具有發(fā)泡性，其水溶液振蕩后產(chǎn)生持久性有發(fā)泡性，其水溶液振蕩后產(chǎn)生持久性泡沫。甾體皂苷

39、具有溶血作用。泡沫。甾體皂苷具有溶血作用。4. 4. 能與堿式鉛鹽、鋇鹽形成沉淀。能與堿式鉛鹽、鋇鹽形成沉淀。5. 5. 顏色反應(yīng)顏色反應(yīng) 甾體皂苷在無(wú)水條件下，遇甾體皂苷在無(wú)水條件下，遇某些酸類可產(chǎn)生與三萜皂苷相類似的顏某些酸類可產(chǎn)生與三萜皂苷相類似的顏色反應(yīng)。色反應(yīng)。甾體皂苷與醋酐硫酸的顏色反應(yīng)，最甾體皂苷與醋酐硫酸的顏色反應(yīng)，最 后出現(xiàn)綠色；三萜皂苷最后出現(xiàn)紅色。后出現(xiàn)綠色；三萜皂苷最后出現(xiàn)紅色。三萜皂苷三氯醋酸加熱到三萜皂苷三氯醋酸加熱到100100度顯色，而度顯色，而甾體皂苷加熱到甾體皂苷加熱到6060度就顯色。度就顯色。6.6.甾體皂苷可與甾醇形成分子復(fù)合物，甾甾體皂苷可與甾醇形成分子復(fù)合物，甾體皂苷的乙醇溶液可被甾醇（常用膽甾醇）體皂苷的乙醇溶液可被甾醇（常用膽甾醇）沉淀。除膽甾醇外，凡是含