腺病毒介導(dǎo)MnSOD基因轉(zhuǎn)染對(duì)香煙煙霧提取物致內(nèi)皮細(xì)胞氧化損

1、基金項(xiàng)目:高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金(20050533023通訊作者:陳平, E 2mail:chenp ing101hotm ail . com論著腺病毒介導(dǎo)MnS OD 基因轉(zhuǎn)染對(duì)香煙煙霧提取物致內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及凋亡的影響曹蔚陳平蔡珊張程陳劍波吳杰中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院呼吸內(nèi)科(湖南長沙410011【摘要】目的探討香煙煙霧提取物(CSE 對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及凋亡的影響, 腺病毒介導(dǎo)錳超氧化物岐化酶(MnS OD 基因轉(zhuǎn)染內(nèi)皮細(xì)胞后, 能否部分抑制CSE 致內(nèi)皮細(xì)胞的氧化損傷及凋亡。方法體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(ECV304 , 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染MnS OD 基因后將內(nèi)皮細(xì)胞分為3組:對(duì)照組、空

2、質(zhì)粒組及MnS OD 組, 同時(shí)分別給予0%、5%及10%CSE 刺激。CSE 濃度刺激后的培養(yǎng)上清液和細(xì)胞爬片, T BA 法檢測上清丙二醛(MDA 濃度, L 結(jié)果(1 CSE 刺激對(duì)照組內(nèi)皮細(xì)胞, 可致MDA , 性。(2 與空質(zhì)粒組比較, CSE 刺激后, P <0105 。結(jié)論(1 CSE (基因可以部分抑制香煙。【關(guān)鍵詞】; 內(nèi)皮細(xì)胞; 氧化應(yīng)激; 凋亡Effect of adenov i rus 2m ed i a ted M nS OD gene tran sfecti on on ox i da ti ve i n jury and apoptosis of endot

3、heli a l cells i n duced by c i garette s m ok i n g extract CAO W ei, CHEN Ping, CA I Shan, ZHAN G Cheng, CHEN J ian 2bo, WU J ie . D epart m ent of Respiratory M edicine, The Second X iangya Hospital, Central South U niversity . Changsha, Hu nan, 410011, ChinaCorresponding author :CHEN Ping, E 2m

4、ail:chenping 101hot m ail . co m【Abstract 】O bjecti ve To elucidate the effect of cigarette s moking extract (CSE on oxidativeinjury and apop t osis of endothelial cells and the i m pacts of adenovirus 2mediated M nS OD transfecti on . M ethods The endothelial cells (EC V304 cultured in vitr o were

5、divided int o the contr ol gr oup, blank p las m id gr oup and MnS OD gr oup after transfecti on .The cells were harvested and supernatants werecollected after interfered by different concentrati ons of CSE f or 24h . T BA assay was e mp l oyed t o measure the concentrati ons of mal ondialdehyde (MD

6、A and T UNE L assay was conducted t o measure A I . Results A. CSE induced dose 2dependent and ti m e 2dependent incre ments of MDA and apop t osis of the endothelial cells in the contr ol gr oup (P <0105 . B. CSE induced dose 2dependent incre ments ofMDA and apop t osis of the endothelial cells

7、were reduced signticantly in MnS OD gr oup (P <0105 . Conclusi on CSE can induce oxidative injury and apop t osis of endothelial cells which could be partly inhibited by transfecti on of adenovirus 2mediated MnS OD.【Key words 】Cigarette s moking extract; Endothelial cell; Oxidative stress; Apop t

8、 osis慢性阻塞性肺疾病(COP D 是呼吸系統(tǒng)的常見病和多發(fā)病, 患病率和病死率均高1。吸煙被認(rèn)為是COP D 的最主要致病因素2。香煙介導(dǎo)的氧化應(yīng)激在COP D 的發(fā)病中起著不可忽視的作用3。本研究通過香煙煙霧提取物(CSE 直接刺激內(nèi)皮細(xì)胞,觀察內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷和凋亡的變化, 以及腺病毒介導(dǎo)MnS OD 基因轉(zhuǎn)染對(duì)CSE 致內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷和凋亡的影響, 探討內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及凋亡在吸煙致肺部疾病中的作用。材料與方法一、CSE 的制備按照Yunchao 等4的方法, 1支去過濾嘴燃燒634 的香煙由負(fù)壓吸引器連續(xù)抽吸, 吸入的煙霧經(jīng)出口通入20mL P BS 液中形成懸液, 懸液用Na

9、 OH 調(diào)至pH 714, 經(jīng)微孔過濾膜過濾形成原液, 配置好的原液于1h 內(nèi)用于實(shí)驗(yàn), 用無血清培養(yǎng)液稀釋成不同濃度, 公式為:CSE 濃度=CSE 原液體積/總體積×100%。分別配制成5%和10%的CSE 用于實(shí)驗(yàn)。二、細(xì)胞培養(yǎng)方法人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(ECV304 購自中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院中心實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞培養(yǎng)置于完全培養(yǎng)基中, 于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。0125%的胰酶消化傳代。三、細(xì)胞內(nèi)基因轉(zhuǎn)染11腺病毒介導(dǎo)的LacZ 轉(zhuǎn)染率的測定(1 采用瞬時(shí)法將腺病毒介導(dǎo)的LacZ 轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)5。取無菌6孔培養(yǎng)板, 每孔均放一無菌蓋玻片, 0125%于完全培養(yǎng)基中, 1×104, (2 5

10、0%70%, 用1640洗滌3次, 分別加入0, 30, 50及70感染倍數(shù)(MO I 的Ad 2LacZ 后無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。(3 24h 后棄上清液, P BS 沖洗3m in ×3次, 4%多聚甲醛室溫固定30m in, 再用P BS 沖洗3m in ×3次, 加入X 2gal 染色, 于37水浴箱3h 。(4 熒光顯微鏡下每蓋玻片隨機(jī)取5個(gè)視野計(jì)數(shù)黃綠色熒光細(xì)胞數(shù), 同一視野白光下計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù), 轉(zhuǎn)染率=黃綠色熒光細(xì)胞數(shù)/光鏡下細(xì)胞總數(shù)×100%。21腺病毒介導(dǎo)的MnS OD 基因轉(zhuǎn)染:步驟同上,待細(xì)胞融合50%70%, 用不含血清的1640洗滌3次, 加

11、入70MO I 的Ad 2MnS OD 后無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)24h, 將MnS OD 基因?qū)隕CV304, 再按不同目的進(jìn)行相應(yīng)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。四、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組將內(nèi)皮細(xì)胞分為3組:(1 對(duì)照組; (2 空質(zhì)粒組:轉(zhuǎn)染70MO I Ad 2LacZ 的ECV304; (3 MnS OD 組:轉(zhuǎn)染70MO I Ad 2MnS OD 的ECV304, 分別予以0%、5%及10%CSE 刺激, 收集三組細(xì)胞CSE 刺激24h 后, 以及對(duì)照組CSE 刺激前和刺激后6及12h的培養(yǎng)上清及細(xì)胞爬片, 每種處理因素收集6個(gè)標(biāo)本。五、MDA 的檢測分別將培養(yǎng)上清液加入試管中, 并設(shè)立標(biāo)準(zhǔn)管、標(biāo)準(zhǔn)空白管、測定空白管

12、, 95水浴40m in, 冷卻后3500r/min, 離心10m in, 取上清液1mL, 532nm處, 測定各管吸光度值。T BA 法檢測MDA:MDA (n mol/L =(測定管-測定空白吸光度 /(標(biāo)準(zhǔn)管-標(biāo)準(zhǔn)空白吸光度 ×標(biāo)準(zhǔn)品濃度(10nmol/L ×樣本稀釋倍數(shù)。六、凋亡率的檢測細(xì)胞爬片用P BS 洗片, 4%的多聚甲醛室溫固定30m in 。P BS 洗片, 內(nèi)源性過氧化物酶阻斷室溫孵育30m in 。P BS 洗片, 通透液冰浴孵育2m in 。P BS 洗片, T UNEL 混合液37孵育60m in 。P BS 洗片, 熒光顯微鏡下分析結(jié)果。P B

13、S 洗片, 加入轉(zhuǎn)化劑P OD 3730m in, P BS 洗片, 加入DAB 底物室溫1030m in, 洗片封片, 。結(jié)果分析:5, T , 。凋亡I /×七、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)用SPSS1310統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析處理, 數(shù)據(jù)以x -±s 表示, 進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn), 在方差齊性基礎(chǔ)上, 組間多樣本均數(shù)比較采用F 檢驗(yàn), 兩兩比較采用LS D 2t 檢驗(yàn), 檢驗(yàn)水準(zhǔn)=0105, P <0105為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果一、腺病毒介導(dǎo)的LacZ 轉(zhuǎn)染率結(jié)果表明:0, 30, 50和70MO I 的Ad 2LacZ 轉(zhuǎn)染ECV30424h 后, X 2gal 染色后顯微

14、鏡下測得轉(zhuǎn)染率分別為0、(512±213 %、(5913±312 %和(9313±219 %, 以70MO I 最明顯(P <0105 , 見圖1和2。70MO IAd 2LacZ 能進(jìn)入90%以上的細(xì)胞內(nèi), 符合要求, 故取該濃度用于實(shí)驗(yàn)。二、CSE 刺激對(duì)照組MDA 及A I 的比較11CSE 刺激對(duì)照組24h 后MDA 及A I 的變化:如表1、圖3和4所示, CSE 刺激對(duì)照組細(xì)胞24h 后, 5%CSE 組較0%CSE 組MDA 和A I 均升高, 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0105 。10%CSE 組較5%CSE 組MDA 和A I 均升高, 有

15、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0105 。表1CSE 刺激對(duì)照組24h 后MDA 及A I 的變化(x -±s CSE 濃度MDA (nmol/L A I (% 0%CSE 01115±01015410±0185%CSE 01406±01010#615±019#10%CSE11100±01016#915±110#注:#與同組內(nèi)相鄰前一濃度比較, P <0105734 2110%CSE 刺激對(duì)照組不同時(shí)間MDA 及A I 的變化:如表2、圖3和圖4所示, 10%CSE 刺激對(duì)照組細(xì)胞, 6h 后的MDA 較刺激前升高, 有統(tǒng)計(jì)

16、學(xué)意義(P <0105 , 而6h 后的A I 較刺激前差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0105 。12h 的MDA 和A I 較6h 均升高, 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0105 。24h 的MDA 和A I 較12h 均升高, 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0105 。表210%CSE 刺激對(duì)照組不同時(shí)間MDA 及A I 的變化(x -±s 時(shí)期MDA (n mol/L A I (% 刺激前01020±01012118±0166h 01261±010213213±01912h 01500±010233615±016324

17、h11100±0101635±1103注:3<01三、實(shí)驗(yàn)組之間MDA 和A I 的比較11CSE 刺激24h 后實(shí)驗(yàn)組之間MDA 的比較:如表3所示, 0%CSE 刺激24h, 空質(zhì)粒組與對(duì)照組、MnS OD 組與空質(zhì)粒組MDA 比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0105 ; 5%CSE 刺激24h, 空質(zhì)粒組與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0105 ,MnS OD 組較空質(zhì)粒組降低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0105 ; 10%CSE 刺激24h, 空質(zhì)粒組與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0105 , MnS OD 組較空質(zhì)粒組降低,

18、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0105 。表3CSE 刺激24h 后實(shí)驗(yàn)組之間MDA 的比較(n mol/L,x -±s CSE 濃度對(duì)照組空質(zhì)粒組MnS OD 組0%CSE 01115±0101501117±0101101123±010155%CSE 01406±01010#01417±01017#01227±01022#10%CSE 11100±01016#11107±01022#01502±01025#注:與空質(zhì)粒組比較, P <0105; #與同組內(nèi)相鄰前一濃度比較,P <0

19、10521CSE 刺激24h 后實(shí)驗(yàn)組之間A I 的比較:如表4所示, 0%CSE 刺激24h, 空質(zhì)粒組與對(duì)照組、MnS OD 組與空質(zhì)粒組A I 比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0105 ; 5%CSE 刺激24h, 空質(zhì)粒組與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0105 ,MnS OD 組較空質(zhì)粒組降低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0105 ; 10%CSE 刺激24h, 空質(zhì)粒組與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0105 , MnS OD 組較空質(zhì)粒組降低, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0105 。表4CSE 刺激24h 后實(shí)驗(yàn)組之間A I 的比較(%, x -&

20、#177;s CSE 濃度對(duì)照組空質(zhì)粒組MnS OD 組0%CSE 410±018411±111413±0165%CSE 615±019#714±019#519±110#10%CSE915±110#918±115#812±017#注:與空質(zhì)粒組比較, P <0105; #與同組內(nèi)相鄰前一濃度比較,P <0105余種化學(xué)物質(zhì), 包括高濃度的自由基和氧化劑, 對(duì)氣道上皮細(xì)胞產(chǎn)生直接損傷2。香煙介導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)在COP D 的發(fā)病中起著不可忽視的作用3。一、基因轉(zhuǎn)染的方法向細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入外源基因的方法

21、可以分為兩類:非病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)法:如DNA 2磷酸鈣沉淀法、電穿孔法、顯微注射法、脂質(zhì)體介導(dǎo)法、DNA 直接注射、基因槍等。病毒介導(dǎo)法:是目前實(shí)際研究中主要采用的基因轉(zhuǎn)移方法, 以逆轉(zhuǎn)錄病毒和腺病毒載體的運(yùn)用最廣泛, 尤其是腺病毒以其安全性好, 可感染宿主范圍大, 易于制備、純化和濃縮, 以及病毒滴度高等特點(diǎn)而得到廣泛應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)采用腺病毒介導(dǎo)MnS OD 基因, 成功轉(zhuǎn)染了ECV304細(xì)胞。二、吸煙對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷和凋亡的影響及其可能機(jī)制氧自由基可以攻擊生物膜的多不飽和脂肪酸, 引起脂質(zhì)過氧化作用, 并形成脂質(zhì)過氧化物如MDA , 所以檢測MDA 的量可以反映脂質(zhì)過氧化的程度, 間接反映出氧化損

22、傷的水平。Betsuyaku 6研究不同年齡段抽煙者與不抽煙者肺泡灌洗液中谷胱甘肽含量發(fā)現(xiàn), 抽煙組明顯低于不抽煙組, 提示吸煙可以導(dǎo)致肺部氧化應(yīng)激水平升高。Segura 2Valdez 等7通過研究COP D 患者離體肺組織發(fā)現(xiàn), 較對(duì)照組比較, 肺氣腫內(nèi)皮細(xì)胞凋亡明顯增高。Banerjee 等8通過熏煙法建立起幾內(nèi)亞豬的肺氣腫模型后, 發(fā)現(xiàn)動(dòng)物體內(nèi)羰基合物及凋亡明顯增強(qiáng), 二者存在相關(guān)性, 表明吸煙引起的細(xì)胞凋亡與局部氧化損傷有關(guān)。834本研究將香煙煙霧提取物直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞, 模擬吸煙后煙霧化學(xué)成分吸收入血循環(huán)這一過程, 期望了解CSE 對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及凋亡的影響。我們發(fā)現(xiàn), CS

23、E 可以濃度和時(shí)間依賴性地導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及凋亡。我們推測其可能機(jī)制是, 一方面, 香煙中大量液相毒素被吸收入血, 直接刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞, 觸發(fā)內(nèi)皮細(xì)胞的氧化損傷, 引起凋亡。另一方面, 香煙中大量的液相毒素進(jìn)入氣道后, 直接引起氣道上皮細(xì)胞的功能障礙、死亡, 此過程中釋放的大量溶酶體、炎性介質(zhì)等可作為應(yīng)激原, 觸發(fā)氧化應(yīng)激, 并釋放大量自由基, 作用于與上皮細(xì)胞緊密相連的內(nèi)皮細(xì)胞, 引起凋亡2。三、腺病毒介MnS OD 基因可部分抑制香煙致內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及凋亡超氧化物歧化酶(S OD 9。, , 要途徑, 所以MnS OD 是清除超氧陰離子的第一道防線,MnS OD 基因的表達(dá)和調(diào)控對(duì)

24、機(jī)體內(nèi)自由基/自由基清除劑的平衡體系至關(guān)重要。Tuder 等10將抗氧化劑MnS OD 類生物M40419, 應(yīng)用于VEGFR 阻斷致肺氣腫大鼠后發(fā)現(xiàn), M40419可以明顯減少氧化應(yīng)激標(biāo)志物的水平, 并可以使肺部凋亡明顯減輕, 增殖現(xiàn)象明顯增加。L ieberthal 等11發(fā)現(xiàn), 生長因子缺乏導(dǎo)致的凋亡, 利用抗氧化劑后, 凋亡可以明顯減輕。劉珊等12將香煙煙霧溶液作用于經(jīng)維生素C 預(yù)處理的大鼠淋巴細(xì)胞, 檢測細(xì)胞內(nèi)自由基、脂質(zhì)過氧化物, 發(fā)現(xiàn)維生素C 干預(yù)組較對(duì)照組細(xì)胞內(nèi)自由基及脂質(zhì)過氧化物水平明顯降低。本研究將Ad 2LacZ 空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入內(nèi)皮細(xì)胞, 在CSE 刺激下表達(dá)MDA 和凋亡

25、與對(duì)照組比較無顯著性差異, 排除了轉(zhuǎn)染過程中引起的氧化損傷和凋亡。本研究將Ad 2MnS OD 基因轉(zhuǎn)染入內(nèi)皮細(xì)胞, 然后以CSE 刺激, 發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)MDA 及凋亡率較空質(zhì)粒組明顯較少。因此可以得出結(jié)論, 腺病毒介導(dǎo)的MnS OD 可以部分抑制CSE 致內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及凋亡。推測其可能的機(jī)制是, 氧化應(yīng)激使細(xì)胞內(nèi)氧化還原狀態(tài)發(fā)生改變, 調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子活性及基因表達(dá), 從而使調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖的信號(hào)傳導(dǎo)通路發(fā)生改變13; 通過激活天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶8(cas pase 28 , 下調(diào)凋亡抑制基因Bcl 22表達(dá)和誘導(dǎo)Bax 移位致線粒體, 增強(qiáng)凋亡啟動(dòng)因子和細(xì)胞色素C 的釋放, 最后在

26、凋亡級(jí)聯(lián)過程中通過激活cas pase 29和cas pase 23而觸發(fā)凋亡14; 還可以通過下調(diào)缺氧誘導(dǎo)因子1(H I F 21 表達(dá)和改變線粒體、核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器的超微結(jié)構(gòu), 從而影響細(xì)胞的營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)和能量代謝。而MnS OD 可以改變細(xì)胞內(nèi)NO 、H 2O 2、超氧陰離子的含量, 通過阻斷以上途徑來達(dá)到抑制凋亡的作用。綜上所述, 我們認(rèn)為在吸煙可以直接引起內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷及凋亡, Ad 2MnS OD 基因轉(zhuǎn)染可以部分逆轉(zhuǎn)這種效應(yīng), 為抗氧化劑應(yīng)用于COP D 患者的臨床治療提供理論基礎(chǔ), 其具體機(jī)制尚不清, 還有待進(jìn)一步深入研究。(4見插頁第5頁參考1. 慢性阻塞性肺疾病診治

27、指南. 中華結(jié)核和呼吸雜志, 2002, 25:4532460.2Mac Nee W , Rah man I . Is oxidative stress central t o thepathogenesis of chr onic obstructive pul m onary disease? TrendsMolMed, 2001, 7:55262.3Rah man I, M ulier B, Gil m our PS, et al . Oxidant mediatedlung ep ithelial cell t olerance:the r ole of intracellular g

28、luta 2thi one and nuclear fact or kappa B. B i oche m Bhar macol, 2001, 62:787.4Yunchao S, W eihong H, Carl os G, et al . Effect of cigarettes moke exact on nitric oxide synthase in pul m onary artery endothelial cells . Am J Res p ir CellMol B i ol, 1998, 19:8192825.5周銳, 鄧潔, 陳平. 腺病毒介導(dǎo)的MnS OD 轉(zhuǎn)染對(duì)肺癌細(xì)

29、胞生長及體內(nèi)抗腫瘤作用的影響. 中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2001, 8:58261.6Betsuyaku T . Oxidative stress in pathogenesis of COP D.N i ppon R insho, 2007, 65:6332636.7Segura 2Valdez L, Pardo A, Gaxi ola M , et al . Up regulati on ofgelatinases A and B, collagenases 1and 2, and increased parenchy mal cell death in COP D. Chest, 2000,

30、117:6842694.8Banerjee S,M aity P,Mukherjee S, et al . B lack tea p reventscigarette s moke 2inducedapop t osisand lung da mage . J I n 2fla mm (Lond , 2007, 14:3.9Eravad A. S OD2. a ne w type of tu mor 2supp ress or gene? I ntJ Cancer, 1992, 51:4762480.10Tuder R M , Zhen L, Cho CY, et al . Oxidative

31、 stress and ap 2op t osis interact and caue e mphyse ma due t o vascular endo 2thelial gr owth fact or recep t or bl ockade . Am J Res p ir Cell Mol B i ol, 2003, 29:88297.(下轉(zhuǎn)第435頁934 等5應(yīng)用抗MCP 21抗體可抑制單核細(xì)胞趨化活性, 進(jìn)一步說明MCP 21對(duì)單核/巨噬細(xì)胞具有趨化作用。研究報(bào)道6支氣管上皮細(xì)胞MCP 21mRNA 的表達(dá)與巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞的數(shù)量及其上的趨化因子受體2(CCR2 的表達(dá)有關(guān)。近來

32、發(fā)現(xiàn)7, 8COP D 患者支氣管上皮及肺組織MCP 21表達(dá)增加。以上研究提示MCP 21可能與COP D 氣道炎癥有關(guān)。本研究顯示COP D 患者血清MCP 21水平明顯高于正常對(duì)照組, COP D 急性加重期又明顯高于穩(wěn)定期, 且與呼吸功能呈負(fù)相關(guān), 說明MCP 21參與了COP D 氣道炎癥的發(fā)生發(fā)展。TGF 2是一類結(jié)構(gòu)密切相關(guān)、功能近似的多肽類物質(zhì), 對(duì)細(xì)胞具有雙向調(diào)節(jié)作用。研究顯示,COP D 患者氣道成纖維細(xì)胞數(shù)明顯增多, TGF 21表, TGF 2191, COP D 厚, 膠原含量增加, TGF 21與氣道平滑肌厚度、膠原厚度呈正相關(guān)10。本研究中, COP D 患者血清

33、TGF 21水平明顯高于正常對(duì)照組, COP D 急性加重期又明顯高于穩(wěn)定期, 且與呼吸功能呈負(fù)相關(guān), 說明TGF 21可能參與COP D 的氣道重塑。應(yīng)用MCP 21或TGF 21抗體或拮抗劑有可能阻斷炎性細(xì)胞浸潤或氣道重塑, 為COP D 的防治提供新的思路。參考文獻(xiàn)1Heino J, I gnotz RA, He m lerME, et al . Regulati on of cell ad 2hesi on recep t ors by transfor m ing gr owth fact or 2beta . Con 2com itant regulati on of integr

34、ins that share a common beta 1subunit . J B i ol Che m, 1989, 264:3802388.2江向?qū)? 車東媛, 鄧仲端, 等. 低氧對(duì)人胚肺成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長因子21表達(dá)的影響. 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床, 2000, 20:26229.3中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì). 慢性阻塞性肺疾病診治指南. 中華結(jié)核和呼吸雜志, 2002, 25:4532460.4Luster AD. Che mokines 2che motactic cyt okines that mediateinfla mmati on . N Engl J Med, 1998, 338

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36、 and chr onic air ways infla on in COP D. J 6192626. 7itter M . Characterizati on oft ors p cells:str ong i T poly (I C on the regulati on of recep t ors, adap t or p r oteins and infla mmat ory re 2s ponse . J I nfla mm (Lond , 2005, 29:16.8Tomaki M , Sugiura H, Koarai A, et al . Decreased exp res 2si on of anti oxidant enzy mes and increased exp ressi on of che mokines in C OP D lung . Pul m Phar macol Ther . 2007, 20:5962