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文檔簡介
1、實驗十三離體小腸平滑肌的生理特性一、實驗目的1學習離體腸段平滑肌的實驗方法。2、觀察消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素對它的影響。3、加深對消化道平滑肌生理特性的理解。二、實驗原理消化管、血管、子宮、輸尿管、輸卵管以及輸精管等均由平滑肌組成。哺乳 動物消化管平滑肌與骨骼肌、心肌一樣,具有肌組織共有的特性,如興奮性、傳 導性和收縮性等。但消化道平滑肌又有其特點,即興奮性較低,收縮緩慢,富有 伸展性,具有緊張性、自動節(jié)律性,對化學、溫度和機械牽張刺激較敏感等。這 些特點對維持消化管內一定壓力、 保持胃腸等一定的形態(tài)和位置,適合于消化管 內容物的理化變化具有生理意義。這些特點在整體內受中樞神經系統(tǒng)
2、和體液因素 的調節(jié)。家兔小腸平滑肌上存在a、B、 M受體。其作用是:a、B受體興奮可使小 腸平滑肌抑制而舒張;M受體興奮可使小腸平滑肌興奮而收縮。下面是各類藥品對小腸受體的分別作用:1、乙酰膽堿(Ach): M受體激活劑,乙酰膽堿可興奮 M受體,使小腸收 縮幅度增加,蠕動加強。2、阿托品(Atro) : M受體阻斷藥,為競爭性拮抗劑,單獨用藥對腸管無 作用,可阻斷M受體,對抗乙酰膽堿的M樣作用,使腸管收縮幅度降 低。3、腎上腺素(Ad) : a、B受體激活劑,可激活a、B受體(主要是B 2 受體),a、B受體激動可產生與 M受體激動相反的效應,表現為腸 管舒張,小腸蠕動減弱。4、氯化鋇(Bac
3、l2): Bf進入細胞與鈣調蛋白結合,使平滑肌收縮。 Bf 可使細胞膜發(fā)生去極化。所以加入Bacl2腸管會發(fā)生強直性收縮,Bacl2 并非作用于受體,所以阿托品不能對抗這一作用。5、鹽酸(HCI):加酸可使Ca2內流減少,肌漿網Ca釋放減少,從而 Cf與肌鈣蛋白結合減少,因此平滑肌收縮頻率和幅度都降低。6、氫氧化鈉(NaOH :加堿后H+降低,Ca內流增加,肌漿網Ca釋放 增多,從而Ca與肌鈣蛋白結合增多,因此平滑肌收縮頻率和幅度都 升高。7、磷酸組織胺:作用于靜息電位較高、興奮性也較高的Ah型神經,使其 興奮性進一步增強,沖動發(fā)生頻率增加,破壞了神經叢原有的沖動發(fā) 放頻率,使得小腸平滑肌痙攣
4、,持續(xù)收縮而不舒張。動物與器材實驗動物:家兔1只。實驗器材:恒溫水浴槽、滴管、小燒杯、培養(yǎng)皿、張力換能器、橋式放大、 細線。實驗試劑:臺式液、1/10 000腎上腺素、1/100000乙酰膽堿、0.01 %磷酸組胺、1mol/L 的 NaOH溶液、1mol/L 的 HCI 溶液、0.5mg/ml硫酸阿托品、1 %氯化鋇溶液。四、方法與步驟1、恒溫浴檔的準備:使用平滑肌槽恒溫儀,浴槽用電熱棒及恒溫儀控制加熱,恒溫工作點定在38C左右。實驗前將臺氏液加入4支小試管,放入浴槽水域 中。開電源開關,使其加熱,同時指示燈亮(若恒溫控制失靈時,需用溫度計 隨時探測浴槽中的溫度)。2、通入氧氣:連接氧氣管,
5、經橡皮管送入裝有臺氏液的培養(yǎng)皿中,調整氣體量至3-5個泡/s。調整Powerlab,準備張力換能器,使其固定于營養(yǎng)管正上方。3、制備標本:用木檢猛擊免頭忱部,使其昏迷,立即剖開腹腔,找出胃幽門與十二指腸交界處。由此取長20 一 30cm的腸管。先將與該腸管相連的腸系膜 沿腸緣剪去,再將此腸管兩端分別用線結扎,干結扎兩端內側剪斷取出腸 段,置于古氏液中輕輕漂洗,當腸內容基本洗凈后,將腸管分成數段每段 長23cm兩端各系一條線,保存于供氧的 35E左右的臺氏液中。4、標本安裝:將小腸段一端固定于營養(yǎng)管鉤子上,一端連于張力換能器,放入 營養(yǎng)管中,使腸段完全浸于臺氏液中,且保證其不貼壁,液未碰到其他阻
6、礙, 并要保證通氣。調節(jié)張力感受器高度和靈敏度,穩(wěn)定一段時間至出現平穩(wěn)曲 線。5、依次加入下列藥物1滴,觀察對腸段運動的影響:腎上腺素(1:10000)、1%BaQ 、1mol/L HCl 、1%CaC2l1mol/L NaOH 、Ach( 1:100000)、0.01%磷酸組織胺 。先加入一種藥品,當反應出現后,即從側管放出營養(yǎng)管中的溶液,換入新鮮 臺氏液,更換34次,使腸段恢復正常節(jié)律。五、實驗記錄4、加1 mol L-1HCI溶液小腸平滑肌運動的曲線記錄5、加1%BaQ溶液小腸平滑肌運動的曲線記錄6加1 mol L-1NaOH溶液小腸平滑肌運動的曲線記錄7、加0.01%磷酸組織胺溶液小腸
7、平滑肌運動的曲線記錄六、注意事項及討論1、不使用麻醉兔子的方法取小腸,取小腸的動作迅速,培養(yǎng)基中臺氏液應通氣 平衡。2、標本安裝好后,應在新鮮38°C臺氏液中穩(wěn)定510min,有收縮活動時即可開 始實驗。3、 注意控制溫度。加藥前,要先準備好更換用的新鮮38 C臺氏液,每個實驗項 目結束后,應立即用38 C臺氏液沖洗,待腸段活動恢復正常后,再進行下一 個實驗項目。4、 每加一種藥物前要有對照,每次更換臺氏液后要穩(wěn)定24mi n,不要出現溫 度大范圍的搏動。5、實驗項目中所列舉的藥物劑量為參考劑量,若效果不明顯,可以增補劑量, 但要防止一次性加藥過量。6實驗中始終要通入氧氣,且氣泡量不要太多。而堿不可加過多,因堿本身對 腸管平滑肌也是一種化學刺激。7、腸道主要受副交感神經支配。小腸有一個復雜的壁內神經叢,它的終末神經 元屬于膽堿能,主要與運動有關,可被阿托品阻斷,從而使運動受到抑制。 阿托品對膽堿受體都有高度親和力,都可以和受體產生可逆性結合,產生競 爭性拮抗作用,阿托品與受體結合后,對節(jié)后膽堿能神經支配的效應細胞上 的M受體有阻斷作用,所以平滑肌收縮頻率和收縮張力都減小。8、小腸離體后,置于
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