姜黃素對肝纖維化大鼠肝組織ⅠⅢⅣ型膠原的影響

1、姜黃素對肝纖維化大鼠肝組織，型膠原的影響         09-08-31 16:38:00     作者：宋健 劉莉君 孫守才    編輯：studa20【摘要】  目的觀察姜黃素對肝纖維化大鼠肝組織，型膠原的影響。方法四氯化碳加酒精制備大鼠肝纖維化模型，設(shè)正常對照組、病理模型組、姜黃素小劑量組、姜黃素中劑量組、姜黃素大劑量組、-干擾素組、復方鱉甲軟肝片組。治療結(jié)束后肝組織作HE染色、膠原纖維染色、網(wǎng)狀纖維染色觀察肝組織纖維

2、化程度；免疫組織化學方法（SABC法）檢測肝組織，型膠原的含量。結(jié)果和病理模型組比較，姜黃素大劑量組大鼠、姜黃素中劑量組大鼠SSS計分值明顯降低（P<0.05），肝組織，型膠原含量明顯降低，有顯著性差異（P<0.05）。結(jié)論姜黃素能夠降低肝組織，型膠原含量，降解肝組織，型膠原，具有治療肝纖維化的作用。 【關(guān)鍵詞】  姜黃素 肝纖維化 大鼠 膠原纖維    Abstract：ObjectiveTo study the effect of Curcumin on the type , and collagens of liver tissues

3、in rats with Liver Fibrosis.MethodsAn animal model of liver fibrosis was made by subcutaneous injection of carbon tetrachloride and ethanol orally and randomly divided into blank control group, model control group, small curcumin group, middle curcumin group, large Curcumin group, -interferon group

4、and Compound Biejiaruangan Tablet group.The degree of liver fibrosis was detected by H.E. staining, collagen fibre and reticular fibre staining. The contents of type , and collagens of liver tissues were detected by immunocytochemistry SABC method.ResultsThe results showed that SSS scores in large a

5、nd middle curcumin group were significantly lower than that of model control group (P0.05), and so did the content of type , and collagens of liver tissues.ConclusionCurcumin can degrade the type , and collagens of liver tissues and promote the recovery of liver fibrosis.    Key words

6、：Curcumin;  Liver fibrosis;  Rats;  Collagen fibre    姜黃素是從姜黃屬中藥中提取的一種酚性色素，近年研究發(fā)現(xiàn)具有抗肝纖維化作用。本實驗觀察了姜黃素對肝纖維化大鼠肝組織，型膠原的影響，以期了解姜黃素抗肝纖維化的作用機理。    1  材料    1.1  動物   一級SD大鼠96只，雄性，體重（200±20） g，由西安交通大學醫(yī)學院實驗動物中心購進。動物合格證號：醫(yī)動字第

7、08-005號。    1.2  藥物及試劑CCl4分析純，西安化學試劑廠生產(chǎn)，批號050124。姜黃素粉，分子式C21H20O6 上海試劑三廠生產(chǎn)，批號050124，25 g/瓶，用0.5%羧甲基纖維素納制成混懸液備用1，濃度分別為10，20，40 mg/ml。羧甲基纖維素鈉：上海山浦化工有限公司生產(chǎn)，500 g/瓶，批號20050118。75%乙醇，500 ml/瓶，陜西祥泰藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號050302。復方鱉甲軟肝片：內(nèi)蒙古福瑞中蒙藥科技股份有限公司出品，0.5 g/片，生產(chǎn)批號20041204，用蒸餾水溶解62.5 mg/ml備用。注射用重

8、組人-干擾素（IFN-）：麗珠生物工程制藥廠出品，100 萬u/支，生產(chǎn)批號20050201，用注射用水溶為80 u/ml備用。 ，型膠原抗體，均為0.2 ml濃縮性，由武漢博士德生物制品有限公司生產(chǎn)，中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學病理教研室提供，批號200510。         2  方法    2.1  動物模型制備2及分組將實驗大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機抽取12只作為正常對照組（A組），其余84只大鼠實驗第1天每只皮下注射50%四氯化碳植物油溶液0.5 ml /

9、100 g體重,以后每3天皮下注射50%四氯化碳植物油溶液0.3 ml /100 g體重造模，從造模第2周開始給大鼠用25%酒精灌胃0.5 ml/100 g體重，隔天1次，第6周起，每周末從造模動物中隨機處死1只大鼠作肝纖維化病理學檢查，按照2000年西安會議病毒性肝炎防治方案肝纖維化分期標準來判斷肝纖維化程度3，直到有2期以上纖維化形成，即確定肝纖維化模型復制成功，造模共12周。造模結(jié)束時大鼠死亡5只，將剩余72只大鼠隨機分為6組：病理模型組(B組)、姜黃素小劑量組(C組)、姜黃素中劑量組(D組)、姜黃素大劑量組(E組) 、-干擾素組(F組)、復方鱉甲軟肝片組(G組)，每組12只。 

10、;   2.2  治療給藥從第13周起開始給藥，A組、B組用生理鹽水灌胃，2 ml/只，1次/d，連續(xù)用藥8周；C組以姜黃素100 mg/kg體重灌胃，1次/d，連續(xù)用藥8周；D組以姜黃素200 mg/kg體重灌胃4，1次/d，連續(xù)用藥8周；E組以姜黃素400 mg/kg體重灌胃，1次/d，連續(xù)用藥8周；F組以-干擾素0.2 mu/kg體重肌肉注射，1次/d，連續(xù)用藥8周；G組以復方鱉甲軟肝片0.625 g/kg體重灌胃，1次/d，連續(xù)用藥8周。各治療組的給藥劑量按成人常用劑量換算所得用量進行實驗2。    2.3  標本的

11、采集與制備5治療結(jié)束分別給大鼠腹腔注射10%水合氯醛0.35 ml/100 g麻醉,頸總動脈取血，2 ml/只，分離血清備檢（肝纖維化血清指標檢測）。與此同時開腹剖取新鮮肝組織左葉，10%甲醛固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，厚5 m 。    2.4  觀測指標及檢測方法    3  結(jié)果    3.1  動物死亡情況  造模結(jié)束時，大鼠死亡5只，死亡率為6.5%；治療結(jié)束時，A，E，C組大鼠無死亡，死亡率為0；D組和F組各死亡1只，死亡率為8.3%；B，G組大鼠各死亡2只，死亡率為16.7%。    3.2  肝纖維化組織學半定量計分系統(tǒng)（SSS）計分結(jié)果與正常對照組比較，病理模型組計分明顯增高（P<0.01），說明造模后肝組織結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯變化；姜黃素小劑量組與病理模型組無差異（P>0.05）；姜黃素大劑量、姜黃素中劑量、復方鱉甲軟肝片、-干擾素4個治療組與病理模型組比較SSS計分明顯降低，有顯著性差異（P<0.05或P<0.01）；姜黃素大劑量、姜