正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化復(fù)方珍珠含片制備工藝

1、正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化復(fù)方珍珠含片制備工藝                作者：許潔 劉揚(yáng) 曹莉 張學(xué)農(nóng) 阮華君 廖杰  姜篤新【摘要】  目的研究復(fù)方珍珠含片的制備工藝。方法采用正交實(shí)驗(yàn)法，以浸膏收率、梓醇含量及甘草酸含量為指標(biāo)，考察加水量、煎煮時(shí)間和煎煮次數(shù) 因素及含醇量及醇沉濃度對(duì)浸膏收率和有限成分的影響。結(jié)果優(yōu)化的提取工藝為加入 倍水量，重復(fù)兩次，每次煎煮 。結(jié)論優(yōu)化篩選處方工藝具備良好的收率，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。 【關(guān)鍵詞】 

2、; 珍珠 口含片 提取工藝 正交實(shí)驗(yàn)Abstract：Objective P B T.Methods ， ， t ， （）， （） （） .Results were as follows： ， decocting .Conclusion Key words：Pearl ；   ；       復(fù)方珍珠含片是在古代名方“珍珠丸”基礎(chǔ)上加減化裁而成，原方由珍珠、西瓜霜、冰片、硼砂、生地黃、甘草等組成，具有清利咽喉，消腫止痛，解毒生肌之功，用于咽喉腫痛，聲啞失音，口舌生瘡，牙齦腫痛或出血。其中生地黃 為玄參科多年生草本植物地黃Re

3、hmannia glutinosa 的干燥塊根，性味甘、苦，寒，歸心、肝、腎經(jīng)。具有清熱涼血、養(yǎng)陰生津之功效。甘草藥性平和，長(zhǎng)于清火解毒，潤(rùn)肺止咳，多用以痰熱咳嗽、咽喉腫痛等，其主要有效成分為甘草酸 。在復(fù)方珍珠含片的制備工藝中，甘草需同生地黃一起經(jīng)煎煮，得浸膏，粉碎后加入其余成分，故本研究以浸膏收率、梓醇含量及甘草酸含量作為考察指標(biāo) ，對(duì)復(fù)方珍珠含片的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。  儀器與試劑  儀器 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（鞏義市英峪予華儀器廠）； × 遠(yuǎn)紅外快速恒溫干燥箱（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）； 型電子天平（ ）； 型真空干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）。  試劑與

4、藥材乙腈（色譜純）、甘草、地黃（蘇州天靈中藥飲片有限公司）。  方法與結(jié)果  色譜條件，  甘草酸含量測(cè)定流速 ；流動(dòng)相：乙腈（含冰醋酸）醋酸水溶液（）；柱溫；檢測(cè)波長(zhǎng) 。  梓醇含量測(cè)定流速 ；流動(dòng)相乙腈水溶液；柱溫；檢測(cè)波長(zhǎng) 。   提取工藝優(yōu)化  醇濃度影響稱取甘草 ，地黃 ，加入 倍量（）分別為醇濃度%，%，%，%，%，的醇溶液于 圓底燒瓶中，加熱煮沸，并保持低沸 ，停止加熱，放冷后，抽濾。將濾液加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，蒸發(fā)濃縮，并移至 容量瓶，定容，則每毫升含 原藥材，精取藥液 ，置小蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，于° 干

5、燥 ，移置干燥器中，冷卻 ，迅速精密稱定重量。以浸出物量、梓醇含量、甘草酸含量為考察指標(biāo)，綜合評(píng)分：總分為 分，浸出物占 分，梓醇含量占 分，甘草酸含量占分。結(jié)果見(jiàn)表。表1  醇濃度影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）結(jié)果表明，隨著醇濃度的增大，浸膏收率下降，甘草酸含量升高，梓醇含量沒(méi)有明顯變化趨勢(shì)。醇濃度影響不明顯，需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證實(shí)。   乙醇提取次數(shù)對(duì)有效成分影響稱取甘草 ，地黃 ，置 圓底燒瓶中，加入乙醇 ，加熱煮沸，并保持低沸 ，停止加熱，放冷后，抽濾。將濾液加入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，蒸發(fā)濃縮，并移至 容量瓶，定容，則每毫升含 原藥材，精取藥液 ，置小蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，于°

6、; 干燥 ，移置干燥器中，冷卻 ，迅速精密稱定重量。    綜合評(píng)分：總分為 分，浸出物占 分，梓醇含量占分，甘草酸含量占 分。結(jié)果見(jiàn)表。表2  60%乙醇提取次數(shù)對(duì)甘草酸和梓醇含量的影響（略）結(jié)果表明，乙醇提取時(shí)，隨提取次數(shù)增加， 個(gè)指標(biāo)也發(fā)生遞增。但分值指標(biāo)偏低。百事通  水煎煮法提取工藝條件的優(yōu)化  正交實(shí)驗(yàn)4 為優(yōu)化水煎煮法提取工藝的條件，選用正交實(shí)驗(yàn)法，考察加水量、煎煮次數(shù)、煎煮時(shí)間 個(gè)因素，以 醇出物量及甘草酸含量作為考察指標(biāo)，選用 （ ）表安排實(shí)驗(yàn)。因素水平見(jiàn)表。表3  因素水平（略）取甘草 ，地黃 ，加入 倍

7、量水，加熱煮沸，并保持低沸 小時(shí)，停止加熱，放冷后，抽濾，煎煮 次。合并濾液，將濾液置于電爐上，蒸發(fā)濃縮，并移至 容量瓶，定容，精取藥液 ，置小蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，于干燥 ，移置干燥器中，冷卻 ，迅速精密稱定重量。將浸出物用 乙醇溶解轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，超聲 ，過(guò)濾后將濾液分多次加入蒸發(fā)皿中，于水浴鍋上蒸干后，于干燥，移置干燥器中，冷卻 ，迅速精稱重量。    綜合評(píng)分：總分為 分，醇出物占 分，梓醇含量占 分，甘草酸含量占 分。結(jié)果見(jiàn)表 。表4  正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）表5  水煎煮提取工藝正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略） 個(gè)因素的極差比較結(jié)果是： ，最佳工藝條件

8、是：因素取 水平（ ）， 因素取 水平（ ）， 因素取 水平（ ），即采用 倍量水，煎煮 次， 次。表6  方差分析（略）由方差分析表 結(jié)果看出， 因素的水平變化對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果都有顯著影響?？梢钥闯?，最高得分處方為 ，即采用 倍量水，煎煮 次， 次。從含量結(jié)果分析，煎煮兩次甘草酸提取率已經(jīng)可以達(dá)到甘草總量的，梓醇含量的。從企業(yè)大生產(chǎn)考慮，采用二次提取更為經(jīng)濟(jì)合理，因此取 與正交實(shí)驗(yàn)所得得最優(yōu)處方 進(jìn)行重復(fù)，以確定最佳處方。3.2  重復(fù)實(shí)驗(yàn)根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果，按照處方組合 和 進(jìn)行重復(fù) 次，取 定容后的提取液，測(cè)定浸出物中甘草和梓醇含量，再用乙醇 ，超聲 ，過(guò)濾后，揮干乙醇，得醇

9、出物量。結(jié)果見(jiàn)表7。表7  重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）通過(guò)重復(fù)實(shí)驗(yàn)的比較，確證了 條件是最佳提取條件。而處方組合 與最佳提取條件 相比較無(wú)顯著差異，且從企業(yè)大生產(chǎn)考慮，采用二次提取更為經(jīng)濟(jì)合理，因此取 作為最優(yōu)處方。33   醇沉淀對(duì)有效成分的影響直接提取、提取后醇沉兩種提取方法進(jìn)行比較。根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，按照處方組合 進(jìn)行重復(fù) 次，取 定容后的提取液，測(cè)定浸出物中甘草和梓醇含量，再用乙醇 ，超聲 ，過(guò)濾后，揮干乙醇，得醇出物量。另取 的提取液加入濃醇，調(diào)至濃度為，體積控制在 以內(nèi)，分別轉(zhuǎn)入錐形瓶中，靜置過(guò)夜，取上清液，定容至 ，測(cè)定梓醇、甘草酸含量。結(jié)果見(jiàn)表8。表8&#

10、160; 兩種提取方法比較結(jié)果（略）采用醇沉法，對(duì)甘草酸含量無(wú)明顯影響，但是梓醇含量明顯下降（P ）。3  討論    本實(shí)驗(yàn)以復(fù)方珍珠含片中有效成分甘草酸、梓醇的含量為指標(biāo)，分別考察不同濃度乙醇回流和煎煮的提取工藝可行性。結(jié)果，乙醇回流 次獲得的提取液中有效成分含量均偏低，不能將有效成分成功轉(zhuǎn)移。因此，宜選擇傳統(tǒng)煎煮法作為提取工藝。實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)對(duì)加水量、煎煮次數(shù)、煎煮時(shí)間 個(gè)因素分別進(jìn)行了單因素考察。結(jié)果，一定范圍內(nèi)加水量與甘草酸、梓醇含量成正比關(guān)系，且加水量大于 倍時(shí)提取較完全；煎煮次數(shù)在二次以上即可將有效成分轉(zhuǎn)移出來(lái)，煎煮時(shí)間達(dá) 以上提取完全。由于中藥復(fù)方制劑成分復(fù)雜，遵循“去粗取精”，即除去糟粕，留其精華，在保證有效成分不被丟失的前提下，最大可能的保留有效成分。同時(shí)，結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)節(jié)約資源原則優(yōu)化出適合工業(yè)化生產(chǎn)的生產(chǎn)工藝?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1 國(guó)家藥典委員會(huì)中國(guó)藥典，部北京：化學(xué)工業(yè)出版社，：，2 汪程遠(yuǎn)，張 浩，孟 莉，等 測(cè)定地黃及其制劑中梓醇的含量華西