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1、利穗科技(蘇州)有限公司 Lisure Science (Suzhou)Co.,Ltd 山茶花中純色素制備 山茶花一般春季開花,園藝品種繁多,其中深紅色重瓣山茶花具有豐富的紅色素,是開發(fā)天然紅色素的良好資源。山茶花性甘涼而味苦辛,為涼血、止血、散癖、消腫的良藥,故山茶花色素具有天然食用色素安全、營養(yǎng)、藥用等典型特征。 樣品十分復雜,含有大量難分離雜質。為提高產(chǎn)量同時保證產(chǎn)品純度,使用兩步制備方法。首先,使用大直徑制備柱對樣品進行粗分,實現(xiàn)目標物與大部分雜質的分離。然后以粗分產(chǎn)品為樣品,使用小直徑制備柱,通過串聯(lián)的方式加長色譜柱柱長提高柱效,進行第二次制備分離。 山茶花樣品分析 圖1 山茶花樣品
2、HPLC譜圖 儀器:依利特EliteP230II高效液相色譜儀; 色譜柱:SinoChrom ODS-BP (4.6×150mm 5um); 流動相:A0.1三氟醋酸水溶液,B乙腈,梯度洗脫; 檢測波長:230nm ; 流速:1.0ml/min。 利穗科技(蘇州)有限公司 Lisure Science (Suzhou)Co.,Ltd 初步制備分離 儀器:Dr FlashII中壓制備系統(tǒng); 流動相:A0.1三氟醋酸水溶液,B甲醇 ,梯度洗脫; 分離柱:2根40g制備柱串聯(lián),填料ODS AQ(30-50m); 收集波長:230nm; 監(jiān)測波長:254nm; 流速:25 ml/min。 圖
3、2 制備粗分圖 收集物HPLC分析檢驗 Minutes42104166228290350mV1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 圖3 粗分收集目標物HPLC譜圖 條件同圖1 利穗科技(蘇州)有限公司 Lisure Science (Suzhou)Co.,Ltd 第二次制備分離 樣品太復雜,一次分離不能達到高純度要求。以初步分離中收集的目標物進樣,進行第二次制備分離,純化目標物。 圖4 樣品第二次制備分離圖 分離柱:3根12g制備柱串聯(lián),填料ODS AQ(30-50m);B為乙腈,其余同圖2 收集物HPLC分析檢驗 圖5 最終目標物HPLC分析譜圖 條件同圖1 目標物純度達到設計要求。 地址:蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號生物納米園
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