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1、四種性病病原體感染16450例的分子流行病學(xué)調(diào)查 【摘要】目的nbsp;調(diào)查CT、UU、NG、HPV等性病的流行病學(xué)狀況;方法nbsp;對江西省12家市級醫(yī)院性病門診就診的16450例泌尿生殖道感染患者留取的分泌物采用熒光定量PCR方法檢測CT、UU、NG、HPV-DNA結(jié)果;結(jié)果nbsp;12733例男性標(biāo)本中CT、UU、NG、HPV陽性率分別為1 四種性病病原體感染16450例的分子流行病學(xué)調(diào)查 陳雪禮1) 陳越1) 劉曉峰1) 史國香2) 黃震1)
2、 (1)九江市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,九江332000 2)廣東中山大學(xué)達(dá)安基因診斷中心) 【摘要】目的 調(diào)查CT、UU、NG、HPV等性病的流行病學(xué)狀況;方法 對江西省12家市級醫(yī)院性病門診就診的16450例泌尿生殖道感染患者留取的分泌物采用熒光定量PCR方法檢測CT、UU、NG、HPV-DNA結(jié)果;結(jié)果 12733例男性標(biāo)本中CT、UU、NG、HPV陽性率分別為16.4%、9.1%、7.1% 、6.5%;3717例女性標(biāo)本中CT、UU、NG、HPV陽性率分別為22.0%、21.1%、10.5%、2.1%。CT+UU混合陽性檢出率6.3%;CT+NG混合陽性檢出率為0.6%;CT+H
3、PV混合陽性檢出率為1.4%;UU+NG混合陽性檢出率為3.4%;UU+HPV混合陽性檢出率為3.7%;NG+HPV混合陽性檢出率為0.7%;兩種以上混合感染例數(shù)的陽性檢出率為1.0%。2002、2003年陽性檢出率分別為37.1%、48.5%。 結(jié)論 江西省CT、UU、NG、HPV4種性病病原體的流行較為嚴(yán)重,總陽性檢出率為42.8%,且有逐年增長的趨勢。 【關(guān)鍵詞】 性傳播疾病 沙眼衣原體 解脲支原體 淋球菌 人乳頭瘤病毒 流行病學(xué) FQ-PCR EPIDEMIOLOGY
4、; INVESTIGATION IN 16450 CASES OF FOUR STDS PATHOGAN INFECTIONS Chen Xue Li Chen Yue Liu Xiao Feng Shi Guo Xiang,et al The clinical laboratory in the first people hospital in Jiujiang City,(Jiujiang 332000)
5、160; ABSTRACT Obijective:Knowing about epidemiology state about pathogens of the STD,such as CT、UU、NG、and HPV,etc in Jingxi province.Method:By use of FQ-PCR,examinging CT-DNA、UU-DNA、NG-DNA、HPV-DNA of the secretion of 16450 STD pationts who were infected in their urinary and reproductive
6、tracts from the 12 municipal level hospitals in Jiangxi province.Results:The positive tates of CT、UU、NG、HPV are 16.4%、9.1%、7.1% 、6.5% from 12733 male samples and 22.0%、21.1%、10.5%、2.1% from 3717 female samples;The mixed positive rates of CT+UU are 6.3% and 0.6% of CT+NG,1.4%of CT+HPV,3.4% of UU+NG 3
7、.7% of UU+HPV,0.7% of NG+HPV and 1.0% of the 3STDS infection The examined postitive rates are 37.1% and 48.5% in 2002 and 2003 years.Conclusion:The four STDs pathogens range much more seriously in Jiangxi province and tend to increase years after years. KEY WORDS STD;CT;UU;NG;HPV;epidemiology,
8、FQ-PCR 性傳播疾病(Sexually transmitted disease STD)即通過性行為傳播的疾病。近些年來該疾病在我國感染情況呈增長趨勢,全國經(jīng)濟(jì)發(fā)展較快,人口流動大以及個人衛(wèi)生防護(hù)相對差是造成流行的客觀條件。為了解江西省沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis, CT)、解脲支原體(Ureaplasma urealyticum , UU)、淋球菌(Neisseria gonorrhoeae , NG)和人乳頭瘤病毒(Human papillomaviruses , HPV)的感染情況,筆者對江西省南北5個地級市12家醫(yī)院性
9、病門診因生殖道感染而就診的患者,采集其生殖道分泌物,應(yīng)用熒光定量PCR檢測方法,統(tǒng)計以上4項(xiàng)性病病原體數(shù)據(jù),按照不同的性別、年齡以及不同的年份進(jìn)行比較分析,報告如下。 材料和方法 1、標(biāo)本來源 2002年6月至2003年10月江西省九江市、南昌市、景德鎮(zhèn)市、贛州市、宜春市等5個地級市12家醫(yī)院性病和婦產(chǎn)科門診,用無菌拭子采集的生殖道分泌物、婦女宮頸分泌物、男性尿道分泌物,置1ml滅菌生理鹽水試管中,采用統(tǒng)一的熒光定量PCR方法檢測4種性病病原體CT-DNA、UU-DNA、NG-DNA、HPV-DNA。 2、檢測方法 2.1 試劑與儀器 檢測CT、UU、NG、HPV-DNA 的PC
10、R擴(kuò)增試劑由廣州達(dá)安公司提供。檢測儀為PE5700和大和FQD-33A型基因擴(kuò)增儀。 2.2 DNA提取 將留取的分泌物標(biāo)本置1ml離心管中,充分震蕩搖勻,提取懸浮液轉(zhuǎn)到5ml離心管中,12,000rpm離心5分鐘,棄上清,再重復(fù)洗滌一次。在沉淀中加入50ul DNA提取液充分混勻,沸水浴10分鐘(誤差不超過1分鐘),轉(zhuǎn)至4oC靜置6-8小時,10,000rpm離心5分鐘,取上清液5ul做PCR反應(yīng)。 2.3 擴(kuò)增 將點(diǎn)好樣的反應(yīng)管放入PCR儀上,93oC2分鐘預(yù)變性,然后按93oC45秒55oC60秒,反應(yīng)10個循環(huán),再按93oC30秒55 oC45秒反應(yīng)30個循環(huán)。每批PCR試驗(yàn)均做陰、陽
11、性對照、臨界陽性。 3、統(tǒng)計學(xué)方法 X2檢驗(yàn)。 結(jié)果 1、不同性別CT、UU、NG、HPV檢測結(jié)果 統(tǒng)計結(jié)果見表1(括號中為該種病原體在該組病例中的陽性檢出率) 表略 2、混合感染情況 見表2。(括號中為該種病原體在該組病例中的陽性檢出率) 表略 由本次調(diào)查數(shù)據(jù)統(tǒng)計顯示,雙重感染及多重感染總檢出率為17.1%。 3、 不同年份感染情況 見表3。(括號中為該種病原體在該組病例中的陽性檢出率) 表略 4、不同年齡感染情況。 見表4(括號中為該種病原體在該組病例中的陽性檢出率 (表略) 討論
12、 在性傳播疾病中,CT、UU、NG、HPV的感染較常見,我們所統(tǒng)計的12家醫(yī)院均采用統(tǒng)一的實(shí)時FQ-PCR技術(shù),所用儀器均為PE5700和大和FQD-33A型基因擴(kuò)增儀,試劑均為中山大學(xué)達(dá)安基因診斷試劑。利用了基因擴(kuò)增的靈敏性,分子雜交的特異性和光化學(xué)的精確性1,5,從根本上解決了PCR擴(kuò)增產(chǎn)物污染和不能定量的問題。同時熒光定量PCR還具有快速、操作簡便、無需對PCR產(chǎn)物進(jìn)行后處理,還具有定量范圍寬、定量準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)6。因此本次調(diào)查所統(tǒng)計的數(shù)據(jù)具有較高的可信性。 江西省CT、UU、NG、HPV4種性病病原體檢出率分別為17.7%,11.8%,7.8%,5.5%,總檢出率為
13、42.8%,與國內(nèi)外報道并不完全一致78,說明不同地區(qū)性傳播疾病的流行存在一定的差異,另外可能與標(biāo)本來源存在一定的關(guān)系。男性患者CT、UU、NG、HPV陽性檢出率分別為16.4%、9.1%、7.1% 、6.5%;女性性患者CT、UU、NG、HPV陽性檢出率分別為22.0%、21.1%、10.5%、2.1%;男性CT陽性檢出率(16.4%)明顯低于女性(22.0%);女性UU陽性檢出率(21.1%)明顯高于男性(9.1%)。NG男性陽性檢出率(7.1%)低于女性陽性檢出率(10.5%);HPV男性陽性檢出率(6.5%)高于女性陽性檢出率(2.1%)。在此次統(tǒng)計調(diào)查中,各種病原體混合感染情況比較嚴(yán)
14、重,有存在雙重感染或多重感染,占總感染的17.1%;其中CT、UU混合感染檢出率為6.3%;CT、NG混合感染檢出率為0.6%;CT、HPV混合感染檢出率為1.4%;UU、NG混合感染檢出率為3.4%;UU、HPV混合感染檢出率為3.7%;NG、HPV混合感染檢出率為0.7%;兩種以上混合感染的感染檢出率為1.0%。因此在臨床上對懷疑為STD患者應(yīng)做多項(xiàng)性病病原學(xué)檢查,以提高病原體的檢出率。另外,2002、2003年陽性率存在上升趨勢。在年齡段上,青少年性病感總檢出率為5.7%,因此需要社會各界的關(guān)注,并做好宣傳、預(yù)防、診斷和治療工作。 參考文獻(xiàn) 1 Geud C A,Willi
15、ams P M.A novel method for real time quantitative RT-PCR.Genome Res,1996,6:995-1001 2 Heid C A, Stevens J,Livak K J, et al.Real time quantitative PCR.Genome Res,1996,6:986-994. 3 Becker K,Pan D,Whitely C B.Real-to,e PCR assau. J Clin chain reaction to assess gene transfer. Hum Gene Ther,7999,10(15):2559-2566 4 Pas S D,Fries E,De Man R A,et al.Development of a quantitative real-time detection assay for hepatitis B vins DNA and comparison with two comme
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