(完整版)PCR實(shí)驗(yàn)室管理制度-PCR實(shí)驗(yàn)室檢查指南合規(guī)版

1、文件編號：生效日期：版本：1. 目的：PCR 實(shí)驗(yàn)室管理制度擬制人：審核人：批準(zhǔn)人：建立 PCR實(shí)驗(yàn)室分區(qū)管理規(guī)定，保證檢驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性。2. 范圍：適用于 PCR實(shí)驗(yàn)室管理。3. 職責(zé)：質(zhì)量部。4. 工作流程：4.1實(shí)驗(yàn)室按照功能分以下區(qū)域：4.1.1 試劑準(zhǔn)備區(qū)（體系室）：為 PCR體系配制區(qū)域。4.1.2 標(biāo)本制備區(qū)（模板室）：為模板 DNA制備、擴(kuò)增體系模板添加的區(qū)域。4.1.3 擴(kuò)增區(qū)（擴(kuò)增室）：為 PCR模板進(jìn)行擴(kuò)增區(qū)域。4.1.4 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) （產(chǎn)物分析室）：為 PCR模板進(jìn)行擴(kuò)增、 電泳檢測或擴(kuò)增產(chǎn)物分析的區(qū)域。本區(qū)域?yàn)?PCR產(chǎn)物污染區(qū)。4.2 實(shí)驗(yàn)室要求：4.2.1 實(shí)

2、驗(yàn)室著裝要求4.2.1.1試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，四個(gè)區(qū)域配備有不同顏色的防靜電實(shí)驗(yàn)服和專用鞋套。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室區(qū)域后，需更換對應(yīng)區(qū)域的實(shí)驗(yàn)服及鞋套。4.2.1.2各區(qū)域工作服及鞋套不能混穿。4.2.1.3離開當(dāng)前實(shí)驗(yàn)區(qū)域時(shí)，應(yīng)在黃色警戒線內(nèi)脫掉該區(qū)實(shí)驗(yàn)服和鞋套，再進(jìn)入其他區(qū)域，更換相應(yīng)區(qū)域的工作服和鞋套。4.2.2 各實(shí)驗(yàn)室內(nèi)試驗(yàn)儀器、耗材、移液器使用規(guī)則：4.2.2.1在各操作間配有專用儀器、耗材、移液器，絕不能混用以避免污染。4.2.2.2每個(gè)房間都有功能標(biāo)識，根據(jù)房間功能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，不能混用。如試劑準(zhǔn)備區(qū)不能用于模板 DNA制備。4.3日常清潔要求：4.3.1各個(gè)實(shí)驗(yàn)

3、室應(yīng)配備專用的清潔設(shè)施，不得混用。1/3 PCR 實(shí)驗(yàn)室管理制度第 0 次修改4.3.2實(shí)驗(yàn)員每月用 1mol/L 鹽酸（ 50ml 12mol/L 鹽酸（即濃鹽酸）和550ml 純化水混合）擦拭操作臺、門把手及移液器、離心機(jī)等設(shè)備外表面，30 分鐘后用清水擦拭。注意金屬表面不能用本試劑進(jìn)行擦拭，可用水代替反復(fù)擦洗。4.3.3每個(gè)房間實(shí)驗(yàn)服在相應(yīng)房間洗手盆中清潔，在相應(yīng)房間自然晾干。各區(qū)域服裝不能混洗，洗滌時(shí)以單件形式進(jìn)行洗滌。4.3.4實(shí)驗(yàn)室紫外消毒要求：實(shí)驗(yàn)室使用頻率大于 1 次/ 月，則每周用屋頂紫外燈過夜照射 1 次，照射時(shí)間一般在 1516 小時(shí)；如實(shí)驗(yàn)室使用頻率小于 1 次 / 月

4、，可在使用前再進(jìn)行此操作。4.4污染源監(jiān)控：每半年監(jiān)控一次。4.4.1 監(jiān)控方法：對各實(shí)驗(yàn)室設(shè)施進(jìn)行取樣，將所取樣品等同于一份臨床樣本，不同產(chǎn)品污染源檢測應(yīng)按照相應(yīng)的產(chǎn)品“說明書”進(jìn)行體系配制、加樣、擴(kuò)增等操作，依據(jù)擴(kuò)增結(jié)果判斷是否存在污染。4.4.2 取樣方法：準(zhǔn)備22 個(gè)裝有 1.0ml 滅菌水的 1.5ml 離心管，將滅菌棉簽沾濕后，2左右 , 將棉簽放回盛有無菌水的離心管中，折斷棉簽?zāi)景舨客磕ú蓸硬课唬?面積在 20cm分，扣好管蓋待檢。4.4.3 取樣部位：試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。試劑準(zhǔn)備區(qū)： 門把手 1 點(diǎn)、臺面 1 點(diǎn)、超凈工作臺 2 點(diǎn)、移液器 1 點(diǎn)、

5、冰箱門把手 1 點(diǎn)、地面 1 點(diǎn)；標(biāo)本制備區(qū)：門把手 1 點(diǎn)、臺面 1 點(diǎn)、生物安全柜 2 點(diǎn)、移液器 1 點(diǎn)、冰箱門把手 1 點(diǎn)、地面 1 點(diǎn)；擴(kuò)增區(qū)：門把手 1 點(diǎn)、臺面 1 點(diǎn)、 PCR儀表面 1 點(diǎn)、地面 1 點(diǎn)；擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：門把手 1 點(diǎn)、臺面 1 點(diǎn)、電泳儀表面 1 點(diǎn)、地面 1 點(diǎn)。共取樣 22 個(gè)點(diǎn)。4.4.4監(jiān)測結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：PCR類：依照現(xiàn)有產(chǎn)品檢驗(yàn)操作規(guī)程進(jìn)行操作，產(chǎn)品中的相應(yīng)陽性對照有特異擴(kuò)增，產(chǎn)品中的相應(yīng)陰性對照無擴(kuò)增，取樣點(diǎn)樣品無擴(kuò)增，則判定試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)無污染，檢驗(yàn)結(jié)果可信；取樣點(diǎn)有擴(kuò)增則證明相應(yīng)區(qū)域有污染，需對相應(yīng)部位進(jìn)行清潔

6、（用1mol/L 鹽酸擦拭），清潔后再次取樣進(jìn)行檢驗(yàn)操作，取樣點(diǎn)樣品無擴(kuò)增則證明實(shí)驗(yàn)室無污染。4.5 實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)4.5.1操作過程中應(yīng)工作服、帽、鞋、手套等穿戴齊全，各區(qū)物品均為專用，不得交叉2/3 PCR 實(shí)驗(yàn)室管理制度第 0 次修改使用，避免污染。4.5.2實(shí)驗(yàn)過程中若出現(xiàn)標(biāo)本及試劑污染工作臺或移液器，應(yīng)及時(shí)用酒精處理。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)立即清潔工作臺，并定期對實(shí)驗(yàn)臺及各種實(shí)驗(yàn)用品進(jìn)行消毒。4.5.3 實(shí)驗(yàn)過程中的廢棄樣本及實(shí)驗(yàn)廢棄物，需作為醫(yī)療廢物統(tǒng)一回收處理。4.6 實(shí)驗(yàn)室日常管理按照質(zhì)檢組實(shí)驗(yàn)室管理制度實(shí)驗(yàn)室安全管理制度執(zhí)行。4.7實(shí)驗(yàn)室壓力要求：4.7.1實(shí)驗(yàn)室 4 個(gè)功能房間均為直排負(fù)壓。4.7.2 PCR 檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的空氣流向應(yīng)當(dāng)按照試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)方向進(jìn)行， 4 個(gè)區(qū)域均為直排負(fù)壓， 壓差梯度逐級增加， 并安裝壓差監(jiān)測裝置，以有效證明空氣流向，實(shí)驗(yàn)室對緩沖間壓差不低于5 帕。實(shí)驗(yàn)室直排風(fēng)扇開啟的順序是擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)擴(kuò)增區(qū)標(biāo)本制備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)，關(guān)閉直排風(fēng)扇順序則反之進(jìn)行，以防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域?？諝饬飨?yàn)閱蜗颍瓜掠挝廴旧嫌巍?.7.3每天上午填寫 1 次 PCR實(shí)驗(yàn)室壓差記錄。5.