生物化學(xué)簡答題新編

1、什么是蛋白質(zhì)的他主要有哪幾種蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)是指多肽鏈主鏈原子的局部空間排布，不包括側(cè)鏈的構(gòu)象。它主要有a -螺旋，B -折疊，B -轉(zhuǎn)角和無規(guī)則卷曲四種。簡述a -螺旋結(jié)構(gòu)特征：1、在a -螺旋結(jié)構(gòu)中，多肽鏈主要圍繞中心軸以右手螺旋方式螺旋上升，每隔3.6個氨基酸殘基上升一圈，螺距為0.54nm2、氨基酸殘基的側(cè)鏈伸向螺旋外側(cè)。3、每個氨基酸殘基的亞氨基上的氫與第四個氨基酸殘基羥基上的氧形成氫鍵，以維持a -螺旋穩(wěn)定。簡述常用蛋白質(zhì)分離、純化方法：鹽析、透析、超速離心、電泳、離子交換層析、分子篩層析。簡述谷胱甘肽的結(jié)構(gòu)和功能：組成：谷胱甘肽由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸構(gòu)成的活性三肽，功能基團(tuán)：

2、半胱氨酸殘基中的疏基。功能： 1、作為還原劑清除體內(nèi) H2O2,使含疏基的酶或蛋白質(zhì)免遭氧化，維持細(xì)胞膜的完整性。2.具有嗜核特性，與親電子的毒物或藥物結(jié)合，保護(hù)核酸和蛋白質(zhì)免遭損害。哪些原因影響蛋白質(zhì) a -螺旋結(jié)構(gòu)的形成或穩(wěn)定？1、一條多肽鏈中，帶有相同電荷的氨基酸彼此相鄰，相互排斥，妨礙 a-螺旋的形成。2、含有大側(cè)鏈的氨基酸殘基，彼此相鄰，空間位阻較大也會影 響a -螺旋的形成。3、脯氨酸為亞氨基酸，亞氨基酸形成肽鍵后，沒有了游離的氫，不能形成氫鍵， 因此不能形成a-螺旋。酶的化學(xué)修飾的特點(diǎn)是什么：在化學(xué)修飾過程中，酶發(fā)生無活性和有活性兩種形式的互變該修飾時共價鍵的變化，最常見的是磷酸

3、化和去磷酸化修飾常受激素的調(diào)控是酶促反應(yīng)有放大效應(yīng) 酶的變構(gòu)調(diào)節(jié)特點(diǎn)是什么：細(xì)胞內(nèi)一些中間代謝產(chǎn)物能與某些酶分子活性中心以外的某一部位以非共價鍵可逆結(jié)合，使酶構(gòu)象發(fā)生改變并影響其催化活性，進(jìn)而調(diào)節(jié)代謝反應(yīng)速率，這種現(xiàn)象為變構(gòu)反應(yīng)，其特點(diǎn)是變構(gòu)酶常由多個亞基構(gòu)成變構(gòu)效應(yīng)劑常結(jié)合在活性中心以外的調(diào)節(jié)部位，引起酶空 間構(gòu)象的改變，從而改變酶的活性變構(gòu)效應(yīng)劑與調(diào)節(jié)部位以非共價鍵結(jié)合酶具有無活性和有活性 兩種方式互變不服從米曼氏方程，呈 S型曲線酶和一般催化劑比較有何異同：相同點(diǎn)：反應(yīng)前后無質(zhì)和量的改變不改變反應(yīng)的平衡點(diǎn)只催化熱力學(xué)允許的反應(yīng)都是通過降低反應(yīng)活化能而增加反應(yīng)速率的不同點(diǎn)酶的催化效率高酶對

4、底物有高度特異性酶活性的可調(diào)節(jié)性，酶的催化作用多受多種因素調(diào)節(jié)酶是蛋白質(zhì)，對反應(yīng)條件要求嚴(yán)格，如溫度、pH 等簡述Km和Vmax的意義：Km的意義：Km等于反應(yīng)速率為最大速率一半時的底物濃度一些酶的 K2>>K3, Km可表示酶和底物的親和力 Km值是酶的特征性常數(shù)，它與酶結(jié)構(gòu)，酶所催化的底物和 反應(yīng)環(huán)境如溫度、pH 、離子強(qiáng)度等有關(guān)，而與酶濃度無關(guān)Vmax 的意義：Vmax 是酶被底物完全飽和時的反應(yīng)速率 簡述何謂酶原與酶原激活的意義：一些酶在細(xì)胞合成時，沒有催化活性，需要經(jīng)一定的加工剪切才有活性。這類無活性的酶的前體稱為酶原。在合適的條件下和特定的部位，無活性的酶原向有活性的酶

5、轉(zhuǎn)化的過程稱為酶原的激活。酶原激活的意義：酶原形式的存在及酶原的激活有重要的生理意義。消化道蛋白酶以酶原形式分泌，避免了胰腺細(xì)胞和細(xì)胞外間質(zhì)的蛋白被蛋白酶水解而破壞，并保證酶在特定環(huán)境及部位發(fā)揮其催化作用。正常情況下血管內(nèi)凝血酶原不被激活，則無血液凝固發(fā)生，保證血流通暢運(yùn)行。一旦血管破損，凝血酶原激活成凝血酶，血液凝固發(fā)生催化纖維蛋白酶原變成纖維蛋白阻止大量失血，起保護(hù)機(jī)體作用舉例說明什么是同工酶，有何意義：同工酶使指催化相同的化學(xué)反應(yīng)，但酶分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)及免疫學(xué)性質(zhì)等不同的一組酶意義：同工酶可存在于不同個體的不同組織中，也可存在于同一個體同一組織中和同一細(xì)胞中。它使不同的組織、器官和不同

6、的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)具有不同的代謝特征。例如：LDH1和LDH5分別在心肌和肝臟高表達(dá)還可以作為遺傳標(biāo)志，用于遺傳分析研究。在個體發(fā)育的不同階 段，同一組織也可因基因表達(dá)不同而有不同的同工酶譜，即在同一個體的不同發(fā)育階段其同工酶亦有不同同工酶的測定對于疾病的診斷及預(yù)后判定有重要意義。如心肌梗死后36小時血中CK2活性升高， 24 小時酶活性到達(dá)頂峰，3 天內(nèi)恢復(fù)正常水平金屬離子作為輔助因子的作用有哪些：作為酶活性中心的催化基因參加反應(yīng)，傳遞電子作為連接酶與底物的橋梁，便于酶和底物密切接觸為穩(wěn)定酶的空間構(gòu)象中和陰離子，降低反應(yīng)的靜電斥力酶的必需基團(tuán)有哪幾種，各有什么作用：酶的必需基團(tuán)包括活性中心內(nèi)的必需

7、基團(tuán)和活性中心外的必需基團(tuán)。活性中心內(nèi)的必需基團(tuán)有結(jié)合基團(tuán)和催化基團(tuán)。結(jié)合基團(tuán)結(jié)合底物和輔酶，使之與酶形成復(fù)合物。能識別底物分子特異結(jié)合，將其固定于酶的活性中心。催化基團(tuán)影響底物分子中某些化學(xué)鍵的穩(wěn)定性，催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，并最終將其轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物?；钚灾行耐獾谋匦杌鶊F(tuán)為維持酶活性的空間構(gòu)象所必需何謂酶促反應(yīng)動力學(xué)，影響酶促反應(yīng)速率的因素有哪些：酶促反應(yīng)動力學(xué)是研究酶促反應(yīng)速率及影響酶促反應(yīng)速率各因素的科學(xué)，影響酶促反應(yīng)速率的因素有酶濃度、底物濃度、pH、溫度、抑制劑及激活劑等在在其他因素不變的情況下，底物濃度的變化對反應(yīng)速率影響的作圖時呈矩形雙曲線的底 物足夠時，酶濃度對反應(yīng)速率的影響呈直線關(guān)

8、系溫度對反應(yīng)速率的影響具有雙重性pH通過改變酶和底物分子解離狀態(tài)影響反應(yīng)速率抑制劑可逆或不可逆的降低酶促反應(yīng)速率激活劑可加快酶促反應(yīng)速率舉例說明競爭性抑制作用在臨床上的應(yīng)用：以磺胺類藥物為例：對磺胺類藥物敏感的細(xì)菌在生長繁殖時，不能直接利用環(huán)境中的葉酸，而是在菌體內(nèi)二氫葉酸合成酶的催化下，以對氨基苯甲酸為底物合成二氫葉酸。二氫葉酸是核昔酸合成過程中的輔酶之一四氫葉酸的前體磺胺類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與對氨基甲苯酸相似，是二氫葉酸合成酶的競爭性抑制劑，抑制二氫葉酸的合成。細(xì)菌則因核苷酸乃至核酸的合成受阻而影響其生長繁殖。人類能直接利用食物中的葉酸，體內(nèi)的核酸合成不受磺胺類藥物的干擾。根據(jù)競爭性抑制劑的特

9、點(diǎn)，服用磺胺類藥物時必須保持血液中藥物的高濃度，以發(fā)揮其有效競爭性抑菌作用許多屬于抗代謝物的抗癌藥物，如氨甲喋呤、5-氟尿嘧啶、6-巰基嘌呤等，幾乎都是酶的競爭性抑制劑，它們分別抑制四氫葉酸、脫氧胸苷酸及嘌呤核苷酸的合成，以抑制腫瘤的生長比較三種可逆性抑制作用的特點(diǎn)：競爭性抑制：抑制劑的結(jié)構(gòu)與底物結(jié)構(gòu)相似，共同競爭酶的活性中心。抑制作用大小與抑制劑和底物的濃度以及酶對它們的親和力有關(guān)。Km 升高， Vmax 不變非競爭性抑制：抑制劑與底物結(jié)構(gòu)不相似或完全不同，只與酶活性中心外的必需基團(tuán)結(jié)合。不影響酶在結(jié)合抑制劑后與底物的結(jié)合。該抑制作用的強(qiáng)弱只與抑制劑的濃度有關(guān)。Km 不變， Vmax 下降反

10、競爭抑制劑：抑制劑只與酶-底物復(fù)合物結(jié)合，生成的三元復(fù)合物不能解離出產(chǎn)物。Km 和 Vmax 均下降生物氧化的特點(diǎn)： 1、在細(xì)胞內(nèi)溫和的環(huán)境中（提問，PH 接近中性）：在一系列酶的催化下逐步進(jìn)行：能量逐步釋放有利于ATP 的形成；廣泛的加氫脫水反應(yīng)使物質(zhì)能間接獲得氧，并增加脫氫的機(jī)會；產(chǎn)生的水是由脫下的氫與氧結(jié)合產(chǎn)生的，CO2 由有機(jī)酸脫羧產(chǎn)生。氧化磷酸化的抑制劑有哪些，請舉例說明：1、呼吸鏈抑制劑：魚藤酮、粉蝶霉素 A、異戊巴比妥、抗霉素A、二疏基丙醇、CO、CN-、N3及H2S。2、解偶聯(lián)劑：二硝基苯酚。 3、氧化磷酸化抑制劑：寡 霉素。NADH呼吸鏈的電子傳遞順序；如果加入異戊巴比妥結(jié)果

11、將如何？NAD HRFMN（Fe-S） - CoCHCyt b -Cyt cl fCyt c -Cyt aa3 - 1/2O2,異戊巴比妥與 FMN結(jié)合，從而阻斷電子傳遞鏈，使電子傳遞終止， 細(xì)胞呼吸停止。體內(nèi)生成ATP的兩種方式的什么，以哪種為主？底物水平磷酸化和氧化磷酸化。前者指直接將代謝物分子中的能量轉(zhuǎn)移給 ADP（或者GDP師生成ATP（或GTP）的過程。后者指代謝物脫下的2H在呼吸鏈電子傳遞過程中偶聯(lián) ADP磷酸化而生成 ATP的過程，這是產(chǎn)生 ATP的主要方式。簡述胞液中的還原當(dāng)量（H+）的兩種穿梭途徑：在胞液中生成的 H+不能直接進(jìn)入線粒體經(jīng)呼吸鏈氧化，需借助穿梭作用才能進(jìn)入線粒

12、體內(nèi)。其中通過a-磷酸甘油穿梭，2H氧化時進(jìn)入琥珀酸呼吸鏈，生成1.5分子ATP;進(jìn)過蘋果酸-天冬氨酸的穿梭作用，則進(jìn)入NADH乎吸鏈，生成2.5分子ATP。磷酸戊糖途徑的生理意義:（1）為核酸的生物合成提供核糖（2）提供 NADPH 作為供氫體參與多種代謝反應(yīng) :a.NADPH 是體內(nèi)許多合成代謝的供氫體,如脂肪酸和膽固醇的合成.b. NADPH 參與體內(nèi)羥化反應(yīng),與生物合成和生物轉(zhuǎn)化有關(guān).c. 用于維持GSH 的還原狀態(tài),保護(hù) -SH 基蛋白和-SH 酶免受氧化及的損壞:保護(hù)紅細(xì)胞膜的完整性.TCA循環(huán)的要點(diǎn)：a乙酰CoA經(jīng)TCA循環(huán)被氧化成2分子CO2;b有4次脫氫反應(yīng)淇中3次由NAD+

13、 接受，1次由FAD接受:c有3個不可逆反應(yīng)，分別由檸檬酸合酶、異檸檬酸脫氫酶、a-酮戊二酸脫氫酶催化 ;d 消耗 2 分子水（檸檬酸合酶及延胡索酸酶反應(yīng)）;e 發(fā)生 1 次底物水平磷酸化反應(yīng)（由琥珀酰CoA 合成酶催化 ） 糖異生的關(guān)鍵酶反應(yīng)：丙酮酸竣化酶：丙酮酸 +CO2+ATP -草酰乙酸+ADP+Pi磷酸烯醇式丙酮酸竣激酶:草酰乙酸+GTP-磷酸烯醇式丙酮酸 +GDP 果糖雙磷酸酶-1:1,6-雙磷酸果糖+H2O -6-磷酸果糖+Pi 葡萄糖-6-磷酸酶:6-磷酸葡萄糖+H2O-葡萄糖+Pio 6-磷酸葡萄糖的代謝途徑及其在糖代謝中的作用:1來源:a葡萄糖經(jīng)糖酵解途徑中的己糖激酶或葡萄

14、糖激酶催化磷酸化反應(yīng)生成；b.由糖原分解產(chǎn)生的1-磷酸葡萄糖異構(gòu)生成；c非糖物質(zhì)經(jīng)糖異生途徑由6-磷酸果糖異構(gòu)生成.2.去路：a經(jīng)糖酵解生成乳酸；b.經(jīng)有氧氧化徹底分解為CO2和水;c.由變位酶催化生成 1-磷酸葡萄糖，參與糖原合成；d.在6-磷酸葡萄糖脫氫酶的催化下進(jìn)入磷酸戊糖途徑；e異生為葡萄糖.3.由此可見 ,6-磷酸葡萄糖是糖代謝多種途徑的交叉點(diǎn), 是各代謝途徑的共同中間產(chǎn)物.6-磷酸葡萄糖的代謝去向取決于各代謝途徑中相關(guān)酶的活性大小.Cori 循環(huán)形成的原因及其生理意義: 形成是由于肝臟和肌肉組織的代謝特點(diǎn)所致.肝內(nèi)糖異生活躍,有葡萄糖-6-磷酸酶水解6-磷酸葡萄糖,釋放出游離葡萄糖

15、.而肌肉組織不能進(jìn)行糖異生,沒有葡萄糖-6-磷酸酶.因此 ,肌肉組織內(nèi)生成的乳酸既不能異生成糖,又不能釋放出游離葡萄糖.G-6-P 在肝臟的代謝去路:1 經(jīng)糖酵解生成乳酸;2 經(jīng)有氧氧化生成CO2 和水 ;3 通過異構(gòu)變成G-1-P, 進(jìn)而合成糖原;4 進(jìn)入磷酸戊糖途徑;5 糖異生途徑中經(jīng)葡萄糖-6-磷酸酶水解成葡萄糖.膜受體介導(dǎo)信息傳遞；激素 膜受體 G 蛋白 酶 信使 蛋白激酶酶或功能蛋白磷酸化生物學(xué)效應(yīng)高血糖使血糖升高機(jī)制胰高血糖素與肝細(xì)胞受體結(jié)合激活Ga,在通過腺昔酸環(huán)化酶使ATP環(huán)化為cATP繼而活化PKA,可促進(jìn)磷酸化酶 b激酶的磷酸化而火花，后者又使磷酸化酶b磷酸化而活化為磷酸化

16、酶a,磷酸化酶a可促進(jìn)肝糖原降解為 1磷酸葡萄糖，在轉(zhuǎn)變?yōu)橛坞x葡萄糖而提供血糖，促進(jìn)糖原 分解，另一方面，PKA 還可使糖原合酶磷酸化而失活，從而減少糖原合成，促使血糖升高類固醇激素作用機(jī)制類固醇激素進(jìn)入核內(nèi)與相應(yīng)受體結(jié)合，受體構(gòu)象發(fā)生變化，導(dǎo)致熱休克蛋白解聚，暴露出受體核定位區(qū)及DNA 結(jié)合區(qū)，使激素受體復(fù)合物向核內(nèi)轉(zhuǎn)移，并結(jié)合靶基因臨近的激素反應(yīng)原件上，進(jìn)而改變基因表達(dá)譜，誘導(dǎo)合成特異蛋白質(zhì)而表現(xiàn)其生理作用 簡述細(xì)胞內(nèi)小分子第二信使共同特點(diǎn)1 在完整細(xì)胞內(nèi)，該分子濃度或分布在細(xì)胞外信號作用下發(fā)生迅速改變 2 該分子類似物可模擬細(xì)胞外信號的作用3 阻斷該分子的變化可阻斷細(xì)胞對外援分子的反應(yīng)4

17、 作為別構(gòu)效應(yīng)劑在細(xì)胞內(nèi)有特定的靶蛋白分子 簡述 Ca 依賴性蛋白激酶途徑的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程激素與受體結(jié)合為激素受體復(fù)合物，激素受體復(fù)合物激活G蛋白，G進(jìn)一步激活 PI-PLC ,水解細(xì)胞膜上的 PIP2,生成IP3, DG。IP3與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和肌漿網(wǎng)上的 受體結(jié)合，促使該迅速釋放，使胞內(nèi)鈣濃度升高，鈣一方面可和DG 磷脂酰絲氨酸一同激活PKC ，發(fā)揮生物學(xué)作用，另一方面和鈣調(diào)蛋白結(jié)合激活Ca-CAM 激酶，使靶蛋白分子發(fā)生磷酸化，從而發(fā)揮生物學(xué)作用。 受體配體結(jié)合特點(diǎn)1 高度專一性，受體選擇性與特定配體結(jié)合，這種選擇性由分子空間構(gòu)想決定，這種識別與結(jié)合的特異性保證了調(diào)控精確性2 高度親和力，體內(nèi)化學(xué)

18、信號存在濃度非常低，受體與信號分子高親和力保證了很低濃度信號分子也可以起充分調(diào)控作用3 可飽和性，無論細(xì)胞內(nèi)外表面受體數(shù)目都是有限的，當(dāng)受體全部被配體占據(jù)時，在提高配體濃度也不會增加細(xì)胞效應(yīng)4 可逆性 受體配體已非共價鍵結(jié)合飛，當(dāng)生物效應(yīng)發(fā)生后，配體即與受體分開5特定的作用模式，受體分布含量具有組織細(xì)胞特異性，并呈現(xiàn)特定作用模式，受體配體結(jié)合后可引起某種特定生理學(xué)效應(yīng) G 蛋白結(jié)構(gòu)特點(diǎn)分類作用機(jī)制G 蛋白是鳥苷酸結(jié)合蛋白的簡稱，居于細(xì)胞膜上是一種傳導(dǎo)體，可將外來的信號裝化為傳向細(xì)胞內(nèi)的信號，有a B 丫三種亞基組成，可分為興奮型抑制型磷脂酶c型傳導(dǎo)素型等，G蛋白有兩種形式，非活化型a 0 Y三

19、聚體與GTP結(jié)合為活化型，G蛋白與蛇形受體胞漿面的第三個環(huán)偶聯(lián)，當(dāng)有信號作用于受體后，促進(jìn)與GTP結(jié)合，G蛋白發(fā)生變構(gòu)，6丫亞基脫落成為活性型G 蛋白后者進(jìn)一步激活其他酶，促使細(xì)胞產(chǎn)生第二信使復(fù)制與轉(zhuǎn)錄過程異同1 都是酶促的核苷酸聚合過程，都以DNA 為模板依賴DNA 聚合酶，聚合過程都是核苷酸之間生成磷酸二酯鍵，都從5-3 方向延伸成新鏈多聚核苷酸，都遵從堿基互補(bǔ)配對原則原核真核生物 RNA聚合酶不同 原核生物RNA-pol有多個亞基構(gòu)成，“20 0 ' w 6成為核心酶，“2B B ' 3 6稱為全酶，真核生物有三種分別轉(zhuǎn)錄45S-rRNA,hnRNA小分子RNA(5s-R

20、NA,tRNA,snRNA) 。原核生物和真核生物的RNA-pol 特異性抑制劑分別是利福平和鵝膏蕈堿，原核RNA 聚合酶直接結(jié)合DNA 模板，真核RNA 聚合酶需轉(zhuǎn)錄因子共同與DNA 模板結(jié)合原核生物非依賴因子轉(zhuǎn)錄終止機(jī)制1 接近終止區(qū)的一段堿基可形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)或發(fā)夾結(jié)構(gòu)，其后多發(fā)現(xiàn)多個連續(xù)U 這種結(jié)構(gòu)終止轉(zhuǎn)錄機(jī)制可理解為1RNA 分子中形成的莖環(huán)結(jié)構(gòu)可改變RNA 聚合酶的構(gòu)象，導(dǎo)致酶和模板結(jié)合方式改變，使酶不再向下游移動，于是轉(zhuǎn)錄停頓2DNA RNA 個自形成自身雙鏈?zhǔn)闺s交體不穩(wěn)定而分離3,3'端一連串U， rU/dA 配對最不穩(wěn)定，易從模板上脫落說明原核生物mRNA 與核蛋白體小亞

21、基結(jié)合的機(jī)制在原核生物各種mRNA 起始 AUG 密碼上游約8-13核苷酸部位，存在4-9 個核苷酸一致序列，富含嘌呤，以AGGA 為核心稱S-D 序列，可與原核小亞基16S-rRNA3' 端富含嘧啶的短序列互補(bǔ)結(jié)合；mRNA 上緊接 S-D 序列后的小段核苷酸序列，可被核蛋白體小亞基蛋白rpS-1 識別結(jié)合.干擾素的作用機(jī)制在雙鏈 RNA 存在時，干擾素能誘導(dǎo)特異蛋白激酶活化，使真核eIF2 磷酸化失活，抑制病毒蛋白合成；干擾素還能與雙鏈RNA 共同活化特殊的2'5'A 合成酶，進(jìn)而活化一種核酸內(nèi)切酶，使病毒的 mRNA 降解，阻斷病毒蛋白合成.蛋白生物合成的體系mR

22、NA 是模板 ;tRNA 是運(yùn)載工具;核蛋白體是場所;20 種氨基酸是合成原料;各種蛋白質(zhì)因子：起始，延長，終止因子;還需氨基酰-tRNA 合成酶，轉(zhuǎn)肽酶等;ATP,GTP 提供能量.mRNA遺傳密碼排列順序翻譯成多肽鏈的氨基酸排列順序，保證準(zhǔn)確翻譯的關(guān)鍵是什么a.氨基酸與tRNA的特異結(jié)合，依靠氨基酰-tRNA合成酶的特異識別作用實(shí)現(xiàn).b.密碼子與反密碼子的特異結(jié)合，依靠互補(bǔ)配對結(jié)合實(shí)現(xiàn)，也有賴于核蛋白體的構(gòu)象正常而實(shí)現(xiàn)正常的裝配功能.真核生物與原核生物翻譯的起始有何不同真核生物，核蛋白體是80S,起始因子種類多，起始 tRNA的Met 不需要甲酰化，帽子結(jié)合蛋白促使mRNA 與核蛋白體小亞

23、基結(jié)合，起始tRNA 先與核蛋白體小亞基結(jié)合，然后再結(jié)合mRNA.簡述 mRNA 編輯 多種生物基因轉(zhuǎn)錄后存在一種對mRNA 外顯子加工過程，可通過特定堿基的插入，缺失或置換，導(dǎo)致mRNA 的移碼，錯義突變或提前終止，造成mRNA 與其 DNA 模板序列之間不匹配，使同一 mRNA 前體翻譯出序列、功能不同的蛋白質(zhì)。這種調(diào)節(jié)方式稱為mRNA 編輯 .原核生物合成一條含有100 個氨基酸殘基的肽鏈至少需要消耗多少高能磷酸鍵？請寫出計算過程.活化100*2=200 個 ATP ；起始 1 個 GTP ；延長：進(jìn)位1 個 GTP 轉(zhuǎn)位 1 個 GTP 99 次核蛋白體循環(huán)2*99=198個GTP;終

24、止1個GTP。所以共計 400個GTP。試述擺動配對及其生理意義轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸的tRNA 的反密碼需要通過堿基互補(bǔ)與mRNA 上的遺傳密碼反向配對結(jié)合，但反密碼子與密碼子之間不嚴(yán)格遵守常見的堿基配對規(guī)則。通常按照5端 ->3 端方向，密碼子的第3 位堿基與反密碼子的第1 位堿基配對有一定擺動性,擺動配對可是一個tRNA 辨認(rèn)多個同義密碼子 .并且當(dāng)密碼子的第三位堿基發(fā)生突變時并不影響tRNA 帶入正確的氨基酸.試說明蛋白質(zhì)翻譯后加工修飾有哪些方式a.一級結(jié)構(gòu)的修飾：如去掉N端甲酰蛋氨酸；在膠原蛋白中將脯氨酸或賴氨酸羥化成羥脯氨酸或羥賴氨酸；將胰島素原有的一條肽鏈加工水解成胰島素A B 兩條鏈

25、；b.高級結(jié)構(gòu)的修飾：許多結(jié)合蛋白如糖蛋白.脂蛋白.色蛋白.各種帶輔基或輔酶的蛋白，合成后都需要結(jié)合相應(yīng)的輔基或輔酶才能成為具有特定功能的蛋白質(zhì)。多個亞基聚合行程具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì).c.靶向運(yùn)輸:蛋白質(zhì)合成后,經(jīng)過復(fù)雜的機(jī)制,定向運(yùn)輸?shù)桨l(fā)揮生物學(xué)功能的靶部位.DNA 分子中的遺傳信息如何傳遞到蛋白質(zhì)分子中去以基因 DNA 為模板,轉(zhuǎn)錄生成的mRNA, 兩者堿基嚴(yán)格互補(bǔ) ,即 mRNA 攜帶 DNA 的遺傳信息,mRNA 分子上的堿基排列順序決定了遺傳密碼的排序,也就決定了蛋白質(zhì)多肽鏈中的氨基酸排列順序.蛋白質(zhì)的生物合成，即將mRNA 攜帶的遺傳信息翻譯成氨基酸的排列順序,即蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu).

26、該一級結(jié)構(gòu)又決定蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)與功能.這種功能便是遺傳信息通過轉(zhuǎn)錄.翻譯過程表達(dá)為具有特定功能的蛋白質(zhì)。說明轉(zhuǎn)錄激活是基因表達(dá)調(diào)控中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)基因表達(dá)是一個多級調(diào)控的過程,涉及基因激活、基因結(jié)構(gòu)活化、轉(zhuǎn)錄起始、轉(zhuǎn)錄后加工、蛋白質(zhì)翻譯、翻譯后加工及蛋白降解, 上述任何一個環(huán)節(jié)異常都會影響基因表達(dá)水平,但不管是原核生物還是真核生物,轉(zhuǎn)錄起始是基因表達(dá)的基本調(diào)控點(diǎn),轉(zhuǎn)錄起始是基因表達(dá)的限速步驟,因此轉(zhuǎn)錄激活是基因表達(dá)調(diào)控的基本環(huán)節(jié)簡述阻遏蛋白在原核基因表達(dá)調(diào)節(jié)的作用特異的阻遏蛋白是控制原核啟動序列活性的重要因素, 當(dāng)阻遏蛋白與操縱序列結(jié)合或解聚時,就會發(fā)生特異基因的阻遏或去阻遏,原核基因調(diào)控普遍涉

27、及特異阻遏蛋白參與的開、關(guān)調(diào)節(jié)機(jī)制, 在乳糖操縱子、大腸桿菌SOS 反應(yīng)和沙門菌的相變異過程都有阻遏和去阻遏機(jī)制. 試述真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)真核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)有：基因組結(jié)構(gòu)龐大，在不同物種中染色體數(shù)目也不同為單順反子，即一個編碼基因轉(zhuǎn)錄生成一個mRNA分子，經(jīng)翻譯生成一條多肽鏈有大量的重復(fù)序列基因組成是斷裂基因,即在DNA 分子上,編碼序列被幾段非編碼的序列間隔成若干段,其中的編碼序列稱為外顯子, 非編碼序列稱為內(nèi)含子.簡述增強(qiáng)子的特點(diǎn)增強(qiáng)子的特點(diǎn)有增強(qiáng)相鄰啟動子的轉(zhuǎn)錄與方向無關(guān)位置不固定可位于結(jié)構(gòu)基因的上下游也可遠(yuǎn)距離發(fā)揮作用需與反式作用因子結(jié)合才能起作用具有細(xì)胞類型的特異性.簡述

28、 lac 的調(diào)節(jié)機(jī)制(1)當(dāng)培養(yǎng)基中有葡萄糖沒有乳糖或葡萄糖乳糖共同存在時,葡萄糖通過降低cAMP濃度，阻礙cAMP與CAP結(jié)合，失去了對RNApol轉(zhuǎn)錄活性的刺激作用，從而lac操縱子不表達(dá)，細(xì)菌充分利 用葡萄糖,這是最節(jié)能的方式(2)當(dāng)培養(yǎng)基中沒有葡萄糖而有乳糖存在是,cAMP 濃度高 ,與 CAP 結(jié)合,促進(jìn)RNA 轉(zhuǎn)錄 ,又由于乳糖分解的半乳糖與阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白失去與O 序列結(jié)合的能力,喪失阻遏作用,在既沒有阻遏作用又有 CAP促進(jìn)作用時lac操縱子轉(zhuǎn)錄，細(xì)菌利用乳糖(3)lac操縱子的強(qiáng)誘導(dǎo)作用既需 要乳糖存在又需缺乏葡萄糖.順式作用元件種類及功能順式作用元件包括啟動子：元件

29、是 TATA盒,精確的決定RNA合成的起始位點(diǎn)上游啟動子元件：包括CAAT盒,CACA盒及GC盒等增強(qiáng)子：是遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)，增強(qiáng)啟動子轉(zhuǎn)錄活性的特異 DNA序列沉默子：對基因轉(zhuǎn)錄起抑制作用的負(fù)性調(diào)節(jié)元件反式作用因子的結(jié)構(gòu)和作用特點(diǎn)(1)具有三個功能結(jié)構(gòu)域： DNA識別結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄活性域結(jié)合其他蛋白的結(jié)合域(2)能識別并結(jié)合上游調(diào)控區(qū)中的順式作用元件(3)對基因表達(dá)有正性和負(fù)性調(diào)控作用,即激活和阻遏基因的表達(dá).請簡述基因工程的基本步驟a分離、提純載體和目的基因，并加以鑒定b.用限制性核酸內(nèi)切酶將載體切開以便插入目的基因 c.將載體和目的基因結(jié)合成重組體d.將重組體轉(zhuǎn)化為宿主細(xì)胞e.將含目的基因的細(xì)

30、胞篩出并鑒定f. 克隆基因表達(dá).載體應(yīng)具備哪些基本條件.具有獨(dú)立復(fù)制能力;具備多個限制酶的識別位點(diǎn);具有遺傳表型或篩選標(biāo)志;有足夠的容量以容納外援DNA 片段 ;可導(dǎo)入受體細(xì)胞.常用的工具酶有哪些其主要用途是什么限制性核酸內(nèi)切酶:識別并特異切割DNA 堿基序列;DNA pol 1:催化缺口平移,制備高比度DNA 探針 ;Klenow 片段:合成cDNA 第二條鏈,補(bǔ)齊或標(biāo)記DNA3 端 ;逆轉(zhuǎn)錄酶:催化合成cDNA;DNA 連接酶:催化兩條DNA 鏈之間形成磷酸二酯鍵;末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶:給載體或cDNA 加上互補(bǔ)的同聚尾、加標(biāo)記物;堿性磷酸酶:防止載體自身連接、32p 標(biāo)記5 端 .常用的

31、目的基因的獲取方法有哪些制備基因組文庫、構(gòu)建cDNA 文庫、 PCR 擴(kuò)增目的基因、人工合成DNA 技術(shù)簡述 PCR 的基本反應(yīng)步驟.變性:將反應(yīng)體系加熱到95,使模板DNA 及引物完全變性成為單鏈;退火:將溫度降到最適宜溫度,使引物與模板DNA 退火結(jié)合;延伸 :將溫度升至72,DNA 聚合酶以dNTP 為底物催化 DNA 的合成反應(yīng).何為限制性核酸內(nèi)切酶寫出大多數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶識別DNA 序列的結(jié)構(gòu)特點(diǎn).限制性核酸內(nèi)切酶是由細(xì)菌產(chǎn)生的一類能特異識別雙鏈DNA 中特定堿基序列,并在識別位點(diǎn)切割磷酸二酯鍵的核酸內(nèi)切酶.限制酶的切割和識別位點(diǎn)通常是48 個 bp 長度切具有回文序列的DNA 片

32、段,主要產(chǎn)生5突出或3 突出的粘性末端或平端.當(dāng)一個樣品DNA 被一個特定的限制酶切割后,可以產(chǎn)生一批相同堿基序列的DNA 片段 ,進(jìn)而可以用于基因重組、克隆、核酸分子雜交與序列分析等.什么是質(zhì)粒,為什么質(zhì)?？勺鳛榛蜉d體.質(zhì)粒是獨(dú)立于染色體之外,能自主復(fù)制的共價閉合環(huán)狀雙鏈DNA. 經(jīng)過人工構(gòu)建的載體,不僅能與外援基因相連接,而且質(zhì)粒含有復(fù)制起始點(diǎn),此起始點(diǎn)與順式作用調(diào)控元件構(gòu)成一個復(fù)制子, 能借助宿主細(xì)菌染色體DNA 復(fù)制所用的酶系獨(dú)立的進(jìn)行自我復(fù)制、克隆。核昔酸在體內(nèi)有哪些生理功能？a.作為核酸合成的原料，這是核昔酸最主要的功能 .b.體內(nèi)能量的利用形式,ATP是細(xì)胞的主要能量形式.c.

33、參與代謝和生理調(diào)節(jié).d.組成輔酶.e.活化中間代謝物.簡述 PRPP 在核苷酸合成中的重要作用PRPP 為 5'-磷酸核糖-1'-焦磷酸的縮寫,他是5'-磷酸核糖的活性供體.既參與嘌呤核苷酸的從頭合成和補(bǔ)救合成,也參與嘧啶核苷酸的從頭合成和補(bǔ)救合成.此外還參與某些輔酶（如 NAD+,NADP+） 等的合成.試討論各類核苷酸抗代謝物的作用原理及臨床應(yīng)用（1）嘌呤核苷酸的合成有兩條途徑,一種是利用磷酸核糖 ,甘氨酸,谷氨酰胺,天冬氨酸一碳單位及CO2 等小分子的物質(zhì)為原料,以 ATP 供能,經(jīng)過系列酶促反應(yīng),合成嘌呤核苷酸,稱從頭合成途徑.另一種是利用體內(nèi)游離的嘌呤或嘌呤核

34、苷,經(jīng)過較簡單的反應(yīng)過程,合成嘌呤核苷酸,稱為補(bǔ)救合成途徑,這兩種合成方式在不同組織中的重要性各不相同,例如肝組織進(jìn)行從頭合成途徑,而腦,骨髓等則只能進(jìn)行補(bǔ)救合成.一般情況下,從頭合成途徑是合成的主要途徑.（2）嘧啶核苷酸與嘌呤核苷酸一樣,在體內(nèi)也有兩條途徑合成,一是從頭合成,磷酸核糖,谷氨酰胺,天冬氨酸,一碳單位及CO2 等小分子的物質(zhì)為原料,以 ATP 供能,經(jīng)過系列酶促反應(yīng),合成嘧啶核苷酸.二是補(bǔ)救合成,利用尿嘧啶,胸腺嘧啶及乳清酸與PRPP 生成嘧啶核苷酸:胞嘧啶合成是由UTP 消耗 ATP, 從谷氨酰胺接受氨基而合成CTP. 尿苷激酶,胸苷激酶也是補(bǔ)救合成的酶,以尿苷,胸苷和ATP

35、分別合成尿嘧啶,胸腺嘧啶。簡述參與原核生物DNA 復(fù)制的主要酶和蛋白因子有哪些各有何功能解螺旋酶打開DNA 雙鏈;拓?fù)洚悩?gòu)酶防止 DNA 解鏈過程中的打結(jié)和纏繞;SSB 蛋白穩(wěn)定解開的單鏈DNA, 防止恢復(fù)為雙鏈DNA; 引物酶合成 RNA 引物 ;DNA 聚合酶 III 催化 DNA 鏈的延長;DNA 聚合酶 I 切除引物,填補(bǔ)缺口,即時校讀;DNA 連接酶連接雙鏈DNA 上的單鏈缺口.簡述原核生物DNA 復(fù)制的體系1.雙鏈 DNA 各自作為模板;2.dNTP 作為底物;3.RNA 作為引物;4.ATP 提供能量;5.多種酶（包括依賴DNA 的 DNA 聚合酶,引物酶,拓?fù)洚悩?gòu)酶,解鏈酶,連

36、接酶等）及多種蛋白因子（SSB,DnaA,DnaC 等 ）;6.Mg2+ 等無機(jī)離子.簡述原核生物DNA 切除修復(fù)的過程1UvrA,UvrB 辨認(rèn)并結(jié)合到損傷部位;2UvrC 在 UvrA,UvrB 的協(xié)助下與損傷 DNA 結(jié)合 ,并置換掉UvrA, 發(fā)揮核酸酶活性,切除損傷的單鏈DNA;3 由 DNApol-I 催化填補(bǔ)DNA單鏈缺口,最后由DNA 連接酶連接DNA 單鏈的斷端,完成修復(fù)過程.簡述1958年Messelson和Stahl證明DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn) 細(xì)菌可以利用 NH4C1為碳源合成 DNA,他 們先將大腸桿菌放在含的氯化鏤培養(yǎng)液中培養(yǎng)若干代后，提取DNA進(jìn)行密度梯度離心，再轉(zhuǎn)

37、入普通N14的氯化鏤培養(yǎng)液中培養(yǎng)一代 ，二彳,并分別提取DNA進(jìn)行密度梯度離心分析，因?yàn)楹琋15的DNA比普通N14 的 DNA 密度高,致密帶位于其下方.簡述逆轉(zhuǎn)錄過程1 以單鏈 RNA 為模板 ,tRNA 為引物,以 RNA 指導(dǎo)的 DNA 聚合酶活性催化單鏈DNA 的合成 ;2 核酸酶活性催化單鏈RNA 的水解 ;3 以單鏈 DNA 為模板 ,以 DNA 指導(dǎo) DNA 聚合酶活性催化合成互補(bǔ)的 DNA, 完成雙鏈DNA 的合成。參與甘油磷脂降解的主要磷脂酶有哪些？各有何作用？磷脂酶A1 ：水解甘油磷脂1 位酯鍵，產(chǎn)物為脂酸和溶血磷脂-2。磷脂酶A2:水解甘油磷脂 2位酯鍵，產(chǎn)物為脂酸（多

38、為花生四烯酸）和溶血磷脂-1。磷脂酶B1 :水解溶血磷脂-1的1位酯鍵，產(chǎn)物為脂酸和甘油磷酸含氮堿。磷脂酶 B2 :水解溶血磷脂-2 的2位酯鍵，產(chǎn)物為脂酸（多為花生四烯酸）和甘油磷酸含氮堿。磷脂酶C:水解甘油磷脂 3位磷脂酸鍵，產(chǎn)物為甘油二酯和磷酸含氮堿。磷脂酶 D:水解甘油磷脂磷酸和含氮堿之間的酯鍵，產(chǎn)物為磷脂 酸和含氮堿。1mol甘油徹底氧化分解產(chǎn)生多少mol ATP ? 16.5或18.5mol。甘油-3-磷酸甘油-1mol3-磷酸甘油+NAD+ -磷酸二羥丙酮 +NADH+H+（穿梭）1.5或2.5mol。3-磷酸甘油醛+NAD+-1,3-二磷酸甘油酸 +NADH+H+（穿梭）1.5或2.5mol。1,3-二磷酸甘油酸- 3-磷酸甘油酸（底物水平磷酸化）1mol。PEP-丙 酮酸（底物水平磷酸化）1mol。丙酮酸-乙酰 CoA2.5mol。乙酰CoA-三竣酸循環(huán)10mol。乙酰CoA在脂類代謝中的來源與去路。來源：脂酸B-氧化 酮體分解 甘油氧化分解。去路：合成脂肪酸 合成酮體合成膽固醇。1 mol 硬脂酸徹底氧化分解產(chǎn)生多