滑子菇菌種制作

1、滑子菇菌種呆藏及使用滑子菇菌種生產(chǎn)流程：蔗糖、麥芽糖、濃縮酵母、水配制裝三角瓶滅菌' r母種一液體菌種培養(yǎng)基玉米芯、甜菜根、隸皮、酵母、碳酸鈣、水配制裝瓶滅菌培養(yǎng)液體菌種A 液體菌種B 固體菌種培養(yǎng)基檢驗(yàn)、保藏、使用一、液體菌種制備1. 培養(yǎng)基使用的化學(xué)試劑及所占比例：蔗糖2.0%麥芽糖1.0%濃縮酵母 0.4%2. 液體培養(yǎng)基的制作步驟：（1）按照制作量及原料配比稱取各成分的重量（2）將原料充分在水中溶解（3）將所配溶液的溫度降至室溫（4）用1.0%的鹽酸溶液將培養(yǎng)液的PH值調(diào)整至5860之間（5）將培養(yǎng)液倒入裝有磁棒的三角瓶中，用瓶塞將瓶口塞好，并使用錫箔紙包好瓶 塞及瓶口，塞子與

2、瓶壁之間不能留有空隙（6）放入蒸汽滅菌鍋中殺菌，溫度達(dá)121°C,滅菌20分鐘3. 母種的制備用PDA培養(yǎng)基制作平板PDA,將試管斜面的母種接種到PDA平板的中央，在20°C 溫度的條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)10天左右，形成以接種母種為圓心的菌落4. 種菌接種前，用0.1%的苯扎澳錢洛液將三角瓶擦拭消毒，將瓶口用酒精燈火焰灼燒滅菌, 輕輕打開瓶塞，同時(shí)將接種鉤灼燒滅菌，在無菌操作下，取適量的母種接種到液體培 養(yǎng)基中，（母種取用方法，用滅菌后的接種鉤在菌落邊緣5mm以內(nèi)處，選取菌絲濃密 的起毛菌絲作為菌種，大小2mm*2mm）接種完畢后，蓋上瓶塞，并用錫箔紙包好（注 意松緊度），在瓶上

3、標(biāo)注菌種名稱、培養(yǎng)開始日期。整個(gè)過程中要特別注意防止雜菌 污染，科學(xué)規(guī)范操作。5. 液體菌種培養(yǎng)條件（1）培養(yǎng)條件：溫度19-20°C,適度67%（2）培養(yǎng)過程及溶液的變化A. 接種入母種后12天，有少量白色小碎屑狀物懸浮于溶液中，培養(yǎng)液橙黃透明B. 接種后第3天，產(chǎn)生少許菌絲和菌絲球，溶液橙黃透明C. 接種后第45天，菌絲和菌絲球數(shù)量明顯增多，有大量菌絲或菌絲球懸浮于溶液 中，培養(yǎng)液顯深黃色，略顯不透明6. 轉(zhuǎn)瓶接種培養(yǎng)（1）方法：為了加快并擴(kuò)大培養(yǎng)量，將以上培養(yǎng)完畢的液體菌種進(jìn)行轉(zhuǎn)瓶接種。用 吸管吸取待接種液體培養(yǎng)基體積1%2%的液體菌種，在無菌操作狀態(tài)下，滴 入培養(yǎng)液中，進(jìn)行培

4、養(yǎng)（2）培養(yǎng)34天后，溶液中形成大量的菌絲和菌絲球，顏色深黃色或黃褐色,即可 接種入固體培養(yǎng)基中（顏色變?yōu)槿榭谏珳啙釥顒t為雜菌污染，作廢棄處理）7. 液體菌種的檢測用滅菌后的吸管吸取0.1ml的液體菌種，滴入PDA平板培養(yǎng)基中央，用彎玻璃棒將其 均勻涂布于表面，蓋上培養(yǎng)皿蓋。標(biāo)注菌種接種日期、名稱、檢測日期。放置于2224°C 的條件下培養(yǎng)67天，檢查表面是否有雜菌污染，并測定菌落數(shù)量（菌落數(shù)量在 1000-1500個(gè)/ml之間,PH值在5456之間）二、固體菌種制作1. 固體菌種培養(yǎng)基的配制原材料及比率原料 玉米芯:甜菜根：隸皮：酵母：碳酸鈣比率 83:5:12:0.03:0.00

5、1預(yù)定含水率：66.5%殺菌后PH值：53-5.82. 制作步驟（1）對原材料進(jìn)行確認(rèn)，要求新鮮、干燥、無霉變、無雜質(zhì)，玉米芯粒度在5mm以 下（2）根據(jù)生產(chǎn)量計(jì)算并稱取原材料，玉米芯的粒度要求l7mm5mm占70%, 1.7mm 以下占30%,甜菜根提前加自身重量46倍的水浸泡。隸皮、酵母、碳酸鈣稱取 好，加入玉米芯中，作為干料先一起攪拌均勻（3）次日，將浸泡好的甜菜根，倒入提前拌好的干料中，邊攪拌邊加入甜菜根，同時(shí), 加入提前備好的水，是所有的原料充分混合，攪拌均勻。然后，測定濕料水分含 量，使之在66.00%左右，偏差較大，進(jìn)行調(diào)整。PH值殺菌前在6.5左右，如有 偏差，用生石灰或者磷酸

6、二氫鉀進(jìn)行調(diào)節(jié)，殺菌后在5558之間。（4）將攪拌好的原料進(jìn)行裝袋，每袋充填量在800g左右，將表面用壓料板壓平，直 徑為2cm的打孔棒打兩個(gè)孔至料底部，切勿將袋子底部打破，保持袋壁整潔。最 后將袋口折疊。（5）制作完畢后，進(jìn)行殺菌。3. 種菌（1）殺菌完畢的培養(yǎng)基冷卻后進(jìn)行種菌，使用培養(yǎng)完畢，狀態(tài)良好的液體菌種（2）種菌前做好各項(xiàng)消毒準(zhǔn)備，用0.1%的苯扎澳讓溶液將三角瓶壁擦拭消毒，在無菌 操作狀態(tài)下，液體菌種倒入提前滅菌的燒杯中，用滅菌后的吸管吸取液體菌種， 接種到固體培養(yǎng)基表面（3）種菌完畢后，標(biāo)注菌種名稱及種菌日期。移入菌種培養(yǎng)室培養(yǎng)。4. 固體菌種培養(yǎng)（1）培養(yǎng)條件：溫度19

7、6;C20°C 濕度67% 二氧化碳濃度2000ppm 菌種在培養(yǎng)過程中應(yīng)避免光照（2）培養(yǎng)過程及菌絲生長A.種菌后23天，菌絲開始萌發(fā)B第5天，菌絲大量萌發(fā)，并開始向下生長C. 接種后30天左右，基本長滿全袋D. 培養(yǎng)45天，即可進(jìn)行使用或保藏三. 固體菌種的檢測檢測時(shí)間：培養(yǎng)至35天左右，菌絲長滿全袋后，進(jìn)行活性、雜菌、細(xì)菌的檢測。 樣本數(shù)量：隨機(jī)抽取菌種樣本2袋1. 活性檢測步驟：（1）制作PDA平板培養(yǎng)基3個(gè)。（PDA配制濃度24g/L）（2）在無菌操作狀態(tài)下，用接種鉤選取針尖大小的菌種粒，置于PDA平板培養(yǎng)基的 中心，蓋上培養(yǎng)川L蓋（3）標(biāo)注菌種名稱、制作日期及檢測日期（4）在22°C24°C的環(huán)境條件下，培養(yǎng)7天。測量以菌種為中心，菌絲邊緣為圓周的 圓的直徑大小。直徑4cm,菌種活性良好。2. 雜菌檢測方法（1）PDA平板培養(yǎng)基3個(gè)（2）在無菌操作的狀態(tài)下，用接種勺把固體菌種搔碎，取一勺均勻散布于PDA表面, 蓋上培養(yǎng)皿蓋（3）標(biāo)注菌種名稱、制作日期及檢測日期同上，培養(yǎng)7天后，觀察是否有雜菌產(chǎn)生，以確認(rèn)是否被污染四、菌種的保藏及使用A）保藏條件：溫度165°C1