氫溴酸加蘭他敏貼劑體外釋藥性和經(jīng)皮滲透性能研究

1、氫溴酸加蘭他敏貼劑體外釋藥性和經(jīng)皮滲透性能研究    A faithful friend is hard to find.                        作者：鄧偉杰，張春鳳，趙樹進，羅佳波 One cannot be in two place at once.  【摘要】 

2、0;目的 研究氫溴酸加蘭他敏貼劑的體外釋放和經(jīng)皮滲透性能。方法 采用Franz擴散池裝置和一階導數(shù)光譜法考察氫溴酸加蘭他敏貼劑的藥物釋放性能;采用Franz擴散池裝置和高效液相色譜法考察氫溴酸加蘭他敏貼劑經(jīng)離體豬皮的滲透性能。結果 氫溴酸加蘭他敏貼劑(1.7 mg·cm-2)24 h累積釋放量均超過95%，釋放曲線符合Higuchi方程，釋放速率為(461.9±41.9) g·cm-2·h-1/2(n=4);貼劑24 h累積滲透量為(20.904±3.050) g&

3、#183;cm-2，滲透曲線符合零級動力學方程，透皮速率為(1.270±0.229) g·cm-2·h-1，透皮時滯為(6.4±0.7) h (n=6)。結論 本研究制備的氫溴酸加蘭他敏貼劑具有良好的藥物釋放性能和一定程度的體外經(jīng)皮滲透性能()。 【關鍵詞】  氫溴酸加蘭他敏 貼劑 釋放度 經(jīng)皮滲透Abstract:Objective To study the release and transd

4、ermal permeation of the transdermal patch of galanthamine hydrobromide in vitro. Methods The release of the transdermal patch of galanthamine hydrobromide was determined by Franz&#

5、160;diffusion cells and firstderivative spectrophotometry. The permeation across porcine skin in vitro was studied by Franz diffusion cells and HPLC. Results The cumulative releases

6、0;of the patches in 24 h (1.7 mg/cm2 ) were all larger than 95%, the release curve was fitted with Higuchi equation, and the release rate was (461.9±41.9) 

7、g/(cm2·h1/2)(n=4). The cumulative permeation of the patches in 24 h was (20.904±3.050) g/cm2, and the permeation curve was fitted with zeroorder kinetic equation, the per

8、meation rate and the lag time were (1.270±0.229) g/(cm2·h) and (4±0.7) h (n=6), respectively. Conclusion The transdermal patch of galanthamine hydrobromide had good trans

9、dermal release and permeation profile in vitro.Key words:galanthamine hydrobromide; patches; release rate; transdermal permeationEvery man has his hobby-horse.  氫溴酸加蘭他敏(galanthamine hydrobromide)系一種競爭性和可逆性的乙酰膽堿酯酶抑制劑，臨床上主要用于治療

10、脊髓灰質炎、重癥肌無力、術后腸肌麻痹、青光眼和阿爾茨海默氏病(Alzheimers disease,AD)，也用作解箭毒藥和非去極化肌松藥的拮抗劑。氫溴酸加蘭他敏易透過血腦屏障，其抑制作用時間長且具有選擇性，是目前治療輕、中度AD有效且耐受性良好的藥物。口服加蘭他敏的不良反應為輕度至中度的胃腸道癥狀，如惡心、嘔吐、腹疼和腹瀉，且AD的治療需要長期給藥，因此以加蘭他敏為活性成分的透皮治療系統(tǒng)(Transdermal Therapeutic System,TTS)提供了很好的給藥途徑。徐子猷等1根據(jù)氫溴酸加蘭他敏的理化性質和藥理性質探討其經(jīng)皮給藥的可能性，同時比較pH

11、值和幾種常用促透劑對氫溴酸加蘭他敏透皮吸收的影響。趙維娟等2研究加蘭他敏經(jīng)皮給藥制劑在臨床應用的可行性，將其制成透皮吸收乳劑。氫溴酸加蘭他敏(商品名：Nivalin)的使用方法有離子導入法3：0.25%的氫溴酸加蘭他敏溶液在0.20 mA/cm2的電流下通過離子電泳作用透過皮膚到達皮下組織的神經(jīng)，以治療外周神經(jīng)系統(tǒng)疾病。美國專利US57004804和US59322385公開了以加蘭他敏為活性成分的透皮治療系統(tǒng)，可用于治療酒精依賴和AD，以適應其長期用藥的特點(醫(yī)藥學/藥學論文 )。本文研究的對象為氫溴酸加蘭他敏貼劑6，該貼劑采用親水性高分子材料為基質，克服了親脂性高分子材料作為壓敏膠

12、貯庫層需采用低極性有機溶劑的缺陷，有利于保護環(huán)境和工作人員健康。體外藥物釋放和經(jīng)皮滲透性能研究是經(jīng)皮給藥制劑藥學性能研究的重要內容，因此本文對該貼劑的體外藥物釋放和經(jīng)皮滲透性能進行了研究。Manners make the man.  1 材料與方法1.1 儀器1.2 試藥氫溴酸加蘭他敏對照品：宜昌市夜明珠天然植物制品有限公司，純度99.25%，批號20040901;甲醇、乙腈:色譜純，德國，Merck;其他試劑均為分析純，購自國內供應商;氫溴酸加蘭他敏貼劑:自制，藥物含量為1.7 mg·cm-2;該貼劑由背襯層、藥庫層、壓敏膠層和防粘

13、層構成，其中藥庫層由氫溴酸加蘭他敏、水溶性高分子材料基質和增塑劑組成，壓敏膠層由氫溴酸加蘭他敏、壓敏膠和透皮促滲劑組成。Everybody's business is nobody's business.  1.3 離體皮膚制備將家豬(3月齡，體質量約35 kg，購于廣州市太和家禽批發(fā)市場)背部區(qū)域的毛剔掉，剝離皮膚，去除皮下脂肪、組織和毛細血管。將處理好的皮膚剪成直徑為2.4 cm的圓形小塊并夾于鋁箔中，放入-20 的冰箱中備用。實驗前將皮膚取出，于生理鹽水中解凍，用濾紙吸干后立即使用。1.4 藥物釋放試驗將貼劑剪成

14、圓形，揭去保護層，把貼劑固定在改良Franz擴散池(容積為7 mL，有效接觸面積為3.14 cm2)上、下兩室之間，釋放面朝下。接受室中以蒸餾水為接受液，接受液與貼劑密切接觸。擴散池置于恒溫水浴循環(huán)箱中保持32 ，接受室中置磁力攪拌子，以250 r/min轉速不斷攪拌。在0.5、1、2、4、6、8、10、12、14、24、36 h從接受室取樣2 mL，取樣后補充相等體積相等溫度的空白釋放介質。測定樣品溶液濃度并按公式(1)計算累積釋放量(Qn,g·cm-2)。以累積釋放量Qn對時間(t，h)和時間的平方根(t1/2，h1/2

15、)分別進行零級擬合和Higuchi擬合，擬合方程的斜率為釋放速率J(零級擬合時單位為g·cm-2·h-1;Higuchi擬合時單位為g·cm-2·h-1/2)。You never know what you can do till you.  Qn=CnV+n-1i=1CiVsS(1)式中Cn為第n個時間點的被測液質量濃度(g/mL)，Ci為第i個時間點的被測液質量濃度(g/mL)，Vs為取樣體積(mL)，V為溶出介質體積(mL)，S為有效接觸面積(cm2)。1.5 經(jīng)皮滲透試驗將皮膚置于改良Franz擴散池(容積為7 mL

16、，有效接觸面積為3.14 cm2)杯口上，角質層向上。揭去貼劑防粘保護層后將黏性面粘貼于皮膚角質層上，蓋上供藥池。接受池中以體積分數(shù)30%乙醇為接受液，接受液與皮膚真皮層密切接觸。擴散池置于恒溫水浴循環(huán)箱中保持32 ，接受池中置磁力攪拌子，以250 r/min轉速不斷攪拌。在4、6、8、10、12、14、24、36 h從接受池取樣1 mL，取樣后補充相等體積相等溫度的空白釋放介質。測定透皮接受液濃度并按公式(1)計算累積滲透量(Qn, g·cm-2)。以累積滲透量Qn對時間(t，h)進行線性回歸，所得直線斜率為透皮速率J&#

17、160;(g·cm-2·h-1)，所得直線在時間軸上的截距為透皮時滯tlag(h)。1.6 樣品溶液濃度測定藥物釋放試驗中樣品溶液濃度的測定采用一階導數(shù)光譜法6：以286 nm處波峰和294 nm處波谷間的振幅為指標，用標準曲線法進行定量。經(jīng)皮滲透試驗中樣品溶液濃度的測定采用高效液相色譜法7：以峰面積為指標用外標法進行定量;其中色譜條件為：色譜柱為Alltima Phenyl (250 mm×4.6 mm,5 m)，流動相為乙腈磷酸鹽緩沖液(20 mmol/L磷酸二氫鉀水溶液

18、1 000 mL加三乙胺1.4 mL，用磷酸調pH至3.3)(體積比892)，流速為0.65 mL/min，柱溫為30 ，檢測波長為210 nm，進樣量為20 L。2 結果與討論論文既是探討問題進行科學研究的一種手段，又是描述科研成果進行學術交流的一種工具.  2.1 樣品溶液濃度測定采用一階導數(shù)光譜法測定藥物釋放試驗中樣品溶液濃度的方法簡單、快捷和準確;氫溴酸加蘭他敏濃度在13130 g·mL-1范圍內線性良好(r=0.999 9，n=6);方法平均回收率為97.

19、23%，RSD為1.12%。經(jīng)皮滲透試驗中樣品溶液濃度低(達到 ng·mL-1級)而且樣品含有無法消除干擾吸收的雜質，因此采用高效液相色譜法測定(圖1);結果表明該方法氫溴酸加蘭他敏進樣量在4.524  904.8 ng范圍內與峰面積線性關系良好(Y=0.11X，r2=1.000，n=10)，氫溴酸加蘭他敏在48 h內穩(wěn)定性好(RSD=0.72%，n=5)，方法重復性好(RSD=0.72%，n=5)，精密度高(RSD=0.72%，n=5)。He that runs fastest gets the ring.  2.2

20、60;藥物釋放性能釋放度是衡量經(jīng)皮給藥系統(tǒng)藥物釋放能力的主要參數(shù)。在經(jīng)皮給藥系統(tǒng)中，藥物首先從貯庫中釋放出來，到達皮膚表面，進而經(jīng)皮滲透進入體內發(fā)揮作用。本文采用擴散池法對氫溴酸加蘭他敏透皮貼劑的釋放度進行了測定，結果表明該貼劑(藥物含量為1.7 mg·cm-2)24 h的累積釋放量均超過95%;釋放曲線(圖2)顯示藥物在初始階段快速釋放，而在后階段釋放速率減少但相對穩(wěn)定;擬合結果(表1)表明，氫溴酸加蘭他敏貼劑的釋放曲線符合Higuchi方程，即藥物的釋放量與時間的平方根呈線性關系，釋放速率為(461.9±41.9) g·cm-2&

21、#183;h-1/2(n=4)。A man cannot whistle and drink at he same time.  2.3 經(jīng)皮滲透性能體外經(jīng)皮滲透特征是評價經(jīng)皮給藥系統(tǒng)的重要指標之一。本文采用擴散池法對氫溴酸加蘭他敏透皮貼劑經(jīng)離體豬皮的滲透性能進行考察，結果表明該貼劑(藥物含量為1.7 mg·cm-2)24 h累積滲透量為(20.904±3.050) g·cm-2(圖3)，擬合結果(表2)表明滲透曲線符合零級動力學方程，其透皮速率為(1.270±0.229) g·cm-

22、2·h-1，透皮時滯為(6.4±0.7) h(n=6)。2.4 不同透皮貼劑經(jīng)皮滲透性能比較本研究制備的氫溴酸加蘭他敏貼劑具有良好的藥物釋放性能和一定程度的經(jīng)皮滲透性能，但經(jīng)皮(豬皮)滲透性能欠佳，24 h累積滲透量僅為21 g·cm-2，透皮速率僅為1.3 g·cm-2·h-1，且透皮時滯較長為6 h。為比較不同透皮貼劑經(jīng)皮滲透性能，筆者曾以加蘭他敏游離堿和煙堿為藥物以相同配方分別制得透皮貼劑并進行經(jīng)離體豬皮滲透實驗，結果表明(表3)加蘭他敏游離堿的滲透速率和24 h累積滲

23、透量約為其鹽的1.7倍;加蘭他敏游離堿比其鹽有更好的滲透特性但滲透性能仍然不佳，其滲透速率和24 h累積滲透量僅為煙堿的6%，透皮時滯延長3.5 h。表2 氫溴酸加蘭他敏貼劑的滲透速率和透皮時滯表3 不同透皮貼劑藥物透過豬皮的滲透性能2.5 經(jīng)皮滲透試驗中皮膚的選擇在經(jīng)皮滲透試驗中，一般選用適當?shù)膭游锲つw模型進行透皮研究，如大鼠、小鼠、家兔、蛇、豬、裸鼠等。裸鼠其皮膚無毛，能避免脫毛時對角質層的損傷，其皮膚結構也與人相似，為較理想的選擇，但其價格昂貴。大鼠、小鼠和家兔皮膚常用作實驗材料，但制備離體皮膚時需脫毛，化學脫毛與電動剃刀脫毛效果均不理想。豬皮的滲透性和人皮的滲透性接近，脫毛較容易，且后續(xù)該貼劑藥效學研究(另文報道)采用豬為試驗動物，故本實驗采