老年結(jié)直腸癌患者的腸道菌群檢測(cè)結(jié)果分析

1、現(xiàn)代消化及介入診療 2012年 第 17卷 第 4期 Modern Digestion &Intervention 2012, Vol.17, No.4老年結(jié)直腸癌患者的腸道菌群檢測(cè)結(jié)果分析王新穎 1王中秋 1徐萍 1李丙生 1江美玲 1許岸高 1,2·短篇論著 ·【 摘要 】 目的 探討老年結(jié)直腸癌患者的腸道菌群變化 。 方法 選取 2008年 1月至 2011年 6月老年結(jié)直腸癌患者糞 便標(biāo)本 50例及正常對(duì)照標(biāo)本 50例, 運(yùn)用傳統(tǒng)梯度稀釋法進(jìn) 行平板培養(yǎng)及提取糞便 DNA 后應(yīng)用 SYBR Green 實(shí)時(shí)熒 光定量 PCR 反應(yīng)測(cè)定 3種需氧菌和 4種厭氧

2、菌的數(shù)量以進(jìn) 行菌群分析 。 結(jié)果 患者組糞便中需氧菌與厭氧菌菌群數(shù)與 正常對(duì)照組比較均有明顯改變 。 需氧菌中患者組金黃色葡萄 球菌明顯增加 (P <0.05 。 厭氧菌中患者組雙歧桿菌和乳酸 桿菌均有程度不同的減少 (P <0.05 , 在 70歲以上老年患者 中減少更明顯; 擬桿菌明顯增加 (P <0.01 , 在 70歲以上老 年患者中減少更明顯 。 腸桿菌 、 腸球菌 、 小梭菌數(shù)量無明顯差 別 (P >0.05 。 平板培養(yǎng)法與定量 PCR 法結(jié)果一致, PCR 法 較平板培養(yǎng)法更敏感 。 結(jié)論 老年結(jié)直腸癌患者存在腸道菌 群紊亂, 其糞便中雙歧桿菌及乳酸桿

3、菌數(shù)量較正常對(duì)照明顯 減少, 金黃色葡萄球菌和擬桿菌數(shù)量明顯增多, 隨年齡增加 菌群紊亂程度更嚴(yán)重, 提示老年結(jié)直腸癌的發(fā)生 、 發(fā)展與腸 道菌群有一定關(guān)系, 針對(duì)性的補(bǔ)充益生菌可能是緩解病情的 有效方法 ?！?關(guān)鍵詞 】 老年; 結(jié)直腸癌; 腸道菌群; 平板培養(yǎng); 實(shí)時(shí)熒 光定量 PCR結(jié)直腸癌是常見的惡性腫瘤, 其發(fā)病率居我國惡性腫瘤 第三位, 隨著生活水平的提高 、 生活習(xí)慣的改變, 其發(fā)病率逐 年增加 1。 老年人是結(jié)直腸癌的高發(fā)人群, 隨著年齡增長, 結(jié) 直腸癌發(fā)病的危險(xiǎn)性增加 。 在發(fā)達(dá)國家, 90%以上病例在 50歲以上, 英國發(fā)病高峰年齡為 70歲, 5%10%為 80歲 2,

4、 美 國發(fā)病高峰為 75歲, 40歲以下發(fā)病少于 6%3。 我國結(jié)直腸 癌發(fā)病同樣具有老年化趨向 。 上海中位發(fā)病年齡為 61歲, 廣 州結(jié)腸癌中位發(fā)病年齡為 66歲,直腸癌為 65歲 4。 目前結(jié)直 腸癌的病因尚未完全清楚,感染是否是結(jié)直腸癌的促發(fā)因 素, 目前尚未被證實(shí), 已有研究提出結(jié)腸細(xì)菌產(chǎn)生的過氧化 物可促發(fā)癌癥 5。 但老年結(jié)直腸癌發(fā)病與腸道菌群紊亂是否 存在相關(guān)性目前尚無文獻(xiàn)報(bào)道 。 因此, 研究老年結(jié)直腸癌患 者腸道菌群狀況, 可以為該病在老年人群中的發(fā)病機(jī)理提出 佐證, 并為制定治療和預(yù)后評(píng)估方案提供參考 。 本研究選取 南方醫(yī)院 20082011年確診的老年結(jié)直腸癌患者 5

5、0例作為研究對(duì)象, 旨在探討其腸道菌群的變化情況 。對(duì)象與方法一 、 研究對(duì)象經(jīng)我院結(jié)腸鏡下取材行病理檢查診斷證實(shí)為結(jié)腸癌的 50例老年結(jié)直腸癌患者,按中華老年醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)建議, 取 60歲 以上患者, 其中男 36例, 女 14例, 平均年齡 67歲 (6082歲 , 劃分為:6069歲 、 7079歲 、 80歲以上; 確診時(shí)均為晚 期, 于治療前取樣, 取樣前 4周內(nèi)均未應(yīng)用抗生素或微生態(tài) 制劑 。 相應(yīng)時(shí)間段內(nèi)取正常對(duì)照 50例, 其中男 32例, 女 18例, 平均年齡 61.5歲 (6081歲 , 所有正常對(duì)照者均無消化 道慢性疾病史, 常規(guī)體檢及糞便常規(guī)檢查均未見異常, 留取 糞便標(biāo)

6、本前 4周內(nèi)均未應(yīng)用抗生素或微生態(tài)制劑 。 2組的年 齡及性別構(gòu)成差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P >0.05 。二 、 研究方法采用平板培養(yǎng)法及 SYBR Green 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 法檢測(cè)糞便菌群中 3種需氧菌群 (腸桿菌 、 腸球菌 、 葡萄球 菌 和 4種厭氧菌群 (擬桿菌 、 雙歧桿菌 、 乳酸桿菌 、 小梭菌 的變化 。1. 平板培養(yǎng)法采用日本光崗知足方法,取新鮮糞便標(biāo)本 0.5g 置于含 有 4.5ml 稀釋液 (加有 45粒玻璃珠 小瓶中, 置旋渦混合 器 (300r/min 震蕩 1min ; 另取 7只無菌青霉素小瓶, 每瓶加 稀釋液 1.8ml 。 從首只小瓶中取 0

7、.2ml 混懸液至第二個(gè)小瓶 中震蕩混勻, 依次稀釋, 按稀釋度分別為 10-2、 10-3、 10-8。 稀 釋后的標(biāo)本接種于培養(yǎng)基, 每個(gè)平板 3個(gè)稀釋度 。 需氧菌置 37 溫箱 24h 后后觀察結(jié)果,厭氧菌置 37 厭氧培養(yǎng)箱 72h 后觀察結(jié)果計(jì)數(shù),再轉(zhuǎn)換為 cfu/g糞便 。 菌落計(jì)數(shù)經(jīng)涂片 、 革 蘭染色 、 生化鑒定, 必要時(shí)使用氣相色譜檢測(cè)細(xì)菌代謝產(chǎn)物, 確認(rèn)為該菌 。2. SYBR Green I 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 法 (1反應(yīng)引物的設(shè)計(jì)與合成 腸桿菌參照 Anderson B 等報(bào)道 6, 腸球菌 、 金黃色葡萄 球菌 、 雙歧桿菌 、 乳酸桿菌 、 小梭菌參照 Ma

8、tsuda K 等報(bào)道 7, 擬桿菌根據(jù)其 cfxA 基因系列設(shè)計(jì)引物 。 8對(duì)引物用 Blast 進(jìn) 行在線核實(shí)其特異性后,由上海英駿生物技術(shù)有限公司合 成 。 引物系列見表 1。(2 糞便 DNA 提取及 PCR 反應(yīng)取樣后稱取中段大便, 每份 300mg , 按糞便細(xì)菌基因組 DNA 提取試劑盒(購自北京天根生化科技有限公司 說明提 取糞便細(xì)菌 DNA , -20 保存?zhèn)溆?。提取的 DNA 分別進(jìn)行 7作者單位:1510515南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院消化內(nèi)科;2516003惠州市醫(yī)學(xué)研究所通訊作者:許岸高, E-mail :mrangao基金項(xiàng)目:惠州市科技計(jì)劃項(xiàng)目 (NO :2010Y0

9、61226-現(xiàn)代消化及介入診療 2012年 第 17卷 第 4期 Modern Digestion &Intervention 2012, Vol.17, No.4表 1細(xì)菌的 PCR 擴(kuò)增引物系列種細(xì)菌的 SYBR Green I 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 反應(yīng), 反應(yīng)體系:Real Master Mix :9l , 上 、 下游引物各 1l 、 模板 DNA 2l 、 DEPC 水 7l 、加石蠟油 8l , 反應(yīng)體積為 20l 。 反應(yīng)條件 :95 預(yù)變性 2min ;95 變性 20s ; 腸桿菌 59 , 腸球菌 、 金 黃色葡萄球菌 60 , 擬桿菌 57 , 雙歧桿菌 57

10、, 乳酸桿菌 58 , 小梭菌 59 退火 30s , 68 延伸 30s , 循環(huán) 40次; 74 后延伸 30s 。每次實(shí)驗(yàn)同時(shí)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品校正和陰性對(duì)照, 反應(yīng) 完畢后根據(jù)溶解曲線分析 PCR 產(chǎn)物的特異性,并由 Light Cycler PCR 儀分析定量結(jié)果 。 結(jié)果以細(xì)菌拷貝數(shù)的常用對(duì)數(shù) /g 糞便表示 。(3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取糞便基因組 DNA 用腸桿菌 、 腸球菌 、 金黃色葡萄球 菌 、 雙歧桿菌 、 乳酸桿菌 、 擬桿菌和小梭菌引物進(jìn)行特異性擴(kuò) 增, 將出現(xiàn)目的條帶的擴(kuò)增產(chǎn)物按 DNA 產(chǎn)物純化試劑盒 (購 自北京艾德萊生物科技有限公司 說明進(jìn)行純化, 純化產(chǎn)物 用核酸蛋白檢測(cè)

11、儀 Biophotmeter 測(cè)定 OD 值及濃度, 換算為 各標(biāo)準(zhǔn)品 1l 的拷貝數(shù) (腸桿菌 5.84×1014、 腸球菌 2.57×1014、金黃色葡萄球菌 3.55×1014、 擬桿菌 3.95×1014、 雙歧桿 菌 3.55×1014、 乳酸桿菌 4.57×1014、 小梭菌 2.02×1014 用于 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線 。 將各純化產(chǎn)物 10倍稀釋后作為標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行 SYBR Green 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 反應(yīng) 。 根據(jù)讀取的熒光數(shù) 據(jù), 由系統(tǒng)軟件自動(dòng)分析循環(huán)閾值 (Cycle thresho ld, Ct ,

12、并 生成標(biāo)準(zhǔn)曲線 。三 、 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果以 ±s 表示, 應(yīng)用 SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析, 采 用 t 檢驗(yàn)進(jìn)行分析,以 P <0.05判定有顯著性差異 。 結(jié)果一 、 平板培養(yǎng)法菌落計(jì)數(shù)結(jié)果患者組糞便中需氧菌與厭氧菌菌群數(shù)與正常對(duì)照組比 較均有明顯改變 (P <0.05 。 需氧菌中患者組金黃色葡萄球 菌明顯增加 (P <0.05 , 厭氧菌中患者組乳酸桿菌和雙歧桿 菌均有程度不同的減少 (P <0.05 ,擬桿菌明顯增加 (P <0.01, 在 70歲以上老年患者中減少更明顯 。 腸桿菌 、 腸球菌 、 小梭菌數(shù)量無明顯差別 (P >

13、0.05 , 見表 2。二 、 細(xì)菌 PCR 定量檢測(cè)結(jié)果細(xì)菌名稱靶基因擴(kuò)增片段長度 (bp 引物序列 (5 -3腸桿菌 16S rRNA 75F:5 -CTC GCT GGC ATT TGC GTA G-3 R:5 -ATC TTT TGC CGT CCG TTT TGC-3 腸球菌 ddl 215F:5 -TTG GCA TTC CAC AAG TAC CA-3 R:5 -AAT TGC TCG GGC ATC ATA AC-3 金黃色葡萄球菌 ddl 186F:5 -TCG GAC GAC TTT GCC TCC CG-3 R:5 -TCG CAC CGG CTC AAT CCG C-3

14、擬桿菌 cfxA 169F:5 -TGA CAG TGA GAG ATT TGC TGC TGC GTT-3 R:5 -TCA GCC GAC ATT TCC TCT TCC GT-3 雙歧桿菌 cpn60200F:5 -TAC TTC GTC ACC AAC GCT GA-3 R:5 -CCA CGG ATG TTG TTC AGG AT-3 乳酸桿菌 16S rRNA 124F:5 -CAC CTT CCT CCG GTT TGT CA-3 R:5 -CGA GCG CAA CCC TTA TTA TCA-3 小梭菌rrnA-16S260F:5 -TGA AAG ATG GCA TCA T

15、TC AAC-3 R:5 -GGT ACC GTC ATT ATC TTC CCC AAA-3表 2糞便標(biāo)本平板培養(yǎng)結(jié)果 (logN ±s菌屬6069歲7079歲80歲以上患者正常對(duì)照患者正常對(duì)照患者正常對(duì)照7.03±0.408.77±0.267.62±0.3510.24±1.22*7.98±0.489.76±1.3410.06±2.977.83±0.909.44±0.705.25±0.877.41±0.99注:與相應(yīng)年齡段正常對(duì)照組比較, *P <0.05, *P &

16、lt;0.01。227-現(xiàn)代消化及介入診療 2012年 第 17卷 第 4期 Modern Digestion &Intervention 2012, Vol.17, No.45.60±0.175.30±0.294.06±0.704.93±1.014.89±0.125.15±0.67菌屬 6069歲7079歲80歲以上患者組糞便中雙歧桿菌及乳酸桿菌數(shù)量與正常對(duì)照組 比較明顯減少 (P <0.01 , 腸桿菌 、 金黃色葡萄球菌 、 擬桿菌 明顯增加 (P <0.05或 0.01 , 在 70歲以上老年患者中改變更

17、明顯, 腸球菌 、 小梭菌數(shù)量無明顯差別 (P >0.05 。 見表 3。討論結(jié)直腸癌是人類常見的惡性腫瘤, 其發(fā)病率隨著我國人 口老齡化有增高趨勢(shì) 8。 腸道中細(xì)菌的組成 、 數(shù)量及活性在維 持人體健康中起重要作用 9。 正常情況下腸道內(nèi)含有大量細(xì)菌, 其中厭氧菌占 99%, 需氧菌僅占 1%, 主要成員為雙歧桿 菌 、 擬桿菌 、 乳桿菌 、 梭菌 、 腸桿菌 、 腸球菌 、 葡萄球菌 、 消化球 菌 、 真桿菌 、 韋榮氏球菌 、 鏈球菌及酵母菌等, 被稱為正常菌 群 。 生理情況下,腸道菌群與宿主處于相對(duì)平衡狀態(tài), 參與機(jī) 體對(duì)食物消化和吸收, 能夠增強(qiáng)機(jī)體的免疫力, 對(duì)機(jī)體起到

18、 保護(hù)作用 10; 如果正常菌群失調(diào), 可引起多種疾病發(fā)生, 可能 與衰老和腫瘤的發(fā)生有關(guān) 。 但腸道感染或腸道微生態(tài)失調(diào)是 否是結(jié)直腸癌的促發(fā)因素, 目前尚未被證實(shí), 但已有研究提 出結(jié)腸細(xì)菌產(chǎn)生的過氧化物可促發(fā)癌癥 11,12。 同時(shí)有研究顯 示:結(jié)直腸癌患者腸道菌群出現(xiàn)微生態(tài)失調(diào), 可能與其發(fā)生 、 發(fā)展有關(guān), 主要表現(xiàn)為結(jié)直癌患者糞便中厭氧菌與需氧菌的 比值下降, 通常以雙歧桿菌 /大腸桿菌 (B/E 的比值作為評(píng)估 指標(biāo) 。 雙歧桿菌的減少會(huì)導(dǎo)致機(jī)體抗腫瘤免疫力下降, 使腫 瘤細(xì)胞逃離機(jī)體免疫監(jiān)控的機(jī)會(huì)增大 13。 Tannock 等 14研究也證明類桿菌 、 梭桿菌及梭狀芽胞桿菌在

19、腸道內(nèi)增多有致癌 作用, 這些細(xì)菌通過產(chǎn)生致癌物質(zhì) 、 輔致癌物質(zhì)或前致癌物 質(zhì)而導(dǎo)致癌癥的發(fā)生 。 因此對(duì)腸道細(xì)菌變化的研究, 對(duì)于了 解細(xì)菌在結(jié)直腸癌發(fā)病中的作用, 尋找結(jié)直腸癌最佳治療方 法有重要意義 ?；谝陨峡紤], 本研究主要選取了腸道菌群中 3種需氧 菌群 (腸桿菌 、 腸球菌 、 葡萄球菌 和 4種厭氧菌群 (擬桿菌 、 雙歧桿菌 、 乳酸桿菌 、 小梭菌 , 檢測(cè)老年結(jié)直腸癌患者的腸 道菌群狀況, 結(jié)果顯示老年結(jié)直腸癌患者糞便中雙歧桿菌及 乳酸桿菌數(shù)量明顯減少, 以雙歧桿菌屬減少為甚; 金黃色葡 萄球菌 、 擬桿菌數(shù)量明顯增加, 且隨年齡增加, 變化更加明 顯, 高齡老人減少最

20、嚴(yán)重, 提示老年結(jié)直腸癌患者腸道菌群 出現(xiàn)微生態(tài)失調(diào), 且與年齡具有相關(guān)性 。 我們同時(shí)利用傳統(tǒng) 細(xì)菌培養(yǎng)法和分子生物學(xué)技術(shù) 16SrRNA 法定量檢測(cè)患者糞 便菌群, 二者結(jié)果一致 。 后者能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)雙歧桿菌屬 、 乳酸桿菌屬等難培養(yǎng)的腸道細(xì)菌的定量分析, 具有更省時(shí) 、 省力 、 準(zhǔn) 確及高靈敏度的特點(diǎn), 結(jié)果顯示老年結(jié)直腸癌患者與正常對(duì) 照者間細(xì)菌數(shù)量的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P <0.05 , 并與年齡 相關(guān), 提示腸道菌群的變化與結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展機(jī)理有 一定關(guān)系 。 同時(shí)說明 SYBR Green 熒光定量 PCR 技術(shù)為研 究老年結(jié)直腸癌患者腸道菌群組成 、 動(dòng)態(tài)變化及相關(guān)的

21、研究 提供了一種有效檢測(cè)手段, 為臨床診治提供新的理論依據(jù) 。參考文獻(xiàn)1Siegel R, Naishadham D, Jemal A. Cancer statistics, 2012. CA Can -cer J Clin, 2012,62:10-29.2Ballard-Barbash R, Friedenreich CM, Courneya KS, et al. Physicalactivity, biomarkers, and disease outcomes in cancer survivors:a systematic review.J Natl Cancer Inst, 2012

22、,104:815-840.3Morikawa T, Kuchiba A, Qian ZR, et al. Prognostic significance andmolecular associations of tumor growth pattern in colorectal cancer. Ann Surg Oncol, 2012,19:1944-1953.4曹卡加 , 馬國勝 , 劉奕龍 , 等 . 廣州市 2000-2002年大腸癌的發(fā)病 率分析 . 癌癥 , 2009,28:441.5Wang X, Huycke MM. Extracellular superoxide produ

23、ction by Ente -rococcus faecalis promotes chromosomal instability in mammalian cells. Gastroenterology, 2007,132:551-561.6Anderson B, Rashid MH, Carter C, et al. Enumeration of bacterio -phage particles:Comparative analysis of the traditional plaque assay and real -time QPCR-and nanosight -based ass

24、ays. Bacteriophage, 2011,1:86-93.7Matsuda K, Tsuji H, Asahara T. Establishment of an analytical sys -tem for the human fecal microbiota, based on reverse transcription-quantitative PCR targeting of multicopy rRNA molecules. Appl Environ Microbiol, 2009,75:1961-1969.8劉國偉 , 蔡全才 . 大腸癌篩查現(xiàn)狀及早期診斷進(jìn)展 . 現(xiàn)代腫瘤

25、醫(yī) 學(xué) , 2009,17:770-774.9Festi D, Schiumerini R, Birtolo C, et al. Gut microbiota and itspathophysiology in disease paradigms. Dig Dis, 2011,29:518-524.10Madden JA, Hunter JO. A review of the role of the gut microflora inirritable bowel syndrome and the effects of probioties. Br J Nutr, 2006,88(Suppl1

26、:s67-s72.11Zhu Y. Gut microbiota and probiotics in colon tumorigenesis. Can -cer Lett. 2011,309:119-127.12Stanghellini V.Gut microbiota and related diseases:clinical features.Intern Emerg Med, 2010,5(Suppl1:S57-63.表 3糞便標(biāo)本細(xì)菌定量 PCR 檢測(cè)結(jié)果 (logN ±s注:與相應(yīng)年齡段正常對(duì)照組比較, *P <0.05, *P <0.01。 228-現(xiàn)代消化及

27、介入診療 2012年 第 17卷 第 4期 Modern Digestion &Intervention 2012, Vol.17, No.4肝癌伴動(dòng)靜脈瘺的造影表現(xiàn)黃永東張振岳毛 健皇甫風(fēng)華蔡曉晴·短篇論著 ·作者單位:226200江蘇省啟東市人民醫(yī)院介入科【 摘要 】 目的 熟悉肝癌伴動(dòng)靜脈瘺的造影表現(xiàn),提高動(dòng) 靜脈瘺的識(shí)別能力 。 方法 選取 30例原發(fā)性肝癌病例, 通過 DSA 造影表現(xiàn)來明確是否合并動(dòng)靜脈瘺,并且確定動(dòng)靜脈瘺 的分型 。 結(jié)果 本組 30例原發(fā)性肝癌并 AVS 患者中肝動(dòng)脈 -門靜脈瘺 25例; 肝動(dòng)脈 -肝靜脈瘺 3例; 肝動(dòng)脈同時(shí)合并肝

28、 靜脈及門靜脈瘺 2例 。 結(jié)論 通過肝總動(dòng)脈造影, 于動(dòng)脈期見 到門靜脈或 /和肝靜脈顯影即可明確原發(fā)性肝癌是否伴有動(dòng) 靜脈瘺 (AVS 的存在 ?！?關(guān)鍵詞 】 肝癌; 動(dòng)靜脈瘺; 造影表現(xiàn)啟東是原發(fā)性肝癌的高發(fā)地區(qū) 。 原發(fā)性肝癌的治療方法 首選手術(shù)切除, 對(duì)于不能手術(shù)的中晚期肝癌 、 術(shù)后復(fù)發(fā)的患 者, 目前最有效的方法是介入治療 。 而肝癌伴動(dòng)靜脈瘺的介 入治療是肝癌介入治療的難點(diǎn) 1。 如果不能正確識(shí)別肝癌伴 動(dòng)靜脈瘺, 不僅介入療效差, 而且可能導(dǎo)致嚴(yán)重的并發(fā)癥 。 因 此正確識(shí)別肝癌伴動(dòng)靜脈瘺的造影表現(xiàn)并選擇相應(yīng)的介入 方案才能保證其療效 2。 作者結(jié)合多年的臨床工作經(jīng)驗(yàn), 擬

29、具 體描述肝癌伴動(dòng)靜脈瘺的造影表現(xiàn), 以供參考 。材料與方法一 、 材料本組男性 24例, 女性 6例; 年齡 3275歲, 平均年齡 51歲 。 術(shù)前經(jīng) B 超 、 CT 、 MRI 、 AFP 及部分患者的手術(shù)病理證實(shí) 為原發(fā)性肝癌, 本組病例均符合肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn), 臨床 Child-Pugh 評(píng)分 A-B 級(jí), 無介入治療禁忌證, 所有的造影表現(xiàn)均伴 有門靜脈或 /和肝靜脈瘺 。二 、 方法所用機(jī)器為 Siemens 公司的 AXIOM Artis FA 血管造影 機(jī) 。 高壓注射器使用的是 LF 的 ANGIOMAT 6000。 術(shù)前行碘 過敏試驗(yàn) 。 采用 Seldinger 技術(shù)經(jīng)皮

30、股動(dòng)脈穿刺置管 。 常規(guī)行 腹腔干 、 腸系膜上動(dòng)脈 、 肝總動(dòng)脈造影, 對(duì)比劑為碘海醇 (300mgI/ml。 腹腔干造影總量 8ml , 注射速度 5ml/s, 壓力 300PSI ,觀察血管解剖 ; 腸系膜上動(dòng)脈造影, 總量 15ml , 注射速 度 5ml/s, 壓力 300PSI , 了解有無變異的肝動(dòng)脈 、 間接觀察門 靜脈血流情況; 肝總動(dòng)脈造影, 總量 16ml , 注射速度 4ml/s, 壓力 300PSI , 明確腫瘤染色及判斷有無動(dòng)靜脈瘺 。三 、 診斷判斷原發(fā)性肝癌是否存在動(dòng) -靜脈瘺,筆者認(rèn)為通過肝 總動(dòng)脈造影, 于動(dòng)脈期見到門靜脈或 /和肝靜脈顯影即可明確 動(dòng)靜脈瘺 (AVS 的存在, 本組 30例原發(fā)性肝癌并 A