新會陳皮中總黃酮的提取工藝

1、新會陳皮中總黃酮的提取工藝【摘要】目的優(yōu)化新會陳皮總黃酮提取的工藝條件。方式在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以總黃酮含量為指標(biāo)，采納正交實(shí)驗(yàn)方式考察液固比、乙醇濃度、提取時刻等因素。結(jié)果各因素的阻礙順序是液固比提取溫度提取時刻；最正確提取工藝為：乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%,液固比1：25,提取溫度70,提取時刻3h,提取1次。結(jié)論優(yōu)選取得的工藝穩(wěn)固可行。【關(guān)鍵詞】新會陳皮;總黃酮;正交設(shè)計(jì)OptimizationofextractionprocessoftotalflavonoidsinXinhuidryorangepeelbyorthogonaldesignLINLin,LINZi-xia,HUANGQin

2、g-hua(SectionofAnalyticalChemistry,GuangdongPharmaceuticalUniversity,Guangzhou,Guangdong510006,China)Abstract:ObjectiveTooptimizeextractionprocessconditionfortotalflavonoidsinXinhuidryorangepeel.MethodsOnthebasisofthesingleexperimentalfactor,theoptimizedextractionconditiononthebasisoftotalflavonoids

3、weredeterminedbyorthogonaldesign.ResultsTheorderoffactorswhichaffectedthetotalflavonoids?extractionwas:solventquantity>extractiontemperature>extractionduration;Theoptimumextractionconditionsareextractiononcewith60%ethanol,solventratio1：25at70for3hoursinwaterbath.ConclusionThemethodissimple,con

4、venient,andaccurate.Keywords:XinHuidryorangepeel;totalflavonoids;orthogonaldesign陳皮是蕓香科植物橘CitusreticulataBlanco及其栽培變種的干燥成熟果皮，藥材分為“陳皮”和“廣陳皮”?！皬V陳皮”為茶枝柑CitusreticulataThachi,的干燥成熟果皮，主產(chǎn)于廣東新會，是廣東十大道地藥材之一。據(jù)報導(dǎo)陳皮的有效成份為黃酮類化合物和揮發(fā)油，具有抗衰老、軟化心血管、減輕實(shí)驗(yàn)動物的動脈粥樣硬化等功效1-4。阻礙陳皮總黃酮提取的因素很多，本文選擇乙醇體積分?jǐn)?shù)，提取溫度，提取時刻，液固比和提取次數(shù)進(jìn)行單

5、因素實(shí)驗(yàn)，在此基礎(chǔ)上采納正交實(shí)驗(yàn)，優(yōu)選取得新會陳皮總黃酮提取的最正確工藝。1材料與儀器TU-1810紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠），恒溫水浴鍋，索氏抽提器等。樣品由新會陳皮協(xié)會提供，并由廣東藥學(xué)院中藥鑒定教研室李書淵教授鑒定為茶枝柑CitusReticulataChachi的干燥成熟果皮。樣品粉碎成粗粉，置干燥箱于60°C烘12h以上。于閉光、陰涼處寄存。橙皮苜（購自中國藥品生物制品檢定所，批號），其他試劑為分析純。2方式與結(jié)果陳皮總黃酮的提取稱取約5g陳皮粗粉置250mL燒瓶中，加入石油酸（3060）80mL,60回流脫脂2h；

6、揮干石油醒后，依如實(shí)驗(yàn)要求，依照不同的水提取溫度、提取時刻以不同液固比及提取次數(shù)進(jìn)行提取,抽濾，洗滌濾渣，歸并濾液和洗液，濃縮去適量的乙醇，然后轉(zhuǎn)入100mL量瓶中，定容，搖勻，即為供試品溶液。橙皮苜標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取mg/mL的橙皮背對照品貯備液，周密吸取、一、和mL置25mL量瓶中，加體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇至刻度。在285nm處測定吸收度，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果說明：在Ug/mL范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，回歸方程為A=+,測定方式取必然提取條件下所得的供試品溶液，適當(dāng)稀釋，在285nm處測定樣品的吸光度。依照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算總黃酮的含量。以陳皮總黃酮的得率（）為指標(biāo)，確信最正確提取條件。單因素實(shí)驗(yàn)選

7、取水浴溫度、乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時刻、液固比、提取次數(shù)這5個可能阻礙提取成效的因素做單因素實(shí)驗(yàn)，以確信相關(guān)因素對陳皮提取物中黃酮含量的阻礙，結(jié)果見圖1。A.提取溫度；B.乙醇體積；C.提取時刻；D.液固比；E.提取次數(shù)圖15種因素對陳皮總黃酮得率的阻礙（略）Effectoffivefactorsontheyieldoftotalflavonoids由圖1能夠得出：在70時陳皮總黃酮得率達(dá)到最大，故能夠確信最正確的提取溫度為70;乙醇體積分?jǐn)?shù)大于60%，陳皮總黃酮得率慢慢減少，故能夠確信最正確的乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%;提取時刻從2h后得率增加不大，以5h為最高;液固比在30倍后有顯著減少，以25倍為

8、最高;提取1次后得率增加不大，從節(jié)省本錢和節(jié)省溶劑的角度，提取次數(shù)為1次。正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)選最正確提取條件通過單因素實(shí)驗(yàn)選取阻礙較大的三個因素：提取時刻、提取溫度和液固比，運(yùn)用正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)法，選用三因素三水平來確信陳皮總黃酮提取的最正確條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表13。表1實(shí)驗(yàn)因素水平表（略）Factorsandlevels從表2的直觀分析能夠看出，3個因素對總黃酮提取含量的阻礙順序：液固比、提取溫度、提取時刻。從表3的方差分析能夠看出，液固比和提取溫度對結(jié)果有顯著性阻礙，提取時刻對結(jié)果的阻礙不顯著，從經(jīng)濟(jì)、省時的原那么考慮，提取時刻定為3ho綜合上面的因素，最正確提取工藝：體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇，提取溫

9、度70,液固比1：25,提取時刻3h,提取1次。表2L9(34)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與直觀分析(略)ResultofL9(34)orthogonalexperimentandanalysis表3L9(34)正交實(shí)驗(yàn)方差分析表(略)AXOVAanalysisofL9(34)orthogonalexperiment驗(yàn)證明驗(yàn)按上述優(yōu)化提取條件平行做3份樣品，結(jié)果穩(wěn)固，證明該方案可行。3討論測定陳皮中總黃酮時，文獻(xiàn)大多采納蘆丁為對照品和“NaX02-Al03-NaOH”體系，使得吸收峰向高處移動，以減少干擾5-6o但事實(shí)上陳皮總黃酮大體不含蘆丁，絡(luò)合后蘆丁最大的吸收峰和陳皮總黃酮的吸收峰相差較大。本文用陳皮總黃酮的要緊成份橙皮行為標(biāo)準(zhǔn)品，直接測定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示二者的最大吸收波長很接近。該方式簡單，易操作，技術(shù)成熟，重現(xiàn)性好。陳皮總黃酮要緊為黃酮苗類,用乙醇提取較水提好,得率高,雜質(zhì)少，有利于后續(xù)的分離，溶劑可回收，適于工業(yè)生產(chǎn)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1王姝梅，何春蘭.陳皮提取物清除氧自由基和抗脂質(zhì)過氧化作用J.中國藥科大學(xué)學(xué)報，1998,29(6):462465.2蘇丹，秦德安.陳皮提取液抗氧化及延緩衰老作用研究J.華東師范大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版,1999(1):100102.3李琴山，婁桂予，錢民章，等.橙皮甘與蘆丁體外抗高密度脂蛋白氧化修飾的作用J.中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報,2004,3(2):115120.4