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1、組織胚胎學(xué)教 案章 節(jié): 第一章 緒 論目的要求:掌握組織學(xué)、胚胎學(xué)的定義、研究范圍及在醫(yī)學(xué)教育中的地位;了解組織學(xué)與胚胎學(xué)常用研究方法和技術(shù)。授課內(nèi)容:一、組織學(xué)和胚胎學(xué)的研究?jī)?nèi)容(35分鐘)二、學(xué)習(xí)組織學(xué)與胚胎學(xué)的意義(10分鐘)三、組織胚胎學(xué)常用研究方法和技術(shù)(35 分鐘)四、組織學(xué)和胚胎學(xué)的學(xué)習(xí)方法(10分鐘)重點(diǎn):組織學(xué)、胚胎學(xué)的定義、研究范圍及在醫(yī)學(xué)教育中的地位。難點(diǎn):組織胚胎學(xué)常用研究方法和技術(shù)。授課單位:組織胚胎學(xué)教研室351035MM教學(xué)內(nèi)容第一章 緒論、組織學(xué)和胚胎學(xué)的研究?jī)?nèi)容組織學(xué)(histology)與胚胎學(xué)(embryology)是相互關(guān)聯(lián)的 兩門學(xué)科,我國(guó)醫(yī)學(xué)教育習(xí)
2、慣將它們列為一門基礎(chǔ)課程。組織學(xué)是用顯微鏡技術(shù)研究正常人體的微細(xì)結(jié)構(gòu)及其與功 能關(guān)系的學(xué)科。它可分為細(xì)胞、基本組織和器官系統(tǒng)三部分。胚胎學(xué)是研究人體發(fā)生發(fā)育規(guī)律的學(xué)科,主要研究從受精 卵開始通過細(xì)胞分裂、分化、逐步發(fā)育成新個(gè)體的全過程。在 此基礎(chǔ)上,還要進(jìn)一步研究先天性畸形的形成過程及其原因, 為優(yōu)生優(yōu)育工作提供依據(jù)。人體胚胎學(xué)是研究出生前從受精卵 開始通過細(xì)胞分裂、分化逐步發(fā)育成新個(gè)體的全過程以及形成 畸形的原因。胚胎在母體內(nèi)的發(fā)育是一個(gè)連續(xù)和復(fù)雜的過程,需時(shí)266天(38周)。為了研究和學(xué)習(xí),常將人胚發(fā)育分成二個(gè)時(shí)期:胚期:指第18周的胚胎,包括受精、卵裂、胚層形 成和器官原基的建立,第8
3、周未胚已具人形。胎期:指第9周起至娩出,此期胎兒逐漸長(zhǎng)大,各器官 的結(jié)構(gòu)和機(jī)能逐漸完善。二、學(xué)習(xí)組織學(xué)與胚胎學(xué)的意義組織學(xué)和胚胎學(xué)是醫(yī)學(xué)中重要的基礎(chǔ)課程,它與其它醫(yī)學(xué) 基礎(chǔ)課程(如生理學(xué)、病理學(xué)等)和臨床課程(如內(nèi)科學(xué)、婦 產(chǎn)科學(xué)等)有著密切的聯(lián)系。醫(yī)學(xué)院校的學(xué)生,要通過學(xué)習(xí)組織學(xué)和胚胎學(xué),系統(tǒng)掌握 人體的微細(xì)結(jié)構(gòu)和發(fā)生規(guī)律,對(duì)于進(jìn)一步學(xué)好其它醫(yī)學(xué)課程, 為開展防病治病的臨床實(shí)踐,都具有重要的意義。三、組織胚胎學(xué)常用研究方法和技術(shù)隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,研究組織學(xué)和胚胎學(xué)的技術(shù)也不斷 更新,涉及很多方面。(一)光學(xué)顯微鏡術(shù)光學(xué)顯微鏡(光鏡,LM)是一種既古老又常用的觀測(cè)工具。 最好的光鏡其分辨率約
4、為0.2 pm可將物體放大約1500倍。借 助光鏡能觀察到細(xì)胞組織的微細(xì)結(jié)構(gòu),稱光鏡結(jié)構(gòu)。時(shí)間在應(yīng)用光鏡技術(shù)時(shí),需把組織制成薄片,以便光線透過, 才能看到組織結(jié)構(gòu)。最常用的薄片是石蠟切片,具制備過程大 致如下:取材、固定:將新鮮材料切成小塊,放入固定液中(如 甲醛等)使蛋白質(zhì)等成分迅速凝固,以保持活體狀態(tài)的結(jié)構(gòu)。脫水、透明、包埋:組織塊經(jīng)酒精脫水,二甲苯透明后, 包埋在石蠟中,使柔軟組織變成具有一定硬度的組織蠟塊。教學(xué)內(nèi)容切片、染色:用切片機(jī)將埋有組織的蠟塊切成5-7 pm的薄片,貼于載玻片上,脫蠟后進(jìn)行染色,最后用樹膠加蓋片 封固。組織切片的染色是使無(wú)色的組織結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)顏色,增加對(duì)比 度,便于
5、鏡下分辨。在組織學(xué)中,染色方法很多,但沒有一種 方法能使細(xì)胞全部結(jié)構(gòu)同時(shí)呈現(xiàn)不同顏色。最常用的染色方法 是蘇木精(hematoxylin)伊紅(eosin)染色法(HE染色)。蘇木精將細(xì)胞核染成紫藍(lán)色,伊紅將細(xì)胞質(zhì)染成紅色。蘇木精是具有陽(yáng)離子的堿性染料,可以與具有陰離子基團(tuán) 的組織成分耦合成鹽,凡組織結(jié)構(gòu)對(duì)蘇木精起紫藍(lán)色反應(yīng)的稱 為嗜堿性(basophil)。伊紅是具有陰離子的酸性染料,可以與具有陽(yáng)離子基團(tuán)的 組織成分耦合成鹽,凡組織結(jié)構(gòu)對(duì)伊紅起紅色反應(yīng)的稱為嗜酸 性(acidophil)。H-E染色除石蠟切片外,還有:冰凍切片;涂片;鋪片; 磨片。(二)電子顯微鏡術(shù)時(shí)間目前電鏡的分辨率達(dá)0.
6、2nm ,能將物體放大幾千倍、幾萬(wàn) 倍、甚至100萬(wàn)倍。借助電鏡可觀察到細(xì)胞更微細(xì)的結(jié)構(gòu),稱超微結(jié)構(gòu)(ultrastructure) 或亞微結(jié)構(gòu)。當(dāng)前常用的電鏡有透射電鏡(TEM)和掃描電鏡(SEM)。透射電鏡像掃描電鏡像教學(xué)內(nèi)容(三)組織化學(xué)術(shù)組織化學(xué)(histochemistry )是應(yīng)用物理、化學(xué)反應(yīng)原理, 研究細(xì)胞組織內(nèi)某種化學(xué)物質(zhì)的分布和數(shù)量,從而探討與其有 關(guān)的機(jī)能活動(dòng)??煞秩?。1 . 一般組織化學(xué)是使化學(xué)試劑與組織或細(xì)胞微細(xì)結(jié)構(gòu)的化學(xué)成分發(fā)生反 應(yīng),在局部形成有色沉淀物,在顯微鏡下對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的化 學(xué)成分及酶活性進(jìn)行定性、定位和定量研究的方法。組織化學(xué)技術(shù)2 .免疫細(xì)胞化學(xué)技
7、術(shù)免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry )是應(yīng)用免疫學(xué)原理,通過抗原和特異性標(biāo)記抗體的結(jié)合反應(yīng),顯示細(xì)胞 內(nèi)的抗原或抗體成分。雖然目前的免疫細(xì)胞化學(xué)中常用的染色 法僅35種,但卻可以定位或示蹤細(xì)胞內(nèi)的各種成分,包括各種蛋白質(zhì)、多肽、部分類脂和多糖,以及細(xì)胞膜表面的膜抗原 和受體等。3 .原位雜交技術(shù)原位雜交(in situ hybridization )是一種核酸分子雜交技 術(shù),它是通過檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)mRNA和DNA序列片段,原位研究 細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達(dá)。組織學(xué)應(yīng)用的原位雜 交術(shù)主要是染色體原位雜交和細(xì)胞原位雜交。(四)其它技術(shù)1 .細(xì)胞形態(tài)計(jì)量術(shù)是運(yùn)用數(shù)學(xué)和統(tǒng)
8、計(jì)學(xué)原理對(duì)組織和細(xì)胞進(jìn)行二維和三維 的形態(tài)測(cè)量研究,如細(xì)胞及其微細(xì)結(jié)構(gòu)成分的數(shù)量、體積、表教學(xué) 內(nèi)容面積、周長(zhǎng)等的相對(duì)和絕對(duì)值的測(cè)量。研究物體內(nèi)某種結(jié)構(gòu)的 立體數(shù)值的科學(xué)又稱為體視學(xué)(ereology )。物質(zhì)結(jié)構(gòu)平面測(cè) 量研究有一定意義,但它是不全面的。利用體視學(xué)從二維走向 三維,使形態(tài)定量研究更可靠,更有比較價(jià)值。目前已廣泛應(yīng) 用圖像分析儀進(jìn)行 形態(tài)計(jì)量研究。2 .組織培養(yǎng)技術(shù)組織培養(yǎng)技術(shù)(tissue culture )是將離體細(xì)胞、組織或器 官,放置在模擬機(jī)體生理?xiàng)l件的培養(yǎng)溶液(培養(yǎng)基)中,在無(wú)菌和適當(dāng)?shù)臏囟龋?7C)下,于體外進(jìn)行培養(yǎng),使之生存和生 長(zhǎng)的一種技木方法。3 .流式細(xì)胞術(shù)
9、是近年來(lái)迅速發(fā)展起來(lái)的細(xì)胞分類和定量研究技術(shù),它是 應(yīng)用流式細(xì)胞儀對(duì)單個(gè)細(xì)胞生物化學(xué)和生物物理特性進(jìn)行快 速定量測(cè)定的。該技術(shù)的特點(diǎn)是速度快,精確性高,靈敏度大, 已成為一種重要手段,廣泛用于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、 月中瘤學(xué)等的研究。4 .顯微分光光度測(cè)量術(shù)是利用顯微分光光度計(jì)(細(xì)胞分光光度計(jì))進(jìn)行的。該儀 器可精確測(cè)定細(xì)胞化學(xué)或熒光染色標(biāo)本中單個(gè)細(xì)胞、單個(gè)核及 核仁內(nèi)的核酸、酶和其它物質(zhì)的含量。四、組織學(xué)和胚胎學(xué)的學(xué)習(xí)方法1 .理論和實(shí)際相結(jié)合主要通過顯微鏡觀察組織切片來(lái)學(xué)習(xí)理論。同時(shí)要注意與 臨床實(shí)際的聯(lián)系。2 .結(jié)構(gòu)和功能相結(jié)合形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是行使f功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ),兩者密切相 關(guān)。3 .共性和個(gè)性相結(jié)合執(zhí)行類似功能的器官,常常具有結(jié)構(gòu)上的一些共同點(diǎn),即 共性。而每一器官的功能特性,又反映在其結(jié)構(gòu)上的特殊性, 即個(gè)性。4 .局部和整體相結(jié)合細(xì)胞和器官都是立體的
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