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1、 1 / 4 實驗十五 一、目的和意義 測定土壤中速效磷的含量,是評價土壤對當季作物供應磷素能力的一種手段,對于施肥有著直接的參考價值。由于提取劑的不同,所得結果也不一致。在中性土壤和石灰性土壤,一般采用碳酸氫鈉或碳酸銨來提取。 二、方法原理 中性、石灰性土壤中的速效磷,多以磷酸一鈣和磷酸二鈣的狀態(tài)存在,可用 0.5M碳酸氫鈉提取到溶液中;酸性土壤中的速效磷,多以磷酸鐵和磷酸鋁的狀態(tài)存在,0.5M碳酸氫鈉能同時提取磷酸鐵和磷酸鋁表面的磷,故也可使用酸性土壤中速效磷的提取。然后將待測液用鉬銻抗混合顯色劑在常溫下進行還原,使黃色的銻磷鉬雜多酸還原成為磷鉬蘭,進行比色。 三、測定方法 1.稱取通過2
2、0號篩的風干土樣5克(精確到0.01克)置于250毫升三角瓶中,加100毫升0.5M碳酸氫鈉溶液,再加一小角勺無磷活性炭,塞緊瓶塞,在振蕩器上震蕩30分鐘,立即用干燥漏斗和無磷濾紙過濾,濾液承接于250毫升三角瓶中。 2.吸取濾液10毫升(含磷量高時取2.55毫升,同時應補加0.5M碳酸氫鈉溶液至10毫升)于50毫升容量瓶中,加7.5N硫酸鉬銻抗混合顯色劑5毫升,利用其中多余的硫酸來中和碳酸氫鈉、充分搖勻,等二氧化碳充分排出后加水定容至刻度,再充分搖勻(最后的硫酸濃度為0.65N)。 3. 30分鐘后在光電比色計上用紅色濾光板比色,或用72型分光光度計比色(波長660微米),比色時須同時做空白
3、測定。 4.磷標準曲線繪制: 分別吸取5ppm磷標準溶液 2 / 4 0、1、 2、3、 4、5毫升于50毫升容量瓶中,每一容量瓶即為 0、0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0.5ppm磷,再逐個分別加入0.5M碳酸氫鈉10毫升和7.5N硫酸鉬銻抗混合顯色劑5毫升,然后同待測液一樣進行比色,在半對數(shù)紙上繪制成曲線。四、結果計算 P(毫克/100克土)顯色液ppm顯色液體積分取倍數(shù) 100 樣品重1000 式中: 顯色液ppm從標準曲線上查得磷的ppm數(shù); 顯色液體積50ml; 1000將微克換算成毫克; 100換算成每百克樣品中磷的毫克數(shù); 分取倍數(shù)浸提液總體積100ml/吸取浸提液ml
4、數(shù)。 五、主要儀器 往返式震蕩機;分光光度計或光電比色計。 3 / 4 六、試劑配料 1.0.5M碳酸氫鈉溶液: 稱取化學純碳酸氫鈉42克溶于800毫升水中,以 0.5N氫氧化鈉調(diào)pH至8.5,洗入1000毫升容量瓶中,定容至刻度,貯存于試劑瓶中。 2.無磷活性炭: 為了除去活性炭中的磷,先用0.5M碳酸氫鈉浸泡過夜,然后在平板瓷漏斗上抽氣過濾,再用0.5M碳酸氫鈉溶液洗23次,最后用水洗去碳酸氫鈉并檢查到無磷為止,烘干備用。 3.磷(P)標準液: 準確稱取45烘干過48小時的分析純磷酸二氫鉀0.2197克于小燒杯中,以少量水溶解,將溶液全部洗入1000毫升容量瓶中,用水定容至刻度充分搖勻,此
5、溶液即為含50ppm的磷基準溶液(此溶液可長期保存)。吸50毫升此溶液稀釋至500毫升,即為5ppm的磷標準液(此溶液不能長期保存)。 比色時按標準曲線系列配制。 4. 7.5N硫酸鉬銻貯存液: 取蒸餾水約400毫升,放入1000毫升燒杯中,將燒杯浸入水中,然后緩緩注入分析純濃硫酸208.3毫升,并不斷攪拌,冷卻至室溫。另稱取分析純鉬酸銨20克溶于約60的200毫升蒸餾水中冷卻,然后將硫酸溶液徐徐倒入鉬酸銨溶液中,不斷攪拌,再加入100%酒石酸銻鉀溶液,用蒸餾水稀釋至1000毫升,混勻,貯于棕色試劑瓶中。 5.鉬銻抗混合顯色劑: 于100毫升鉬銻貯存液中,加入1.5克左旋(旋光度+21+22°)抗壞血酸,此試劑有效期24小時,宜用前配制。 附注: 4 / 4 1.活性炭一定要洗至無磷無氯反應,否則不能使用。 2.顯色時7.5N硫酸鉬銻抗混合顯色劑5毫升,除中和10毫升0.5M碳酸氫鈉溶液外,最后酸度為0.65N。 3.室內(nèi)低于20時,顯色后的鉬蘭則有沉淀產(chǎn)生(0.4ppm磷以上時),此時可將其放入4050的烘箱或熱水中保溫20分鐘,稍冷卻30分鐘后比色。 作物對施用磷肥的反應(供參考) 測定結果 土壤速效磷(ppm)含量 磷5ppm(0.5毫克/100克土) 磷510ppm(0.51.0毫克/100克土
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