各論第一章羧酸及其酯類(lèi)藥物的分析

1、1第一章 羧酸及其酯類(lèi)藥物的分析藥物分析學(xué)藥物分析學(xué) 各論各論藥物分析學(xué)質(zhì)量控制藥 典鑒 別純度檢查含量測(cè)定各類(lèi)（個(gè)）藥物各類(lèi)（個(gè)）藥物分析方法分析方法結(jié) 構(gòu) Chemical Structure of Drug（Function Group） 理化性質(zhì)Physical and Chemical Properties具體分析方法Analytical MethodRelationship? The Key2021-12-294本章要求v掌握芳酸及其酯類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和主要性質(zhì)掌握芳酸及其酯類(lèi)藥物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和主要性質(zhì)v掌握鑒別和含量測(cè)定的基本原理和方法（以水掌握鑒別和含量測(cè)定的基本原理和方法（以水

2、楊酸類(lèi)為代表）楊酸類(lèi)為代表）v熟悉阿司匹林等的特殊雜質(zhì)檢查熟悉阿司匹林等的特殊雜質(zhì)檢查v了解脂肪酸及其酯類(lèi)藥物的分析了解脂肪酸及其酯類(lèi)藥物的分析COOH芳酸酸性強(qiáng)度依次酸性強(qiáng)度依次: : 無(wú)機(jī)酸、芳酸、無(wú)機(jī)酸、芳酸、 碳酸、碳酸、 苯酚苯酚 注意（芳酸類(lèi)結(jié)構(gòu)）：注意（芳酸類(lèi)結(jié)構(gòu)）：共同特點(diǎn)：苯環(huán)、羧基共同特點(diǎn)：苯環(huán)、羧基藥理作用：抗炎、止痛、退熱、抗凝血藥理作用：抗炎、止痛、退熱、抗凝血羧基游離、羧基游離、形成鹽或酯形成鹽或酯PKa 3-6pKa1 6.38 9.95典型的非甾體抗炎藥物典型的非甾體抗炎藥物v水楊酸類(lèi)水楊酸類(lèi)v苯甲酸類(lèi)苯甲酸類(lèi)v芳基乙酸類(lèi)芳基乙酸類(lèi)v芳基丙酸類(lèi)芳基丙酸類(lèi) v其他

3、芳酸類(lèi)其他芳酸類(lèi)阿司匹林、阿司匹林、對(duì)氨基水楊酸鈉對(duì)氨基水楊酸鈉甲芬那酸、甲芬那酸、丙磺舒、苯甲酸鈉丙磺舒、苯甲酸鈉雙氯芬酸鈉雙氯芬酸鈉布洛芬布洛芬 普利類(lèi)、他汀類(lèi)、普利類(lèi)、他汀類(lèi)、 氯鋇丁酯氯鋇丁酯OOHORR(水楊酸類(lèi))OHOHO(水楊酸)(Salicylic Acid)OOHOCH3O(阿司匹林)(Aspirin)OOHOOOH(雙水楊酯)(Salsalate)一、典型藥物結(jié)構(gòu)一、典型藥物結(jié)構(gòu)COONaOHNH2sodium aminosalicylate對(duì)氨基水楊酸鈉對(duì)氨基水楊酸鈉水楊酸類(lèi)水楊酸類(lèi)苯甲酸類(lèi)苯甲酸類(lèi)HOOCSNCH3OOCH3丙磺舒(probenecid)COOHNHCH

4、3CH3甲芬那酸 (mefenamic acid)苯甲酸（pKa4.20）COOHNNaOOClClH雙氯芬酸鈉Diclofenac Sodium芳基烷酸類(lèi)芳基烷酸類(lèi)布洛芬布洛芬 ibuprofenOOHCH3CH3H3C氯貝丁酯氯貝丁酯 clofibrateClO CCH3CH3COOC2H5其他芳酸類(lèi)其他芳酸類(lèi)2021-12-2911v 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)l苯環(huán)苯環(huán) (phenyl ring) l羧基羧基 (carboxyl)l鄰位鄰位-酚羥基酚羥基 (phenol hydroxyl)l個(gè)別藥物特征取代基個(gè)別藥物特征取代基COOHOCOCH3游離羧基阿司匹林酯鍵苯環(huán)光譜pKa = 3.49H

5、2021-12-2913v 理化性質(zhì)理化性質(zhì)l溶解性溶解性相似相溶的原則相似相溶的原則對(duì)氨基水楊酸鈉對(duì)氨基水楊酸鈉 溶于水溶于水阿司匹林阿司匹林 溶于乙醇溶于乙醇芳酸的酸性強(qiáng)度與分子中芳環(huán)、取代基(吸電子、給電子)、及其連接位置有關(guān)l酸性酸性芳酸具游離羧基，呈酸性芳酸具游離羧基，呈酸性pKa為為36，屬中等強(qiáng)度的酸或弱酸，屬中等強(qiáng)度的酸或弱酸可用于含量測(cè)定可用于含量測(cè)定如酸性大小比較：如酸性大小比較：水楊酸水楊酸 阿司匹林阿司匹林 苯甲酸苯甲酸 COOHOH水楊酸 （pKa2.98）OCOCH3鄰位鄰位-OH-OH，吸電子基團(tuán)，吸電子基團(tuán) 酸性增加酸性增加分子內(nèi)氫鍵，增加其極性分子內(nèi)氫鍵，增加

6、其極性 酸性增加酸性增加pKa 2.953.49 4.2616l水解性水解性芳酸酯可水解，堿性條件下水解完全芳酸酯可水解，堿性條件下水解完全可用于鑒別、特殊雜質(zhì)產(chǎn)生依據(jù)、含量測(cè)定可用于鑒別、特殊雜質(zhì)產(chǎn)生依據(jù)、含量測(cè)定u酸性介質(zhì)酸性介質(zhì): : 水解-酯化平衡，不可能全部水解u堿性介質(zhì)堿性介質(zhì): : 過(guò)量堿(氫氧化鈉和碳酸鈉)中和產(chǎn)生的酸， 可水解完全2021-12-2917u含酚羥基、潛在酚羥基的水楊酸類(lèi) 與三氯化鐵試液反應(yīng)，顯色重氮化反應(yīng)、重氮化-偶合反應(yīng)u含芳伯氨基的對(duì)氨基水楊酸鈉u含硫的丙磺舒 分解生成硫化物l官能團(tuán)反應(yīng)特性官能團(tuán)反應(yīng)特性lUV和和IR特征特征可用于鑒別、含量測(cè)定可用于鑒別

7、、含量測(cè)定可用于鑒別、含量測(cè)定可用于鑒別、含量測(cè)定2021-12-2918醋酸臭氣醋酸臭氣）水楊酸（白色水楊酸（白色醋酸鈉醋酸鈉水楊酸鈉水楊酸鈉阿司匹林阿司匹林硫酸硫酸 CONa32堿性條件：加速水解、完全水解堿性條件：加速水解、完全水解二、鑒別試驗(yàn)二、鑒別試驗(yàn)v 水解反應(yīng)水解反應(yīng)2021-12-2919COOHOCOCH332CONa+ CH3COONaCOONaOHCOOHOH42SOH COOHCH32021-12-2920加水煮沸水解加氫氧化鈉煮沸水解稀鹽酸酸化成弱酸性阿司匹林：對(duì)氨基水楊酸鈉：雙水楊酯：紫色類(lèi)配位化合物v FeCl3反應(yīng)反應(yīng) 具酚羥基或具酚羥基或潛在潛在酚羥基的藥物酚

8、羥基的藥物 OHR類(lèi)似紫色鐵配位化合物類(lèi)似紫色鐵配位化合物-6pH43 FeClOHAru水楊酸及其鹽類(lèi)：水楊酸及其鹽類(lèi)：強(qiáng)酸會(huì)導(dǎo)致分解褪色，堿性會(huì)導(dǎo)致鐵鹽水解產(chǎn)生強(qiáng)酸會(huì)導(dǎo)致分解褪色，堿性會(huì)導(dǎo)致鐵鹽水解產(chǎn)生Fe(OH)3 2021-12-2922水楊酸水楊酸 ChP（2010）鑒別鑒別 （1）取本品的水溶液，加三氯化鐵試取本品的水溶液，加三氯化鐵試液液1 1滴，即顯滴，即顯紫堇色紫堇色例子水楊酸阿司匹林阿司匹林阿司匹林 ChP（2010）鑒別鑒別 （1）取本品約取本品約0.1g，加水，加水10ml，煮沸，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯滴，即顯紫堇色紫堇色2021-12

9、-2923u苯甲酸類(lèi)：苯甲酸類(lèi)：丙磺舒鈉鹽在pH 5.06.0 水溶液中與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成米黃色沉淀COOHO2S(CH3CH2CH2)2NNaOHCOONaO2S(CH3CH2CH2)2NCOOO2S(CH3CH2CH2)2N3FeFeCl3COONaO2S3(CH3CH2CH2)2NpH5.06.0應(yīng)用：應(yīng)用：對(duì)氨基水楊酸鈉、貝諾酯水解產(chǎn)物，對(duì)氨基水楊酸鈉、貝諾酯水解產(chǎn)物，在稀鹽酸中在稀鹽酸中與亞硝酸鈉發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成的重氮鹽再進(jìn)一步偶與亞硝酸鈉發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成的重氮鹽再進(jìn)一步偶合作用得到有色產(chǎn)物合作用得到有色產(chǎn)物具芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物 NH2Rv 重氮化重氮化-偶合

10、偶合反應(yīng)反應(yīng)NRNClNRNOH2021-12-2925HOOCSO2N(CH2CH2CH3)2+ 3 NaOHONa + CO2+ H2O + Na2SO3 + HN(CH2CH2CH3)2 Na2SO3 Na2SO4 O丙磺舒的鑒別：顯硫酸鹽反應(yīng)v 分解產(chǎn)物的分解產(chǎn)物的反應(yīng)反應(yīng)v 紫外光譜法紫外光譜法 最大、最小吸收波長(zhǎng) 最大波長(zhǎng)及其吸收系數(shù)或吸光度 兩特征吸收波長(zhǎng)及其吸光度之比 u 應(yīng)注明所用應(yīng)注明所用溶劑溶劑、藥物的、藥物的濃度濃度等條件等條件u UV鑒別參數(shù)：鑒別參數(shù)：溶劑溶劑 max / min A水楊酸二乙胺水楊酸二乙胺20g/mL乙醇乙醇257nm / 227、297nm丙磺舒

11、丙磺舒20g/mL鹽酸乙醇鹽酸乙醇249nm0.67甲芬那酸甲芬那酸20g/mL鹽酸甲醇鹽酸甲醇279nm350nm 0.69-0.74 0.59-0.60對(duì)氨基水楊酸鈉對(duì)氨基水楊酸鈉NaOH265nm/299nm比值：比值： 1.50-1.56例子廣泛應(yīng)用于該類(lèi)藥物的原料藥廣泛應(yīng)用于該類(lèi)藥物的原料藥中紅外：4000400 cm-1特征區(qū)： 40001300 cm-1 2800 3000 cm-1 CH3 1600 1850 cm-1 C=O 指紋區(qū)：1250400 cm-1v 紅外光譜法紅外光譜法阿司匹林羥基OH3230 cm1羰基c=o 1660 cm1鄰位取代苯環(huán) Ar-H 775cm1

12、苯環(huán) C=C 1610、1570、1480、1460 cm1羧酸酯CO 1310、1230、1188 cm12021-12-2930 阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查 對(duì)氨基水楊酸鈉中間氨基酚等對(duì)氨基水楊酸鈉中間氨基酚等 有關(guān)物質(zhì)的檢查有關(guān)物質(zhì)的檢查甲芬那酸中 2, 3 -二甲基苯胺的檢查三、特殊雜質(zhì)檢查三、特殊雜質(zhì)檢查2021-12-2931阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查 檢查方法： （阿司匹林溶于碳酸鈉，雜質(zhì)不溶） u溶液的澄清度溶液的澄清度 檢查碳酸鈉試液中的不溶物：未反應(yīng)完全的水楊酸脫羧產(chǎn)生的 苯酚乙酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯一定量阿司匹林在碳酸鈉

13、試液中溶解應(yīng)澄清。苯酚發(fā)生副反應(yīng)產(chǎn)生的 無(wú)羧基2021-12-2932Chp(2005) 檢查原理及方法檢查原理及方法： 阿司匹林無(wú)酚羥基無(wú)酚羥基，不能與直接高鐵鹽作用 水楊酸可直接與高鐵鹽反應(yīng)呈色u游離水楊酸游離水楊酸 來(lái)源來(lái)源：生產(chǎn)中乙酰化不完全、貯藏中水解都會(huì)產(chǎn)生檢查原因：檢查原因：有毒；易氧化，形成醌型有色物質(zhì)COOHOHCOOHOCOCH3 4223SOHOCOCH乙?；?075COOHOCOCH3 OH2COOHOH對(duì)照法：對(duì)照法：與一定量水楊酸對(duì)照液生成的色澤比較，控制游離水楊酸的限量與一定量水楊酸對(duì)照液生成的色澤比較，控制游離水楊酸的限量。2021-12-2933u游離水楊酸游

14、離水楊酸 Chp(2010)檢查方法：檢查方法： 流動(dòng)相： 乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70） 固定相： ODS 定量方法：外標(biāo)一點(diǎn)法限量規(guī)定：限量規(guī)定：原料原料 0.1%阿司匹林片阿司匹林片 0.3%阿司匹林腸溶片阿司匹林腸溶片 1.5%阿司匹林栓阿司匹林栓 3.0% HPLC法為什么原料藥和制劑都要進(jìn)行水楊酸的檢查？2021-12-2934u有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì) 檢查方法：檢查方法：HPLC除“游離水楊酸”之外的其他合成副產(chǎn)物包括：對(duì)照液：供試液稀釋200倍固定相： ODS流動(dòng)相: A為乙腈- 四氫呋喃- 冰乙酸-水（20 5 5 70） B為乙腈（ 梯度洗脫） 苯酚 乙酸苯酯水

15、楊酸苯酯 乙酰水楊酸苯酯雙水楊酯 乙酰水楊酰水楊酸水楊酸酐 乙酰水楊酸酐主成分自主成分自身對(duì)照法身對(duì)照法雜質(zhì)峰面雜質(zhì)峰面積和不得積和不得大于對(duì)照大于對(duì)照液主峰面液主峰面積積2021-12-2935對(duì)氨基水楊酸鈉中間氨基酚等有關(guān)物質(zhì)的檢查對(duì)氨基水楊酸鈉中間氨基酚等有關(guān)物質(zhì)的檢查u檢查方法檢查方法：HPLCu有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)：間氨基酚、5- 氨基水楊酸、其他未知雜質(zhì)u來(lái)源來(lái)源：未反應(yīng)完全的間氨基酚原料，貯藏過(guò)程中脫羧產(chǎn)生u檢查原因檢查原因：易氧化成醌型化合物，使藥物變色；有毒間氨基酚：外標(biāo)法定量其它有關(guān)物質(zhì)：主成分自身對(duì)照法，限量檢查固定相：ODS流動(dòng)相：甲醇-10% 四丁基氫氧化鈉溶液 -0.0

16、5 mol/LNa2HPO4-0.05 mol/LNaH2PO4（ 200 19 400 400） 2021-12-2936 酸堿滴定法酸堿滴定法 UV法 HPLC法法直接滴定法直接滴定法水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法非水溶液滴定法四、含量測(cè)定四、含量測(cè)定u直接滴定法直接滴定法u水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法u兩步滴定法兩步滴定法v 酸堿滴定法酸堿滴定法強(qiáng)堿滴定本類(lèi)藥物的羧基 2021-12-2938水楊酸類(lèi)的酚羥基可以發(fā)生水楊酸類(lèi)的酚羥基可以發(fā)生A. 三氯化鐵反應(yīng) B. 水解反應(yīng)C. 酯化反應(yīng)D. 沉淀反應(yīng) E. 重氮化-偶合反應(yīng) 課前回顧課前回顧2021-12-2939水楊酸與三氯化鐵

17、試液生成紫堇色產(chǎn)物水楊酸與三氯化鐵試液生成紫堇色產(chǎn)物的反應(yīng)，要求溶液的的反應(yīng)，要求溶液的pH值是值是A. pH10.0 B. pH2.0C. pH78 D. pH46 E. pH2.00.1 2021-12-2940區(qū)別阿司匹林和丙磺舒，最常用的試液是區(qū)別阿司匹林和丙磺舒，最常用的試液是A. 碘化鉀B. 碘化汞鉀C. 三氯化鐵 D. 硫酸亞鐵 E. 亞鐵氰化鉀 2021-12-2941阿司匹林加碳酸鈉試液加熱后，再加阿司匹林加碳酸鈉試液加熱后，再加稀硫酸酸化，此時(shí)產(chǎn)生的白色沉淀應(yīng)稀硫酸酸化，此時(shí)產(chǎn)生的白色沉淀應(yīng)是是A. 苯酚 B. 乙酰水楊酸C. 水楊酸 D. 醋酸鈉 E. 醋酸苯酯 2021

18、-12-2942 阿司匹林中要求檢查的已知雜質(zhì)為阿司匹林中要求檢查的已知雜質(zhì)為A. 乙酰水楊酸酐B. 乙酰水楊酸水楊酸C. 水楊酸D. 水楊酰水楊酸 E. 以上都不對(duì) 2021-12-2943 阿司匹林中水楊酸的檢查為什么由對(duì)照阿司匹林中水楊酸的檢查為什么由對(duì)照法改為法改為HPLC？A. 除了水楊酸還有有關(guān)物質(zhì)B. 對(duì)照法無(wú)法比較結(jié)果C. 沒(méi)有水楊酸對(duì)照品D. 檢查過(guò)程中阿司匹林可能水解 E. 以上都不對(duì) 2021-12-2944對(duì)氨基水楊酸鈉中的特殊雜質(zhì)是對(duì)氨基水楊酸鈉中的特殊雜質(zhì)是A. 水楊酸B. 間氨基酚C. 氨基酚D. 苯酚 E. 苯胺 酸堿中和，反應(yīng)摩爾比1:1中性乙醇COOHOCO

19、CH3NaOH20以下COONaOCOCH3H2O乙醇作用：溶解乙醇作用：溶解ASA 防止防止ASA在滴定過(guò)程水解在滴定過(guò)程水解中性乙醇：對(duì)指示劑中性乙醇：對(duì)指示劑( (酚酞酚酞) )而言為中性而言為中性u(píng)直接滴定法直接滴定法酯鍵水解，酯鍵水解，干擾測(cè)定干擾測(cè)定阿司匹林阿司匹林 ChP（2010）10.1mol L180.16g mol1 18.02g L18.02mg mlaTCMb注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 用中性乙醇作溶劑用中性乙醇作溶劑 不斷攪拌、不斷攪拌、稍快稍快滴定，以滴定，以防止局部堿度過(guò)大，促使水解防止局部堿度過(guò)大，促使水解 適用范圍：不能用于含水楊酸過(guò)高或制劑分析，只能用適用范圍：不能

20、用于含水楊酸過(guò)高或制劑分析，只能用于合格原料藥的含量測(cè)定于合格原料藥的含量測(cè)定USP（32）COOHOCOCH3+ 2NaOHCOONaOH+CH3COONa 水解： 剩余滴定： 2NaOH（過(guò)量）H2SO4Na2SO42H2O同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)：同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)： 不加供試品不加供試品的空白試劑的空白試劑相同條件相同條件下試驗(yàn)下試驗(yàn)u水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法酸堿中和、酯鍵水解，反應(yīng)摩爾比酸堿中和、酯鍵水解，反應(yīng)摩爾比1:2剩余滴定法為什么進(jìn)行空白試驗(yàn)？剩余滴定法為什么進(jìn)行空白試驗(yàn)？0100%VVW-（）FT百分含量1ml 氫氧化鈉（0. 5mol/l）1ml 硫酸（0. 25mol/l

21、）相當(dāng)消除空白試劑消除空白試劑及及COCO2 2的影響的影響空白消耗的體積與含量計(jì)算有關(guān)空白消耗的體積與含量計(jì)算有關(guān)滴定液吸收CO2轉(zhuǎn)變成Na2CO3由于酚酞為指示劑硫酸回滴時(shí)化學(xué)計(jì)量關(guān)系不同空 白滴 定NaOHH2SO4V0VV2V1剩余滴定法消耗NaOHV1 V0-VNaOHH2SO42021-12-2950案例： 某藥檢所抽取某醫(yī)院藥房阿司匹林片，測(cè)定結(jié)果為94.8%，低于含量限度（95.0%-105.0%），按藥品法規(guī)要求，應(yīng)沒(méi)收作劣藥處理，并進(jìn)行罰款。因?yàn)楹刻幱谶吘?，?duì)療效不會(huì)造成很大影響，醫(yī)院從經(jīng)濟(jì)角度出發(fā)，力爭(zhēng)繼續(xù)使用。雙方為此發(fā)生激烈爭(zhēng)執(zhí)。問(wèn)題： 阿司匹林片可以采用酸堿滴定法

22、嗎？輔料會(huì)不會(huì)干擾測(cè)定？測(cè)定條件？干擾因素？（片劑含酒石酸、水楊酸和醋酸等酸性穩(wěn)定劑）（片劑含酒石酸、水楊酸和醋酸等酸性穩(wěn)定劑） 反應(yīng)原理：反應(yīng)分兩步進(jìn)行 第一步 中和（酸雜質(zhì)） 第二步 水解、剩余滴定u兩步滴定法兩步滴定法 適用對(duì)象：阿司匹林片、腸溶片等制劑COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O第一步 中和酒石酸枸櫞酸水楊酸醋酸+NaOH鈉鹽+H2O不用于含量計(jì)算第二步 水解后剩余滴定 水解： COONaOCOCH3+NaOHCOONaOH+CH3COONa(定量過(guò)量）? 2NaOH（過(guò)量）H2SO4 Na2SO42H2O剩余滴定反應(yīng)摩爾比為1 1 同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)同時(shí)

23、進(jìn)行空白試驗(yàn)片劑含量測(cè)定結(jié)果的計(jì)算 0%100%VVW-（）FT平均片重標(biāo)示量標(biāo)示量原料含量ChP 水楊酸二乙胺乳膏劑、丙磺舒片劑v 紫外分光光度法紫外分光光度法u直接直接UV法法%100標(biāo)示量平均片重WD 100lEA%標(biāo)示量1%1cm2021-12-2956丙磺舒片劑含量測(cè)定：取本品10 片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量，置200 ml 量瓶中，加乙醇150 ml 與鹽酸溶液（9 100）4 ml，置70水浴上加熱30 min，放冷，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5 ml，置100 ml 量瓶中，加鹽酸溶液（9 100）2 ml，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，在249 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按C13H19NO4S 的吸收系數(shù)為338 計(jì)算含量。例子1%1cmAE100100%WD百分含量D=2001005=4000標(biāo)示量平均片重USP 阿司匹林膠囊、栓劑（除去輔料及水楊酸的干擾）樣品填