H7N9禽流感病毒_實驗室檢測

1、整理課件人感染人感染H7N9禽流感實驗室檢測禽流感實驗室檢測整理課件整理課件病例定義病例定義l人感染H7N9禽流感疑似病例與確診病例定義參照人感染H7N9禽流感診療方案（2013年第2版）（衛(wèi)發(fā)明電201317號）。整理課件標本采集、運送標本采集、運送l當醫(yī)務(wù)人員懷疑病人感染H7N9禽流感病毒時，應(yīng)當盡早采集其上、下呼吸道標本（尤其是下呼吸道標本）和發(fā)病7天內(nèi)急性期血清以及與急性期血清采集時間間隔2-4周的血清等。整理課件標本采集、運送標本采集、運送對符合衛(wèi)生部發(fā)布的人感染H7N9禽流感疫情防控方案（第二版） 中規(guī)定的病例定義的病人進行采樣。上呼吸道標本（如咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和

2、鼻洗液） 下呼吸道標本（如氣管吸取物、肺洗液、肺組織標本）整理課件標本采集、運送標本采集、運送血清標本：發(fā)病7天內(nèi)急性期血清以及間隔2-4周的恢復(fù)期血清尸檢標本環(huán)境標本：禽類糞便、籠具涂拭標本和環(huán)境污水等標本整理課件標本采集要求 呼吸道標本：發(fā)病早期采樣，采集的呼吸道標本每份分為3 管，每份不少于1ml。血清標本：每份分為2管，每管不少于。整理課件標本采集、運送標本采集、運送l標本采集、包裝、運送等應(yīng)當嚴格按照可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定（衛(wèi)生部第45號令）等生物安全相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。整理課件標本采集、運送：標本采集、運送：lH7N9禽流感病毒實驗室活動和樣本運輸按照

3、人間傳染的病原微生物名錄中高致病性禽流感病毒進行管理。整理課件實驗室檢測實驗室檢測l有條件開展核酸檢測的醫(yī)療機構(gòu)要對呼吸道標本開展H7N9病毒核酸檢測，進行病例診斷，并指導(dǎo)早期應(yīng)用抗病毒藥物；沒有條件開展核酸檢測的醫(yī)療機構(gòu)應(yīng)當盡快利用快速抗原檢測試劑進行甲型流感病毒抗原檢測，并將甲型流感病毒抗原檢測陽性的標本送當?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室進一步開展H7N9病毒核酸檢測。整理課件實驗室檢測實驗室檢測整理課件流感樣病例強化監(jiān)測流感樣病例強化監(jiān)測l尚未發(fā)生人感染H7N9禽流感病例的地區(qū)，在既往流感樣病例監(jiān)測工作基礎(chǔ)上，要提高監(jiān)測強度。增加標本采集和檢測數(shù)量，南方省份每家流感監(jiān)測哨點醫(yī)院每周采集流感樣病例和

4、人感染H7N9禽流感相關(guān)病例標本20份，送當?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室開展檢測。整理課件整理課件相關(guān)技術(shù)文件相關(guān)技術(shù)文件整理課件人感染人感染H7N9禽流感病毒標本采集及實禽流感病毒標本采集及實驗室檢測策略驗室檢測策略標本采集為進行病例診斷，醫(yī)療機構(gòu)應(yīng)盡早采集病人的相關(guān)臨床樣本。采集的臨床標本包括病人的上呼吸道標本（如咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液）、下呼吸道標本（如氣管吸取物、肺洗液、肺組織標本）和血清標本等。整理課件人感染人感染H7N9禽流感病毒標本采集及實禽流感病毒標本采集及實驗室檢測策略驗室檢測策略l應(yīng)當盡量采集病例發(fā)病早期的呼吸道標本（尤其是下呼吸道標本）和發(fā)病7天內(nèi)急性期血清以

5、及間隔2-4周的恢復(fù)期血清。如病人死亡，應(yīng)當盡可能說服家屬同意尸檢，及時進行尸體解剖，采集組織（如肺組織、氣管、支氣管組織）標本。醫(yī)療機構(gòu)采集的呼吸道標本每份不少于3ml。血清標本每份分為2管，每管不少于0.5ml。整理課件人感染人感染H7N9禽流感病毒標本采集及實禽流感病毒標本采集及實驗室檢測策略驗室檢測策略l對人感染H7N9禽流感確診病例可能暴露的禽類飼養(yǎng)或交易等場所，由疾控機構(gòu)采集禽類糞便、籠具涂拭標本和環(huán)境污水等標本，技術(shù)要求參考職業(yè)暴露人群血清學和環(huán)境高致病性禽流感監(jiān)測方案（2011年版）。（http:/ 小時小時內(nèi)，立即對呼內(nèi)，立即對呼吸道標本開展甲、乙型流感病毒通用引物，吸道標本

6、開展甲、乙型流感病毒通用引物，H5、H7亞型亞型的檢測。的檢測。若當?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室檢測結(jié)果為若當?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室檢測結(jié)果為H5、H7核酸檢測核酸檢測陽性陽性時，應(yīng)當于時，應(yīng)當于12小時小時內(nèi)將其中內(nèi)將其中2管呼吸道相關(guān)原始標本管呼吸道相關(guān)原始標本送至省級疾控中心流感網(wǎng)絡(luò)實驗室。送至省級疾控中心流感網(wǎng)絡(luò)實驗室。若當?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室檢測到若當?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室檢測到甲通陽性，不能分亞型甲通陽性，不能分亞型的標本的標本，要，要12小時小時內(nèi)送省級疾控中心流感網(wǎng)絡(luò)實驗室。內(nèi)送省級疾控中心流感網(wǎng)絡(luò)實驗室。人感染人感染H7N9禽流感病毒標本采集禽流感病毒標本采集及實驗室檢測策略及實驗室檢測

7、策略整理課件l標本分裝：標本分裝： 流感網(wǎng)絡(luò)實驗室收檢的呼吸道標本每份分為流感網(wǎng)絡(luò)實驗室收檢的呼吸道標本每份分為3管，每管，每管應(yīng)不少于管應(yīng)不少于1ml。1管用于檢測，另外管用于檢測，另外2管用于復(fù)核和管用于復(fù)核和病毒分離。病毒分離。標本儲存應(yīng)在標本儲存應(yīng)在-70或以下溫度，避免反或以下溫度，避免反復(fù)凍融。復(fù)凍融。人感染人感染H7N9禽流感病毒標本采集及實禽流感病毒標本采集及實驗室檢測策略驗室檢測策略整理課件H7N9禽禽流感病毒檢測方法：流感病毒檢測方法：整理課件H7N9禽禽流感病毒檢測方法：流感病毒檢測方法：lRealtime PCR檢測方法：引物探針、陽性對照由國家流感中心和四川省疾控中心

8、統(tǒng)一下發(fā) 請認真閱讀引物探針說明。整理課件H7N9流感病毒檢測方法流感病毒檢測方法l將新合成的引物探針在開蓋前短暫離心l用RNase Free Water溶解，管上標記為Xul/100pmol ,引物加上X的2.5倍體積的水，探針加上X的5倍體積的水，變成為使用濃度。l引物/探針未溶解前（干粉狀態(tài)）4保存。 引物/探針溶解之后 -20或 -20以下保存（注意：反復(fù)凍融易導(dǎo)致引物/探針降解，建議分裝保存）。 整理課件人感染人感染H7N9禽流感強化監(jiān)測實施方案禽流感強化監(jiān)測實施方案l適用范圍l本方案適用于各地在已發(fā)生人感染H7N9禽流感確診病例的縣（區(qū)）開展強化監(jiān)測工作。僅發(fā)現(xiàn)動物或環(huán)境H7N9禽

9、流感病毒檢測陽性結(jié)果的地區(qū)可參考此方案，自行決定是否開展強化監(jiān)測工作。整理課件人感染人感染H7N9禽流感強化監(jiān)測實施方案禽流感強化監(jiān)測實施方案l發(fā)生人感染H7N9禽流感確診病例的縣（區(qū)），應(yīng)當從病例確診后次日開始在所有二級及以上醫(yī)療機構(gòu)門急診開展為期2周的流感樣病例（ILI）和住院嚴重急性呼吸道感染（SARI）強化監(jiān)測。整理課件人感染人感染H7N9禽流感強化監(jiān)測實施方案禽流感強化監(jiān)測實施方案.嚴重急性呼吸道感染（SARI）病例（1）5歲以上兒童及成人。新收入院患者具有以下4項臨床表現(xiàn)：急性起??；腋下體溫38；咳嗽或咽痛；氣促（呼吸頻率25次/分鐘）或呼吸困難正在住院治療的患者如出現(xiàn)上述4項臨床表現(xiàn)，也視為嚴重急性呼吸道感染病例。整理課件人感染人感染H7N9禽流感強化監(jiān)測實施方案禽流感強化監(jiān)測實施方案（2）5歲及以下嬰幼兒。新收入院患兒具有以下臨床表現(xiàn)：急性起??；咳嗽或呼吸困難；伴以下癥狀或體征之一：A氣促：呼吸頻率大于 60次/分鐘（2個月的嬰兒）；呼吸頻率大于50次/分鐘（2-11月齡嬰兒）；呼吸頻率大于40 次/分鐘（1-5歲）。B拒食或嗆奶。C嚴重嘔吐。D抽搐。E嗜睡或昏迷。F胸壁凹陷或平靜時喘鳴。正在住院治療的患兒如出現(xiàn)上述臨床表現(xiàn)，也視為嚴重急性呼吸道感染病例。整理課件人感染人感染H7N9禽流感強化監(jiān)