分析化學(xué)紫外可見光分光光度法-ppt課件

1、第十章吸光光度法化學(xué)分析法總結(jié)化學(xué)分析法總結(jié) 酸堿滴定法 配位滴定法 氧化-復(fù)原滴定法 沉淀滴定法 分量分析法化學(xué)分析化學(xué)分析常量組分常量組分(1%), Er 0.1%0.2%根據(jù)化學(xué)反響根據(jù)化學(xué)反響, 運(yùn)用玻璃儀器運(yùn)用玻璃儀器 儀器分析儀器分析微量組分微量組分(Ev (0.051eV) Er (0.0050.05eV)電子能級的躍遷電子能級的躍遷 當(dāng)用可見光或紫外光照射當(dāng)用可見光或紫外光照射分子時，價電子可以躍遷產(chǎn)生分子時，價電子可以躍遷產(chǎn)生吸收光譜，在電子能級變化的吸收光譜，在電子能級變化的同時，不可防止地伴隨分子振同時，不可防止地伴隨分子振動和轉(zhuǎn)動的能級變化。因此他動和轉(zhuǎn)動的能級變化。因

2、此他包含了大量譜線，并由于這些包含了大量譜線，并由于這些譜線的重疊而成為延續(xù)的吸收譜線的重疊而成為延續(xù)的吸收帶。帶。 分子的激發(fā)分子的激發(fā)(Excitation) E = E2 - E1 = h 分子構(gòu)造的復(fù)雜性使其對不同波長光的吸收程度不同； 用不同波長的單色光照射，測吸收光的程度隨光波長的變化 吸收曲線與最大吸收波長 max。 M + h M *基態(tài)基態(tài) 激發(fā)態(tài)激發(fā)態(tài) E1 E E2苯和甲苯在環(huán)己烷中的吸收光譜苯和甲苯在環(huán)己烷中的吸收光譜(Absorption spectra of benzene and toluene in cyclohexane)苯苯(254nm)甲苯甲苯(262nm

3、)A 230 250 270 第二節(jié)第二節(jié) 光吸收根本定律光吸收根本定律ItI0bdxI I-dIs1. 朗伯定律朗伯定律2. 比爾定律比爾定律 A=k2cA=lg(I0/It)=k1b光程光程3。朗伯。朗伯-比爾定律比爾定律0tIT =I=10=10T-kbc-AA = lg (I0/It) = lg(1/T) = k b c1) T透光率透光率A=k b cA 吸光度吸光度b 介質(zhì)厚度介質(zhì)厚度c 濃度濃度K 吸光系數(shù)吸光系數(shù)2吸光系數(shù)吸光系數(shù)a的單位的單位: Lg-1cm-1當(dāng)當(dāng)c的單位用的單位用gL-1表示時，用表示時，用a表示，表示， Aa b c 的單位的單位: Lmol-1cm-1

4、當(dāng)當(dāng)c的單位用的單位用molL-1表示時，用表示時，用表示表示. 摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù) A b c 1%1cmE1%1cmE1%1cmE當(dāng)當(dāng)c的單位用的單位用g(100mL)-1表示時，用表示時，用 表表示，示，A b c， 叫做比消光系數(shù)叫做比消光系數(shù)3吸光度吸光度(A)、透光率、透光率(T)與濃度與濃度(c)的關(guān)系的關(guān)系A(chǔ)Tc= 10-kbcTA=kbc線性關(guān)系線性關(guān)系吸光度與光程的關(guān)系吸光度與光程的關(guān)系 A = A = bc bc 檢測器檢測器b樣品樣品光源光源0.22吸光度吸光度光源光源檢測器檢測器0.00吸光度吸光度光源光源檢測器檢測器0.44吸光度吸光度b樣品樣品b樣品樣品吸光

5、度與濃度的關(guān)系吸光度與濃度的關(guān)系 A = A = bcbc 吸光度吸光度0.00光源光源檢測器檢測器 吸光度吸光度0.22光源光源檢測器檢測器b 吸光度吸光度0.44光源光源檢測器檢測器b4 4摩爾吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù)( () )的討論的討論1吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑條件下的特征吸收物質(zhì)在一定波長和溶劑條件下的特征常數(shù)，可作為定性鑒定的參數(shù)；常數(shù)，可作為定性鑒定的參數(shù)；2不隨濃度不隨濃度c和光程長度和光程長度b的改動而改動。在的改動而改動。在溫度和波長等條件一定時，溫度和波長等條件一定時，僅與吸收物質(zhì)本身僅與吸收物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；的性質(zhì)有關(guān)，與待測物濃度無關(guān)；3同一吸收物質(zhì)

6、在不同波長下的同一吸收物質(zhì)在不同波長下的值是不同的值是不同的。在最大吸收波長。在最大吸收波長max處的摩爾吸光系數(shù)，常處的摩爾吸光系數(shù)，常以以max表示。表示。max闡明了該吸收物質(zhì)最大限制闡明了該吸收物質(zhì)最大限制的吸光才干，也反映了光度法測定該物質(zhì)能夠到的吸光才干，也反映了光度法測定該物質(zhì)能夠到達(dá)的最大靈敏度。達(dá)的最大靈敏度。 4max越大闡明該物質(zhì)的吸光才干越強(qiáng)，用越大闡明該物質(zhì)的吸光才干越強(qiáng)，用光度法測定該物質(zhì)的靈敏度越高。光度法測定該物質(zhì)的靈敏度越高。 105：超高靈敏；：超高靈敏； =(610104 ：高靈敏；：高靈敏； 104*選擇性好，最好只與一種組分顯色選擇性好，最好只與一種組

7、分顯色*顯色劑在測定波優(yōu)點無明顯吸收。顯色劑在測定波優(yōu)點無明顯吸收。*對比度大對比度大, max60 nm .*反響生成的有色化合物組成恒定，穩(wěn)定。反響生成的有色化合物組成恒定，穩(wěn)定。*顯色條件易于控制，重現(xiàn)性好。顯色條件易于控制，重現(xiàn)性好。2.顯色劑顯色劑無機(jī)顯色劑無機(jī)顯色劑: Fe(SCN)2+，TiOH2O22+有機(jī)顯色劑有機(jī)顯色劑:一。顯色反響一。顯色反響1) 生色團(tuán)發(fā)色團(tuán)生色團(tuán)發(fā)色團(tuán) ONN，NO，OC=S,N 共軛雙鍵共軛雙鍵e2) 助色團(tuán)助色團(tuán)注：當(dāng)出現(xiàn)幾個發(fā)色團(tuán)共軛，那么幾個發(fā)色團(tuán)所注：當(dāng)出現(xiàn)幾個發(fā)色團(tuán)共軛，那么幾個發(fā)色團(tuán)所產(chǎn)生的吸收帶將消逝，代之出現(xiàn)新的共軛吸收產(chǎn)生的吸收帶將

8、消逝，代之出現(xiàn)新的共軛吸收帶，其波長將比單個發(fā)色團(tuán)的吸收波長長，強(qiáng)帶，其波長將比單個發(fā)色團(tuán)的吸收波長長，強(qiáng)度也加強(qiáng)度也加強(qiáng)3) 紅移和藍(lán)移紅移和藍(lán)移 由于化合物構(gòu)造變化共軛、引入助色團(tuán)取代基或采用不同溶劑后，吸收峰位置向長波方向的挪動，叫紅移; 吸收峰位置向短波方向挪動，叫藍(lán)移.4) 增色效應(yīng)和減色效應(yīng) 增色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度加強(qiáng)的效應(yīng) 減色效應(yīng)：吸收強(qiáng)度減小的效應(yīng)5) 強(qiáng)帶和弱帶 max105 強(qiáng)帶(Strong band) min103 弱帶(Weak band)有機(jī)顯色劑有機(jī)顯色劑CH3CCCH3 HON NOH NNOHCOOHSO3HOO型：型：NNNOH OHON型：型：PARNH N

9、HNSNS型：型：雙硫腙雙硫腙NN型：型：丁二丁二酮肟酮肟鄰二鄰二氮菲氮菲磺基水楊酸磺基水楊酸二。二。 顯色條件的選擇顯色條件的選擇cRcRcR1. 顯色劑用量顯色劑用量(cM、pH一定一定)Mo(SCN)32+ 淺淺紅紅Mo(SCN)5 橙紅橙紅Mo(SCN)6- 淺紅淺紅Fe(SCN)n3-n2. 顯色反響酸度顯色反響酸度cM、 cR一定一定pH1pH儀器丈量誤差儀器丈量誤差%100lg434. 0%100ln%100%10001. 0TTTTTTAAccETdTr%100ln%100%100ln434. 0lg1lgTTdTAdAcdcETTTbcAr濃度丈量的相對誤差與濃度丈量的相對誤

10、差與T(或或A)的關(guān)系的關(guān)系1086420204060800.70.40.20.1AT%Err0.434lg(0.01)cTEcTTT (36.8)0.434實踐任務(wù)中，應(yīng)控制實踐任務(wù)中，應(yīng)控制T T在在10107070, , A A在在0.150.150 0。8 8之間之間例例1 鄰二氮菲光度法測鐵鄰二氮菲光度法測鐵 ，(Fe)=1.0 mg/L, b = 2cm , A = 0.38 ，計算，計算 和和解：解： cFe=1.0 mg/L=1.010-3/55.85 =1.810-5 mol/L1%1cmE4-1-1-50.38=1.1 10 L molcm2 1.8 10 c =1.0 m

11、g/L=1.010-3 g /1000mL = 1.010-4g/100mLbc1%1cmAE=1%m431c-=0.38/2.0 10=1.9 10E1%1cm53=10=1.1 10 /55.85=o1.9 10r E/M 第五節(jié)第五節(jié) 光度分析法的運(yùn)用光度分析法的運(yùn)用一。單一組分測定一。單一組分測定金屬離子金屬離子: Fe-phen, Ni-丁二酮肟丁二酮肟, Co-鈷試劑鈷試劑2) 磷的測定磷的測定: DNA中含中含P9.2%, RNA中含中含P9.5%, 可得核酸量可得核酸量.H3PO4+12(NH4)2MoO4+21HNO3=(NH4)3PO412MoO3+12NH4NO3+12H

12、2O磷鉬黃磷鉬黃(小小)磷鉬磷鉬(V)藍(lán)藍(lán)(大大)Sn2+多組分的測定多組分的測定 x1, y1, x2, y2x1, y1, x2, y2由由x,yx,y標(biāo)液標(biāo)液 在在 1, 1, 2 2處分別測得處分別測得在1處測組分x, 在2處測組分yb) 在1處測組分x; 在2處測總吸收,扣除x吸收,可求yc) x,y組分不能直接測定組分不能直接測定A1=exl1bcx+ eyl1bcy(在在 1處測得處測得A1) A2 =exl2bcx+ eyl2bcy(在在 2處測處測得得A2)二。示差吸光光度法二。示差吸光光度法 普通分光光度法普通只適于測定微量組分，普通分光光度法普通只適于測定微量組分，當(dāng)待測

13、組分含量較高時，將產(chǎn)生較大的誤差。需當(dāng)待測組分含量較高時，將產(chǎn)生較大的誤差。需采用示差法。即提高入射光強(qiáng)度，并采用濃度稍采用示差法。即提高入射光強(qiáng)度，并采用濃度稍低于待測溶液濃度的規(guī)范溶液作參比溶液。低于待測溶液濃度的規(guī)范溶液作參比溶液。設(shè)：待測溶液濃度為設(shè)：待測溶液濃度為cx，規(guī)范溶液濃度為，規(guī)范溶液濃度為cs(cs cx)。那么：。那么：Ax= b cx， As = b cs=x s =b(cx cs =bc 測得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測溶液與規(guī)測得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測溶液與規(guī)范溶液的吸光度之差范溶液的吸光度之差。由規(guī)范曲線上查得相。由規(guī)范曲線上查得相應(yīng)的應(yīng)的c值，那么待測溶液濃度

14、值，那么待測溶液濃度cx ： cx = cs + c 示差法標(biāo)尺擴(kuò)展原理：示差法標(biāo)尺擴(kuò)展原理： 普通法：普通法： cs的的T=10%；cx的的T=5% 示差法：示差法： cs 做參比，調(diào)做參比，調(diào)T=100% 那么：那么： cx的的T=50% ；標(biāo)尺擴(kuò)展；標(biāo)尺擴(kuò)展10倍倍三。雙波長分光光度法三。雙波長分光光度法 不需空白溶液作參比；但需求兩個單色器獲得兩束單色光(1和2)；以參比波長1處的吸光度A1作為參比，來消除干擾。在分析渾濁或背景吸收較大的復(fù)雜試樣時顯示出很大的優(yōu)越性。靈敏度、選擇性、丈量精細(xì)度等方面都比單波長法有所提高。 雙波長分光光度法雙波長分光光度法A A2 A1 (2 1)b c

15、 兩波優(yōu)點測得的吸光度差值兩波優(yōu)點測得的吸光度差值A(chǔ)與待測組分濃與待測組分濃度度c成正比。成正比。1和和2分別表示待測組分在分別表示待測組分在1和和2處的摩爾吸光系數(shù)。處的摩爾吸光系數(shù)。丈量波長丈量波長2和參比波長和參比波長1的選擇與組合的選擇與組合根本要求：根本要求：在選定的兩個波長在選定的兩個波長11和和22處待測組分的吸光處待測組分的吸光度應(yīng)具有足夠大的差值。度應(yīng)具有足夠大的差值。 選定的波長1和2處干擾組分應(yīng)具有一樣吸光度，即：Ay = A y2 A y1 = 0故：Ax+y = A x=(x2x1)bcx此時：測得的吸光度差A(yù)只與待測組分x的濃度呈線性關(guān)系，而與干擾組分y無關(guān)。假設(shè)x

16、為干擾組分，那么也可用同樣的方法測定y組分。雙波長分光光度法消除干擾雙波長分光光度法消除干擾在2， A2 = Ax2+Ay2在1， A1= Ax1+Ay1 A= A 2 - A 1 = Ax2+Ay2 (Ax1+Ay1) = Ax2 Ax1 = AxAy2 Ay1 Ax =( x2 x1)bcx消除了消除了y的干擾的干擾X被測被測Y干擾干擾211Ay1AX1Ay2AX2A/nm雙波長分光光度法消除渾濁背景干擾雙波長分光光度法消除渾濁背景干擾 1 2AA 1 -A 2 = A Ac例例 牛奶中微量牛奶中微量Fe的測定的測定四。導(dǎo)數(shù)分光光度法四。導(dǎo)數(shù)分光光度法 導(dǎo)數(shù)分光光度法在多組分同時測定、渾濁

17、樣品分析、消除背景干擾、加強(qiáng)光譜的精細(xì)構(gòu)造以及復(fù)雜光譜的辨析等方面，顯示了很大的優(yōu)越性。 利用吸光度(或透光度)對波長的導(dǎo)數(shù)曲線來進(jìn)展分析： 0 e-bc假定入射光強(qiáng)度0 在整個波長范圍內(nèi)堅持恒定： dI 0 /d0那么：dI/d0 bc e -bc d/d 0 bc d/d 導(dǎo)數(shù)分光光度法導(dǎo)數(shù)分光光度法dI/d dI/d 0 bc d/d 0 bc d/d 一階導(dǎo)數(shù)信號與試樣濃度呈一階導(dǎo)數(shù)信號與試樣濃度呈線性關(guān)系；線性關(guān)系；測定靈敏度依賴于摩爾吸光測定靈敏度依賴于摩爾吸光系數(shù)對波長的變化率系數(shù)對波長的變化率d/dd/d。吸收曲線的拐點處。吸收曲線的拐點處d/dd/d最大，故其靈敏度最高。最大

18、，故其靈敏度最高。同理可以導(dǎo)出其二階和三階同理可以導(dǎo)出其二階和三階導(dǎo)數(shù)光譜導(dǎo)數(shù)光譜 導(dǎo)數(shù)分光光度法導(dǎo)數(shù)分光光度法混合物導(dǎo)數(shù)光譜混合物導(dǎo)數(shù)光譜A 圖圖01234A 圖圖中藥降壓片中氫氯噻嗪含量的測定中藥降壓片中氫氯噻嗪含量的測定1.氫氯噻嗪氫氯噻嗪.2.硫酸雙肼肽硫酸雙肼肽嗪嗪3. 鹽酸可樂定鹽酸可樂定4.中藥降壓片中藥降壓片 250 290 330 412312AA 肝中茚滿二酮類抗凝血?dú)⑹髣┑墓滔噍腿「沃熊釢M二酮類抗凝血?dú)⑹髣┑墓滔噍腿》椒ǎ焊蝿驖{用乙腈浸提，浸提液方法：肝勻漿用乙腈浸提，浸提液用用6的的HClO4稀釋，然后用稀釋，然后用GDX100大孔樹脂萃取，用二氯甲大孔樹脂萃取，用二氯

19、甲烷烷5mL洗脫殺鼠劑，洗脫殺鼠劑，40揮干，揮干，剩余物用剩余物用0.1molL-1NaOH4mL溶溶解后，紫外導(dǎo)數(shù)光譜測定。解后，紫外導(dǎo)數(shù)光譜測定。A22ddA 0.0cdabDa.空白肝普通光譜空白肝普通光譜b.2.5 mg/L敵鼠溶液的普通光譜敵鼠溶液的普通光譜c.空白肝二階導(dǎo)數(shù)光譜空白肝二階導(dǎo)數(shù)光譜d.2.5 mg/L敵鼠溶液的二階導(dǎo)數(shù)光譜敵鼠溶液的二階導(dǎo)數(shù)光譜五。一元弱酸離解常數(shù)的測定五。一元弱酸離解常數(shù)的測定HL HLHLHLL=HL+LKccAKK +L+aaa(HL)H (HL)=+H +H KaH+L/HL高酸度下，幾乎全部以高酸度下，幾乎全部以HL存在，可測得存在，可測得

20、AHLHLc(HL)；低酸度下，幾乎全部以低酸度下，幾乎全部以L存在，可測得存在，可測得AL Lc(HL).代入整理：代入整理：AAKAA +HLaL-=H -HLLL HLAAKAAa-p= pH+lg-或配制一系列配制一系列c一樣一樣,pH不同的溶液不同的溶液,測測A(設(shè)設(shè)b=1cm).MO吸收曲線吸收曲線Aa(HL)Ab(L)123456Ab654321Aa350400450500550600 /nmA曲線曲線pHpH1 11.10, 1.381.10, 1.382 22.652.653 33.063.064 43.483.485 53.983.986 65.53,6.805.53,6.

21、80由每份溶液的由每份溶液的一對一對pH、A，可求得一個可求得一個Ka, 取平均值即可取平均值即可.MO離解常數(shù)的測定離解常數(shù)的測定作圖法作圖法LHLappHlgAAKAA HLL2AAA AHL3.32(pKa)123456ApH=pKapHpHA曲曲線線ALLHLlgpHAAAA 曲曲線線0.60.40.20-0.2-0.4-0.63.04.0pHHLLHLlggLlAAAA 3.34六。六。 絡(luò)合物組成的測定絡(luò)合物組成的測定(1)(1)摩爾比法摩爾比法: : 固定固定cM ,cM ,改動改動cR cR 1:13:1c(R)/c(M)A1.0 2.0 3,0 (2)(2)等摩爾延續(xù)變化法等

22、摩爾延續(xù)變化法: :M:R=1:10.50.33cM/ccM/cM:R=1:2MR=MRnn MR(ccc） 常常數(shù)數(shù)表觀構(gòu)成常數(shù)的測定表觀構(gòu)成常數(shù)的測定 (設(shè)設(shè)M、R均無吸收均無吸收)0.5cM/cM:R=1:1A0A00ccc00-=A AA cM + cR= c)2MR(1-=M R 1-=cKccc MmRn型型 ? 七。光度滴定七。光度滴定NaOH滴定滴定 對硝基苯酚對硝基苯酚 pKa=7.15 間硝基苯酚間硝基苯酚 pKa=8.39 pKa =1.24V1V2VNaOH/mL對硝基苯酚對硝基苯酚間硝基苯酚間硝基苯酚酸形酸形均無均無色色. .堿形堿形均黃均黃色色典型的光度滴定曲線典型

23、的光度滴定曲線根據(jù)滴定過程中溶液吸光度變化來確定終點的滴定分析方根據(jù)滴定過程中溶液吸光度變化來確定終點的滴定分析方法。法。Vsp滴定劑與待滴定劑與待測物均吸收測物均吸收Vsp滴定劑吸收滴定劑吸收Vsp被滴物吸收被滴物吸收Vsp產(chǎn)物吸收產(chǎn)物吸收例：例：維生素維生素B12 的水溶液在的水溶液在361nm處的百分處的百分吸光系數(shù)為吸光系數(shù)為207，用，用1cm比色池測得某維比色池測得某維生素生素B12溶液的吸光度是溶液的吸光度是0.414，求該溶，求該溶液的濃度液的濃度解：解：mLgmLgbEACcm/0 .20100/00200. 01207414. 01%1例例1： 精細(xì)稱取精細(xì)稱取B12樣品樣

24、品25.0mg，用水溶液配成，用水溶液配成100ml。精細(xì)汲取。精細(xì)汲取10.00ml，又置，又置100ml容量瓶容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，的吸收池中，于于361nm處測定吸光度為處測定吸光度為0.507，求，求B12的百分的百分含量？百分吸光系數(shù)為含量？百分吸光系數(shù)為207 解：解：mLgmLgCi/1045. 2100/1045. 21207507. 053mLgC/1050. 2100101001050. 252樣%0 .98%1001050. 21045. 2%100%5512樣CCBi例例2：解：解：%)0 .764(591. 010

25、01025000.201%1255367iEAmLmLmLmgcmmlmLHCl求已知測移取稀至樣品稀至吡啶 mLgmLgbEACcmi/1092. 7100/1092. 7764591. 0641%1%0 .99%10010010250100 . 21092. 7%100%26樣CCii習(xí)題習(xí)題1.朗伯朗伯-比耳定律的物理意義是什么比耳定律的物理意義是什么？什么叫吸收曲線？什么叫規(guī)范曲線？什么叫吸收曲線？什么叫規(guī)范曲線？習(xí)題習(xí)題2.摩爾吸光系數(shù)的物理意義是什么摩爾吸光系數(shù)的物理意義是什么？習(xí)題習(xí)題3.為什么目視比色法可采用復(fù)合光為什么目視比色法可采用復(fù)合光日光，而吸光光度法那么必需采用單日光

26、，而吸光光度法那么必需采用單色光？分光光度計是如何獲得單色光的？色光？分光光度計是如何獲得單色光的？習(xí)題習(xí)題4.符合朗伯符合朗伯比爾定律的有色溶液比爾定律的有色溶液，當(dāng)其濃度增大后，當(dāng)其濃度增大后，max、T、A和和有無有無變化？有什么變化？變化？有什么變化？習(xí)題習(xí)題5,6習(xí)題習(xí)題5.同吸收曲線的肩部波長相比，為什么在同吸收曲線的肩部波長相比，為什么在最大吸收波優(yōu)點丈量能在較寬的濃度范圍內(nèi)使規(guī)最大吸收波優(yōu)點丈量能在較寬的濃度范圍內(nèi)使規(guī)范曲線呈線性關(guān)系？范曲線呈線性關(guān)系？習(xí)題習(xí)題6.兩種藍(lán)色溶液，知每種溶液僅含有一種兩種藍(lán)色溶液，知每種溶液僅含有一種吸光物質(zhì)，同樣條件下用吸光物質(zhì)，同樣條件下用1

27、cm比色皿測得如下的比色皿測得如下的吸光度值。問這兩種溶液能否是同一種吸光物質(zhì)吸光度值。問這兩種溶液能否是同一種吸光物質(zhì)？試解釋之。？試解釋之。溶液溶液A770 A82010.6220.41720.3910.240習(xí)題習(xí)題7, 8, 9, 10習(xí)題習(xí)題7.什么是適宜的吸光度讀數(shù)范圍？此什么是適宜的吸光度讀數(shù)范圍？此范圍的大小取決于什么要素？測定時如何范圍的大小取決于什么要素？測定時如何才干獲得合理的吸光度讀數(shù)？才干獲得合理的吸光度讀數(shù)？習(xí)題習(xí)題8.顯色劑的選擇原那么是什么？顯色顯色劑的選擇原那么是什么？顯色條件是指的哪些？如何確定適宜的顯色條條件是指的哪些？如何確定適宜的顯色條件？件？習(xí)題習(xí)題

28、9.分光光度計由哪些部分組成？各部分光光度計由哪些部分組成？各部分有什么作用？分有什么作用？習(xí)題習(xí)題10.某試液用某試液用2cm比色皿丈量時，比色皿丈量時，T=100%。假設(shè)用。假設(shè)用1cm或或3cm比色皿進(jìn)展丈比色皿進(jìn)展丈量，量，T及及A各是多少？答：各是多少？答：77.4%、0.111；46.5%、0.333。習(xí)題習(xí)題11, 12習(xí)題習(xí)題12.以以MnO4-方式丈量合金中的錳。方式丈量合金中的錳。液解液解0.500g合金試樣并將錳全部氧化為合金試樣并將錳全部氧化為MnO4-后，將溶液稀釋至后，將溶液稀釋至500mL，用，用1cm比色皿在比色皿在525nm處測得該溶液的吸光度處測得該溶液的吸

29、光度A=0.400；而；而1.0010-4 molL-1的的KMnO4在一樣條件下測得的在一樣條件下測得的A=0.585。設(shè)。設(shè)KMnO4溶液在此范圍內(nèi)服從光的吸收定律。試求溶液在此范圍內(nèi)服從光的吸收定律。試求合金試樣中合金試樣中Mn的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。答：的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。答：0.376習(xí)題習(xí)題11.含含Cu2+為為0.510mgL-1的溶液，用的溶液，用雙環(huán)己酮草酰二腙顯色后，在雙環(huán)己酮草酰二腙顯色后，在600nm處用處用2cm比色皿測得比色皿測得A=0.300。求透光率。求透光率T、吸、吸光系數(shù)光系數(shù)a和摩爾吸光系數(shù)和摩爾吸光系數(shù)。 答答:79.1%；2.9102 Lg-1cm-1；1.9104Lmo

30、l-1cm-1習(xí)題習(xí)題13.習(xí)題習(xí)題13.兩種無色物質(zhì)兩種無色物質(zhì)X和和Y經(jīng)反響生成一種在經(jīng)反響生成一種在550nm處處=450Lmol-1cm-1的有色配合物的有色配合物XY。該配合物的規(guī)范離解常數(shù)是該配合物的規(guī)范離解常數(shù)是6.0010-4。當(dāng)?shù)润w積。當(dāng)?shù)润w積混合濃度均為混合濃度均為0.00100 molL-1的的X和和Y溶液時，用溶液時，用1cm的比色皿在的比色皿在550nm處測得的處測得的A是多少？是多少？答：答：1.59光吸收定律、吸收曲線、任務(wù)曲線及其運(yùn)光吸收定律、吸收曲線、任務(wù)曲線及其運(yùn)用；提高吸光分析法選擇性和準(zhǔn)確度的主用；提高吸光分析法選擇性和準(zhǔn)確度的主要途徑；吸光分析法的原理

31、和實踐運(yùn)用要途徑；吸光分析法的原理和實踐運(yùn)用 難點：丈量條件的選擇，任務(wù)曲線的繪制難點：丈量條件的選擇，任務(wù)曲線的繪制和運(yùn)用和運(yùn)用 教學(xué)內(nèi)容：、概述：吸光光度法的意教學(xué)內(nèi)容：、概述：吸光光度法的意義和運(yùn)用；比色分析法和分光光度法的特義和運(yùn)用；比色分析法和分光光度法的特點。點。 、吸光光度法的根本原理。、吸光光度法的根本原理。 光的性質(zhì)和物質(zhì)對光光的性質(zhì)和物質(zhì)對光的吸收；的吸收； 溶液顏色和光吸收的關(guān)系溶液顏色和光吸收的關(guān)系, ,吸收曲線；朗伯吸收曲線；朗伯- -比比耳定律耳定律( (吸光度吸光度A A與透光度與透光度T T的關(guān)系的關(guān)系, ,吸光系數(shù)、摩爾吸光系吸光系數(shù)、摩爾吸光系數(shù)、靈敏度及其意義數(shù)、靈敏度及其意義)。 、比色和分光光度法的方法和儀器：光度分析法