幾種藥物對大腸桿菌的治療效果e

1、幾種藥物對大腸桿菌的敏感性測定結果報告40 日.* * *坦貝：報告人：* 學號：*幾種藥物對大腸桿菌的敏感性測定摘要：大腸桿菌的抗原性復雜，毒力因子多種多樣，不同血清型、不 同毒力因子菌株的宿主范圍和致病性大不相同， 可在不同的動物或在 同種不同年齡的動物中引起多種多樣的疾病。 通過采用不同的抗菌藥 物對雞大腸桿菌病進行治療，結果說明，該菌對頭抱曝腸、慶大霉素、 阿米卡星、氧氟沙星和卡那霉素敏感?！緦嶒災康摹客ㄟ^檢測抑菌圈大小測定大腸桿菌對氟苯尼考、頭抱嚷味吶、硫酸新霉素可溶粉、氧氟沙星和卡那霉素幾種藥物的敏感程度?！緦嶒炘怼考埰ㄋ幟粼囼炇菍⒖咕幬镂盏教囟ǖ募埰校?然后置于已接 種

2、待測定菌的固體培養(yǎng)基上，抗菌藥物通過向培養(yǎng)基內(nèi)的擴散， 抑制 敏感細菌的生長，從而出現(xiàn)抑菌環(huán)帶。由于藥物擴散的距離越遠， 到達該距離的藥物濃度越低，故可以根據(jù)抑菌環(huán)的大小，判斷細菌對 藥物的敏感度。通過藥物敏感試驗，我們可以找出針對于某些致病菌 的敏感藥物，從而對臨床中的細菌性疾病的治療提供指導。【實驗材料】1-藥品及細菌一一氟苯尼考、頭抱嚷味吶、硫酸新霉素桿菌凈 、 氧氟沙星和卡那霉素等抗菌藥物，生理鹽水，磷酸鹽緩沖溶液， MH 營養(yǎng)肉湯，MH培養(yǎng)基，麥康凱培養(yǎng)基，蒸儲水，大腸桿菌2-器材一一紙片，試管，移液器，酒精燈，高壓蒸汽鍋，無菌操作 臺，鐐子，剪刀，錐形瓶，烘箱，培養(yǎng)箱，天平，玻璃棒

3、，干凈毛巾報紙，炭筆，接種環(huán)，小廣口瓶【實驗方法及內(nèi)容】1 .藥敏紙片的制作1.1 制備方法：取新華1號定性濾紙，用打孔機打成 6毫米直徑的 圓形小紙片。取圓紙片50片放入清潔枯燥的小廣口瓶中，瓶口以單 層牛皮紙包扎。經(jīng)15-20分鐘高壓消毒后，放在37c溫箱或烘箱中數(shù) 天，使完全枯燥。因不好取材，故擴大十倍配藥。，并翻動紙片，使各紙片充分浸透 藥液，翻動紙片時不能將紙片搗爛。同時在瓶口上記錄藥物名稱，放 37c溫箱內(nèi)過夜，枯燥后即密蓋，如有條件可真空枯燥。切勿受潮， 置陰暗枯燥處存放，有效期3-6個月。2 .藥液的制備用于商品藥的試驗：按商品藥的使用治療量的比例 配制藥液；如商品藥百病消按其

4、說明量治療量 0.01%飲水，可按這個 比例配制藥液，可取10毫克參加10毫升的水中混勻。此稀釋液即為 用于做藥敏試驗的藥液。蛋白月東2g杭州微生物試劑牛肉膏成都長壽生物利劑Nacl 1g成都市科龍化工試劑廠200ml 按上述要求稱取各種成分于三角瓶中，混合均勻，用 NaOH調(diào)PH至 7.4,調(diào)好PH后其瓶口用報紙封好，至于高壓蒸汽滅菌中滅菌30min。 待冷卻后，倒于無菌平板中。冷凝后放置在無菌操作臺上備用。水解酪蛋白瓊脂M-H瓊脂杭州微生物試劑用法 稱取本品36g于1000ml蒸儲水中，加熱溶解，經(jīng)121c 15min 高壓滅菌，待冷至50c左右，傾注無菌平板。此次實驗只需要配置 200m

5、l,稱取水解酪蛋白瓊脂于三角瓶中，往 三角瓶中參加200ml蒸儲水即可。放入高壓蒸汽滅菌鍋里滅菌 30min。 待冷卻50 c左右，傾注無菌平板。4.細菌的轉(zhuǎn)種、純化、活化培養(yǎng)(1)在麥康凱培養(yǎng)基上用無菌接種環(huán)接種大腸桿菌(2)用無菌接種環(huán)將細菌接種到 MH培養(yǎng)基中6個，保證細菌均 勻的涂布在培養(yǎng)基中。注意無菌操作。(3)將培養(yǎng)基置于37c的恒溫多f中培養(yǎng)24h。4.藥敏片法操作方法4.1 在“超凈臺中，用經(jīng)酒精燈火焰滅菌的接種環(huán)挑取適量 細菌培養(yǎng)物，以劃線方式將細菌涂布到平皿培養(yǎng)基上。具體方式；用 滅菌接種環(huán)取適量細菌分別在平皿邊緣相對四點涂菌，以每點開始劃 線涂菌至平皿的1/2。然后，找到

6、第二點劃線至平皿的1/2,依次劃線,直至細菌均勻密布于平皿。另：可挑取待試細菌于少量生理鹽水中 制成細菌混懸液，用滅菌棉拭子將待檢細菌混懸液涂布于平皿培養(yǎng)基 外表。要求涂布均勻致密4.2 將鐐子于酒精燈火焰滅菌后略停，取藥敏片貼到平皿培養(yǎng)基外 表。為了使藥敏片與培養(yǎng)基緊密相貼，可用鐐子輕按幾下藥敏片。為 了使能準確的觀察結果，要求藥敏片能有規(guī)律的分布于平皿培養(yǎng)基 上；一般可在平皿中央貼一片，外周可等距離貼假設干片外周一般 可貼四片，每種藥敏片的名稱要記住。4.3 將平皿培養(yǎng)基置于37c溫箱中培養(yǎng)24小時后，觀察效果。附：1 .結果判斷依據(jù)r表1藥物觸感實地判定標淮抑菌圈直徑（塞米）觸感度20以

7、上根以高頊申頊低映不敏15<010-141。以下2 .所用藥品:A桿菌凈泰硫酸新霉素可溶粉主要成分：硫酸新霉素生產(chǎn)商：四川萊邦藥業(yè)用法及用量：200g兌水600kgB 頭抱嚷味鈉 批號061202生產(chǎn)商：浙江海正藥業(yè) 濃度：89.6% C 卡那霉素 用法及用量：禽類10g可混飲水500-1500kgD氧氟沙星可溶粉生產(chǎn)商：廣東大華農(nóng)動物保健品動物保健廠用法及用量：禽類每1L水混飲2.5g,每日2次，連用3-5日E氟苯尼考可溶粉生產(chǎn)商：廣東養(yǎng)寶生物制藥用法及用量：雞每1L水混飲100mg3 .【考前須知】培養(yǎng)基：應根據(jù)試驗菌的營養(yǎng)需要進行配制。傾注平板時，厚度適宜 約5-6mm，不可太薄，

8、一般 90mm直徑的培養(yǎng)皿，傾注培養(yǎng)基18-20ml為宜。培養(yǎng)基內(nèi)應盡量防止有抗菌藥物的拮抗物質(zhì)，如鈣、 鎂離子能減低氨基糖甘類的抗菌活性，胸腺喀咤核甘和對氨苯甲酸PABA能拮抗磺胺藥和TMP的活性。細菌接種量：細菌接種量應恒定，如太多，抑菌圈變小，能產(chǎn)酶的菌 株更可破壞藥物的抗菌活性。藥物濃度：藥物的濃度和總量直接影響抑菌試驗的結果， 需精確配制。商品藥應嚴格按照其推薦治療量配制。培養(yǎng)時間：一般培養(yǎng)溫度和時間為37c 8-18小時，有些抗菌藥擴散 慢如多粘菌素，可將已放好抗菌藥的平板培養(yǎng)基，先置4c冰箱內(nèi)24 小時，使抗菌藥預擴散，然后再放 37c溫箱中培養(yǎng)，可以推遲細菌 的生長?！緦嶒炦M度】上午：稱量和制備藥液，藥敏片打孔、裝瓶、滅菌、枯燥，稱量制 備肉湯、普通、麥康凱、MH培養(yǎng)基并滅菌，實驗用品和器 具的滅菌處理。下午：將藥液參加已枯燥的藥敏小瓶，制備藥敏片。倒平