高三生物《專題2課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)》ppt課件

1、專題2 微生物的培育與運(yùn)用課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)一 研討思緒二統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目2.稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法: 運(yùn)用： 統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基外表生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，經(jīng)過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。一 研討思緒二統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目2.稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法: 運(yùn)用： 統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基外表生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，經(jīng)過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。留意：普通選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)展記數(shù)。一 研討思緒二統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目2.稀釋涂

2、布平板計(jì)數(shù)法: 第一位同窗只涂布了一個(gè)平板，沒有設(shè)置反復(fù)第一位同窗只涂布了一個(gè)平板，沒有設(shè)置反復(fù)組，因此結(jié)果不具有壓服力。組，因此結(jié)果不具有壓服力。一 研討思緒二統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目2.稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法: 第一位同窗只涂布了一個(gè)平板，沒有設(shè)置反復(fù)第一位同窗只涂布了一個(gè)平板，沒有設(shè)置反復(fù)組，因此結(jié)果不具有壓服力。組，因此結(jié)果不具有壓服力。第二位同窗思索到設(shè)置反復(fù)組的問題，涂布了3個(gè)平板，但是，其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差太遠(yuǎn)，闡明在操作過程中能夠出現(xiàn)了錯(cuò)誤，因此，不能簡單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值。一 研討思緒三設(shè)置對(duì)照一 研討思緒三設(shè)置對(duì)照主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)主要目的是

3、排除實(shí)驗(yàn)組中非測試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。一 研討思緒三設(shè)置對(duì)照判別培育基中能否有雜菌污染：判別培育基中能否有雜菌污染：主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。一 研討思緒三設(shè)置對(duì)照判別培育基中能否有雜菌污染：判別培育基中能否有雜菌污染：將未接種的培育基同時(shí)進(jìn)展培育。將未接種的培育基同時(shí)進(jìn)展培育。主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。

4、一 研討思緒三設(shè)置對(duì)照判別培育基中能否有雜菌污染：判別培育基中能否有雜菌污染：將未接種的培育基同時(shí)進(jìn)展培育。將未接種的培育基同時(shí)進(jìn)展培育。判別選擇培育基能否具有挑選作用：判別選擇培育基能否具有挑選作用：主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。一 研討思緒三設(shè)置對(duì)照判別培育基中能否有雜菌污染：判別培育基中能否有雜菌污染：將未接種的培育基同時(shí)進(jìn)展培育。將未接種的培育基同時(shí)進(jìn)展培育。判別選擇培育基能否具有挑選作用：判別選擇培育基能否具有挑選作用：完全培育基營養(yǎng)成分齊全接種后培育完全培育基營養(yǎng)成分齊

5、全接種后培育察看菌落數(shù)目。察看菌落數(shù)目。主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試要素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括：二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括：實(shí)驗(yàn)方案、資料器具、實(shí)施步驟和時(shí)間安排等。實(shí)驗(yàn)方案、資料器具、實(shí)施步驟和時(shí)間安排等。二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括：2. 實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)方案、資料器具、實(shí)施步驟和時(shí)間安排等。實(shí)驗(yàn)方案、資料器具、實(shí)施步驟和時(shí)間安排等。二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括

6、：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括：2. 實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)方案、資料器具、實(shí)施步驟和時(shí)間安排等。實(shí)驗(yàn)方案、資料器具、實(shí)施步驟和時(shí)間安排等。1土壤取樣土壤取樣二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的內(nèi)容包括：2. 實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程：1土壤取樣土壤取樣從肥沃、潮濕的土壤中取樣。先鏟去表層土從肥沃、潮濕的土壤中取樣。先鏟去表層土3 cm左右，再取樣，將樣品裝入事先預(yù)備左右，再取樣，將樣品裝入事先預(yù)備好的信封中。好的信封中。實(shí)驗(yàn)方案、資料器具、實(shí)施步驟和時(shí)間安排等。實(shí)驗(yàn)方案、資料器具、實(shí)施步驟和時(shí)間安排等。二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2樣品的稀釋樣品的稀釋二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2樣品的稀釋樣品的稀釋將待測樣品經(jīng)過一系列的稀

7、釋，然后選擇三個(gè)將待測樣品經(jīng)過一系列的稀釋，然后選擇三個(gè)稀釋度的菌液均勻涂布在平板上，然后培育。稀釋度的菌液均勻涂布在平板上，然后培育。 由于不同微生物在土壤中含量不同，其目由于不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保證獲得菌落數(shù)在的是保證獲得菌落數(shù)在30300之間。之間。 不同。不同。為了結(jié)果接近真實(shí)值，可將同一稀釋度菌液涂為了結(jié)果接近真實(shí)值，可將同一稀釋度菌液涂布到布到3個(gè)或個(gè)或3個(gè)以上的平板上，經(jīng)培育，計(jì)算出個(gè)以上的平板上，經(jīng)培育，計(jì)算出菌落的平均數(shù)。菌落的平均數(shù)。計(jì)算公式：計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)每克樣品中的菌株數(shù) =CVM計(jì)算公式：計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)每克樣品中的菌株數(shù) =

8、CVM某同窗在稀釋倍數(shù)為106 的培育基中測得平板上菌落數(shù)的平均數(shù)為234，那么每克樣品中的菌落數(shù)是涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1ml ( )A. 2.34108B. 2.34109C. 234D. 23.4 某同窗在稀釋倍數(shù)為106 的培育基中測得平板上菌落數(shù)的平均數(shù)為234，那么每克樣品中的菌落數(shù)是涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1ml ( )A. 2.34108B. 2.34109C. 234D. 23.4 B B計(jì)算公式：計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)每克樣品中的菌株數(shù) =CVM二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2. 實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程：3微生物的培育與察看二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2. 實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程：3微生物的

9、培育與察看培育皿編號(hào)：104、105、106各編號(hào)三個(gè)培育皿。二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2. 實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程：3微生物的培育與察看培育皿編號(hào)：104、105、106各編號(hào)三個(gè)培育皿。每個(gè)培育皿參與牛肉膏蛋白胨瓊脂培育基15ml。二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2. 實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程：3微生物的培育與察看培育皿編號(hào)：104、105、106各編號(hào)三個(gè)培育皿。每個(gè)培育皿參與牛肉膏蛋白胨瓊脂培育基15ml。用移液管按照編號(hào)分別參與不同濃度土壤稀釋液各0. 1ml，轉(zhuǎn)動(dòng)培育皿，使土壤稀釋液與培育基混合均勻。二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2. 實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程：3微生物的培育與察看培育皿編號(hào)：104、105、106各編號(hào)三個(gè)培育皿。每個(gè)培育皿參與牛

10、肉膏蛋白胨瓊脂培育基15ml。用移液管按照編號(hào)分別參與不同濃度土壤稀釋液各0. 1ml，轉(zhuǎn)動(dòng)培育皿，使土壤稀釋液與培育基混合均勻。冷卻倒置放入3037攝氏度的恒溫培育箱中培育。察看紀(jì)錄。三 操作提示三 操作提示1. 無菌操作無菌操作2. 做好標(biāo)志做好標(biāo)志3. 規(guī)劃時(shí)間規(guī)劃時(shí)間四 操作提示三 操作提示1. 無菌操作無菌操作2. 做好標(biāo)志做好標(biāo)志3. 規(guī)劃時(shí)間規(guī)劃時(shí)間四 結(jié)果分析與評(píng)價(jià)五 課題延伸五 課題延伸 怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒定怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒定?2. 怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？3. 怎樣鑒定某細(xì)菌可以分解尿素？怎樣鑒定

11、某細(xì)菌可以分解尿素？五 課題延伸 怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒定怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒定?2. 怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？3. 怎樣鑒定某細(xì)菌可以分解尿素？怎樣鑒定某細(xì)菌可以分解尿素？借助生物化學(xué)的方法借助生物化學(xué)的方法五 課題延伸 怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒定怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒定?借助生物化學(xué)的方法借助生物化學(xué)的方法CONH22 + H2OCO2+2NH3脲酶2. 怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？五 課題延伸 怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒定怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒定?借

12、助生物化學(xué)的方法借助生物化學(xué)的方法CONH22 + H2OCO2+2NH3脲酶經(jīng)過檢測培育基經(jīng)過檢測培育基pH變化來判別變化來判別2. 怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？五 課題延伸 怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒定怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒定?2. 怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？3. 怎樣鑒定某細(xì)菌可以分解尿素？怎樣鑒定某細(xì)菌可以分解尿素？借助生物化學(xué)的方法借助生物化學(xué)的方法經(jīng)過檢測培育基經(jīng)過檢測培育基pH變化來判別變化來判別五 課題延伸 怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒定怎樣對(duì)分別的菌種作進(jìn)一步的鑒

13、定?2. 怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？怎樣判別細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響能否發(fā)生？3. 怎樣鑒定某細(xì)菌可以分解尿素？怎樣鑒定某細(xì)菌可以分解尿素？借助生物化學(xué)的方法借助生物化學(xué)的方法經(jīng)過檢測培育基經(jīng)過檢測培育基pH變化來判別變化來判別 在以尿素為獨(dú)一氮源的培育基中參與酚紅在以尿素為獨(dú)一氮源的培育基中參與酚紅指示劑。培育某種細(xì)菌后，假設(shè)指示劑。培育某種細(xì)菌后，假設(shè)pH升高，指升高，指示劑將變紅示劑將變紅 ，闡明該細(xì)菌可以分解尿素。，闡明該細(xì)菌可以分解尿素。請(qǐng)根據(jù)以上配方，回答以下問題：請(qǐng)根據(jù)以上配方，回答以下問題：(1)(1)該培育基含有微生物所需求的該培育基含有微生物所需求的_類營養(yǎng)類營

14、養(yǎng)物質(zhì)。其中最主要的碳源是物質(zhì)。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)該培育基按物理性質(zhì)劃分是該培育基按物理性質(zhì)劃分是_培育基；培育基；按培育基的作用劃分是按培育基的作用劃分是_培育基。培育基。例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方請(qǐng)根據(jù)以上配方，回答以下問題：請(qǐng)根據(jù)以上配方，回答以下問題：(1)(1)該培育基含有微生物所需求的該培育基含有微生物所需求的_類營養(yǎng)類營養(yǎng)物質(zhì)。其中最主要的碳源是物質(zhì)。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)該培育基按物理性質(zhì)劃分是該培育基按物理性質(zhì)劃分是_培育基；培育基；按培育基的作用劃分

15、是按培育基的作用劃分是_培育基。培育基。4 4例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方請(qǐng)根據(jù)以上配方，回答以下問題：請(qǐng)根據(jù)以上配方，回答以下問題：(1)(1)該培育基含有微生物所需求的該培育基含有微生物所需求的_類營養(yǎng)類營養(yǎng)物質(zhì)。其中最主要的碳源是物質(zhì)。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)該培育基按物理性質(zhì)劃分是該培育基按物理性質(zhì)劃分是_培育基；培育基；按培育基的作用劃分是按培育基的作用劃分是_培育基。培育基。4 4葡萄糖葡萄糖例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方請(qǐng)根據(jù)以上配方，

16、回答以下問題：請(qǐng)根據(jù)以上配方，回答以下問題：(1)(1)該培育基含有微生物所需求的該培育基含有微生物所需求的_類營養(yǎng)類營養(yǎng)物質(zhì)。其中最主要的碳源是物質(zhì)。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)該培育基按物理性質(zhì)劃分是該培育基按物理性質(zhì)劃分是_培育基；培育基；按培育基的作用劃分是按培育基的作用劃分是_培育基。培育基。4 4葡萄糖葡萄糖尿素尿素例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方請(qǐng)根據(jù)以上配方，回答以下問題：請(qǐng)根據(jù)以上配方，回答以下問題：(1)(1)該培育基含有微生物所需求的該培育基含有微生物所需求的_類營養(yǎng)類營養(yǎng)物質(zhì)。其中最主要的碳

17、源是物質(zhì)。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)該培育基按物理性質(zhì)劃分是該培育基按物理性質(zhì)劃分是_培育基；培育基；按培育基的作用劃分是按培育基的作用劃分是_培育基。培育基。4 4葡萄糖葡萄糖尿素尿素固體固體例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方請(qǐng)根據(jù)以上配方，回答以下問題：請(qǐng)根據(jù)以上配方，回答以下問題：(1)(1)該培育基含有微生物所需求的該培育基含有微生物所需求的_類營養(yǎng)類營養(yǎng)物質(zhì)。其中最主要的碳源是物質(zhì)。其中最主要的碳源是_，氮源是，氮源是_。(2)(2)該培育基按物理性質(zhì)劃分是該培育基按物理性質(zhì)劃分是_培育基；培育基；按培育

18、基的作用劃分是按培育基的作用劃分是_培育基。培育基。4 4葡萄糖葡萄糖尿素尿素固體固體選擇選擇例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方(3)(3)該培育基具有選擇作用的緣由是該培育基具有選擇作用的緣由是 。例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方(3)(3)該培育基具有選擇作用的緣由是該培育基具有選擇作用的緣由是 。該培育基中，獨(dú)一的氮源是尿素，只需能分解該培育基中，獨(dú)一的氮源是尿素，只需能分解尿素的微生物才干在該培育基上生長和繁衍尿素的微生物才干在該培育基上生長和繁衍例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方(4)(4)該培育基中，可經(jīng)過檢測該培育基中，可經(jīng)過檢測pHpH的變化來判別的變化來判別尿素能否被分解，根據(jù)的原理是尿素能否被分解，根據(jù)的原理是 。例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方例：下面是分別分解尿素的細(xì)菌所用的培育基配方(4)(4)該培育基中，可經(jīng)過檢測該培育基中，可經(jīng)過檢測pHp