光學(xué)顯微鏡的使用及動(dòng)物基本組織切片觀察

1、基礎(chǔ)生物學(xué)技術(shù)試驗(yàn)光學(xué)顯微鏡的使用及動(dòng)物基本組織切片觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、光學(xué)顯微鏡的使用2、基本組織切片的觀察與記錄3、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書寫與要求4、生物量級、生物系統(tǒng)的層次以及生物類別5、各個(gè)胚層細(xì)胞發(fā)育方向 二、實(shí)驗(yàn)原理1、生物量級：殘基（氨基酸，核昔酸，脂肪酸，甘油）生物大分子一亞細(xì)胞 結(jié)構(gòu)（subcellularstructure）細(xì)胞器一細(xì)胞組織（器官）一系統(tǒng)f種群一群 落一生態(tài)系統(tǒng)一生物圈物理量級：基本粒子（夸克，輕子）一電子（自旋反平行）一質(zhì)子一原子一 分子（物體：生物量級）一天體一星系一星云一宇宙一宇宙膜2、生物系統(tǒng)：系統(tǒng)發(fā)育無生命的有機(jī)行星（殘基f RNA, PR, DNA）-生命

2、產(chǎn)生一多類型細(xì)胞一真細(xì)菌（包 括支原體衣原體）一古細(xì)菌（甲烷菌，鹽細(xì)菌，硫化細(xì)菌等）一真核生物a）生物界類群：b）原核生物界：真細(xì)菌，古細(xì)菌c）原生主物界：原生動(dòng)物，藻類，黏菌（無細(xì)胞膜，無菌絲，多細(xì)胞）d）真菌界：接合菌（菌絲體無隔），子囊菌（除酵母菌單細(xì)胞），擔(dān)子菌（初、 次生菌絲，形成擔(dān)子，擔(dān)抱子），半知菌（只有無性或有性階段未發(fā)現(xiàn)）e）植物界：苔蘇類植物，維管植物（無種子：石松、木賊、真蕨類），有種 子（裸子、被子（單子葉，雙子葉）f）動(dòng)物界：側(cè)生動(dòng)物（海綿），輻射對稱動(dòng)物（刺胞動(dòng)物門，水母水Kb櫛 水母動(dòng)物門，海胡桃），兩側(cè)無體腔動(dòng)物（渦蟲），假體腔動(dòng)物（線蟲）, 真體腔動(dòng)物（原口動(dòng)

3、物：環(huán)節(jié)、軟體、節(jié)肢；后口動(dòng)物：棘皮、半索、 脊索）,3、各胚層細(xì)胞發(fā)育走向：a）外胚層：神經(jīng)系統(tǒng)（腦.脊髓、脊神經(jīng)、自主神經(jīng)、視網(wǎng)膜、內(nèi)耳、腎上 腺髄質(zhì)），表皮（毛發(fā)、汗腺、油脂腺、乳腺、晶體、口腔黏膜）b）中胚層：肌肉、骨骼、血液、真皮、心臟血管系統(tǒng)、泌尿生殖系統(tǒng)以及結(jié) 締組織（固有結(jié)締組織、骨與軟骨、血液）c）內(nèi)胚層：消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)的上皮和有關(guān)腺體（胰，肝）、膀胱上皮d）口訣：外表感神經(jīng)，內(nèi)組消胰肝4、分辨力：能分辨最小間隔的能力，單位距離（人眼距H標(biāo)物25cm處）R=KAnsin(|)K是透鏡品質(zhì)，光鏡在0.61-1.0之間，入光波波長或電子波長，n是光鏡介質(zhì)折射率，8是鏡口角（樣

4、本對物鏡的鏡口張角，一般180度），sina/2<l5、鏡種：暗視場（背景黑色，接受標(biāo)本反射光線，利于分辨顆粒物，觀察活細(xì) 胞），相差顯微鏡（鍍鋁膜，將光推遲1/4+1/4相位，背景亮，標(biāo)本黑），干涉顯基礎(chǔ)生物學(xué)技術(shù)試驗(yàn)微鏡，熒光顯微鏡。6、光學(xué)顯微鏡使用：提拿時(shí)注意手握鏡臂，下方托住底座；粗調(diào)時(shí)抬起后放下， 調(diào)節(jié)，禁止抬升載物臺(tái)防止物鏡壓壞玻片；雙U鏡注意視野重疊；油鏡多使用香 柏油，以二甲苯清除香柏油。三、動(dòng)物與器材實(shí)驗(yàn)材料：組織標(biāo)本實(shí)驗(yàn)設(shè)備：光學(xué)顯微鏡四、方法與步驟1、實(shí)驗(yàn)分組2、實(shí)驗(yàn)原理講解3、顯微操作、觀察a）安放顯微鏡b）檢查顯微鏡是否有故障c）插入電源d）對光，調(diào)節(jié)亮度e）

5、放入組織切片，調(diào)焦f）低倍鏡觀察g）換高倍鏡，調(diào)焦，觀察五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果纖毛杯狀細(xì)胞細(xì)胞核基礎(chǔ)生物學(xué)技術(shù)試驗(yàn)六、實(shí)驗(yàn)結(jié)論假復(fù)層纖毛柱狀上皮(pseudostratified ciliated columnar epithelium)|l|纖毛細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、基細(xì)胞、刷細(xì)胞和彌散的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞組成。細(xì)胞高矮不等，細(xì)胞 核的位置參差不齊，好似有多層，但每個(gè)細(xì)胞的基底部都附于基膜上，所以稱假 復(fù)層。纖毛細(xì)胞呈柱狀(柱狀細(xì)胞)，游離面有纖毛，每個(gè)細(xì)胞約有三百根，核 卵圓形，位于細(xì)胞中部，纖毛向咽側(cè)快速擺動(dòng)，將粘液以及附于其上的塵粒細(xì)菌 等推向咽部被咳出，故纖毛細(xì)胞對凈化吸入空氣有極大作用。杯狀細(xì)胞結(jié)構(gòu)與

6、腸 道上皮的杯狀細(xì)胞類似，頂部細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有大量粘原顆粒，細(xì)胞分泌的黏蛋白為 大分子蛋白，與管壁內(nèi)腺體的分泌物在上皮表面構(gòu)成一道粘液性屏障，粘附吸入 空氣中的異物，溶解吸入的SO2、CO等有害氣體，隨粘液咳出?；?xì)胞呈錐形， 于上皮深部，為未分化的細(xì)胞，有增殖分化能力，可分化成前述兩種細(xì)胞。七、問題解答1、慢性氣管炎會(huì)影響男性精子活性？慢性氣管炎是假復(fù)層細(xì)胞纖毛擺動(dòng)無力，可能有關(guān)基因?qū)绗F(xiàn)問題，同時(shí)造成 精子游動(dòng)緩慢，導(dǎo)致男性不育。2、光學(xué)顯微鏡組成？機(jī)械系統(tǒng)，光學(xué)系統(tǒng)，光源系統(tǒng)3、為什么被稱作假復(fù)層細(xì)胞？細(xì)胞高矮不等，細(xì)胞核的位置參差不齊，好似有多層，但每個(gè)細(xì)胞的基底部 都附于基膜上，所以稱假復(fù)層。4、干涉顯微鏡和熒光顯微鏡的工作原理？a) 熒光顯微鏡可觀察細(xì)胞中的熒光。當(dāng)用激發(fā)光照射時(shí)，細(xì)胞發(fā)射熒光。 這種熒光被稱為原發(fā)熒光，山細(xì)胞中固有的熒光物質(zhì)比如還原輔酶 l(NADH)發(fā)出的。另一種是用熒光染料對細(xì)胞中的成分進(jìn)行特異染色， 再經(jīng)激發(fā)光照射。照射后經(jīng)化學(xué)反應(yīng)使組織中的非熒光物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)闊晒?物質(zhì)所發(fā)的熒光成為誘發(fā)熒光。其他的還有免疫熒光等。b) 微分干涉顯微鏡術(shù)是用平面偏振光經(jīng)棱鏡折射后分成兩束，于不同時(shí)