葡聚糖凝膠使用說(shuō)明

1、葡聚糖凝膠使用說(shuō)明化學(xué)和物理性質(zhì)葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠，含有大量的羥基，很容易在水中和電解質(zhì)溶液中溶脹。G型的葡聚糖凝膠有各種不同的交聯(lián)度，因此它們的溶脹度和分級(jí)分離范圍也有所不同。葡聚糖凝膠的溶 脹度基本上不因鹽和洗滌劑的存在而受影響。葡聚糖凝膠有不同的粒度。超細(xì)級(jí)的葡聚糖凝膠是用于需要極高分辨率的柱色譜和薄層色譜。粗 級(jí)和中級(jí)的凝膠用于制備性色譜過(guò)程，可在較低的壓力下獲得較高的流速。另外，粗級(jí)也可用于 批量工藝?；瘜W(xué)穩(wěn)定性葡聚糖凝膠不溶于一切溶劑（除非它被化學(xué)降解）。它在水、鹽溶液、有機(jī)溶劑、堿和弱酸性溶液中都是穩(wěn)定的，在強(qiáng)酸中凝膠骨架的糖昔鍵被水解。長(zhǎng)期接觸氧化劑將破壞凝膠，因而應(yīng)避

2、免使 用。物理穩(wěn)定性葡聚糖凝膠并不熔融，可以在濕態(tài)、中性PH進(jìn)行滅菌或在高壓滅菌器 120C、30分鐘而不影響它的色譜性質(zhì)。干態(tài)的凝膠加熱至120 C以上將開(kāi)始焦糖化。葡聚糖凝膠的機(jī)械強(qiáng)度取決于交聯(lián)度。產(chǎn)品說(shuō)明：產(chǎn)品名稱分離范圍應(yīng)用葡聚糖凝膠G-10<700緩沖液交換、脫捻，分離小分子，去除小分子匍聚罹凝膠G-15<1500緩沖液交換、脫鹽分離小分子.去除小分子仙聚糖凝膠G-251000-5000工業(yè)上脫梓及交換緩沖液葡聚糖凝膠G-501000-30000務(wù)肽分離、脫鹽、潔洗生物提取液、分子站制1定葡聚糠凝膠G-752000-70000蛋白分離純化、分子最測(cè)定、平衡常數(shù)測(cè)定葡聚糖凝

3、膠G-1002000-120000蛋白分高純化、分子屆測(cè)定、平衡常數(shù)測(cè)定葡聚糖褫膠G-1505000-300000蚩白分離純化、分子量測(cè)定、平衡常數(shù)測(cè)定葡聚糖，疑膠G-2005000-600000蛋白分高純化、分子鼠測(cè)定、平衡常數(shù)測(cè)定使用方法:1. 乙醇浸泡：在室溫下，將干粉浸泡于 50-60%乙醇中至少24小時(shí)，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無(wú)鹽水洗 去殘存的乙醇濾干；2. 無(wú)鹽水浸泡：室溫下，在無(wú)鹽水中充分溶脹 24小時(shí)，間隙攪拌，以保證凝膠的完全溶脹，然后；3. 鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2N HCl浸泡12小時(shí)，間隙攪拌，濾干，水洗只中性；4. 將溶脹好的凝膠脫氣后（真空抽濾或超聲波）根

4、據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層；PH值等于上柱5. 上樣前平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止（流出液的的 Buffer 的 PH 值）；6. 凝膠過(guò)濾的上樣量一般為 5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整；脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50cm以下，過(guò)高的凝膠層會(huì)引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高 和流速控制，脫鹽時(shí)高徑比為5: 1即可；7. 洗脫方法：可以用無(wú)鹽水，也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫；在上柱Buffer中加入NaCl等

5、梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以完全分離純化；8. 在位清洗（CIP）凝膠使用十次后作一次 CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以 40cm/h用 1M氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積，再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。備注：其它規(guī)格葡聚糖凝膠處理方法類似。PS:可以優(yōu)惠到290元/10g （進(jìn)口產(chǎn)品），并且含10元的快遞費(fèi)！G-75可以重復(fù)使用，一般幾十次都沒(méi)問(wèn)題的。保質(zhì)期 2年。未使用，室溫保存即可。使用后保存方法如下：凝膠層析的載體不會(huì)與被分離的物質(zhì)發(fā)生任何作用，因此凝膠柱在層析分離后稍加平衡即可進(jìn)行下一次的分離操作。但使用多次后，由于床體積變小，流動(dòng)速率降低或雜質(zhì)污染等原因， 使分

6、離效果受到影響。 此時(shí)對(duì)凝膠柱需進(jìn)行再生處理，其方法是：先用水反復(fù)進(jìn)行逆向沖洗，再用緩沖溶液平衡，即可進(jìn)行下一次分離。對(duì)使用過(guò)的凝膠，若短時(shí)間保存，只要反復(fù)洗滌除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，加入適量防腐劑即可；若長(zhǎng)期保存，則需將凝膠從柱中取出，進(jìn)行洗滌、脫水和干燥等處理后，裝瓶保存。凈相關(guān)參教產(chǎn)品貸號(hào)：KA-0250-01產(chǎn)品名稱：葡聚糖凝膠G-T5英文名稱：075產(chǎn)品規(guī)格：ER產(chǎn)品包裝：2S克，100克500克，10公斤保存條件：RT產(chǎn)品名稱：葡聚糖凝膠G-75英文名稱：Sephadex G-75性狀：白色微球，多孔凝膠類型：凝膠過(guò)濾填料，親水型凝膠結(jié)構(gòu)成分：交聯(lián)右旋糖酎粒 徑：40-120四工作PH值：2-10操作溫度：4-40 C球蛋白分離范圍：3000-80000保存條件：4-25 C應(yīng) 用：利用分子篩作用，進(jìn)行多肽分離、脫鹽、清洗生物提取液、分子量測(cè)定葡