第五章黃酮類化合物

1、第五章第五章 黃酮類化合物黃酮類化合物FlavonoidsOHOOOHOHOHOHHOOOHOH本章內(nèi)容本章內(nèi)容 結(jié)構(gòu)研究實(shí)例結(jié)構(gòu)研究實(shí)例檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定 提取與分離提取與分離理化性質(zhì)與顯色反應(yīng)理化性質(zhì)與顯色反應(yīng)概述概述學(xué)習(xí)要求學(xué)習(xí)要求1.掌握黃酮類化合物的主要結(jié)構(gòu)類型，了解結(jié)構(gòu)之間的生物合成關(guān)系；2.掌握黃酮類化合物的理化性質(zhì)和顯色反應(yīng)；3.掌握黃酮類化合物的提取分離方法；4.掌握波譜法在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用，熟悉其色譜鑒定方法。第一節(jié)第一節(jié) 概述概述概述概述定義：定義： 黃酮類化合物泛指兩個(gè)苯環(huán)通過(guò)中黃酮類化合物泛指兩個(gè)苯環(huán)通過(guò)中央三碳鏈連結(jié)而成的一系列化合物。央三碳鏈

2、連結(jié)而成的一系列化合物。OABC12345678123456C6-C3-C6OO2-2-苯基色原酮概述概述 黃酮類化合物為一類植物色素，分布廣，數(shù)量大，生物活性溫和而且多樣。 天然黃酮類化合物常以苷類形式（包括氧苷與碳苷）存在，糖通常連在A環(huán)6，8位。重要的黃酮類化合物重要的黃酮類化合物槲皮素Quercetin重要的黃酮類化合物重要的黃酮類化合物橙皮苷橙皮苷HesperidinOOOHOHOCH3RhaglcO重要的黃酮類化合物重要的黃酮類化合物兒茶素catechins表兒茶素Epicatechin重要的黃酮類化合物重要的黃酮類化合物OOOHOH大豆素Daidzein銀杏黃酮重要的黃酮類化合物

3、重要的黃酮類化合物生源生源： 由三個(gè)丙二酸單酰輔酶由三個(gè)丙二酸單酰輔酶A A和一個(gè)桂皮酰和一個(gè)桂皮酰輔酶輔酶A A生物合成而成生物合成而成. .一、黃酮類化合物生物合成的基本途徑一、黃酮類化合物生物合成的基本途徑OABC桂皮酰輔酶A丙二酰輔酶ACOCoACH2COCoACOOH3 X二、結(jié)構(gòu)分類及結(jié)構(gòu)類別間的生物合成關(guān)系二、結(jié)構(gòu)分類及結(jié)構(gòu)類別間的生物合成關(guān)系（一）結(jié)構(gòu)分類分類的依據(jù)： 1、三碳鏈的氧化程度；2、B環(huán)的連接位置；3、三碳鏈?zhǔn)欠癯森h(huán)。OABC結(jié)構(gòu)分類結(jié)構(gòu)分類黃酮類黃酮類Flavone黃酮醇類黃酮醇類二氫黃酮二氫黃酮類類二氫黃酮二氫黃酮醇類醇類異黃酮類異黃酮類二氫異黃酮二氫異黃酮類類

4、查耳酮查耳酮二氫查耳酮二氫查耳酮OOOHOOHOOOOOOHOOOOOHOO結(jié)構(gòu)分類結(jié)構(gòu)分類魚(yú)藤酮類魚(yú)藤酮類黃烷黃烷-3-3-醇醇類類 紫檀素類紫檀素類黃烷黃烷-3 -3，4- 4-二醇類二醇類 花色素花色素橙酮橙酮OOOOOOOHOHOOHOOCHO+OH第二節(jié) 黃酮類化合物的理化性質(zhì)與顯色反應(yīng)一、性狀及旋光性一、性狀及旋光性1、苷元多呈晶形，苷類為無(wú)定形粉末；2、顏色：多為黃色，與結(jié)構(gòu)中的交叉共軛體系和助色團(tuán)有關(guān)。OOOH.例如：黃酮、黃酮醇多為灰黃灰黃黃色黃色，而二氫黃酮、黃酮醇多為無(wú)色。注意：花色素的顏色隨pH不同而不同紅（pH8.5)一、性狀及旋光性一、性狀及旋光性旋光性旋光性有旋光

5、性取決于有無(wú)不對(duì)稱碳原子所有黃酮苷（糖）二氫黃酮二氫黃酮醇二氫異黃酮黃烷醇類游離黃酮黃酮醇異黃酮查耳酮（二氫）橙酮花色素類等無(wú) 黃酮類化合物的溶解度因結(jié)構(gòu)及存在的黃酮類化合物的溶解度因結(jié)構(gòu)及存在的不同而有很大差異。不同而有很大差異。1）苷元：難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑（甲醇、乙醇、醋酸乙酯、丙酮）及稀堿水中；1、黃酮（醇）、查耳酮等平面性強(qiáng)的分子，使分子與分子間排列緊密，分子間引力較大，更難溶于水；二、溶解性二、溶解性2 2、二氫黃酮及二氫黃酮醇等，無(wú)交叉共軛體系，二氫黃酮及二氫黃酮醇等，無(wú)交叉共軛體系，由由于吡喃酮環(huán)已被氫化成為類似于半椅式結(jié)構(gòu)，破壞于吡喃酮環(huán)已被氫化成為類似于半椅式結(jié)構(gòu)，破壞

6、了分子的平面性，為非平面型分子。分子與分子間了分子的平面性，為非平面型分子。分子與分子間排列不緊密，分子間引力下降，溶解度稍大排列不緊密，分子間引力下降，溶解度稍大3 3、異黃酮類異黃酮類B B環(huán)由于受吡喃酮環(huán)羰基的立體障礙，分環(huán)由于受吡喃酮環(huán)羰基的立體障礙，分子的平面性降低，故親水性比平面型分子增加子的平面性降低，故親水性比平面型分子增加4 4、花色苷元（花色素類）花色苷元（花色素類）雖為平面結(jié)構(gòu)，但離子形雖為平面結(jié)構(gòu)，但離子形式存在，具有鹽的通用性，水溶度較大式存在，具有鹽的通用性，水溶度較大； 水 甲醇 乙醇 乙酸乙酯 氯仿 乙醚 稀堿水1.1.游離黃酮游離黃酮 -+ + + + + +

7、 +（酚羥基)取決于取決于R=OH 二氫黃酮醇R=H 二氫黃酮黃酮類苷元溶解度大?。狐S酮類苷元溶解度大?。?花色素苷元二氫黃酮（醇）異黃酮花色素苷元二氫黃酮（醇）異黃酮黃酮（醇）、查耳酮黃酮（醇）、查耳酮2）苷： 黃酮苷一般溶于水、甲醇、乙醇等強(qiáng)極性溶劑中，但難溶于或不溶于苯、氯仿等有機(jī)溶劑中。糖鏈越長(zhǎng)，則水溶度越大。二糖鏈苷單糖鏈苷； 多糖苷單糖苷； C3-羥基苷C7-羥基苷（ C3-羥基苷與C4-羰基的立體障礙使分子平面性降低） 水水 甲醇甲醇 乙醇乙醇 乙酸乙酯乙酸乙酯 氯仿氯仿 乙醚乙醚 稀稀 + + + + - - - + + + + + - - - +黃酮類化合物溶解性（極性）規(guī)律

8、黃酮類化合物溶解性（極性）規(guī)律: :三糖苷 雙糖苷 單糖苷 苷元3 - O - 糖苷 7 - O - 糖苷（平面性分子）花色素(平面性分子,離子型) 非平面性分子 平面性分子黃酮黃酮苷( (親水性親水性) ) 糖的連接位置對(duì)苷的水溶性的影響糖的連接位置對(duì)苷的水溶性的影響OOOHOHOOglcHOHOOOHOHOglcOOOHOHOHOH三、酸性與堿性三、酸性與堿性（一）顯著的酸性（一）顯著的酸性羥基位置 酸性 溶解性 7，4-二羥基強(qiáng)弱溶于5%NaHCO37或4-羥基 溶于5%Na2CO3一般酚羥基溶于0.2%NaOH5-羥基 溶于4%NaOH三、酸性與堿性三、酸性與堿性（二）微弱的堿性： 1

9、位氧原子有未共用電子對(duì)，表現(xiàn)微弱堿性，可與濃鹽酸、濃硫酸成 鹽，極不穩(wěn)定，遇水分解。OOOO.-+HClH2O四、顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng)還原試驗(yàn)還原試驗(yàn)金屬鹽類的金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)絡(luò)合反應(yīng)硼酸的顯色硼酸的顯色反應(yīng)反應(yīng)堿性試劑的堿性試劑的 顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)還原試驗(yàn)還原試驗(yàn)1 1、鹽酸鹽酸鎂粉反應(yīng)鎂粉反應(yīng)（最常用）（最常用） 黃酮（醇）類二氫黃酮（醇）類 陽(yáng)性（紅色）查耳酮兒茶素類異黃酮陰性注意：花色素、部分查耳酮等在濃HCl酸性下變紅，要做空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)，排除干擾。還原試驗(yàn)還原試驗(yàn)2 2、四氫硼鈉反應(yīng)：（、四氫硼鈉反應(yīng)：（專屬性專屬性）二氫黃酮（醇）二氫黃酮（醇） 陽(yáng)性陽(yáng)性（紅色紅色）其它黃酮其它黃

10、酮陰性陰性附：二氫黃酮類化合物可與附：二氫黃酮類化合物可與磷鉬酸磷鉬酸試劑試劑反應(yīng)呈反應(yīng)呈棕褐色棕褐色。金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)可以發(fā)生金屬鹽類絡(luò)合反應(yīng)的基團(tuán)：可以發(fā)生金屬鹽類絡(luò)合反應(yīng)的基團(tuán)：常見(jiàn)的金屬鹽類：常見(jiàn)的金屬鹽類：鋁鹽、鎂鹽、鋯鹽等鋁鹽、鎂鹽、鋯鹽等。OOOHOHOHOHOH1、三氯化鋁的顯色反應(yīng)： 3-OH，4-C=O 黃色黃色 5-OH，4-C=O 鮮黃色熒光鮮黃色熒光 鄰二酚羥基鄰二酚羥基 （44或或7 7，44黃酮醇，天黃酮醇，天藍(lán)色熒光）藍(lán)色熒光）大多數(shù)黃酮顯黃色并有熒光。用途：黃酮類化合物的定性定量分析。金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)2、醋酸鉛的顯色反應(yīng)

11、試劑：中性醋酸鉛或堿式醋酸鉛陽(yáng)性結(jié)果：生成黃紅色沉淀作用部位：金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)OOOHOHOHOHOH3、鋯鹽枸櫞酸顯色反應(yīng)：用途：區(qū)別3-OH 和/或 5-OH的存在。金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)OOOHOHOZrClOH2O注意：3-羥基黃酮產(chǎn)生的絡(luò)合物穩(wěn)定性大于5-羥基黃酮。 鋯鹽鋯鹽枸櫞酸顯色反應(yīng)區(qū)別枸櫞酸顯色反應(yīng)區(qū)別3-OH或或5-OH的存在的存在樣品樣品/ MeOH2%2%ZrOCl2/MeOH溶液變黃溶液變黃有有3-OH和和/或或5-OH2%枸櫞酸枸櫞酸/MeOH仍顯黃色仍顯黃色顯著褪色顯著褪色有有3-OH無(wú)無(wú)3-OH，有，有5-OH4、醋酸鎂的顯色反

12、應(yīng)二氫黃酮(醇)：天藍(lán)色熒光異黃酮、黃酮(醇) ：黃橙黃褐色熒光5、氯化鍶（SrCl2）的顯色反應(yīng)具有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物:綠棕色黑色沉淀 金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)金屬鹽類的絡(luò)合反應(yīng)（三）硼酸的顯色反應(yīng)（三）硼酸的顯色反應(yīng)OOH具有具有結(jié)構(gòu)的化合物結(jié)構(gòu)的化合物在酸性條件下與硼酸反應(yīng)生成亮黃色。例如：OOHOOHO（四）堿性試劑顯色反應(yīng)（四）堿性試劑顯色反應(yīng)OOOHOHOHOCH3OOHOHOHOCH3OHOHH+1、二氫黃酮類遇堿變黃橙色2、黃酮醇遇堿呈黃色，通入空氣變棕色。3、具有鄰二酚羥基或3，4-二羥基取代 時(shí)，在堿液中易氧化，在堿液中由黃-深 紅-綠棕色沉淀。第三節(jié) 黃酮類化合物的提

13、取與分離黃酮類化合物的提取與分離黃酮類化合物的提取與分離提取提取分離分離醇提法醇提法沸水法沸水法堿溶酸沉法堿溶酸沉法柱色譜法柱色譜法pHpH梯度萃梯度萃取法取法系統(tǒng)溶劑系統(tǒng)溶劑萃取法萃取法聚酰胺聚酰胺吸附法吸附法硼酸絡(luò)合法硼酸絡(luò)合法（一）醇提法（一）醇提法95%乙醇 提取苷元6070%乙醇 提取苷類 注意：1.含雜質(zhì)多，可用石油醚去油脂、蠟、葉綠素 等脂溶性雜質(zhì)。2.用炭粉吸附、酚/水洗脫的方法進(jìn)行苷類成分的精制（二）沸水法（二）沸水法適用于苷類和水溶性苷元的提取。注意：（1）酶的活性；（2）糊化和變質(zhì)；（3）加等量濃醇使蛋白質(zhì)、多糖等水溶性雜質(zhì)去除。（三）堿提取酸沉淀法（三）堿提取酸沉淀法常

14、用堿的種類：常用堿的種類：稀稀NaOH石灰水石灰水含含5%NaOH稀乙醇稀乙醇注意注意：（1 1）堿水濃度不宜過(guò)）堿水濃度不宜過(guò)高高否則易破壞母核；否則易破壞母核；（2 2）酸化時(shí)酸性不能酸化時(shí)酸性不能太強(qiáng)，否則易生成太強(qiáng)，否則易生成 鹽，使得率下降。鹽，使得率下降。（一）柱色譜法（一）柱色譜法1 1硅膠柱色譜硅膠柱色譜2 2聚酰胺柱色譜聚酰胺柱色譜3 3葡聚糖凝膠柱色葡聚糖凝膠柱色譜譜4 4 氧化鋁色譜氧化鋁色譜5 5 高相液相色譜高相液相色譜1 1硅膠柱色譜（依極性差異進(jìn)行分離）硅膠柱色譜（依極性差異進(jìn)行分離）非極性與極性化合物都能用，適于分離黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮類、二氫黃酮醇類、異

15、黃酮類和黃酮苷元類2 2、聚酰胺柱色譜聚酰胺柱色譜（1）基本原理雙重色譜雙重色譜氫鍵吸附氫鍵吸附相似相溶相似相溶水溶性相差不大水溶性相差不大水溶性相差較大水溶性相差較大（2）洗脫規(guī)律叁糖苷雙糖苷單糖苷苷元。母核酚羥基數(shù)目越多，洗脫越慢；酚羥基數(shù)目相同，易成分子內(nèi)氫鍵者吸附弱。異黃酮二氫黃酮醇黃酮黃酮醇。芳香核多，共軛程度高，難洗脫。 洗脫規(guī)律洗脫規(guī)律：與吸附規(guī)律正好相反，即吸附能力越強(qiáng)，：與吸附規(guī)律正好相反，即吸附能力越強(qiáng)， 越難洗脫（薄層越難洗脫（薄層Rf越小）越?。?（2） “雙重色譜雙重色譜”原理原理主要用于解釋黃酮苷與苷元聚酰胺色譜現(xiàn)象主要用于解釋黃酮苷與苷元聚酰胺色譜現(xiàn)象 正相色譜正

16、相色譜 反相色譜反相色譜聚酰胺：極性固定相（極性酰胺基團(tuán)） 非極性固定相（非極性脂肪鏈）洗脫劑：有機(jī)溶劑（氯仿-甲醇，極性?。?含水溶劑（甲醇-水，極性大） 先洗脫：游離黃酮（苷元，極性?。?苷（極性大）（柱色譜分離） Rf值： 苷元 苷 苷元 雙糖苷單糖苷苷元OOOHOHHOOHOHOH3,5,7,3,4,5-六羥基黃酮六羥基黃酮3 3、葡聚糖凝膠色譜法、葡聚糖凝膠色譜法（1）基本原理雙重屬性雙重屬性吸附屬性吸附屬性分子篩屬性分子篩屬性分子量相差不大分子量相差不大分子量相差較大分子量相差較大類型：類型： Sephadex G型（親水性凝膠）型（親水性凝膠） Sephadex LH-20型型

17、(羥丙基葡聚糖凝膠，水及極性有機(jī)溶劑均可羥丙基葡聚糖凝膠，水及極性有機(jī)溶劑均可) 原理：原理： “雙重色譜雙重色譜”原理原理 分子篩作用 吸附原理 （按分子大小分離） （按極性大小分離） 應(yīng)用應(yīng)用：黃酮苷及苷元的分離：黃酮苷及苷元的分離 苷元的分離苷元的分離 洗脫順序洗脫順序：分子由大到小被洗脫 極性由小到大被洗脫叁糖苷 雙糖苷 單糖苷 苷元 1-OH 2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黃酮 常用洗脫劑：堿水（0.1mol / L NH3.H2O）；鹽水（0.5mol / L NaCl）； 醇或醇水不同比例。例例： 黃酮類化合物在黃酮類化合物在Sephadex-LH20(Sephadex

18、-LH20(甲醇甲醇) )上的上的VeVe/Vo/Vo黃酮類化合物黃酮類化合物取代圖式取代圖式Ve/ Vo芹菜素芹菜素木犀草素木犀草素槲皮素槲皮素楊梅素楊梅素山奈酚山奈酚-3-半乳糖鼠李糖半乳糖鼠李糖-7-鼠李糖苷鼠李糖苷槲皮素槲皮素-3-蕓香糖苷蕓香糖苷槲皮素槲皮素-3-鼠李糖苷鼠李糖苷5,7,4-三三OH5,7,3,4-四四OH3,5,7,3,4-五五OH3,5,7,3,4,5-六六OH三糖苷三糖苷雙糖苷雙糖苷單糖苷單糖苷5.36.38.39.23.34.04.9注：Ve為洗脫樣品時(shí)需要的溶劑總量或洗脫體積；Vo為柱子的空體積。Ve/Vo數(shù)值越小，說(shuō)明化合物越容易被洗脫下來(lái)。 分離依據(jù)：游

19、離黃酮類化合物的酸性差異（見(jiàn)黃酮酸性規(guī)律） 分離工藝：總游離黃酮的乙醚液 依次以依次以5%NaHCO3 、5%Na2CO3、0.2 % NaOH、 4% NaOH萃取萃取 5%NaHCO3液液 5%Na2CO3液液 0.2 % NaOH液液 4% NaOH液液 母液母液 酸化酸化 （脂溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)）7，4-OH黃酮黃酮 7或或4-OH黃酮黃酮 一般一般-OH黃酮黃酮 5-OH黃酮黃酮（二）（二）pH梯度萃取法梯度萃取法 根據(jù)具有鄰二酚羥基的黃酮與硼酸絡(luò)合，生成物易溶于水的性質(zhì)與其它類型黃酮分離。 通常在不與水混溶的有機(jī)溶劑如乙醚中，用硼酸液萃取，水相即為鄰二酚羥基類黃酮。（四）系統(tǒng)溶

20、劑萃取法 依據(jù)極性與相應(yīng)溶解性的差異分離（五）聚酰胺吸附法 依據(jù)酚羥基與聚酰胺的吸附與不含酚羥基的成分分離（三）（三）硼酸絡(luò)合法第四節(jié)第四節(jié) 黃酮類化合物的黃酮類化合物的檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定檢識(shí)與結(jié)構(gòu)鑒定色譜法色譜法紫外及可見(jiàn)光譜氫核磁共振譜碳核磁共振譜質(zhì)譜二、紫外及可見(jiàn)光譜法二、紫外及可見(jiàn)光譜法OO帶帶（240-280 nm）由苯甲?；到y(tǒng)引起由苯甲酰基系統(tǒng)引起反應(yīng)反應(yīng)A環(huán)取代情況環(huán)取代情況 帶帶（300-380nm）由）由桂皮?；到y(tǒng)引起反應(yīng)桂皮?；到y(tǒng)引起反應(yīng)B環(huán)取代情況環(huán)取代情況 (一) 黃酮類化合物在甲醇溶液中的UV光譜 判斷黃酮類化合物類型1 .1 .黃酮、黃

21、酮醇類黃酮、黃酮醇類 峰帶峰帶I I和和IIII強(qiáng)度相似強(qiáng)度相似nm帶I ：黃酮類 304350nm 黃酮醇（3-OH被取代）328357nm 黃酮醇（3-OH游離） 352385nm帶II ： 240285nmIII木犀草素和槲皮素在甲醇溶液中的木犀草素和槲皮素在甲醇溶液中的UVUV光譜數(shù)據(jù)光譜數(shù)據(jù)OOOHOHOHOH木犀草素木犀草素MeOHMeOH 253 253 （帶（帶II II） 349 349 （帶（帶I I）OOOHOHOHOHOH槲皮素槲皮素MeOHMeOH 256 256 （帶（帶II II） 371371（帶（帶I I）2.2.查耳酮、橙酮類查耳酮、橙酮類 帶帶I I 強(qiáng)，

22、帶強(qiáng)，帶II II 次強(qiáng)峰次強(qiáng)峰nmIII 帶帶I 帶帶II 查耳酮 340390nm(有裂分) 220270nm橙酮 370430nm(34個(gè)峰)OCHO12346O23456112463.異黃酮、二氫黃酮(醇)類 帶I 弱，帶II 強(qiáng)峰只有A-環(huán)苯甲酰系統(tǒng)，帶II 為主峰帶II 異黃酮 245270nm 二氫黃酮（醇） 270295nm帶I 肩峰IIInm異黃酮和二氫黃酮在甲醇溶液中的異黃酮和二氫黃酮在甲醇溶液中的UVUV光譜光譜OOOH7-羥基異黃酮羥基異黃酮OOHOHO4，7-二羥基二氫黃酮二羥基二氫黃酮200300400500 總結(jié)總結(jié)二氫黃酮二氫黃酮 黃酮醇黃酮醇黃酮黃酮查耳酮查耳

23、酮橙酮橙酮異黃酮異黃酮 200300400(nm)加入診斷試劑：加入診斷試劑： 甲醇鈉：強(qiáng)堿，所有酚羥基解離甲醇鈉：強(qiáng)堿，所有酚羥基解離 醋酸鈉：堿性弱，酸性強(qiáng)的酚羥基解離醋酸鈉：堿性弱，酸性強(qiáng)的酚羥基解離 醋酸鈉硼酸：鄰二酚羥基絡(luò)合醋酸鈉硼酸：鄰二酚羥基絡(luò)合 三氯化鋁：三氯化鋁：3-OH3-OH，4-4-羰基；羰基；5-OH5-OH，4-4-羰基絡(luò)合鄰二羰基絡(luò)合鄰二酚羥基酚羥基上述相應(yīng)吸收峰紅移上述相應(yīng)吸收峰紅移（二）加入診斷試劑后引起的位移及其（二）加入診斷試劑后引起的位移及其在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的意義在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的意義常見(jiàn)的診斷試劑常見(jiàn)的診斷試劑NaOMeNaOAc（熔融/未熔融）NaOAc/H

24、3BO3AlCl3AlCl3 /HCl診斷試劑診斷試劑位移規(guī)律位移規(guī)律歸屬歸屬NaOMe帶帶I紅移紅移40-60nm，強(qiáng)度不降，強(qiáng)度不降帶帶I紅移紅移50-60nm，強(qiáng)度下降，強(qiáng)度下降示有示有 -OH示有示有 -OH，但，但4-OHNaOAc帶帶II紅移紅移5-20nm示有示有 -OHNaOAc/H3BO3帶帶I紅移紅移12-30nm帶帶II紅移紅移5-10nm示示 環(huán)有鄰二酚羥基環(huán)有鄰二酚羥基示示 環(huán)有鄰二酚羥基（不環(huán)有鄰二酚羥基（不包括包括5,6-鄰二酚羥基）鄰二酚羥基）AlCl3及及AlCl3/HClAlCl3/HCl譜圖譜圖= AlCl3譜圖譜圖AlCl3/HCl譜圖譜圖AlCl3譜圖

25、譜圖帶帶I藍(lán)移藍(lán)移30-40nm帶帶I藍(lán)移藍(lán)移50-65nm示示鄰二酚羥基鄰二酚羥基示示鄰二酚羥基鄰二酚羥基示示 環(huán)有鄰二酚羥基環(huán)有鄰二酚羥基示示 、 環(huán)均可能有鄰二環(huán)均可能有鄰二酚羥基酚羥基診斷試劑診斷試劑位移規(guī)律位移規(guī)律歸屬歸屬AlCl3及及AlCl3/HClAlCl3/HCl譜圖= MeOH譜圖AlCl3/HCl譜圖MeOH譜圖示無(wú) -OH及或5-OH示可能有 -及或5-OH帶I紅移35-55nm示只有 -OH帶I紅移60nm帶I紅移50-60nm帶I僅紅移17-20nm示只有 -OH示可能有 -及5-OH示除5-OH外，尚有6-含氧取代診斷試劑診斷試劑位移規(guī)律位移規(guī)律歸屬歸屬NaOAc

26、異黃酮 帶II紅移6-20nm二氫黃酮（醇）帶II紅移34-37nm，帶II紅移51-58nm示有 -OH示有-二OH示有 -OHAlCl3/HClAlCl3/HCl譜圖與甲醇中的譜圖比較異黃酮 帶II紅移10-14nm二氫黃酮（醇）帶II紅移20-26nm示5-OH示有5-OH三、黃酮類化合物的三、黃酮類化合物的1 1HNMRHNMR譜特征譜特征 B環(huán)質(zhì)環(huán)質(zhì)子信號(hào)子信號(hào)C環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子信號(hào)信號(hào)A環(huán)質(zhì)環(huán)質(zhì)子信號(hào)子信號(hào)（一）（一）A環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子 ()1) 5，7-二羥基取代：H-6: 5.706.90ppm(d,J=2.5Hz)H-8: 5.706.90ppm(d,J=2.5Hz)H-6通常比H-

27、8位于較高磁場(chǎng)區(qū)。OOHOHHHO（二）（二）B B環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子 6.57.9ppm左右左右 （三）（三）C C環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子1、黃酮類： H-3，s，尖峰， 6.30 ppm；OOH2、異黃酮類：H-2，單峰（s） ，7.607.80ppmOOH3、二氫黃酮：H-2，dd峰，J=5，11Hz，5.20ppm; H-3，兩組dd峰，偶合常數(shù)分別為5，17Hz和 11，17Hz，中心位于2.80 ppmOOHHH黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)解析 AlCl3/HCl譜圖= AlCl3譜圖1 1H-NMR:H-NMR: OOOHOHHOOOOHOHOHOH356784P206P206黃色晶體HCl-Mg反應(yīng)（+

28、）-Molish反應(yīng)（+）-化合物A經(jīng)酸水解得到化合物B 和葡萄糖- ;ZrOCl2反應(yīng)黃色，加枸櫞酸后黃色退去-SrCl2/NH3 反應(yīng)（-）-NaOMe帶I（368nm）紅移35nm-NaOAc帶II（267nm）未發(fā)生紅移-再結(jié)合上述解析說(shuō)明化合物A有游離，。NaOMe帶I（392nm）紅移-;NaOAc帶II（274nm）發(fā)生紅移（紅移了7nm）-AlCl3/HCl及AlCl3吸收峰-同時(shí)NaOAc/H3BO3的吸收峰-再結(jié)合上述解析得知苷元化合物B中有游離5-OH、7-OH、4-OH，無(wú)3-OH。說(shuō)明化合物B通過(guò)7-OH與葡萄糖相連形成化合物再結(jié)合氫譜數(shù)據(jù)可推斷：OOOGluOHOHOOHOOHOH化合物A化合物B（2）1H-NMR d：6.20：6-H（間位偶合，與8-H發(fā)生偶合）6.50：8-H（間位偶合，與6-H發(fā)生偶合）6.30：3-H（單峰，無(wú)偶合）7.75：2，6-H（J=8.5Hz，與3，5-H發(fā)生偶合）6.90：3，5-H（J=8.5Hz，與2，6-H發(fā)生偶合）填空題填空題1、確定黃酮化合物結(jié)構(gòu)具有5-OH的方法有（ ）、（ ）、（ ）。 2、黃酮類化合物因其結(jié)構(gòu)的不同而在水中的溶解度不同。