普通微生物學(xué)--周德慶--第三版-復(fù)習(xí)重點(diǎn)(共14頁)_第1頁
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文檔簡介

1、普通微生物學(xué)周德慶第三版考試復(fù)習(xí)重點(diǎn)2013-2014海洋大學(xué)生技和環(huán)科緒論微生物: 微生物是形體微小、單細(xì)胞或個(gè)體結(jié)構(gòu)簡單的多細(xì)胞、或無細(xì)胞結(jié)構(gòu),用肉眼看不見或看不清的低等生物的總稱。微生物學(xué): 微生物學(xué)是一門在細(xì)胞、分子或群體水平上研究微生物的形態(tài)構(gòu)造、生理代謝、遺傳變異、生態(tài)分布和分類進(jìn)化等生命活動(dòng)基本規(guī)律,并將其應(yīng)用于工業(yè)發(fā)酵、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物工程和環(huán)境保護(hù)等實(shí)踐領(lǐng)域的科學(xué),其根本任務(wù)是發(fā)掘、利用、改善和保護(hù)有益微生物,控制、消滅或改造有害微生物,為人類社會(huì)的進(jìn)步服務(wù)??潞帐戏▌t:用瓊脂配制對(duì)分離細(xì)菌十分有效的固體培養(yǎng)基(須先滅菌),以劃線方式進(jìn)行樣品稀釋,從而輕而易舉地在瓊脂平板上獲得

2、某一微生物的純種培養(yǎng)。3、微生物共有哪五大共性?其中最基本的是哪一個(gè)?為什么?五大共性:體積小,面積大;吸收多,轉(zhuǎn)化快;生長旺,繁殖快;適應(yīng)強(qiáng),易變異;分布廣,種類多。其中最基本的是體積小,面積大;原因:由于微生物是一個(gè)如此突出的小體積大面積系統(tǒng),從而賦予它們具有不同于一切大生物的五大共性,因?yàn)橐粋€(gè)小體積大面積系統(tǒng),必然有一個(gè)巨大的營養(yǎng)物質(zhì)吸收面、代謝廢物的排泄面和環(huán)境信息的交換面,并由此而產(chǎn)生其余4個(gè)共性。8.試述微生物的多樣性。 答:物種的多樣性,.生理代謝類型的多樣性,.代謝產(chǎn)物的多樣性,遺傳基因的多樣性生態(tài)類型的多樣性第一章 原核生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能革蘭氏染色法:肽聚糖:是

3、真細(xì)菌細(xì)胞壁中特有成分,由N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡萄胺組成。缺壁細(xì)菌:在自然界或在實(shí)驗(yàn)中某些細(xì)菌進(jìn)行自發(fā)突變,不能合成胞壁。主要包括L型細(xì)菌、球狀體、支原體和原生質(zhì)體。L型細(xì)菌:在實(shí)驗(yàn)狀態(tài)或宿主體內(nèi)發(fā)生自發(fā)突變形成遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺損菌株。異染粒:可用墨藍(lán)或TTC染成紫色,是無級(jí)機(jī)磷酸的聚合物。羧酶體(羧化體):存在于一些自養(yǎng)菌細(xì)胞內(nèi)的多角體或六角形內(nèi)含物。糖被:包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的透明膠狀物質(zhì)。莢膜:是糖被的一種形式,含水量高,經(jīng)脫水和特殊染色后可在光鏡下看到。問圖示G+細(xì)菌和G-細(xì)菌細(xì)胞壁的主要構(gòu)造,并簡要說明其異同。 答:G+細(xì)菌的細(xì)胞壁厚度大,主要含肽聚糖和磷壁酸

4、。肽聚糖由肽(肽橋和四肽尾)和聚糖(N-乙酰葡萄胺和N-乙酰胞壁酸)組成,磷壁酸主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。G-細(xì)菌的細(xì)胞壁厚度較薄,層次較多。其肽聚糖藏在外膜脂多糖層內(nèi),外膜為G-細(xì)菌的細(xì)胞壁特有構(gòu)造。在G-細(xì)菌中,其外膜與細(xì)胞膜間的狹窄空間成為周質(zhì)空間。問革蘭氏染色機(jī)制? 答:步驟:結(jié)晶紫染色、碘液媒染、95%的乙醇脫色、紅色染料復(fù)染。 機(jī)制:由于其細(xì)胞壁化學(xué)成分不同,導(dǎo)致脫色能力不同。G+由于細(xì)胞壁后,肽聚糖交聯(lián)致密,遇脫色劑乙醇(或丙酮)處理時(shí),因失水而使網(wǎng)孔縮小,再加上不含類脂,故乙醇處理不會(huì)溶出縫隙,因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物留在壁內(nèi),保持其紫色;G-細(xì)菌細(xì)胞壁薄,外膜層類脂含

5、量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差,遇脫色劑后,以類脂為主的外膜溶解,這時(shí)薄而松的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物溶出,褪為無色。這時(shí)再經(jīng)紅色染料最終染為紅色。問什么是菌落?討論微生物的細(xì)胞形態(tài)與菌落形態(tài)間的相關(guān)性及其內(nèi)在原因。 答:菌落是指單個(gè)細(xì)胞或多數(shù)同種細(xì)胞在固體培養(yǎng)基表面,處于事宜的條件下,迅速繁殖并形成細(xì)胞堆。第二章 真核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能單細(xì)胞蛋白:用許多工農(nóng)業(yè)廢料人工培養(yǎng)的微生物菌體。溶酶體:單層膜細(xì)胞器,主要功能是細(xì)胞內(nèi)的消化作用,消化自身死亡蛋白質(zhì)和外來異物。酵母菌:泛指一類能發(fā)酵糖類的各種單細(xì)胞真菌,其細(xì)胞壁呈三明治狀,外層為甘露聚糖,內(nèi)層為葡聚糖。酵母菌的繁殖:(無性)芽殖

6、是最常見的方式,還有裂殖和產(chǎn)無性孢子;(有性)形成子囊和子囊孢子。假菌絲:芽殖過程中,如果子細(xì)胞與母細(xì)胞以狹小的面積相連,不立即分離,這種偶節(jié)狀的細(xì)胞串就成為假菌絲。如果其間的橫隔面積與細(xì)胞直徑一致,則這種竹節(jié)狀的細(xì)胞串就稱為真菌絲。酵母菌是生活史:營養(yǎng)體既能以單倍體又能以二倍體形式存在;營養(yǎng)體只能以單倍體的形式存在;營養(yǎng)體只能以二倍體的形式存在。霉菌(絲狀真菌):指那些菌絲體較發(fā)達(dá)又不產(chǎn)生大型肉質(zhì)子實(shí)體的真菌。在自然界中扮演分解者的角色。其營養(yǎng)體的基本單位是菌絲(營養(yǎng)菌絲體和氣生菌絲體)。營養(yǎng)菌絲體的特化:假根(固著吸收養(yǎng)料的功能)、匍匐菌絲、吸器(只在宿主細(xì)胞間隙間蔓延的營養(yǎng)菌絲上分化的短

7、枝,吸取宿主細(xì)胞內(nèi)養(yǎng)料而不使其致死)、附著包(侵入宿主角質(zhì)表皮而吸取養(yǎng)料)、附著枝、菌核(不良條件下可保持?jǐn)?shù)年生命力)、菌所(促進(jìn)菌體蔓延和抵御不良環(huán)境)、菌環(huán)和菌網(wǎng)。氣生菌絲的特化形態(tài)(各種子實(shí)體):結(jié)構(gòu)簡單的分生孢子頭,結(jié)構(gòu)負(fù)復(fù)雜的分生孢子盤、分生孢子器和分生孢子座。子實(shí)體:可產(chǎn)生有性或無性孢子,有一定形狀構(gòu)造的任何菌絲體組織。鎖狀聯(lián)合:為兩核細(xì)胞形成分裂產(chǎn)生雙核菌絲體的一種特有形式。常發(fā)生在菌絲頂端,開始時(shí)在細(xì)胞上產(chǎn)生突起,并向下彎曲,與下部細(xì)胞鏈接,形如鎖狀。問比較真菌孢子的類型、主要特點(diǎn)和菌落特征?游動(dòng)孢子孢囊孢子分生孢子節(jié)孢子厚垣孢子芽胞子擲孢子卵孢子接合孢子子囊孢子擔(dān)孢子無性孢子

8、無性孢子無性孢子無性孢子無性孢子無性孢子無性孢子有性孢子有性孢子有性孢子有性孢子染色體n染色體n染色體n染色體n染色體n染色體n染色體n染色體2n染色體2n染色體n染色體n問比較四大類微生物的細(xì)胞形態(tài)和菌落特征?單細(xì)胞微生物菌絲狀微生物細(xì)菌酵母菌放線菌霉菌菌落含水狀態(tài)很濕或較濕較濕干燥或較干燥干燥外觀性狀小而突凸或大而平坦大而凸起小而緊密大而疏松或大而致密細(xì)胞相互關(guān)系單個(gè)分散或有一定排列單個(gè)分散或假菌絲絲狀交織絲狀交織形態(tài)特征小而均勻,個(gè)別有芽孢大而分化細(xì)而均勻粗而分化第三章 病毒和亞病毒因子最大的病毒(似菌病毒)、最小病毒(豬圓環(huán)病毒和長尾鸚鵡喙羽病毒);病毒的群體形態(tài):在植物細(xì)胞中(包含體

9、),在植物葉片上(枯斑),在動(dòng)物細(xì)胞中(空斑),噬菌體在菌苔上形成的負(fù)菌落(即為噬菌斑)。動(dòng)物病毒以線狀的dsDNA和ssRNA為多,植物病毒以線狀ssRNA為多,噬菌體以線狀dsDNA多。噬菌體:即原核生物病毒,包括噬細(xì)菌體,噬放線菌體、噬藍(lán)細(xì)菌體。其繁殖分為5個(gè)階段:吸附、侵入、增殖、成熟(裝配)、裂解(釋放)。凡在短時(shí)間內(nèi)連續(xù)完成以上5個(gè)階段而實(shí)現(xiàn)繁殖的噬菌體稱為烈性噬菌體。烈性噬菌體所經(jīng)歷的繁殖過程稱為裂解性周期。自外裂解:大量噬菌體吸附在同于宿主細(xì)胞表面并釋放眾多的溶菌酶,最終因外在原因而導(dǎo)致細(xì)胞裂解。平均每一宿主細(xì)胞裂解后產(chǎn)生的子代噬菌體數(shù)稱為裂解量。效價(jià)(噬菌斑形成單位):表示沒

10、ml試樣中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數(shù)。測(cè)定效價(jià)的方法有:液體稀釋法、玻片快速測(cè)定法和單層平板法,較常用且精確的方法是雙層平板法,上層平板(1.0%瓊脂培養(yǎng)基3ml,對(duì)數(shù)期菌液0.2ml,噬菌體試樣0.1ml混勻),下層平板(2%的瓊脂培養(yǎng)基7-8ml),然后在37培養(yǎng)10小時(shí),計(jì)數(shù)噬菌斑。優(yōu)點(diǎn):底層培養(yǎng)基可彌補(bǔ)培養(yǎng)皿底部不平的缺陷,可使所有的噬菌斑都位于近乎同一平面,上層培養(yǎng)基較稀,可形成形態(tài)較大、特征較明顯以及便于觀察和計(jì)數(shù)的噬菌斑。一步生長曲線:定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線。分為潛伏期、裂解期和平穩(wěn)期。溶源性:溫和噬菌體的侵入并不引起宿主細(xì)胞裂解。凡能引起溶源性的噬菌體稱溫和噬

11、菌體,其存在形式有3種(游離態(tài)、整合態(tài)【整合在宿主基因組上的溫和噬菌體的核酸叫前噬菌體?!亢蜖I養(yǎng)態(tài)),其宿主稱為溶源菌。溶源性周期:整合到到宿主基因組上的噬菌體核酸。問圖示并簡介病毒的典型構(gòu)造?問病毒粒有哪幾種?各種對(duì)稱體制又有幾種特殊外形?各舉一例。 答:病毒粒專指成熟、結(jié)構(gòu)完整的有感染性的單個(gè)病毒。基本成分是核酸和蛋白質(zhì),核酸位于中心,成為基因組或核心。蛋白質(zhì)包圍在核心周圍,形成了衣殼。其對(duì)稱體制有三種,分別是螺旋對(duì)稱、二十面體對(duì)稱和復(fù)合對(duì)稱,其代表分別為煙草花葉病毒(TMV)、腺病毒和T偶數(shù)噬菌體(T2、T4和T6)。第四章 微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基營養(yǎng):生物體從外部環(huán)境中攝取對(duì)生命活動(dòng)必需

12、的能量和物質(zhì)。具有營養(yǎng)功能的物質(zhì)稱為營養(yǎng)物。碳源:一切能滿足微生物生長繁殖所需的碳元素的營養(yǎng)源。微生物能利用的碳源范圍稱為碳源譜。能源:能為微生物生命活動(dòng)提供最初能量來源的營養(yǎng)物或輻射能。單功能營養(yǎng)物:在微生物生長、繁殖過程中,只能微生物提供一種營養(yǎng)物的物質(zhì)。雙功能營養(yǎng)物:在微生物生長、繁殖過程中,能為微生物提供兩種營養(yǎng)物的物質(zhì)。生長因子:一類對(duì)調(diào)節(jié)微生物正常代謝所必需,但不能用簡單的碳、氮源自行合成的微量有機(jī)物。狹義的生長因子僅指維生素,廣義的則指維生素、堿基、卟啉、甾醇、胺類、C4-C6的分支或直鏈脂肪酸。營養(yǎng)類型能源H供體基本碳源實(shí)例光能無機(jī)營養(yǎng)性(光能自養(yǎng)型)光無機(jī)物CO2藍(lán)細(xì)菌、藻類

13、光能有機(jī)營養(yǎng)性(光能異養(yǎng)型)光有機(jī)物CO2紅螺菌科的細(xì)菌化能無機(jī)營養(yǎng)型(化能自養(yǎng)型)無機(jī)物無機(jī)物CO2硝化細(xì)菌、硫細(xì)菌化能有機(jī)營養(yǎng)型(化能異養(yǎng)型)有機(jī)物有機(jī)物有機(jī)物多數(shù)原核生物、真菌微生物的營養(yǎng)類型:營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式:單純擴(kuò)散(不需載體和能量,不逆濃度運(yùn)輸)、促進(jìn)擴(kuò)散(需載體不需能量,載體蛋白與物質(zhì)一一對(duì)應(yīng),不逆濃度運(yùn))、主動(dòng)運(yùn)送(需能量和載體,逆濃度運(yùn)輸)、基團(tuán)移位(需載體和能量,逆濃度運(yùn)輸,運(yùn)送后物質(zhì)發(fā)生變化)。培養(yǎng)基:由人工配制的、含有6大類營養(yǎng)要素、適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝物用的混合營養(yǎng)料。其配制的4個(gè)原則為:目的明確、營養(yǎng)協(xié)調(diào)、理化適宜和經(jīng)濟(jì)節(jié)約。配制的4種方法為:生態(tài)模擬

14、、借鑒文獻(xiàn)、精心設(shè)計(jì)和試驗(yàn)比較。按培養(yǎng)基成分分為:天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基。按物理狀態(tài)分為:液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基。按對(duì)微生物的功能分為:選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基(EMB培養(yǎng)基是鑒別大腸桿菌的)第五章 微生物的新陳代謝生物氧化:發(fā)生在活細(xì)胞內(nèi)的一系列產(chǎn)能性氧化反應(yīng)的總稱。包括物質(zhì)與氧結(jié)合、脫氫和失電子3種形式;呼吸、無氧呼吸和發(fā)酵3種類型;產(chǎn)ATP、產(chǎn)還原力H和產(chǎn)小分子中間代謝產(chǎn)物3個(gè)功能;脫氫、遞氫和受氫3個(gè)階段。底物脫氫的4條途徑:ENP途徑(在無氧條件下,1分子葡萄糖分解產(chǎn)生2分子丙酮酸2分子還原型輔酶2分子ATP)、HMP途徑(1分子6-磷酸葡萄糖產(chǎn)生

15、12分子的還原型輔酶)、ED(微生物所特有,缺乏EMP途徑的微生物經(jīng)4步反應(yīng)就可以形成EMP途徑形成的丙酮酸)途徑、TCA循環(huán)(有氧條件下,EMP途徑產(chǎn)生的丙酮酸徹底分解產(chǎn)生大量能量)。呼吸:底物脫氫后經(jīng)電子傳遞鏈(也叫呼吸鏈)最終被外源分子氧接受,產(chǎn)生水并釋放出ATP形式的能量。發(fā)酵:指在無氧外源氫受體的條件下,底物脫氫后所產(chǎn)生的還原力氫未經(jīng)呼吸鏈傳遞而直接交給某一內(nèi)源性中間代謝產(chǎn)物接受,以實(shí)現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類生物化學(xué)反應(yīng)。同型乳酸發(fā)酵:葡萄糖經(jīng)EMP途徑產(chǎn)生丙酮酸,丙酮酸只單純產(chǎn)生2分子乳酸。Stickland反應(yīng):少數(shù)厭氧菌兼做碳源、能源和氮源,通過一種氨基酸做氫供體另一種氨基酸

16、做氫受體的獨(dú)特產(chǎn)能方式?!皃ark”核苷酸:1、在細(xì)胞質(zhì)中合成,有葡萄糖合成N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸,N乙酰胞壁酸合成“Park”核苷酸,即UDP-N-乙酰胞壁酸五肽,它的合成分為4步,都需UDP作糖載體,另外,還合成D-丙氨酰-D-丙氨酸的2步反應(yīng),且他們都可被環(huán)絲氨酸所抑制。2、在細(xì)胞膜中合成,由Park核苷酸合成肽聚糖單體是在細(xì)胞膜上進(jìn)行的。3、在細(xì)胞膜外合成。細(xì)菌萜醇:是一種含11個(gè)異戊二烯單位的C35類異戊二烯醇,它可通過2個(gè)磷酸基與N-乙酰胞壁酸分子相接,使糖的中間代謝物呈現(xiàn)出很強(qiáng)的疏水性,從而使它們能順利通過疏水性很強(qiáng)的細(xì)胞膜而轉(zhuǎn)移到膜外。問比較呼吸、無氧呼吸和發(fā)酵的特點(diǎn)?

17、比較項(xiàng)目呼吸無氧呼吸發(fā)酵遞氫體呼吸鏈呼吸鏈無氫受體O2無機(jī)或有機(jī)氧化物中間代謝無終產(chǎn)物H2O還原后的無機(jī)或有機(jī)氧化物中間代謝物產(chǎn)能機(jī)制氧化磷酸化氧化磷酸化底物水平磷酸化產(chǎn)能效率高中低問青霉素為何只能抑制代謝旺盛的細(xì)菌?其抑制機(jī)制如何? 答:青霉素是抑制細(xì)胞壁的形成,代謝旺盛的細(xì)胞,細(xì)胞分裂頻率也會(huì)比其他細(xì)胞快。隨著細(xì)胞分裂和生長,數(shù)量越來越多,總體積和細(xì)胞壁面積也越來越大,但是青霉素阻礙細(xì)胞壁形成,導(dǎo)致一部分細(xì)胞無法形成完整的細(xì)胞壁而破裂。第六章 微生物的生長及其控制平板菌落計(jì)數(shù)法:可用澆注平板法、涂布平板法等進(jìn)行。適用各種好氧菌或厭氧菌。操作為把一定量的菌樣通過澆注瓊脂培養(yǎng)基或瓊脂平板上涂布

18、的方法,讓其內(nèi)的微生物單細(xì)胞一一分散在瓊脂平板上,待培養(yǎng)后每一活細(xì)胞就形成一個(gè)單菌落即菌落形成單位(cfu)生長速率常數(shù):每小時(shí)分裂的次數(shù)(R)。連續(xù)培養(yǎng):是指向培養(yǎng)基容器中連續(xù)加新鮮培養(yǎng)基,使微生物的液體培養(yǎng)物長期維持穩(wěn)定、高速生長狀態(tài)的一種溢流培養(yǎng)技術(shù),又叫開放培養(yǎng)。生長溫度3基點(diǎn):任何微生物生長溫度盡管有寬有窄,但總有最低生長溫度、最適生長溫度和最高生長溫度。滅菌:使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失生長繁殖的措施。消毒:僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體或動(dòng)植物有害的病原菌,而被消毒的對(duì)象基本無害。問微生物的生長于繁殖間的關(guān)系如何?研究它們的生長繁殖有和理論與實(shí)踐意義?問平板菌落計(jì)數(shù)法有

19、何優(yōu)缺點(diǎn)?試對(duì)澆注平板法和涂布平板法做一比較?問延滯期有何特點(diǎn)?實(shí)踐上如何縮短它? 答:特點(diǎn)為1、生長速率常數(shù)為零;2、細(xì)胞變大或增長;3、RNA尤其是rRNA增加;4、合成十分活躍(酶類、ATP、核糖體);5、對(duì)外界不良環(huán)境(抗生素、溫度、理化因素等)敏感??s短的方法有4:接種齡,接種物或種子的生長年齡,實(shí)驗(yàn)證明如果用指數(shù)期接種齡的種子接種,子代培養(yǎng)物的延滯期就短,反之如果用延滯期或衰亡期的種子接種,則子代培養(yǎng)物的延滯期就長。接種量,一般來說,接種量大,則延滯期就短,反之則長。工業(yè)上,種子:發(fā)酵培養(yǎng)基=1:10,V/V來縮短延滯期。培養(yǎng)基成分,營養(yǎng)單調(diào)的培養(yǎng)基比營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基短。種子損傷度

20、,損傷的種子恢復(fù)需要時(shí)間。問指數(shù)期有何特點(diǎn)?處于指數(shù)期的微生物有何用? 答:特點(diǎn):生長速率R最大細(xì)菌平衡生長酶系活躍,代謝旺盛。影響因素:菌種營養(yǎng)成分營養(yǎng)物濃度培養(yǎng)基溫度。用處:因其生理代謝較一致、細(xì)胞各成分平衡增長和生長速率恒定等優(yōu)點(diǎn),可用作代謝、生理和酶學(xué)等研究的良好材料,用作用做種子縮短延滯期的良好材料。問穩(wěn)定期有和特點(diǎn)?穩(wěn)定期到來的原因有哪些? 答:R=0,特: 開始積累脂肪、聚糖原等內(nèi)含物芽孢桿菌開始產(chǎn)生芽孢開始以此生代謝產(chǎn)物作前體,合成抗生素。此期到來的原因:營養(yǎng)物耗盡營養(yǎng)物比例失調(diào)酸、醇、毒素、H2O2等有害代謝物的積累PH、氧化還原電勢(shì)等理化條件不適宜。問什么是高密度培養(yǎng)?如何

21、保證好氧菌或兼性厭氧菌獲得高密度生長? 答:也加高密度發(fā)酵,微生物在液體培養(yǎng)基條件下細(xì)胞群體密度超過常規(guī)10倍以上時(shí)的生長狀態(tài)或培養(yǎng)技術(shù)。第七章 微生物的遺傳變異和育種遺傳型:又叫(基因型),指某一生物個(gè)體所含有的全部遺傳因子(基因組)所攜帶的遺傳信息。表型:某一生物外表特征和內(nèi)在特性的總和。(表型=遺傳型+環(huán)境條件)變異:某一生物在外因或內(nèi)因的作用下所引起的遺傳物質(zhì)節(jié)后或數(shù)量的改變。飾變:外表的修飾性改變。證明DNA是遺傳物質(zhì)3個(gè)經(jīng)典的實(shí)驗(yàn):經(jīng)典轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)、噬菌體侵染實(shí)驗(yàn)和植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)。遺傳物質(zhì)在生物細(xì)胞內(nèi)存在的部位和形式:細(xì)胞水平、細(xì)胞核水平、染色體水平、核核酸水平、基因水平、密碼子水

22、平和核苷酸水平。質(zhì)粒:游離于原核生物的核基因組外,具有復(fù)制能力的小型環(huán)裝dsDAN分子。質(zhì)粒的分離與鑒定:細(xì)胞的裂解、蛋白質(zhì)和RNA的去除、質(zhì)粒DNA與染色體DNA分離。典型質(zhì)粒:F質(zhì)粒(性因子)、R質(zhì)粒(抗性因子)、Col質(zhì)粒(大腸桿菌素質(zhì)粒)、Ti質(zhì)粒(T-DN可攜帶任何外源基因整合到植物基因組中)、Ri質(zhì)粒、mega質(zhì)粒、降解性質(zhì)粒和生理功能性質(zhì)粒。選擇性突變株:營養(yǎng)型缺陷型、抗性缺陷型、條件致死突變型。非選擇性突變型:形態(tài)突變型、抗原突變型、產(chǎn)量突變型。突變率:某一細(xì)胞(或病毒)在每一世代中發(fā)生某一性狀突變的幾率。基因突變自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性的實(shí)驗(yàn)證明:變量試驗(yàn)、涂布試驗(yàn)、影印實(shí)驗(yàn)。誘變育

23、種原理:出發(fā)菌株(多數(shù)死亡)少數(shù)存活(多數(shù)未變)少數(shù)突變(多數(shù)負(fù)變)少數(shù)正變(多數(shù)幅度?。┥贁?shù)幅度大(多數(shù)不宜投產(chǎn))少數(shù)宜投產(chǎn)。艾姆斯試驗(yàn):利用細(xì)菌營養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變來檢測(cè)環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的方法。3類突變株的篩選方法:產(chǎn)量突變、抗藥性突變、營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選?;九囵B(yǎng)基:僅能滿足某微生物的野生型菌株生長所需的最低成分的組合培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基:凡可滿足某微生物一切營養(yǎng)缺陷型菌株需要的天然或半組合培養(yǎng)基。補(bǔ)充培養(yǎng)基:凡只能滿足相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型突變菌株生長需要的組合或半組合培養(yǎng)基。野生型:從自然界分離到的任何微生物在其發(fā)生人為營養(yǎng)缺陷突變之前的原始菌株。原養(yǎng)型:營養(yǎng)缺陷型經(jīng)回復(fù)突

24、變或重組后產(chǎn)生的菌株,其營養(yǎng)要求在表型上與野生型相同。(問)抗生素法和菌絲過濾法為何能“濃縮”營養(yǎng)缺陷型菌株? 答:抗生素法有青霉素法和制霉菌素法。青霉素法原理是青霉素能抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的生物合成,因而可殺死能正常繁殖的野生型細(xì)菌,但無法殺死正處于休止?fàn)顟B(tài)的營養(yǎng)缺陷型。制霉菌法適用于真菌。轉(zhuǎn)化:受體菌直接吸收供體菌的DNA片段而獲得后者部分遺傳性狀的表象。感受態(tài):受體細(xì)胞最易接受外源DNA片段并能實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化的一種生理狀態(tài)。轉(zhuǎn)導(dǎo):通過缺陷噬菌體的媒介,把供體菌細(xì)胞中的小片段DNA攜帶到受體細(xì)胞中,通過交換與整合,使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象。普遍轉(zhuǎn)導(dǎo):通過極少數(shù)完全缺陷噬菌體對(duì)供體菌基因組上任何

25、小片段DNA進(jìn)行“誤包”,而將其遺傳性狀傳給受體菌的現(xiàn)。溶源轉(zhuǎn)變:當(dāng)正常的溫和型噬菌體感染期宿主而使其發(fā)生溶源化時(shí),因噬菌體基因整合到宿主的核基因組上,而使宿主獲得了除免疫性外的新遺傳性狀的現(xiàn)象。接合:供體菌(雄性)通過性菌毛與受體菌(雌性)直接接觸,把F質(zhì)粒或其攜帶的不同長度的核基因組片段傳遞給后者,使后者獲得若干性遺傳性狀的現(xiàn)象。準(zhǔn)性雜交:在自然條件下,同種不同菌株間的體細(xì)胞發(fā)生融合的現(xiàn)象。問準(zhǔn)性雜交育種步驟:1、選擇親本;2、強(qiáng)制異合;3、移單菌落;4、驗(yàn)穩(wěn)定性;5、促進(jìn)變異;6、選出良種??顾幮酝蛔?cè)恚禾荻绕桨迨且环N含有某藥物的梯度濃度的瓊脂培養(yǎng)基平板,它由含藥物的上半個(gè)斜面和不含藥

26、物的下半個(gè)斜面分兩次澆合而成。梯度平板法是定向篩選抗藥性突變株的一種有效方法。通過制備瓊脂表面存在藥物濃度梯度的平板在其上面涂布誘變處理后的細(xì)胞懸液經(jīng)培養(yǎng)后再從其上選取抗藥性菌落等步驟。第八章 微生物生態(tài)學(xué)生態(tài)學(xué):研究生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)及其環(huán)境系統(tǒng)間相互作用規(guī)律的科學(xué)。微生物生態(tài)學(xué):研究微生物生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)及周圍生物和非微生物環(huán)境系統(tǒng)間相互作用的規(guī)律。正常菌群:生活在健康動(dòng)物各部位、數(shù)量大、種類較穩(wěn)定、一般能發(fā)揮有益作用的微生物種群。條件致病菌:原先某些致病菌的正常菌群成員,在某種條件下趁機(jī)感染宿主,大量繁殖,成了致病菌。共生:兩種生物共居在一起,相互分工合作、相依為命,甚至形成獨(dú)特的結(jié)構(gòu)、達(dá)到難

27、分難解、合二為一的極其緊密的一種相互關(guān)系。寄生:一般指一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內(nèi)或體表,從中奪取營養(yǎng)并進(jìn)行生長繁殖,同時(shí)使后者蒙受損害甚至被殺死的一種相互關(guān)系。拮抗:又叫抗生,某種生物所產(chǎn)生的特定代謝產(chǎn)物可抑制他種生物的生長發(fā)育甚至殺死它們的一種相互關(guān)系。捕食:一般指一種大型的生物直接捕捉、吞食另一種小型生物以滿足其營養(yǎng)需要的相互關(guān)系。微生物間的捕食關(guān)系主要是原生動(dòng)物捕食細(xì)菌和藻類。、生化需氧量(生物需氧量或BOD):水體中有機(jī)物含量的一個(gè)間接指標(biāo)。在1L水或待測(cè)水樣中所含的一部分易氧化的有機(jī)物,當(dāng)微生物對(duì)其氧化、分解時(shí),所消耗的水中溶解氧毫克數(shù)。化學(xué)需氧量(COD):水體中有機(jī)

28、物含量的一個(gè)間接指標(biāo),指1L污水中所含的有機(jī)物在用強(qiáng)氧化劑將它氧化后,所消耗氧的毫克數(shù)。第九章 傳染與免疫毒素:細(xì)菌毒素分為外毒素和內(nèi)毒素。外毒素:病原細(xì)菌生長過程中不斷向外界環(huán)境分泌的一類毒性蛋白質(zhì),屬于酶、酶原或毒蛋白。類毒素:用0.3%-0.4%甲醛溶液對(duì)外毒素進(jìn)行脫毒處理,可獲得失去毒性但任保留其原有免疫原性(抗原性)的生物制品。內(nèi)毒素:是G-細(xì)菌細(xì)胞壁外層的組分之一,其化學(xué)成分是脂多糖。因它在活細(xì)胞體內(nèi)不分泌到體外,僅在細(xì)菌死亡后自溶或人工裂解時(shí)才釋放,故名。非特異性免疫:主要由屏障結(jié)構(gòu)(血腦屏障和血胎屏障)、吞噬細(xì)胞(多形核白細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等)、抗菌物質(zhì)和炎癥反應(yīng)等組成。補(bǔ)體:實(shí)為

29、補(bǔ)體系統(tǒng)。存在于人體或高等動(dòng)物血清中的一組非特異性血清蛋白。在免疫反應(yīng)中,能擴(kuò)大和增強(qiáng)抗體的“補(bǔ)助”功能。干擾素:高等動(dòng)物細(xì)胞在病毒或dsRNA等干擾素誘生劑的刺激下,產(chǎn)生的一種具有高活性、廣譜抗病毒等功能的特異性糖蛋白。它的功能除能抑制病毒在細(xì)胞中增殖外,還具有免疫調(diào)節(jié)作用和對(duì)癌細(xì)胞的殺傷作用等??捎糜诓《静『桶┌Y的治療。免疫反應(yīng):抗原分子能與相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物在體內(nèi)或體外參與特異性結(jié)合的性能。免疫應(yīng)答:一類發(fā)生在活生物體內(nèi)的特異性免疫的系列反應(yīng)過程。細(xì)胞免疫:機(jī)體在抗原的刺激下,T細(xì)胞發(fā)生增殖、分化,進(jìn)而直接攻擊靶細(xì)胞或間接地釋放一些淋巴因子的免疫作用。體液免疫:機(jī)體受抗原刺激后,B細(xì)胞進(jìn)行

30、增殖、分化為漿細(xì)胞,由它合成抗體并釋放到體液中以發(fā)揮免疫作用。TD抗原:即胸腺依賴性抗原。包括血細(xì)胞、血清成分、細(xì)菌細(xì)胞和其他可溶性蛋白等在內(nèi)的多數(shù)抗原。需要抗原呈遞細(xì)胞(APC)呈遞抗原,促進(jìn)成熟的TH(輔助性T細(xì)胞)轉(zhuǎn)化成活化的TH才能刺激TC(細(xì)胞毒細(xì)胞)和TD(遲發(fā)型超敏T細(xì)胞)產(chǎn)生淋巴因子(執(zhí)行細(xì)胞免疫功能)。以及刺激成熟B細(xì)胞轉(zhuǎn)變成漿細(xì)胞后產(chǎn)生抗體(執(zhí)行體液免疫功能)。TI抗原:即非胸腺依賴性抗原它在刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體時(shí),不需要T細(xì)胞輔助的抗原或是對(duì)T細(xì)胞依賴程度低的抗原。中樞免疫器官:骨髓(B細(xì)胞成熟)、胸腺(T細(xì)胞成熟)、法氏囊(鳥類特有,B細(xì)胞成熟)。外周免疫器官:脾和淋巴結(jié)。免疫細(xì)胞:T細(xì)胞(主要執(zhí)行細(xì)胞免疫功能)、B細(xì)胞(細(xì)胞膜表面帶有自己合成的免疫球蛋白)、NK細(xì)胞(自然殺傷細(xì)胞,是機(jī)體抗腫瘤的第一道防線)、K細(xì)胞(殺傷細(xì)胞)、NKT細(xì)胞。T細(xì)胞表面標(biāo)志:包括表面受體和表面抗原??乖?Ag):是一類能誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生免

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