核酸類藥物PPT學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1核酸類藥物核酸類藥物第1頁/共93頁第2頁/共93頁第3頁/共93頁第4頁/共93頁第5頁/共93頁第6頁/共93頁第7頁/共93頁第8頁/共93頁第9頁/共93頁第10頁/共93頁第11頁/共93頁第12頁/共93頁第13頁/共93頁第14頁/共93頁第15頁/共93頁第16頁/共93頁第17頁/共93頁第18頁/共93頁第19頁/共93頁第20頁/共93頁第21頁/共93頁第22頁/共93頁第23頁/共93頁第24頁/共93頁第25頁/共93頁第26頁/共93頁第27頁/共93頁第28頁/共93頁第29頁/共93頁第30頁/共93頁第31頁/共93頁第32頁/共93頁第33頁/共9

2、3頁第34頁/共93頁第35頁/共93頁第36頁/共93頁第37頁/共93頁第38頁/共93頁第39頁/共93頁第40頁/共93頁第41頁/共93頁第42頁/共93頁第43頁/共93頁第44頁/共93頁第45頁/共93頁第46頁/共93頁第47頁/共93頁第48頁/共93頁第49頁/共93頁第50頁/共93頁含RNA、DNA、蛋白質(zhì)、磷蛋白等RNADNARNADNA第51頁/共93頁第52頁/共93頁第53頁/共93頁第54頁/共93頁第55頁/共93頁第56頁/共93頁第五節(jié)第五節(jié) 核酸類物質(zhì)的制備核酸類物質(zhì)的制備n核酸及其衍生物類藥物，屬天然、大分子、結(jié)構(gòu)復(fù)雜的，多采用生物材料為原料的提取

3、提取法法制造。 n衍生物，小分子、結(jié)構(gòu)簡單的，多采用化學(xué)化學(xué)合成法合成法制造。第57頁/共93頁第58頁/共93頁第59頁/共93頁第60頁/共93頁第61頁/共93頁第62頁/共93頁第63頁/共93頁第64頁/共93頁第65頁/共93頁二、二、DNA的提取與制備的提取與制備 n通常在組織搗碎后用氯化鈉液，反復(fù)洗滌除去RNA，再進(jìn)行DNA蛋白質(zhì)的提取。也可采用氯化鈉和枸櫞酸鈉混合液代替氯化鈉液，這樣的鹽液濃度不變，而枸櫞酸根離子可以抑制DNase對(duì)DNA的降解破壞作用。nDNA蛋白質(zhì)在的氯化鈉溶液中溶解度最低，RNA蛋白質(zhì)溶解度較大，可從沉淀物中洗去RNA蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，DNA蛋白質(zhì)仍留在沉淀

4、物中。 第66頁/共93頁第67頁/共93頁三、核苷酸的制備三、核苷酸的制備1水解核酸法水解核酸法n核酸經(jīng)酶、酸、堿水解生成核苷酸，然后分離提取制備各種核苷酸的方法通稱水解核酸法水解核酸法。n由于所用催化劑的不同，分為酶水解、酸水解酶水解、酸水解和堿水解和堿水解等。第68頁/共93頁第69頁/共93頁第70頁/共93頁第71頁/共93頁第72頁/共93頁第73頁/共93頁第74頁/共93頁第75頁/共93頁第76頁/共93頁第77頁/共93頁第78頁/共93頁 第79頁/共93頁2、雙酶法生產(chǎn)肌苷酸和鳥苷酸（、雙酶法生產(chǎn)肌苷酸和鳥苷酸（IG）n呈味核苷酸的主要品種是肌苷酸鈉和鳥苷酸鈉，商品名簡

5、稱為（IG），用核酸酶P1降解RNA可獲得GMP和AMP，其中AMP經(jīng)脫氨生成IMP。雙酶法生產(chǎn)（I G）工藝 。第80頁/共93頁3、菌體自溶法生產(chǎn)核苷酸、菌體自溶法生產(chǎn)核苷酸n磷酸二酯酶在合適的條件下降解細(xì)胞內(nèi)的RNA可產(chǎn)生5-核苷酸。在國內(nèi)用谷氨酸產(chǎn)生菌體自溶法生產(chǎn)5-核苷酸。第81頁/共93頁4、堿水解法生產(chǎn)、堿水解法生產(chǎn)2，3-混合核苷酸混合核苷酸nRNA結(jié)構(gòu)中的磷酸二酯鍵對(duì)于堿性條件不穩(wěn)定，很容易生成2，3-環(huán)狀磷酸酯，此環(huán)狀磷酸酯對(duì)堿更不穩(wěn)定，加水分解生成2，3-混合核苷酸。n從RNA水解成2，3-核苷酸的降解率達(dá)95以上，將2，3-混合核苷酸制成每片含50100mg的片劑，經(jīng)臨

6、床使用，對(duì)非特異性血小板減少癥、對(duì)白血球減少癥、癌腫的化療和放療后的升白血球均有較好療效。第82頁/共93頁第83頁/共93頁5、半合成法制備核苷酸、半合成法制備核苷酸n由于發(fā)酵法生產(chǎn)核苷的產(chǎn)率很高，核苷懸浮于磷酸三甲酯或磷酸三乙酯中，在冷卻條件下加入氯化氧磷，進(jìn)行磷酸化，從核苷生成5-核苷酸收率可達(dá)90%。 第84頁/共93頁二、核苷的制備二、核苷的制備1、RNA化學(xué)水解法制備核苷化學(xué)水解法制備核苷 RNA經(jīng)甲酰胺化學(xué)水解制備核苷第85頁/共93頁第86頁/共93頁2、發(fā)酵法生產(chǎn)核苷、發(fā)酵法生產(chǎn)核苷 發(fā)酵法生產(chǎn)核苷是近代發(fā)酵工程領(lǐng)域中的杰出成果，產(chǎn)率高，周期短，控制容易，產(chǎn)量大。用發(fā)酵法生產(chǎn)

7、各種核苷的菌株有著許多共同特點(diǎn)：它們都使用磷酸單酯酶活力很強(qiáng)的枯草芽孢桿菌枯草芽孢桿菌或短小芽抱桿菌或短小芽抱桿菌為誘變出發(fā)菌株；它們都是通過使用物理或化學(xué)誘變方法選育出在遺傳性狀上具有特定標(biāo)記的誘變菌誘變菌；它們?cè)诎l(fā)酵培養(yǎng)時(shí)必須提供限量的生長因素提供限量的生長因素，并且好氧，在某一特定的范圍內(nèi)累積大量核苷。第87頁/共93頁三、疊氮胸苷（三、疊氮胸苷（Azidothymidine，AZT）1、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)、結(jié)構(gòu)與性質(zhì) AZT是1987美國FDA批準(zhǔn)的治療艾滋病的新藥 。 AZT的藥理作用是人體內(nèi)經(jīng)磷酸化后生成了3-疊氮-2-脫氧胸腺嘧啶核苷酸，后者取代了正常的胸腺嘧啶核苷酸參與病毒DNA的合成

8、，含有AZT成份的DNA不能繼續(xù)復(fù)制，從而達(dá)到阻止病毒增殖的目的。2、生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)工藝 此合成路線的起始原料是胸苷，目前主要是從DNA水解法制備，由于原料來源少，合成路線較復(fù)雜，成本很高。第88頁/共93頁第89頁/共93頁四、聚肌胞苷酸（聚肌胞）（四、聚肌胞苷酸（聚肌胞）（Poyinosinic，Polycytidylic Acid，Poly1：C）（一）結(jié)構(gòu)與性質(zhì)（一）結(jié)構(gòu)與性質(zhì)n1967年美國人Field發(fā)現(xiàn)聚肌胞是干擾素誘導(dǎo)物，而且具有廣譜抗病毒作用。本品是人工合成的干擾素誘導(dǎo)劑，系由多聚肌苷酸和多聚胞苷酸組成的雙股多聚核苷酸。n本品可溶于氯化鈉溶液。第90頁/共93頁（3）固定化多

9、核苷酸磷酸化酶：將分離純化的酶液滴加入固定化多核苷酸磷酸化酶：將分離純化的酶液滴加入冰浴中的載體，得到共價(jià)結(jié)合的固定化多核苷酸磷酸化。冰浴中的載體，得到共價(jià)結(jié)合的固定化多核苷酸磷酸化。（二）生產(chǎn)工藝（二）生產(chǎn)工藝70年代中期我國開始研制聚肌胞，其生產(chǎn)工藝如下： 1、底物、底物5-核苷二磷酸吡啶鹽的制備核苷二磷酸吡啶鹽的制備5-核苷酸（核苷酸（5-肌苷酸或肌苷酸或5-胞苷酸）胞苷酸） 5-核苷二磷酸吡啶核苷二磷酸吡啶鹽（即鹽（即CDP吡啶鹽，吡啶鹽，IDP吡啶鹽）吡啶鹽）2、固定化多核苷酸磷酸化酶的制備、固定化多核苷酸磷酸化酶的制備第91頁/共93頁3、Poly I：C制備制備（1）底物預(yù)處理：CDP吡啶鹽轉(zhuǎn)成鋰鹽，IDP轉(zhuǎn)成鈉鹽。（2）酶促反