中藥化學(xué)執(zhí)業(yè)藥師考前輔導(dǎo)精華版精品資料

1、第五章香豆素和木脂素【學(xué)習(xí)要點(diǎn)】1掌握香豆素基本母核的結(jié)構(gòu)特征和類型。2掌握香豆素的性狀和溶解性。3掌握香豆素與堿作用及其對(duì)結(jié)構(gòu)變化的影響。4掌握香豆素的提取分離方法。5掌握香豆素的物理性質(zhì)、顯色反應(yīng)及應(yīng)用，6掌握秦皮、五味子中所含主要化合物基本特征。7熟悉簡(jiǎn)單香豆素的lHNMR譜特征。8熟悉木脂素的物理性質(zhì)9了解補(bǔ)骨脂和厚樸中主要化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)類型【重點(diǎn)與難點(diǎn)提示】一、香豆素類化合物的結(jié)構(gòu)特征及分類1.簡(jiǎn)單香豆素 : 僅在苯環(huán)上有取代的香豆素。大多數(shù)香豆素在7-位都有含氧官能團(tuán)存在。2.呋喃香豆素：香豆素核上的異戊烯基與鄰位酚羥基環(huán)合成呋喃環(huán)者稱為呋喃香豆素。根據(jù)呋喃環(huán)連接位置又分為線型和角

2、型。3.吡喃香豆素：香豆素的C6 或C8 異戊烯基與鄰酚羥基環(huán)合而成2,2-二甲基- -吡喃環(huán)結(jié)構(gòu)，形成吡喃香豆素。根據(jù)吡喃環(huán)連接位置又分為線型和角型。4.其他類：這類是指 -吡喃酮環(huán)上有取代基的香豆素類。C3，C4 上常有苯基、羥基、異戊烯基等取代。二、香豆素類化合物的理化性質(zhì)1.內(nèi)酯性質(zhì)香豆素的 -吡喃酮環(huán)具有 、 -不飽和內(nèi)酯性質(zhì)，在稀堿液中漸漸水解成黃色溶液， 生成順式鄰羥桂皮酸的鹽。其鹽的水溶液一經(jīng)酸化即閉環(huán)恢復(fù)為內(nèi)酯。順式鄰羥桂皮酸不易游離存在，長(zhǎng)時(shí)間堿液中放置或UV 光照射，可轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定的反式鄰羥桂皮酸。OH-OOH +O -COO-OH-COO-COOHH +O-OH提取時(shí)必須

3、必須注意堿液濃度，并避免長(zhǎng)時(shí)間加熱，以防破壞內(nèi)酯環(huán)。2. 熒光性質(zhì) : 羥基香豆素在紫外光下顯示藍(lán)色熒光， 7-羥基香豆素加堿可使熒光轉(zhuǎn)為綠色，一般香豆素遇堿熒光都增強(qiáng)。 7-羥基香豆素在 C8 位導(dǎo)入羥基，熒光消失。3. 顯色反應(yīng)(1) 異羥肟酸鐵反應(yīng)：內(nèi)酯的鑒別。(2) 三氯化鐵：酚羥基的鑒別。(3) Gibb s反應(yīng)：要求有游離酚羥基且酚羥基對(duì)位無(wú)取代。(4) Emerson 反應(yīng)：要求有游離酚羥基且酚羥基對(duì)位無(wú)取代。三、香豆素類合物的提取分離方法1. 水蒸氣蒸餾法：適用于小分子的香豆素，因其具有揮發(fā)性。2. 堿溶酸沉法：利用內(nèi)酯遇堿能皂化、加酸能恢復(fù)的性質(zhì)分離香豆素。3. 系統(tǒng)溶劑萃取

4、：常用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇等溶劑依次萃取。4. 色譜法：結(jié)構(gòu)相似的香豆素多數(shù)情況下必須經(jīng)色譜方法才能有效分離。用硅膠或中性和酸性氧化鋁。四、香豆素類化合物的波譜特征，香豆素的1H-NMR特征：香豆素母核上的質(zhì)子，由于受內(nèi)酯羰基吸電子共軛效應(yīng)的影響，C3、 C6 和 C8 的質(zhì)子信號(hào)在較高場(chǎng)， C4、 C5 和 C7 上的在較低場(chǎng)。簡(jiǎn)單香豆素約在 6.16.4 化學(xué)位移單位和 7.58.3 化學(xué)位移單位之間，可見(jiàn)一對(duì)二重峰（五、木脂素的結(jié)構(gòu)類型及理化性質(zhì)H-3 和 H-4J=9.5Hz ）。1.木脂素的基本結(jié)構(gòu)類型木脂素是一類由苯丙素氧化聚合而成的天然產(chǎn)物，通常所指是其二聚物，少數(shù)

5、是三聚物和四聚物。組成木脂素的單體主要有四種：(1)桂皮酸，偶有桂皮醛(2)桂皮醇木脂素可分為二類，一類由前二種單體組成，五味子素等。另一類由后二種單體組成，和厚樸酚。(3) 丙烯苯(4)烯丙苯 -碳原子氧化型的，稱木脂素，如連翹苷、 -碳原子未氧化型的，稱為新木脂素，如厚樸酚、2.木脂素理化性質(zhì)（ 1）木脂素多數(shù)呈無(wú)色結(jié)晶，但新木脂素不易結(jié)晶。少數(shù)可升華，如去甲二氫愈創(chuàng)木酸。（ 2）木脂素沒(méi)有共同的特征反應(yīng)，結(jié)構(gòu)中有亞甲二氧基的木脂素可與變色酸 -濃硫酸溶液反應(yīng)呈紫色，如五味子果實(shí)中的木脂素?！颈菊戮毩?xí)題】一. A 型題（單選）1. 加熱時(shí)能溶于氫氧化鈉水溶液的是A. 香豆素B.萜類C.甾體

6、皂苷D. 四環(huán)三萜皂苷E. 五環(huán)三萜皂苷2. 下列化合物適合于堿溶酸沉淀法與其它成分分離的是A. 大黃酸的全甲基化B.大黃素甲醚C.7-羥基香豆素D.季銨型生物堿E.糖苷類3. 香豆素和木脂素的生合成途徑是A. AA-MA途徑B. MV A 途徑C. 桂皮酸途徑D. 氨基酸途徑E. 復(fù)合途徑4. 下列哪種屬于線型呋喃香豆素A.傘形香豆素B. 花椒內(nèi)酯C. 白芷內(nèi)酯D. 補(bǔ)骨內(nèi)酯E. 邪蒿內(nèi)酯E.仙鶴草內(nèi)酯5. 香豆素類成分的母體通常為A. 5-羥基香豆素B. 7-羥基香豆素C. 5-甲氧基香豆素D. 7-甲氧基香豆素E. 5,7-二羥基香豆素6. 在堿液中最難水解的是A. 6- 甲氧基香豆素B

7、. 7- 甲氧基香豆素D. 5- 甲氧基香豆素E. 7- 羥基香豆素C. 8-甲氧基香豆素7. 呋喃香豆素多在 UV 下顯 ( )色熒光 ,通常以此檢識(shí)香豆素A. 藍(lán)色B. 綠色C. 黃色D. 紫色E. 橙色8. 具有治療痢疾功效的中藥是A. 補(bǔ)骨脂B. 厚樸C. 秦皮D. 丹參E. 黃芩9. 五味子素屬于A. 簡(jiǎn)單木脂素B. 木脂內(nèi)酯C. 雙環(huán)氧木脂素D. 聯(lián)苯環(huán)辛烯型木脂素E. 新木脂素10.7-羥基香豆素的 max 在哪種條件下會(huì)紅移A. 中性溶液B. 酸性溶液C. 堿性溶液D. 加熱E. 冷置11香豆素類化合物的基本母核是A 苯駢 -呋喃酮B 苯駢 -呋喃酮 C 苯駢 -吡喃酮D 苯駢

8、 -吡喃酮E.苯駢 -吡喃酮12一般天然香豆素類成分在其7 位常有取代基，大多為A.-OMe B. -MeC. -OHD. -COOHE. -CH2-CH313異羥肟酸鐵反應(yīng)是用于鑒別香豆素的A 母核 B 酚羥基 C醇羥基 D內(nèi)酯環(huán) E氧環(huán)14. 傘形花內(nèi)酯在結(jié)構(gòu)分類上屬于A 簡(jiǎn)單香豆素B 呋喃香豆素C 吡喃香豆素D 異香豆素E 其它香豆素15可發(fā)生Emerson 反應(yīng)的化合物是A.5- 羥基香豆素B.6-羥基香豆素C.7-羥基香豆素D.5， 8-二羥基香豆素E.6， 7-二羥基香豆素16. 秦皮中所含的七葉內(nèi)酯及其苷具有A 抗癌作用B 消炎作用C 止血作用D 止咳作用E 治療痢疾17補(bǔ)骨脂內(nèi)

9、酯在結(jié)構(gòu)分類上屬于A 簡(jiǎn)單香豆素B 呋喃香豆素C 吡喃香豆素D 異香豆素E 其它香豆素18在香豆素類結(jié)構(gòu)中具有哪一條件可使Gibbs 反應(yīng)和 Emerson 反應(yīng)為陽(yáng)性A 有游離酚羥基B 有鄰二酚羥基C 有鄰三酚羥基D 酚羥基對(duì)位有活潑質(zhì)子E 酚羥基鄰位有活潑質(zhì)子19. 厚樸酚屬于A 簡(jiǎn)單木脂素類B 木脂內(nèi)酯類C 環(huán)木脂素D 環(huán)木脂內(nèi)酯類E 新木脂素類20.五味于臨床上常用于斂肺、止汗、澀精、止瀉等，都是取其A 收澀的功效B 鎮(zhèn)痛的功效C 利尿的功效D 燥濕的功效E 清熱的功效二 B 型題 (配伍題 ) 21 2521. 具有止痢功效的是22. 屬于呋喃型香豆素的是23. 屬于新木脂素類型的是

10、24. 具有止汗 ,止瀉作用的是25. 具有祛痰 , 利尿 , 止痛作用的是26 30A. 6-OCH3 香豆素D. 8- 羥基香豆素B. 呋喃香豆素E. 7-甲氧基香豆素C. 吡喃香豆素26. 可發(fā)生 Emerson 反應(yīng)的是27. FeCl3 反應(yīng)呈陽(yáng)性的是28. 花椒內(nèi)酯屬于29. 可與堿式 Pb(Ac)2 反應(yīng)的是30. 白芷內(nèi)酯屬于三 x 題型（多項(xiàng)選擇題）31.7-羥基香豆素可有如下哪些反應(yīng)A. Emerson 反應(yīng)B. Gibb s反應(yīng)C. FeCl3反應(yīng)D. 異羥肟酸鐵反應(yīng)E. 紫外下有熒光32.有Emerson 反應(yīng)的物質(zhì)是A. 6,7- 二羥香豆素B. 5,8- 二羥基香豆

11、素C. 5,7-二羥基香豆素D. 6,7,8- 三羥基香豆素E. 7-甲氧基香豆素33區(qū)別 6， 7 呋喃香豆素和7， 8-呋喃香豆素，將它們堿水解后用A. 異羥肟酸鐵反應(yīng)B. Gibbs 反應(yīng)C. Emerson 反應(yīng)D.三氯化鐵反應(yīng)E.醋酐 -濃硫酸反應(yīng)34. Emerson 反應(yīng)為陰性的香豆素是A.7 ， 8-二羥基香豆素B.8-OCH3-6 ，7-呋喃香豆素C.6-OH-7-O-g1uD.5 ， 6，7-三羥基香豆素E.6-OCH3 香豆素香豆素苷35采用系統(tǒng)溶劑提取法提取香豆素類化合物時(shí)，首先用石油醚提取的意義是A. 脫脂作用B. 提高提取純度C.用于提取親脂性較強(qiáng)的成分D. 可與苷

12、類成分分離E.減少純化處理過(guò)程第六章黃酮【學(xué)習(xí)要點(diǎn)】1掌握黃酮類化合物的基本母核、結(jié)構(gòu)分類2掌握黃酮類化合物顏色、旋光性、溶解性的特征及與結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系.3掌握黃酮類化合物的酸堿性，酸性強(qiáng)弱與結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系及在提取分離中的應(yīng)用。4掌握黃酮類化合物的顯色反應(yīng)及與結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系和應(yīng)用。5掌握黃酮類化合物的一般提取方法和主要分離方法的原理以及它們與結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系。6掌握黃酮類化合物色譜鑒定法的原理和應(yīng)用7掌握黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮和查耳酮的UV 光譜特征。8掌握黃芩中所含代表性黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、提取分離方法、鑒定方法和生物活性。9掌握葛根中所含代表性的黃酮類化合物的結(jié)

13、構(gòu)、提取分離方法和生物活性10掌握銀杏葉中所含代表性的黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)和生物活性，11熟悉黃酮、黃酮醇、二氫黃酮、二氫黃酮醇和異黃酮的1HNMR 譜特征。12熟悉槐米中主要化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)。13熟悉陳皮中主要化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和鑒別方法。14了解滿山紅葉中主要黃酮類成分的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和提取分離方法。15了解黃酮類化合物UV 光譜位移試劑在測(cè)定其結(jié)構(gòu)中的原理與應(yīng)用。16了解黃酮類化合物13C-NMR 譜的基本特點(diǎn)及其在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用【重點(diǎn)與難點(diǎn)提示】一、黃酮類化合物分類的依據(jù)及其主要結(jié)構(gòu)類型 根據(jù)中央三碳鏈的氧化程度、位置（ 2-或 3-位）以及三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀等特點(diǎn)，可將主要的

14、天然黃酮類化合物分類黃酮類化合物的主要結(jié)構(gòu)類型B-環(huán)連接名稱三碳鏈部分結(jié)構(gòu)名稱三碳鏈部分結(jié)構(gòu)黃酮類黃烷 -3- 醇類(Flavones)OO(Flavan-3-ols)OOH黃酮醇類異黃酮類(Flavonol)(Isoflavanones)(Flavanones)(Flavanonols)花色素類(Anthocyanidins)黃烷 -3, 4-二醇類(Flavan-3,4-diols)（酮類）(Xanthones)二、黃酮類化合物理化性質(zhì)OOHOOOOOHOO+OHOOHOHOO二氫異黃酮類(Isoflavanones)查耳酮類(Chalcones)二氫查耳酮類(Dihydrochalcon

15、es)橙酮類(類)(Aurones)高異黃酮類(Homoisoflavones)OOOOOHOOHOOCHOOO1. 物理性質(zhì)（ 1）顏色黃酮類化合物是否有顏色與分子中是否存在交叉共軛體系及助色團(tuán)(-OH 、-OCH3等) 的種類、數(shù)目以及取代位置有關(guān)。以黃酮為例來(lái)說(shuō)，其色原酮部分原本無(wú)色，但在2-位上引入苯環(huán)后，即形成交叉共軛體系，并通過(guò)電子轉(zhuǎn)移、重排，使共軛鏈延長(zhǎng)，因而顯現(xiàn)出顏色。（ 2）旋光性游離的各種苷元母核中，除二氫黃酮、二氫黃酮醇、黃烷及黃烷醇有旋光性外，其余則無(wú)光學(xué)活性。苷類由于在結(jié)構(gòu)中引入糖的分子，故均有旋光性，且多為左旋。（ 3）溶解性一般游離苷元難溶或不溶于水，易溶于甲醇、

16、乙醇、醋酸乙酯、乙醚等有機(jī)溶劑及稀堿水溶液中。 其中黃酮、 黃酮醇、 查耳酮等平面性強(qiáng)的分子，因分子與分子間排列緊密，分子間引力較大，故更難溶于水；而二氫黃酮及二氫黃酮醇等，因系非平面性分子，故分子與分子間排列不緊密，分子間引力降低，有利于水分子進(jìn)入，溶解度稍大。2. 酸堿性及與結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系： 7,4'-二 OH 7-或 4'-OH 一般酚 OH 5-OH3. 黃酮類化合物的特征顯色反應(yīng)及其與結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系，以及這些顯色反應(yīng)在化合物定性鑒別中的應(yīng)用。（ 1）還原試驗(yàn)鹽酸 -鎂粉（或鋅粉）反應(yīng) 此為鑒定黃酮類化合物最常用的顏色反應(yīng)。多數(shù)黃酮、黃酮醇、二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物

17、顯橙紅紫紅色，少數(shù)顯紫藍(lán)色。但查耳酮、橙酮、兒茶素類則無(wú)該顯色反應(yīng)。異黃酮類除少數(shù)例外，也不顯色。四氫硼鈉（鉀）反應(yīng) NaBH4 是對(duì)二氫黃酮類化合物專屬性較高的一種還原劑。與二氫黃酮類化合物產(chǎn)生紅紫色。其它黃酮類化合物均不顯色，可與之區(qū)別。（ 2）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)黃酮類化合物分子中常含有下列結(jié)構(gòu)單元，故?？膳c鋁鹽、鉛鹽、 鋯鹽、 鎂鹽等試劑反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物。OOHOH OOHOHO鋁鹽常用試劑為1%三氯化鋁或硝酸鋁溶液。 生成的絡(luò)合物多為黃色 （ max = 415 nm ），并有熒光，可用于定性及定量分析。鉛鹽常用 1%醋酸鉛及堿式醋酸鉛水溶液，可生成黃紅色沉淀。醋酸鉛只能與分子

18、中具有鄰二酚羥基或兼有3-OH 、4-酮基或 5-OH 、4-酮基結(jié)構(gòu)的化合物反應(yīng)生成沉淀，但堿式醋酸鉛的沉淀能力要大得多。一般酚類化合物均可為之沉淀，據(jù)此不僅可用于鑒定，也可用于提取及分離工作。鋯鹽多用 2%二氯氧化鋯甲醇溶液。黃酮類化合物分子中有游離的3-或 5-OH 存在時(shí)，均可與該試劑反應(yīng)生成黃色的鋯絡(luò)合物。但兩種鋯絡(luò)合物對(duì)酸的穩(wěn)定性不同。3-OH, 4- 酮基絡(luò)合物的穩(wěn)定性比5-OH, 4-酮基絡(luò)合物的穩(wěn)定性強(qiáng)（僅二氫黃酮醇除外）。故當(dāng)反應(yīng)液中接著加入枸櫞酸后，5-羥基黃酮的黃色溶液顯著褪色，而3-羥基黃酮溶液仍呈鮮黃色（鋯-枸櫞酸反應(yīng)）。鎂鹽常用醋酸鎂甲醇溶液為顯色劑，本反應(yīng)可在紙

19、上進(jìn)行。試驗(yàn)時(shí)在紙上滴加一滴供試液，噴以醋酸鎂的甲醇溶液，加熱干燥，在紫外光燈下觀察。二氫黃酮、二氫黃酮醇類可顯天藍(lán)色熒光， 若具有C5-OH ，色澤更為明顯。 而黃酮、 黃酮醇及異黃酮類等則顯黃橙黃褐色。氯化鍶（ SrCl2 ）氨性甲醇溶液中，可與分子中具有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)的黃酮類化合物生成綠色棕色乃至黑色沉淀。三氯化鐵反應(yīng)三氯化鐵水溶液或醇溶液為常用的酚類顯色劑。多數(shù)黃酮類化合物因分子中含有酚羥基， 故可產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)， 但一般僅在含有氫鍵締合的酚羥基時(shí)，才呈現(xiàn)明顯的顏色。（ 3）硼酸顯色反應(yīng)黃酮類化合物分子中當(dāng)有下列結(jié)構(gòu)時(shí)，在無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸存在條件下，可與硼酸反應(yīng)，生成亮黃色。顯然，5-羥基

20、黃酮及2'-羥基查耳酮類結(jié)構(gòu)可以滿足上述要求，故可與其它類型區(qū)別。 一般在草酸存在下顯黃色并具有綠色熒光，但在枸櫞酸丙酮存在的條件下，則只顯黃色而無(wú)熒光。CCCOHO4）堿性試劑顯色反應(yīng)在日光及紫外光下， 通過(guò)紙斑反應(yīng)， 觀察試樣用堿性試劑處理后的顏色變化情況， 對(duì)于鑒別黃酮類化合物有一定意義。其中，用氨蒸氣處理后呈現(xiàn)的顏色變化置空氣中隨即褪去，但經(jīng)碳酸鈉水溶液處理而呈現(xiàn)的顏色置空氣中卻不褪色。此外，利用堿性試劑的反應(yīng)還可幫助鑒別分子中某些結(jié)構(gòu)特征。例如：二氫黃酮類易在堿液中開(kāi)環(huán)，轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的異構(gòu)體 查耳酮類化合物,顯橙黃色OHOHHOOHHOOHO-OCH3OCH3H+OHOOHO二

21、氫黃酮和查耳酮在酸、堿條件下的結(jié)構(gòu)互變黃酮醇類在堿液中先呈黃色，通入空氣后變?yōu)樽厣?，?jù)此可與其它黃酮類區(qū)別。黃酮類化合物當(dāng)分子中有鄰二酚羥基取代或 3, 4'-二羥基取代時(shí) ,在堿液中不穩(wěn)定，易被氧化，由黃色深紅色綠棕色沉淀。三、提取與分離1. 黃酮類化合物的一般提取方法、各類提取方法的原理及與結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系。（ 1）溶劑萃取法 利用黃酮類化合物與混入的雜質(zhì)極性不同，選用不同溶劑進(jìn)行萃取可達(dá)到精制純化的目的。（ 2）堿提取酸沉淀法黃酮苷類雖有一定極性，可溶于水，但卻難溶于酸性水，易溶于堿性水，故可用堿性水提取，再將堿水提取液調(diào)成酸性，黃酮苷類即可沉淀析出。此法簡(jiǎn)便易行，如蘆丁、橙皮苷、

22、黃芩苷提取都應(yīng)用了這個(gè)方法。在用堿酸法進(jìn)行提取純化時(shí)，應(yīng)當(dāng)注意所用堿液濃度不宜過(guò)高，以免在強(qiáng)堿性下，尤其加熱時(shí)破壞黃酮母核。在加酸酸化時(shí)，酸性也不宜過(guò)強(qiáng)，以免生成鹽，致使析出的黃酮類化合物又重新溶解，降低產(chǎn)品收率。（ 3）炭粉吸附法主要適于苷類的精制工作。通常，在植物的甲醇粗提取物中，分次加入活性炭，攪拌，靜置，直至定性檢查上清液無(wú)黃酮反應(yīng)時(shí)為止。濾過(guò)，收集吸苷炭末，依次用沸水、沸甲醇、 7%酚 /水、 15%酚 /醇溶液進(jìn)行洗脫。2. 黃酮類化合物的主要分離方法，（ 1）柱色譜法 分離黃酮類化合物常用的吸附劑或載體有硅膠、聚酰胺及纖維素粉等。此外，也有用氧化鋁、氧化鎂及硅藻土等。 硅膠柱色譜

23、此法應(yīng)用范圍最廣，主要適于分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇及高度甲基化（或乙醚化）的黃酮及黃酮醇類。 聚酰胺柱色譜 對(duì)分離黃酮類化合物來(lái)說(shuō)，聚酰胺是較為理想的吸附劑。其吸附強(qiáng)度主要取決于黃酮類化合物分子中羥基的數(shù)目與位置及溶劑與黃酮類化合物或與聚酰胺之間形成氫鍵締合能力的大小。黃酮類化合物從聚酰胺柱上洗脫時(shí)大體有下述規(guī)律：苷元相同，洗脫先后順序一般是叁糖苷、雙糖苷、糖苷、苷元。母核上增加羥基，洗脫速度即相應(yīng)減慢。當(dāng)分子中羥基數(shù)目相同時(shí)，羥基位置對(duì)吸附也有影響，聚酰胺對(duì)處于羰基間位或?qū)ξ坏牧u基吸附力大于鄰位羥基， 故洗脫順序?yàn)榫哂朽徫涣u基黃酮、具有對(duì)位（或間位）羥基黃酮。不同類型黃酮化合物，先后

24、流出順序一般是異黃酮、二氫黃酮醇、黃酮、黃酮醇。分子中芳香核、共軛雙鍵多者易被吸附，故查耳酮往往比相應(yīng)的二氫黃酮難于洗脫。 葡聚糖凝膠 （ Sephadex gel）柱色譜 Sephadex-G 型及 Sephadex-LH20 型。對(duì)于黃酮類化合物的分離，主要用兩種型號(hào)的凝膠：葡聚糖凝膠分離黃酮類化合物的機(jī)制：分離游離黃酮時(shí)， 主要靠吸附作用。 凝膠對(duì)黃酮類化合物的吸附程度取決于游離酚羥基的數(shù)目；但分離黃酮苷時(shí)，則分子篩的性質(zhì)起主導(dǎo)作用。在洗脫時(shí)，黃酮苷類大體上是按分子量由大到小的順序流出柱體，（ 2）梯度 pH 萃取法梯度 pH 萃取法適合于酸性強(qiáng)弱不同的黃酮苷元的分離。根據(jù)黃酮類苷元酚羥

25、基數(shù)目及位置不同其酸性強(qiáng)弱也不同的性質(zhì)，可以將混合物溶于有機(jī)溶劑（如乙醚）后，依次用5%NaHCO3 、 5%Na2CO3 、 0.2%NaOH 及 4%NaOH 溶液萃取，來(lái)達(dá)到分離的目的。一般規(guī)律大致如下：酸性：7, 4'- OH 7-或 4'-OH 一般 OH 5-OH溶于 NaHCO3 中溶于 Na2CO3溶于不同濃度的NaOH 中（3）根據(jù)分子中某些特定官能團(tuán)進(jìn)行分離在黃酮類成分的混合物中，具有鄰二酚羥基成分與無(wú)此結(jié)構(gòu)的成分，可用鉛鹽法分離。有鄰二酚羥基的成分可被醋酸鉛沉淀，不具有鄰二酚羥基的成分可被堿式醋酸鉛沉淀，據(jù)此可將兩類成分分離。與黃酮類成分混存的其它雜質(zhì)的分

26、子中如有羧基（如樹(shù)膠、粘液、果膠、有機(jī)酸、蛋白質(zhì)、氨基酸等）或鄰二酚羥基（如鞣質(zhì)等）時(shí)，也可被醋酸鉛沉淀達(dá)到去雜質(zhì)的目的。黃酮類化合物與鉛鹽生成的沉淀，濾集后按常法懸浮在乙醇中，通入H2S 進(jìn)行復(fù)分解，濾除硫化鉛沉淀，濾液中可得到黃酮類化合物。四、含黃酮類化合物的中藥實(shí)例1. 黃芩為清熱解毒常用中藥，主要有效成分黃芩苷具有抗菌、消炎作用，黃芩苷為淡黃色針晶，幾乎不溶于水，難溶于甲醇、乙醇。保存和炮制時(shí)易被水解變質(zhì)。2. 葛根主要含異黃酮類化合物，其總黃酮具有增加冠狀動(dòng)脈血流量及降低心肌耗氧量作用。3. 銀杏葉中所含的黃酮類化合物有黃酮、黃酮醇及其苷、雙黃酮和兒茶素等。具有擴(kuò)張冠狀血管和增加腦血

27、流量的作用。五、鑒別與結(jié)構(gòu)測(cè)定1. 黃酮類化合物的色譜鑒定方法。（ 1）紙色譜（ PC）適用于分離各種天然黃酮類化合物及其苷類的混合物。 以黃酮苷類來(lái)說(shuō)，一般第一向展開(kāi)采用某種醇性溶劑， 主要是根據(jù)分配作用原理進(jìn)行分離。 第二向展開(kāi)溶劑則用含水溶液，主要是根據(jù)吸附作用原理進(jìn)行分離。（ 2）硅膠薄層色譜用于分離與鑒定弱極性黃酮類化合物較好。（ 3）聚酰胺薄層色譜適用范圍較廣，特別適合于分離含游離酚羥基的黃酮及其苷類。由于聚酰胺對(duì)黃酮類化合物吸附能力較強(qiáng)， 因而展開(kāi)劑需要較強(qiáng)的極性。 在大多數(shù)展開(kāi)劑中含有醇、酸或水。2. 黃酮類化合物的紫外光譜特征以及在判斷化合物母核中的應(yīng)用。多數(shù)黃酮類化合物，因

28、分子中存在如下所示的桂皮酰基及苯甲?；M成的交叉共軛體系，故其甲醇溶液在 200 400 nm 的區(qū)域內(nèi)存在兩個(gè)主要的紫外吸收帶， 稱為峰帶 （I 300 400 nm）及峰帶（ 220 280 nm）。（1）黃酮及黃酮醇類兩者 UV 光譜譜形相似，但帶I 位置不同。（2）查耳酮及橙酮類，共同特征是帶I 很強(qiáng)，為主峰；而帶II 則較弱，為次強(qiáng)峰（3）異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇帶 II 為主峰；而帶I 很弱，常在主峰的長(zhǎng)波方向處有一肩峰。3. 黃酮類化合物紫外光譜位移試劑在測(cè)定其結(jié)構(gòu)中的原理與應(yīng)用。測(cè)定試樣在甲醇溶液中的 UV 光譜。測(cè)定試樣在甲醇溶液中加入各種診斷試劑后得到的UV 及可見(jiàn)光譜

29、。常用的診斷試劑有甲醇鈉 （NaOMe ）、醋酸鈉（ NaOAc ）、醋酸鈉 /硼酸（ NaOAc/H3BO3 ）、三氯化鋁 （AlCl3 ）及三氯化鋁 /鹽酸（ AlCl3/HCl ）等。加入診斷試劑的黃酮類化合物UV 圖譜及結(jié)構(gòu)特征的歸診斷試劑帶帶歸屬NaOMe紅移 40-60 nm示有 4'-OH強(qiáng)度不降紅移 50-60 nm示有 3-OH，但無(wú) 4'-OH強(qiáng)度下降吸收譜隨時(shí)間延長(zhǎng)而衰退示有對(duì)堿敏感的取代圖式，如 3,4'-;3,3',4'-;5,6,7-;5,7,8-;3',4',5' -羥基取代圖NaOAc(未熔融 )紅

30、移 5-20 nm示有 7-OHNaOAc/HBO紅移 12-30 nm示 B環(huán)有鄰二酚羥基33結(jié)構(gòu)紅移 5-10 nm示 A 環(huán)有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)（但不包括 5,6-位）AlCl 3 及AlCl3/HCl 譜圖 = AlCl 3譜圖示結(jié)構(gòu)中無(wú)鄰二酚羥AlCl /HCl基結(jié)構(gòu)3AlCl3/HCl 譜圖 AlCl 3譜圖示結(jié)構(gòu)中可能有鄰二酚峰帶（或 a）羥基紫移 30-40 nm示 B環(huán)上有鄰二酚羥基紫移 50-65 nm示 A、B環(huán)上均可能有鄰二酚羥基AlCl 3/HCl 譜圖 = MeOH譜圖示無(wú)3- 及/ 或5-OH3示可能有 3- 及 / 或 5-OHAlCl /HCl 譜圖 MeOH譜圖

31、峰帶紅移 35-55 nm示只有 5-OH紅移 60 nm示只有 3-OH紅移 50-60 nm示可能同時(shí)有 3- 及 5-OH紅移 17-20 nm除 5-OH外尚有 6- 含氧取4. 黃酮類化合物 1H-NMR 的特征信號(hào)及其在結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用。代（ 1） A 環(huán)質(zhì)子 5,7-二羥基黃酮類化合物H-6 及 H-8 將分別作為二重峰（J =2.5 Hz）出現(xiàn)在 5.70 6.90 區(qū)域內(nèi)，且H6H8 信號(hào)位于較高的磁場(chǎng)區(qū)。信號(hào)總是比 7-羥基黃酮類化合物A 環(huán)上有 H-5 、H-6 、H-8 三個(gè)芳香質(zhì)子。 H-5 因有 C4 位羰基強(qiáng)烈的負(fù)屏蔽效應(yīng)的影響，以及 H6 的鄰偶作用，將作為一個(gè)

32、二重峰 （ J = Ca, 9.0 Hz ）出現(xiàn)在 8.0 左右，位于比其它芳香質(zhì)子較低的磁場(chǎng)。 H-6 因有 H-5 的鄰偶 (J = Ca, 9.0 Hz) 及 H-8 間偶 (J = 2.5 Hz) 作用，將表現(xiàn)為一個(gè)雙二重峰。 H-8 因有 H-6 的間位偶合作用故顯現(xiàn)為一個(gè)裂距較小的二重峰(J = 2.5 Hz) 。（ 2）B 環(huán)質(zhì)子 4'-氧取代黃酮類化合物該取代模式的B 環(huán)質(zhì)子構(gòu)成AA'BB' 系統(tǒng)，其譜形可粗略地看成一個(gè) AB 偶合系統(tǒng)（ J = Ca, 8.5 Hz ），出現(xiàn)在 6.50 7.90 處，大體上位于比A 環(huán)質(zhì)子稍低的磁場(chǎng)區(qū)。H-3'

33、;,5' 的化學(xué)位移總是比H-2',6' 的化學(xué)位移值小。3',4'- 二氧取代黃酮及黃酮醇H-5' 作為一個(gè)二重峰 （ d, J8.5 Hz ）出現(xiàn)在6.70 7.10 處。 H-2'（ d, J 2.5 Hz ）及 H-6'（ dd, J = 8.5 及 2.5 Hz ）的信號(hào)出現(xiàn)在7.20 7.90 范圍內(nèi)，兩信號(hào)有時(shí)相互重疊不好分辨。 3',4' -二氧取代異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇H-2' 、H-5' 及 H-6' 將作為一個(gè)復(fù)雜的多重峰（常常組成兩組峰）出現(xiàn)在 6.70 7.1

34、0 區(qū)域內(nèi)。 3',4',5'-三氧取代黃酮類化合物當(dāng) B 環(huán)有 3',4',5'-三羥基時(shí)，則H-2' 及 H-6' 將作為相當(dāng)于兩個(gè)質(zhì)子的一個(gè)單峰，出現(xiàn)在 6.50 7.50 范圍內(nèi)。但如3'-或 5'-OH 甲基化或苷化時(shí)，則 H-2' 及 H-6' 將分別以不同的化學(xué)位移作為一個(gè)二重峰（J Ca, 2.0 Hz）出現(xiàn)。（3） C 環(huán)質(zhì)子其所示特征是區(qū)別各類型黃酮類化合物的主要根據(jù)。黃酮類其上， H-3 常常作為一個(gè)尖銳的單峰信號(hào)出現(xiàn)在 6.30 處。異黃酮類異黃酮上的H-2 ，因正好位于羰基

35、的 位，且通過(guò)碳與氧相接，故將作為一個(gè)單峰出現(xiàn)在比一般芳香質(zhì)子較低的磁場(chǎng)區(qū)（ 7.60 7.80）。二氫黃酮及二氫黃酮醇二氫黃酮H-2 與兩個(gè)磁不等同的H-3 偶合（ Jtrans Ca, 11.0 Hz；JcisCa, 5.0 Hz ），故作為一個(gè)雙二重峰出現(xiàn)，中心位于 5.20 處。兩個(gè) H-3 ，因有相互偕偶（J 17.0 Hz ）及 H-2 的鄰偶，將分別作為一個(gè)雙二重峰出現(xiàn)，中心位于 2.80 處。二氫黃酮醇在天然存在的二氫黃酮醇中，H-2 及 H-3 多為反式二直立鍵，故分別作為一個(gè)二重峰出現(xiàn)（ J= Ca, 11.0 Hz ）。H-2 位于 4.90 前后， H-3 則位于 4.

36、30 左右，兩者很容易區(qū)分，據(jù)此還可確定 C2 及 C3 的相對(duì)構(gòu)型 ,即兩質(zhì)子互為反式。查耳酮及橙酮類在查耳酮中， H-a 以及 H-b 分別作為二重峰 （ J Ca, 17.0 Hz ）出現(xiàn)在 6.70 7.40（ H-a ）及 7.30 7.70（ H-b ）處。在橙酮中， 芐基質(zhì)子則作為一個(gè)單峰出現(xiàn)在 6.50 6.70 處。如以 DMSO- d6 作溶劑，則該信號(hào)將移至 6.37 6.94。其確切峰位取決于A- 及 B-環(huán)上的羥基取代圖式。（4）糖上的質(zhì)子單糖苷類糖與苷元相連時(shí)，糖上C-1"-H （以下用H-1" 表示）與其它H 比較，一般位于較低磁場(chǎng)區(qū)。雙糖苷類

37、黃酮類化合物雙糖苷中，末端糖上的C-1'''-H 因離黃酮母核較遠(yuǎn)，受到其負(fù)屏蔽影響相對(duì)較小，共振峰將移至比H-1'' 較高磁場(chǎng)區(qū)，但移動(dòng)程度則因末端糖的連接位置不同而異。（5） 6-及 8-C-CH3 質(zhì)子其中， 6-C-CH3質(zhì)子信號(hào)恒定地出現(xiàn)在比8-C-CH3質(zhì)子小約0.20 化學(xué)位移單位。（ 6）乙酰氧基的質(zhì)子通常，脂肪族乙酰氧基上的質(zhì)子信號(hào)出現(xiàn)在 1.65 2.10處；而芳香族乙酰氧基上的質(zhì)子信號(hào)則出現(xiàn)在 2.302.50 處。(7）甲氧基上的質(zhì)子除若干例外，甲氧基質(zhì)子信號(hào)一般在 3.50 4.10 處出現(xiàn)。【本章練習(xí)題】一 . A 型題（單選

38、）1. UV 光譜有兩個(gè)吸收帶，帶 I 在 312nm，帶 II 在 276nm 帶 II 強(qiáng)度比帶 I 強(qiáng)得多，該化合物是（ ）類成分。2. 在水中溶解度最大的是A. 黃酮B. 二氫黃酮C. 二氫黃酮醇D. 查耳酮E. 花色素3. 葛根中具有增加冠狀動(dòng)脈血流量及降低心肌耗氧量作用的成分是E. 異黃酮類4. 酸性最弱的是A. 7,4 -二羥黃酮B. 5,7- 二羥基黃酮C. 4-羥基黃酮D. 5- 羥基黃酮E. 8-羥基黃酮5. 診斷試劑中用于判斷 7-OH 的是A. CH3OH+NaOCH3B. CH3OH+NaOACC. CH3OH+NaOAC+H3BO3D. CH3OH+ALCl3/HClE. CH3OH+ALCl36. 若黃酮中含有4-OH, 則 CH3OH+NaOCH3譜與 CH3OH 譜比譜帶A. 藍(lán)移 40 60nmB. 紅移 40 60nmC. 紅移 520nmD. 藍(lán)移 5 20nmE. 藍(lán)移 30 40nm7. 有清熱解毒功效的是8. 聚酰胺對(duì)黃酮類產(chǎn)生最強(qiáng)吸附能力的溶劑是A.95% 乙醇B.15% 乙醇C.水D. 甲酰胺E 脲素9. 分離黃酮類化合物最常用的方法是A. 氧化鋁柱色譜B. 氣相色譜C.聚酰胺柱色譜D.纖維素柱色譜