《LS2020倉儲蟲螨DNA條形碼分子鑒定技術規(guī)程》編制說明

1、倉儲蟲螨DNA條形碼分子鑒定技術規(guī)程行業(yè)標準編制說明一、工作簡況（一）任務來源倉儲蟲螨的快速、準確鑒定是有效防控的前提和基礎。截止 2000 年，全世界已記載的倉儲昆蟲和螨類約500 種，我國有 383 種，其中倉儲昆蟲242 種，螨類141 種。傳統(tǒng)的倉儲蟲螨種類鑒定技術普遍以成蟲形態(tài)特征為依據(jù)，很難對未成熟蟲態(tài)、殘損樣品以及形態(tài)相似種類進行準確鑒定。DNA條形碼分子鑒定技術是通過對一段標準化基因DNA序列的分析來實現(xiàn)對生物物種準確、快速鑒定的技術。為解決倉儲蟲螨監(jiān)測預警及防控中的種類鑒定問題，因此編制該技術規(guī)程。 本標準規(guī)定了倉儲蟲螨的DNA 條形碼鑒定方法，適用于倉儲蟲螨DNA 條形碼的

2、測定、結果的比對分析和判定，服務于蟲螨監(jiān)測和防控。根據(jù)國家糧食和物資儲備局辦公室關于下達2018 年第三批糧油行業(yè)標準制修訂計劃的通知（ 2018329 號），本行業(yè)標準立項，國家糧食和物資儲備局科學研究院組織逐步開展倉儲蟲螨 DNA 條形碼分子鑒定技術規(guī)程行業(yè)標準的編制工作。（二）起草單位本標準負責起草單位：國家糧食和物資儲備局科學研究院。1本標準參加起草單位：中國農(nóng)業(yè)大學、中儲糧成都儲藏研究院有限公司、河南工業(yè)大學、南京財經(jīng)大學。（三）主要工作過程標準編制計劃下達后，積極組織行業(yè)內(nèi)技術骨干成立標準起草工作組，研究和制定了標準編制工作方案，并按照標準化工作要求展開標準制定工作。標準起草工作組

3、收集整理國內(nèi)外倉儲蟲螨鑒定技術的相關資料，分析比較倉儲害蟲及農(nóng)業(yè)害蟲分子鑒定的相關技術，結合倉儲蟲螨個體微小、種類較多的特點以及殘損樣品鑒定難度大的問題，參考已發(fā)布的相關規(guī)范性國家標準和行業(yè)標準，起草倉儲蟲螨DNA 條形碼分子鑒定技術規(guī)程。具體征求意見情況如下： 發(fā)送 “征求意見稿 ”的單位數(shù) 18 個，收到 “征求意見稿 ”后回函的單位數(shù) 17 個，收到 “征求意見稿 ”后回函并有建議或意見的單位數(shù) 14 個，沒有回函的單位數(shù) 1個。2表 1標準起草人員信息表姓名單位伍祎國家糧食和物資儲備局科學研究院曹陽國家糧食和物資儲備局科學研究院李志紅中國農(nóng)業(yè)大學嚴曉平中儲糧成都儲藏研究院有限公司唐培安

4、南京財經(jīng)大學魯玉杰河南工業(yè)大學邵小龍南京財經(jīng)大學吳芳中儲糧成都儲藏研究院有限公司汪中明國家糧食和物資儲備局科學研究院分工標準整體框架搭建、 標準編制及相關實驗的設計和組織管理工作；本標準主編。標準整體框架搭建；參與標準編制。參與本標準 DNA條形碼部分的編制。參與本標準 DNA條形碼部分的編制。參與本標準 DNA條形碼部分的編制參與本標準 DNA條形碼部分的編制參與本標準 DNA條形碼部分的編制參與本標準DNA條形碼部分的編制編制。參與本標本起草及論證工作。張濤國家糧食和物資儲備局科學研究院參與標準起草及論證工作。二、標準的編制原則和主要內(nèi)容（一）標準的編寫原則與相關法律法規(guī)一致，與現(xiàn)行有效標

5、準相協(xié)調(diào)，同時符合我國國情。標準編制重點圍繞倉儲蟲螨DNA 條形碼的測定、結果的比對分析和判定的規(guī)范化操作設定相應技術規(guī)程內(nèi)容。在確保倉儲蟲螨 DNA 條形碼分子鑒定術語方法操作規(guī)范的基礎上，實現(xiàn)倉儲蟲螨準確、高效、快速的鑒定。倉儲蟲螨DNA 條形碼分子鑒定技術規(guī)程的編寫格式符合 GB/T 1.1-2009標準化工作導則第 1 部分：標準的結構和編寫的要求。（二）提出本標準的依據(jù)倉儲蟲螨的監(jiān)測檢測和防控是糧食倉儲行業(yè)重要的工3作，而倉儲蟲螨的準確鑒定是成功控制蟲害的第一步。傳統(tǒng)的倉儲蟲螨種類鑒定技術普遍以成蟲形態(tài)特征為依據(jù)，需要嚴格的專業(yè)知識學習和培訓，而且很難對未成熟蟲態(tài)（卵、幼蟲及蛹）、殘

6、損樣品以及形態(tài)相似種類進行準確鑒定?，F(xiàn)代分子技術的發(fā)展， 尤其是 DNA 條形碼技術的出現(xiàn)和完善，為物種準確快速鑒定開辟了新方法，同時從基因水平反映物種的進化關系，在提高物種鑒定效率、發(fā)現(xiàn)新種和隱存種等方面具有重要應用價值。通過前期需求調(diào)研及倉儲蟲螨DNA條形碼分子鑒定技術研究，制定本標準。（三）制定本標準的基礎起草組共10 人：伍 祎、曹陽、李志紅、嚴曉平、唐培安、魯玉杰、邵小龍、吳芳、汪中明、張濤。其中高級職稱4 人，副高級職稱6 人。本標準起草工作組在儲糧害蟲DNA 條形碼分子鑒定領域一直處于國內(nèi)領先地位。本起草組近幾年來一直從事儲糧害蟲 DNA 條形碼分子鑒定技術相關研究， 建立優(yōu)化了

7、方法、比較篩選了通用的幾個基因、分別從不同倉儲蟲螨進行了DNA 條形碼研究， 重點開展基于 DNA 條形碼分子鑒定技術的儲糧害蟲鑒定研究，形成了該技術的標準化操作，獲得了54 種倉儲蟲螨的 DAN 條形碼序列數(shù)據(jù)，為倉儲蟲螨的準確鑒定提供技術支持。（四）標準主要內(nèi)容1. 范圍本標準規(guī)定了倉儲蟲螨DNA 條形碼的測定、結果的比4對分析和判定技術，適用于倉儲蟲螨的種類鑒定。2. 規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本( 包括所有的修改單 ) 適用于本文件。GB/T 6682-2008 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3. 術語和定義下列術語和定義適用于本技術規(guī)程：3.1 DNA 條形碼DNA barcodes生物體內(nèi)一段短的、標準化的DNA 片段，用于區(qū)分不同的物種。 該片段在物種間有足夠的變異、容易進行 PCR 擴增。3.2 CO 基因CO gene線粒體基因組的蛋白編碼基因， 全稱為細胞色素 c 氧化酶亞基 （ cytochrome c oxidase subunit I, CO ），該片段在物種間有足夠的變異、 易進行 PCR 擴增且重復性好， 被證實能對很多動物物種進行高效區(qū)分，是進行DNA 條形碼分子鑒