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文檔簡介
1、階段性綜合檢測(cè)一、選擇題(本題共 20 小題,每題 2.5 分,滿分 50 分)1. (2011 年高考四川卷)北極比目魚中有抗凍基因,其編碼的抗凍蛋白具有 11 個(gè)氨基酸的重復(fù)序列,該序列重復(fù)次數(shù)越多, 抗凍能力越強(qiáng)。下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程 示意圖,有關(guān)敘述正確的是()A 過程獲取的目的基因,可用于基因工程和比目魚基因組測(cè)序B 將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達(dá)的新基因,不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋 白C.過程構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因,需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選D .應(yīng)用 DNA 探針技術(shù),可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表 達(dá)解析:選 B。因?yàn)橐环N氨基酸可能
2、對(duì)應(yīng)多種密碼子、真核生物體內(nèi)的基因含有內(nèi)含子等因素,導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄合成的目的基因與原基因有較大的差異,所以人工合成的目的基因不能用于比目魚基因組測(cè)序, A 選項(xiàng)錯(cuò)誤;抗凍蛋白的 11 個(gè)氨基酸的重復(fù)序列重復(fù)次數(shù)越多,抗 凍能力越強(qiáng),并不是抗凍基因的編碼區(qū)重復(fù)次數(shù)越多抗凍能力越強(qiáng),抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因已不是原來的抗凍基因,因此不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白,B 選項(xiàng)正確;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的最常用方法,不是為了篩選含有標(biāo)記基因的質(zhì) 粒,C 選項(xiàng)錯(cuò)誤;應(yīng)用 DNA 探針技術(shù),可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因植物中目的基因的存在,但不能完 成對(duì)目的基因表達(dá)的檢測(cè),D 選項(xiàng)錯(cuò)誤。2.基因工程的
3、設(shè)計(jì)施工是在什么水平上進(jìn)行的()A .細(xì)胞B.細(xì)胞器C .分子D.原子解析:選 C?;蚬こ逃址Q DNA 重組技術(shù)。在生物體外,將 DNA 分子經(jīng)“剪切”和 “拼接”重組后,導(dǎo)入受體細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行大量繁殖,使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá),產(chǎn)生出人類所需要的基因產(chǎn)物,所以是在分子水平上定向改造生物的性狀的。3. 下列關(guān)于 DNA 連接酶的敘述正確的是()催化相同粘性末端的 DNA 片段之間的連接催化不同粘性末端的 DNA 片段之間的連接催化兩個(gè)粘性末端互補(bǔ)堿基間氫鍵的形成催化 DNA 分子兩條鏈的脫氧核糖與磷酸間磷酸二酯鍵的形成A .C.解析:選 D。在 DNA 重組技術(shù)中,兩個(gè) DNA 片段必須有相同
4、的粘性末端才能互補(bǔ)配 對(duì)進(jìn)行結(jié)合,具有相同粘性末端的 DNA 分子連接時(shí), DNA 連接酶的作用是催化脫氧核苷 酸鏈上的脫氧核糖與磷酸間磷酸二酯鍵的形成。4.基因工程中要把所需目的基因從供體細(xì)胞中分離出來,這要利用限制性核酸內(nèi)切酶,有一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別DNA 分子中的 GAATTC 序列,并在 G 和 A 之間進(jìn)行切割,這是利用了酶的 ()A .高效性B.專一性C.多樣性D.催化活性受溫度影響解析:選 B。本題綜合考查了酶的功能特性,即專一性,高效性,多樣性的特點(diǎn)。另外 酶的活性受溫度、 pH 的影響,一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列,并 在特定的位點(diǎn)切割是酶專一性的
5、體現(xiàn)。5.基因工程的操作過程中需要的工具酶有 ()A .限制性核酸內(nèi)切酶DNA 聚合酶B .限制性核酸內(nèi)切酶DNA 連接酶C. DNA 連接酶 DNA 聚合酶D. RNA 聚合酶 DNA 連接酶解析:選 B。DNA 聚合酶、RNA 聚合酶分別在 DNA 合成、RNA 合成時(shí)起作用,基因 工程中不需要。6.基因工程中常作為基因的載體的一組結(jié)構(gòu)是 ()A .質(zhì)粒、線粒體、噬菌體B .染色體、葉綠體、線粒體C. 質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒D. 細(xì)菌、噬菌體、動(dòng)植物病毒答案: C7.能夠?qū)⒕哂心┒藟A基互補(bǔ)的 2 個(gè) DNA 片段連接在一起的是 ()A. DNA 水解酶B. DNA 解旋酶C. DNA 連
6、接酶D. DNA 聚合酶解析: 選 C。 DNA 水解酶能將高分子化合物 DNA 水解為脫氧核苷酸, 甚至進(jìn)一步水解 為五碳糖、堿基和磷酸; DNA 解旋酶能使具有雙螺旋結(jié)構(gòu)的 DNA 解開螺旋,并使其雙鏈 間的氫鍵打開成為互補(bǔ)的單鏈; DNA 聚合酶能夠?qū)蝹€(gè)脫氧核苷酸連接到脫氧核苷酸鏈上; 只有 DNA 連接酶能將具有末端堿基互補(bǔ)的 2 個(gè) DNA 片段連接在一起,也就是說具有縫合 DNA 片段的作用。8.基因工程技術(shù)中常用的質(zhì)粒其本質(zhì)是什么分子?一般取自何類生物()A .蛋白質(zhì)、噬菌體B.蛋白質(zhì)、動(dòng)物細(xì)胞C. DNA、細(xì)菌細(xì)胞D. DNA、植物細(xì)胞答案: C9.在基因工程中, 切割載體和
7、含有目的基因的DNA 片段一般需使用 ()A .同種限制性核酸內(nèi)切酶B .兩種限制性核酸內(nèi)切酶C.同種連接酶 D .兩種連接酶B.D.解析:選 A。該題考查限制性核酸內(nèi)切酶的功能,當(dāng)使用同種限制性核酸內(nèi)切酶時(shí),在 載體和目的基因中才會(huì)產(chǎn)生相同的粘性末端, 從而進(jìn)行不同片段或相同 DNA 分子片段之間 的堿基互補(bǔ)配對(duì)。10.現(xiàn)有一長度為 1000 堿基對(duì)(bp)的 DNA 分子,用限制性核酸內(nèi)切酶 EcoRI酶切后 得到的 DNA 分子仍是 1000 bp,用 KpnI單獨(dú)酶切得到 400 bp 和 600 bp兩種長度的 DNA 分子,用 EcoRI、KpnI同時(shí)酶切后得到 200 bp 和
8、600 bp 種長度的 DNA 分子。下圖中表 示該 DNA 分子的酶切圖譜正確的是 ()解析:選 D。該 DNA 分子用限制性核酸內(nèi)切酶 EcoRI酶切前后長度不變,數(shù)量不變,說明其為環(huán)狀結(jié)構(gòu), 進(jìn)一步根據(jù)題目所給實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可推斷該 DNA 分子酶切圖譜如圖 D 所示。11. 已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性 DNA 分子上有 3 個(gè)酶切位點(diǎn),如圖中箭頭所指。 如果在該線性 DNA 分子在 3 個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷,則會(huì)產(chǎn)生a、 b、 c、 d 四種不同長度的 DNA 片段。 現(xiàn)有多個(gè)上述線性 DNA 分子,若在每個(gè) DNA 分子上至少有 1 個(gè)酶切位 點(diǎn)被該酶切斷,則從理論上講,經(jīng)該酶酶切后
9、,這些線性 DNA 分子最多能產(chǎn)生長度不同的 DNA 片段種類數(shù)是 ()A 3B4C9D 12解析:選 C。本題考查的是基因工程方面的內(nèi)容,每一種限制性內(nèi)切酶切割DNA 后會(huì)留下特殊性的粘性末端,同時(shí)一次切割后,會(huì)把 DNA 分割成兩個(gè)片段,且不同的內(nèi)切酶切 后的片段不一樣, 如果將圖中的三個(gè)切割位點(diǎn)自左至右依次標(biāo)為甲乙丙,由甲處切, 可產(chǎn)生兩個(gè)片段,即 a 和右邊的 b cd 段,如果只從乙處切,就有 ab 和 cd 段,如果只從丙 處切,就有 abc 和 d 段,甲乙同時(shí)切,就有 a、b 和 cd 段,乙丙同時(shí)切,就有 ab 和 c、d 段,甲丙同時(shí)切,就可 a、bc、d 段三種片段,甲乙
10、丙三者都同時(shí)切,就有a、b、c、d 三種片斷。所以本題應(yīng)該選 C。12基因工程是在 DNA 分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的,在基因操作的基本步驟中,不 進(jìn) 行堿基互補(bǔ)配對(duì)的步驟是 ()A.人工合成目的基因B .目的基因與載體 DNA 連接C.將重組 DNA 導(dǎo)入受體細(xì)胞D .目的基因的表達(dá)解析:選 C。目的基因的人工合成、表達(dá)以及與載體DNA 結(jié)合都發(fā)生堿基配對(duì)行為。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的過程中沒有堿基互補(bǔ)配對(duì)行為。13.下列關(guān)于基因工程的敘述,錯(cuò)誤的是 ()A .目的基因和受體細(xì)胞均可來自動(dòng)、植物或微生物B限制性核酸內(nèi)切酶和 DNA 連接酶是兩類常用的工具酶C.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰
11、島素原無生物活性D .載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA 的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)解析:選 D。人胰島素原基因中有內(nèi)含子存在,因此大腸桿菌中表達(dá)后無生物活性。載 體上的抗性基因有利于篩選含重組 DNA 的細(xì)胞,但由于它和目的基因是相互獨(dú)立的,并不 能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。14.利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá),可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品。 下列各項(xiàng)中能說明目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是 ()A .在受體細(xì)胞中檢測(cè)到了外源基因B .大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因及其轉(zhuǎn)錄成的mRNAC.山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人生長激素的分解產(chǎn)物氨基酸D 轉(zhuǎn)入了人胰島素原的大腸桿菌細(xì)胞中檢測(cè)到了人胰島素原解析:選 D。
12、考查了基因工程中目的基因表達(dá)的有關(guān)知識(shí)。目的基因在受體細(xì)胞中存在并不意味著目的基因一定表達(dá),所以需要進(jìn)行篩選。 此題一定要注意題干中的“目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá) ”,意指目的基因的終產(chǎn)物而不是中間物質(zhì)。15. 番茄營養(yǎng)豐富,是人們喜愛的一類果蔬。 普通番茄細(xì)胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制細(xì)胞產(chǎn)生多聚半乳糖醛酸酶,該酶能破壞細(xì)胞壁,使番茄軟化,不耐貯藏??茖W(xué)家 通過基因工程將一種抗多聚半乳糖醛酸酶基因?qū)敕鸭?xì)胞,獲得了抗軟化番茄。 下列關(guān)于培育抗軟化番茄的敘述中,錯(cuò)誤的是 ()A 運(yùn)載工具是質(zhì)粒B .受體細(xì)胞是番茄細(xì)胞C.目的基因?yàn)槎嗑郯肴樘侨┧崦富駾 .目的基因的表達(dá)延緩了細(xì)胞的
13、軟化解析:選 C??管浕训呐嘤且再|(zhì)粒作運(yùn)載體,將目的基因(抗多聚半乳糖醛酸酶基因 )與質(zhì)粒結(jié)合形成重組 DNA ,利用含重組 DNA 的土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法去感染普通番茄, 目的基因進(jìn)入普通番茄細(xì)胞中染色體的 DNA 上,從而使多聚半乳糖醛酸酶基因不能表達(dá)。16.目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性, 只有通過鑒定和檢測(cè)才能知道。下列屬于目的基因檢測(cè)和鑒定關(guān)鍵步驟的是 ()A .檢測(cè)受體細(xì)胞是否有目的基因B .檢測(cè)受體細(xì)胞是否有致病基因C.檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄 mRNAD .檢測(cè)目的基因是否翻譯蛋白質(zhì)解析:選 A。目的基因的檢測(cè)包括:首先檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA 上是
14、否插入了目的基因, 方法是用 DNA 探針, 使 DNA 探針與基因組 DNA 雜交;其次檢測(cè)目的基因是否 轉(zhuǎn)錄出了 mRNA ,方法是用基因探針與 mRNA 雜交; 最后檢測(cè)目的基因是否翻譯了蛋白質(zhì),方法是進(jìn)行抗原 抗體雜交。其中第一步是目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵。17.目前科學(xué)家把兔子的血紅蛋白基因?qū)氲酱竽c桿菌細(xì)胞中,在大腸桿菌細(xì)胞中合成了兔子的血紅蛋白。下列哪一項(xiàng)不.是這一先進(jìn)技術(shù)的理論依據(jù) ()A .所有生物共用一套遺傳密碼B .基因能控制蛋向質(zhì)的合成C.兔子的血紅蛋白基因與大腸桿菌的DNA 都是由四種脫氧核苷酸構(gòu)成,都遵循相同的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則D .兔子與大腸桿菌有共同
15、的原始祖先解析: 選 D 。轉(zhuǎn)基因生物體內(nèi)的外源基因能夠成功表達(dá),是建立在下列基礎(chǔ)之上的:不 同生物的遺傳密碼是一樣的; 不同生物遺傳物質(zhì)的組成一樣, 即都是由四種脫氧核苷酸連接 而成長鏈, 然后根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則組成雙鏈; 不同生物體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成都要在核糖體 上完成,且都需經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。18. 抗病毒轉(zhuǎn)基因植物成功表達(dá)后,以下說法正確的是 ()A .可以抵抗所有的病毒B .對(duì)病毒的抗性具有局限性或特異性C.可以抗害蟲D .可以穩(wěn)定遺傳,不會(huì)變異解析:選 B??共《巨D(zhuǎn)基因植物只可以抵抗某些病毒,不是所有病毒,不可以抗蟲???病毒基因的存在可能會(huì)增大變異的可能性。(2)以上過程中,將目
16、的基因?qū)朊藁?xì)胞內(nèi)使用了法。目的基因能否在19 治療白化病、苯丙酮尿癥等人類遺傳病的根本途徑是( )A 口服化學(xué)藥物B .注射化學(xué)藥物C.利用輻射或藥物誘發(fā)致病基因突變D .采用基因治療法糾正或補(bǔ)償缺陷基因帶來的影響解析:選 D。遺傳病是受基因控制的,要想徹底根治,只有通過基因工程技術(shù),用正常 的目的基因去糾正或補(bǔ)償缺陷基因,這是基因治療。雖然用輻射或藥物誘發(fā)致病基因突變, 可以改變?cè)械幕颍谝话闱闆r下,突變大多是有害的,很可能引起另一種新的疾病。 A、B 選項(xiàng)只能治標(biāo),不能治本。20.目前研究人員運(yùn)用基因工程技術(shù),已 經(jīng) 能讓 羊 合成并由乳腺分泌抗體, 下列相關(guān)敘述中正確的是 ()
17、1該技術(shù)能定向改變生物的遺傳性狀2DNA 連接酶把目的基因與載體的粘性末端的堿基對(duì)連接起來3蛋白質(zhì)中的氨基酸序列可為合成目的基因提供信息4受精卵是理想的受體A .B.C.D.解析:選 B。本題考查了對(duì)基因工程知識(shí)的綜合分析判斷能力。基因工程是按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過體外 DNA 重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,所 以可以定向改造生物的遺傳性狀。在基因操作中, DNA 連接酶連接的不是目的基因與載體 的粘性末端的堿基對(duì),而是基因與載體 DNA 兩條鏈的骨架,即磷酸二酯鍵。由蛋白質(zhì)中的 氨基酸序列可推知 mRNA 的核苷酸序列,進(jìn)而推測(cè)得到 DNA 的核苷酸序列,再用化學(xué)合
18、成法獲得目的基因。用動(dòng)物細(xì)胞作受體細(xì)胞時(shí),一般采用其受精卵, 因?yàn)轶w細(xì)胞的全能性受 到嚴(yán)格限制。二、非選擇題 (本題共 4 小題,滿分 50 分)21. (12 分)科學(xué)家通過基因工程, 成功培育出能抗棉鈴蟲的棉花植株 抗蟲棉, 其過 程大致如圖所示。(1)細(xì) 菌 的 基 因 能 “ 嫁 接 ” 到 棉 花 細(xì) 胞 內(nèi) , 其 原 因 是棉株體內(nèi)穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性的關(guān)鍵是 _,還需要通過檢測(cè)才能知道,從生物個(gè)體水平上檢測(cè),采用的方法是 _。(3)利用基因工程技術(shù)培育抗蟲棉,相比誘變育種和傳統(tǒng)的雜交育種方法, 具有_和_等突出的優(yōu)點(diǎn),但是目前基因工程仍不能取代傳統(tǒng)的雜交育種和誘變育種。與基
19、因工程技術(shù)相比,雜交育種和誘變育種方法主要具有 _的優(yōu)點(diǎn)。(4)某棉農(nóng)在食用了該抗蟲棉種子壓榨的棉子油后,出現(xiàn)鼻塞流涕、皮膚瘙癢等難忍癥狀。停用一段時(shí)間后這些癥狀會(huì)自然消失,該現(xiàn)象很可能是 _ 。解析:本題以抗蟲棉的培育為背景,考查了運(yùn)用基因工程技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因作物的步驟、 方法。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的常用方法,利用它能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物, 以及其 Ti 質(zhì)粒上的 T-DNA 能轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞, 并且整合到受體細(xì)胞染色體 DNA 上的特點(diǎn),可以把目的基因插入其 Ti 質(zhì)粒的 T-DNA 中,借助其作用使目的基 因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞中。細(xì)菌基因能嫁接到棉花細(xì)胞內(nèi)的原
20、因是DNA 的結(jié)構(gòu)和組成單位是相同的,并且嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則進(jìn)行?;蚬こ逃N的優(yōu)點(diǎn)主要是目的性強(qiáng)、育 種周期短、克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和障礙等。答案:(1)組成細(xì)菌和植物的 DNA 分子的空間結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成相同;有互補(bǔ)的堿基序列(2)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 目的基因是否插入了受體細(xì)胞的染色體子,看其是否死亡目的性強(qiáng) 能有效地打破物種的生殖隔離界限操作簡便易行過敏反應(yīng)22. (10 分)已知 SARS 是由一種 RNA 病毒感染所引起的疾病。 SARS 病毒表面的 S蛋 白是主要的病毒抗原,在 SARS 病人康復(fù)后的血清中有抗S 蛋白的特異性抗體。某研究小SARS 病毒的疫苗,開展了前期研究工作,其簡
21、要的操作流程如下:ISARSl脫 l, (TJ選擇性擴(kuò)憎屮債白| 九玉 * | -tri?耳4I-*RNA 1 XL? Kl.JXA墮(1)實(shí)驗(yàn)步驟所代表的反應(yīng)過程是 _。步驟構(gòu)建重組 DNA 分子 A 和重組 DNA 分子 B 必須使用限制性核酸內(nèi)切酶和_酶,后者的作用是將用限制性核酸內(nèi)切酶切割的 _ 和_ 連接起來。(3)如果省略步驟而將大量擴(kuò)增的 S 蛋白基因直接導(dǎo)入大腸桿菌,一般情況下,不能得到表達(dá)的 S 蛋白,其原因是 S 蛋白基因在大腸桿菌中不能 _ ,也不能_(4)步驟和的結(jié)果相比,原核細(xì)胞表達(dá)的S 蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S 蛋白的氨基酸序列_ (填“相同”或“不同”,根本原因是解
22、析:(1)利用 RNA 獲取 DNA , 一般采用逆轉(zhuǎn)錄的方法,在這一過程中需要逆轉(zhuǎn)錄酶;(2)目的基因與載體結(jié)合, 先用限制性核酸內(nèi)切酶在目的基因和載體上切出相同的粘性末端,DNA 上讓害蟲吃棉花的葉組為了斗養(yǎng)動(dòng)植b【胞真核細(xì)胞表達(dá)的百SEN將目的基因片段插入載體的切口處,再加入適量DNA 連接酶,將粘性末端連接起來;選擇性擴(kuò)增后得到的含有遺傳信息的DNA 片段(S 蛋白基因),直接導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi),在不與其 DNA 整合的情況下,不進(jìn)行復(fù)制和轉(zhuǎn)錄,得不到相應(yīng)的蛋白質(zhì);(4)各種生物都共用一套遺傳密碼,因此轉(zhuǎn)入相同的目的基因,表達(dá)出的蛋白質(zhì)一般應(yīng)相同。答案: (1)逆轉(zhuǎn)錄(2)DNA 連接
23、 載體 S 蛋白基因(3)復(fù)制 合成 S 蛋白基因的 mRNA(4)相同 表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同23 (15 分)回答有關(guān)基因工程的問題:(1)_構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí), 用不同類型的限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA 后, 可能產(chǎn)生 粘性末端, 也可能產(chǎn)生末端。 若要在限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接, 則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生 _ (相同、不同 )粘性末端的限制性核酸內(nèi)切酶。(2)利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí),構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等, 其中啟動(dòng)子的作用是在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí), 常用 _ 處理大腸桿菌, 以利于表達(dá)載體進(jìn)入; 為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了
24、mRNA ,可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與 mRNA 雜交, 該雜交技術(shù)稱為 _ 。為了檢測(cè)胰島素基因轉(zhuǎn)錄的 mRNA 是否翻譯成 _ ,常用抗原 抗體雜交技術(shù)。(3)如果要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞,先要將目的基因插入農(nóng)桿菌 Ti 質(zhì)粒的_中, 然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞,通過 DNA 重組將目的基因插入植物細(xì)胞的 _上。解析: (1)限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別特定的DNA 序列,并在特定位點(diǎn)上切割 DNA ,形成粘性末端或平末端; 要使目的基因和質(zhì)粒直接進(jìn)行連接, 應(yīng)使用同一種限制性核酸內(nèi)切酶 進(jìn)行切割,使二者產(chǎn)生相同的粘性末端。 (2)啟動(dòng)子為 DNA 序列,其具有 RNA
25、聚合酶結(jié) 合位點(diǎn),能啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,合成 RNA ;將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌時(shí),常用Ca2+處理;檢測(cè)目的基因時(shí),常用分子雜交技術(shù)檢測(cè)目的基因或相應(yīng)的mRNA,或采用抗原 一抗體雜交技術(shù)鑒定相應(yīng)的蛋白質(zhì)。 (3)用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞時(shí),首先將目的基因?qū)?入農(nóng)桿菌 Ti質(zhì)粒的 T-DNA 中,再利用農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞,通過 DNA 重組將目的基因插 入植物細(xì)胞的染色體的DNA 上。答案: (1)平 相同 (2)RNA 聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn),有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA ,最終獲得所需要的蛋白質(zhì)Ca2DNA 分子雜交技術(shù) 人胰島素(3)T- DNA 染色體的 DNA24. (13 分)如圖為某種質(zhì)粒結(jié)構(gòu)簡圖,小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn),ampR為青霉素抗性基因,tetR為四環(huán)素抗性基因,P 為啟動(dòng)子,T 為 終止子,ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答:(1) 將含有目的基因的 DNA 與質(zhì)粒分別用 EcoRI酶切割,酶切產(chǎn)物用 DNA 連接酶進(jìn)行連 接后, 其中 由兩個(gè) DNA 片段之 間連
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