香蕉植株內(nèi)生細(xì)菌群落多態(tài)性研究

1、香蕉植株內(nèi)生細(xì)菌群落多態(tài)性研究藍(lán)江林s劉波匚焦會民2,朱育菁蘇明星史懷j(1 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生物資源研究所，福建福州350003; 2福建農(nóng)林大學(xué)，福建福州350002)摘 要：【冃的】了解香蕉植株在不同生長狀態(tài)下內(nèi)生細(xì)菌的群落多樣性?！痉椒ā坎捎闷桨宸蛛x純化香蕉健株和病 株內(nèi)生細(xì)菌,利用細(xì)菌脂肪酸鑒定技術(shù)進(jìn)行鑒定。【結(jié)果】共獲得內(nèi)生細(xì)菌21屬24種,香蕉健株共分離獲得9株內(nèi) 生細(xì)菌，6種細(xì)菌分布在根部，莖部分離到2種，葉部分離到8種細(xì)菌。香蕉病株共分離獲得17株內(nèi)生細(xì)菌，分屈 15個屬，從根部分離到3種細(xì)菌，莖部分離到行種，葉部共分離到6種。就內(nèi)生細(xì)菌的含量來看，香蕉健株根部的 內(nèi)生細(xì)

2、菌含量最高，達(dá)5.195x10mu/g,下部葉片內(nèi)生細(xì)菌的含量最低，僅為0.30x1 owgo香蕉病株莖部內(nèi)生細(xì)菌的 數(shù)量顯著高于其他部位，達(dá)1.05x107cfu/g.【結(jié)論】香蕉植株在不同牛長狀態(tài)下內(nèi)牛細(xì)菌的種類和數(shù)量均存在多樣性。 關(guān)鍵詞：香蕉；內(nèi)牛細(xì)菌；群落多態(tài)性中圖分類號：文獻(xiàn)標(biāo)識碼：文章編號：community and diversity of endophytic bacteria in side musa plantslan jiang-lin1, liu bo1 jiao hui-min2, zhu yu-jing1, su ming-xing1, shi huai1(1.a

3、gricultural bioresource research institute, fuji a n academy of agricultural scien ces, fuzhou 350 003; 2.college of plant protection, fujian agriculture and forestry university, fuzhou 350002)abstract:【0bjective in order to study the community structure of endophytic bacteria in musa paradisiacal.

4、method the healthy and disease infested musa paradisiaca plants were collected from zhangzhou in fujian province, pr china the endophytic bacteria were isolated using the culture method and identified by microorganism identification system (midi system produced by usa).【result the results showed tha

5、t a total of 24 microbial species identified belonging to 21 genera of bacteria were colonized detected in musa plants.there were 9 microbial species belonging to 9 genera were found inside the healthy plant, of which,6 species were found in side the roots with the high amount of 5.96x105cfug-1, 2 s

6、pecies were found in side stems and 8 species of bacteria were found in side leaves.there were 17 microbial species belonging to 15 genera were displayed in the diseased infested plant, 11 species of bacteria were found inside the stems with the high amount of 1.05x107cfu/g, 3 species were found ins

7、ide roots and 6 species of bacteria were found inside leaves . conclusion there are significant polymorphism among community structure of endophytic bacteria and their quantity in musa paradisiacal.key word： musa paradisiaca; endophytic bacteria; community and diversity0引言【引言】香蕉是世界水果貿(mào)易量最大宗的水果，也是僅次于水

8、稻、小麥、玉米的第四糧食作物, 經(jīng)濟(jì)地位及其重要。然而香蕉枯萎病的危害卻嚴(yán)重影響香蕉的牛產(chǎn)，香蕉枯萎病俗稱黃葉病、巴拿收稿日期：接受日期：基金項目：公益性行業(yè)科研專項經(jīng)費項冃(200903049)：棉建省財政專項福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)瀟團(tuán)隊建設(shè)基金(st1f-y03)；福建省發(fā) 改委重點項目(閩發(fā)改投資|2006|781號)。作者簡介：藍(lán)江林(1972)副研究員，研究方向:農(nóng)業(yè)微生物研究與應(yīng)用。電子郵件：lanfz2008。通訊作者：劉波，博士，研究員。研究方向：生物技術(shù)與生物防治。電子郵件：izliubo.馬枯萎病，是由尖施鐮刀菌(fusariumoxyspoem)引起的毀滅性最強(qiáng)的病害z_

9、,依據(jù)病菌在不同類 型香蕉品系或者不同屬種的致病程度可將其劃分為4個生理小種，其屮4號生理小種(f0c4)危害最 人【1】，我國于2007年5月將該病正式列入進(jìn)境植物檢疫性有害牛:物名錄。香蕉枯萎病作為一種土傳病 害，到it前為止尚無十分有效的防治措施。隨著生物防治在農(nóng)作物病害防治中優(yōu)勢不斷顯現(xiàn)，利用 內(nèi)生菌進(jìn)行香蕉枯萎病的防治成為了研究的熱點。【前人研究進(jìn)展】曹理想等匹報道了粉蕉內(nèi)生放線 菌玫瑰淺灰鏈霉菌株對香蕉枯萎病菌表現(xiàn)出明顯的拮抗作用。付業(yè)勤等【3研究表明，內(nèi)工扌吉抗細(xì)菌枯 草芽砲桿菌(bacillussubtilis)對香蕉枯萎病菌有良好的抑制作用。研究表明植物內(nèi)生細(xì)菌綸防機(jī)制主 要

10、冇產(chǎn)生抗生索、競爭生態(tài)位和營養(yǎng)、誘導(dǎo)寄主產(chǎn)生系統(tǒng)抗性、滅活病菌萌發(fā)因子、產(chǎn)生胞外酶溶 解病原菌細(xì)胞捲和降解毒素等兒種方式。植物內(nèi)牛細(xì)菌具有宿主特異性，而且在同一宿主的不同器 官、生育期及宿主所處環(huán)境的不同，其類群結(jié)構(gòu)各冇不同軋在宿主的彫響下，內(nèi)牛菌的不同亞群會 在不同的環(huán)境中形成，當(dāng)宿主植物在環(huán)境惡化的情況下，它會選擇那些增強(qiáng)其抵抗惡劣環(huán)境的內(nèi)生 菌亞群的侵染【6】?！颈狙芯壳腥朦c】內(nèi)牛菌的牛物學(xué)功能都是在復(fù)雜的內(nèi)住菌群落結(jié)構(gòu)條件下實現(xiàn)的, 因而，利用內(nèi)生菌防治香蕉枯萎病，必須了解植物內(nèi)生細(xì)菌的群落結(jié)構(gòu)多樣性，研究內(nèi)生生防菌株 在群落結(jié)構(gòu)中的地位及功能，從而明確內(nèi)生生防菌株的作用機(jī)制，更加有效

11、地利用內(nèi)生菌資源?！緮M 解決的關(guān)鍵問題】木研究通過分離不同生長狀態(tài)香蕉植株內(nèi)生細(xì)菌，了解內(nèi)生細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的多態(tài) 性。擬通過氣相色譜技術(shù)快速、靈敏、準(zhǔn)確的檢出內(nèi)牛細(xì)菌的脂肪酸，利用全自動微牛物鑒定系統(tǒng) 進(jìn)行鑒定，從而明確香蕉植株內(nèi)生細(xì)菌菌群的組成，為香蕉內(nèi)生細(xì)菌資源的進(jìn)一步研究和開發(fā)利用 提供基礎(chǔ)。1材料與方法1.1試驗材料香蕉(musaparadisiacal健株1株，病株1株；均處于成果期。采集地點為福建漳州。采集時間 為2007年6月27日。1.2試驗方法1.2.1內(nèi)生細(xì)菌的分離卩將香蕉植株分為根、莖、葉三部分。根部分別選取根尖和根基部分；假莖部則據(jù)根長度從莖基 部到莖頂端等分為5段，每段

12、隨機(jī)取樣；葉片根據(jù)生長的位置分為上部、中部和下部葉片，每部分 取葉基部、屮部和葉尖部分。將樣本用自來水沖洗干凈，吸水濾紙吸干水分，稱重，先川75%酒精 浸泡40s左右，用無菌水充分淋洗，再用10% kcio3溶液浸8 min,無菌水反復(fù)淋洗，無菌濾紙吸干。 在無菌研缽屮充分研磨勻漿，無菌水梯度稀釋至m3和104,取200 pl稀樣液涂布于na平板上, 侮梯度3個重復(fù)，靜置20 min后，30°c倒置暗培養(yǎng)24一8 h。統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量。分別計數(shù)后用80°c 廿油冷凍保存待用。以組織消毒示用無菌水淋洗的淋洗液作為對照，涂na平板培養(yǎng)，如長菌落，則判定研磨液所培 養(yǎng)的菌落為非

13、內(nèi)生菌，丟棄；若對照屮無菌落，則基木可判定在研磨液屮長出的菌落可能是內(nèi)生菌， 純化，保存待用。1.2.2脂肪酸的提取和氣相色譜檢測7,8細(xì)菌培養(yǎng)采用tsba培養(yǎng)基：30g胰蛋口月東人豆肉湯(tsb,購于fisher公司)+15g瓊脂+1l水。 脂肪酸提取試劑：(1)皂化試劑：45 g氫氧化鈉+150 ml甲醇+150 ml水；(2)甲基化試劑:325 ml6mol-l-1 鹽酸+275 ml甲醇；(3)萃取試劑：200 ml正已烷+200 ml甲基叔丁基乙(4)洗滌試劑：10.8 g 氫氧化鈉+900 ml水。配制方法由midi公司提供。脂肪酸提取：(1)獲菌：用接種環(huán)挑取35環(huán)(約40 mg

14、濕重)的菌落置入一個干凈、干燥的 有螺旋蓋的試管中(最佳的獲菌區(qū)域為第3區(qū));(2)皂化:加入(1.0±0.1)ml皂化試劑,擰緊蓋子, 振蕩5-10 s,放入95-100°c的沸水中5 min,宗溫冷卻，振蕩5-10s,再水浴25 min,宗溫冷卻；(3) 甲基化：開蓋加入(2.0±0.1) ml甲基化試劑，擰緊蓋子，振蕩5-10 s, (80±1) °c水浴10 min,移開 且快速用流動占來水冷卻至室溫；(4)萃?。杭尤?1.3±0.1) ml的萃取試劑，擰緊蓋子，溫和混合 旋轉(zhuǎn)10 min,打開管蓋，利用干凈的移液管取出每個樣

15、木的下層水相部份;(5)基木洗滌:加入(3.0±0.2) ml洗滌試劑，擰緊蓋了，溫和混合旋轉(zhuǎn)5 min,打開管蓋，利用干凈的移液管移出約2/3體積的上層 有機(jī)相到干凈的氣相色譜檢體小瓶，用于氣相檢測。在下述色譜條件下平行分析脂肪酸甲酯混合物標(biāo)樣和待檢樣本：二階程序升高柱溫，仃0°c起始, 5°cmin升至260c,而后405in升溫至310°c,維持90s；汽化室溫度250°c、檢測器溫度300°c； 載氣為氫氣(2ml min-i).尾吹氣為氮氣(30mlmin-9；柱前壓10.00psi (1 psi=6.895 kpa)；進(jìn)樣

16、量ipl, 進(jìn)樣分流比100:l1.2.3細(xì)菌種類鑒定(脂肪酸鑒定法)系統(tǒng)根據(jù)各組分保留時間計算等鏈長(ecl)值確定目標(biāo)組分的存在、采用峰面積歸一化法計算 各組分的相對含雖:，再將二者為系統(tǒng)譜庫中的標(biāo)準(zhǔn)菌株數(shù)值匹配計算相似度(similarityindex, si),從 而給出一種或幾種可能的菌種鑒定結(jié)果。-般以最高si的菌種名稱作為鑒定結(jié)果，但當(dāng)其報告的幾 個菌種的si比較接近時，則根據(jù)色譜圖特征及菌落生長特性進(jìn)行綜合判斷。以脂肪酸混合標(biāo)樣校正 保留時間。2結(jié)果與分析2.1香蕉植株內(nèi)生細(xì)菌的分離和鑒定實驗分離香蕉植株內(nèi)生細(xì)菌種類見表仁香蕉植株共分離獲得"屬24株內(nèi)生細(xì)菌。其屮腸桿

17、菌屬、泛菌局和微桿菌屬各有-2株，其余 18個屬各有1株。表2香蕉健株和病株內(nèi)生細(xì)菌脂肪酸鑒定結(jié)果table2 detecting results the fatty acid of health banana plant and disease banana plant植株 plant部位屬genus菌株strains種 species健株根、莖摩根氏菌1morganella-morganii摩氏摩根菌health根、莖、葉窄食單胞菌屬1stenotrophomonas maltophilia嗜麥芽窄食單胞菌plant根、葉棒桿菌屬1corynebacteriu matruchotii馬氏棒

18、桿菌白喉棒桿菌屬1dipptheriae intermedius中間白喉棒桿菌埃希氏菌屬1escherichia coli大腸桿菌微桿菌屬1microbacterium liquefaciens液化微桿菌|十短波單胞菌屬1brevundimona vesicularis泡囊短波單胞菌腸桿菌屬1enterobacter aerogenes產(chǎn)氣腸桿菌庫特氏菌屬1kurthia sibirica西伯利亞庫特氏菌病株根沙門氏菌屬1salmonella typhimurium嵐傷寒沙門菌disease根、葉腸桿菌屈1enterobacter cloacae陰溝腸桿菌plant弧菌屬1vibrio hol

19、lisae霍氏弧菌莖、葉嗜冷桿菌屬1psychrobacter phenylpyruvicus苯丙酮酸冷桿菌莖醋桿菌屬1acetobacter aceti醋酸醋桿菌黃桿菌屬1chryseobacterium balustinum大比ii魚黃桿菌腸桿菌屬1enterobacter aerogenes產(chǎn)氣腸桿菌乳酸菌屬1lactobacillus acetotoleran乳酸菌屬微桿菌屬1microbacterium chocolatum巧克力微桿菌泛菌屬2pantoea agglomerans成團(tuán)泛菌pantoea-ananatis波蘿多源菌鞘氨醇桿菌屬1sphingobacterium mjl

20、tivorum多食鞘氨醇桿菌窄食單胞菌屬1stenotrophomonas maltophilia嗜麥芽窄食單胞菌鏈球菌屬1streptococcus uberis乳房鏈球菌葉紅球菌屬1rhodococcus rhodochrous玫瑰紅紅球菌不動桿菌屬1acinetobacter calcoaceticus醋酸鈣不動桿菌伯克霍爾徳氏菌屬1burkholderia cepacia洋蔥伯克霍爾徳氏菌2.2香蕉鍵株與枯萎病株內(nèi)生細(xì)菌種類多樣性實驗結(jié)果見表仁健株共分離獲得9株內(nèi)生細(xì)菌，分屬9個屬。6種細(xì)菌分布在根部，分別是摩 氏摩根菌(morgae/amorga")、嗜麥芽窄食單胞菌(st

21、enotrophomonas maltophilia)、馬氏棒桿菌 (corynebacteriumatruchotii) 中間白喉棒桿菌(dipptheiaeintemedius)、大腸桿菌(escherichiacoli) 和液化微桿菌(microbacterium liquefaciens),其中，摩氏摩根菌(morganellamorganii)和嗜麥芽窄食單 胞菌(stenotrophomonas maltophilia)也在莖部分離到。從葉部分離到8種細(xì)菌，分別是嗜麥芽窄食單 胞菌(stenotrophomonas maltophilia)、馬氏棒桿菌(corynebacteriu

22、 matruchotii)、中間白喉棒桿菌 (dipptheriae-intermedius)s 人腸桿菌(escherichia-coli)、液化微桿菌(microbacterium liquefaciens)> 泡囊 如波單胞菌(bevundimonasvesicularis)、產(chǎn)氣腸桿菌(enterobacteraerogenes) 和西伯利亞庫特氏菌(kurthiasibirica).香蕉病株共分離獲得仃株內(nèi)牛細(xì)菌，分屬15個屬。從根部分離到3株細(xì)菌，分別是鼠傷寒沙 門菌(salmonellatyphimurium)、陰溝腸桿菌 (enterobactercloacae)和崔氏弧

23、菌(vibriohollisae)。從 舉部分離到11株細(xì)菌，分別是苯丙酮酸冷桿菌(psychrobacterphenylpyruvicus) >醋酸醋桿茵(acefobac£er aceti)、人比目血黃桿菌(chryseobacterium balustinum)、產(chǎn)氣腸桿菌(enterobacter aerogenes)、乳酸菌 屬(lactobacillus acetotoleran)> 巧克力微桿菌(microbacterium chocolatum)、成i才i泛菌(pantoea agglomerans)> 波蘿多源茵(pantoea-ananatis)

24、>多食艄氨醇桿菌(sphingobacterium m/jltivorum)>嗜麥芽窄食單胞菌 (stenotrophomonas maltophilia)和乳房鏈球菌( streptococcus uberis)。在葉部共分離到6種細(xì)菌，分別 是陰溝腸桿菌(emerobacfer c/oacee)、崔氏弧菌(vibrio hollisae) > 玫瑰紅紅球菌(rhodococcus rhodochrous) > 醋酸鈣不動桿菌(acinetobacter calcoaceticus)和洋蔥伯克霍爾德氏菌(burkholderia cepacia)健株和病株中同時分離到

25、的有腸桿菌屬產(chǎn)氣腸桿菌(enterobacteraerogenes)>微桿菌屬液化微桿 (microbacterium liquefaciens)和窄食單胞菌屬嗜麥芽窄食單胞菌(stenotrophomonas maltophilia)。2.3香蕉健株與枯萎病株不同部位內(nèi)生細(xì)菌含量多態(tài)性香蕉植株不同部位內(nèi)生細(xì)菌的多態(tài)性見表2、圖仁香蕉健株的各部位內(nèi)生細(xì)菌的含量存在差界， 香蕉健株上部葉片、中部葉片、下部葉片、莖部和根部內(nèi)生細(xì)菌的平均數(shù)量分別為1.86x104cfu/g, 166.69x104cfu/g 0.003x104cfu/g> 72.736x104cfu/g 和 519.5x

26、104cfu/g；根部的內(nèi)生細(xì)菌含最最高，下部葉片 內(nèi)生細(xì)菌的含最最低。香蕉病株相應(yīng)各部位的內(nèi)生細(xì)菌平均數(shù)最分別為4.15x10mu/g> 13.86x104cfu/g. 0.42x104cfu/g. 1052.06x104cfu/g和6.77x104cfu/g,其中莖部內(nèi)牛細(xì)菌的數(shù)量顯著高于其他部位。表2香蕉植株不同部位分離到的內(nèi)生菌數(shù)量特征 tablei antibiotics character separated of different parts of musa plant分離部位上部葉片中部葉片下部葉片假莖部根部健株(xl04cfu/g)1.86166.690.00372.

27、736519.5病株(x!04cfu/g)4.1513.860.421052.066.77圖仁芭蕉屬植株不同部位內(nèi)生細(xì)菌數(shù)量3討論對于植物內(nèi)生細(xì)菌的研究目前已成為熱點，涉及的植物主要冇小麥、水稻、棉花、花生、馬鈴 薯、番茄、煙草等陽9。藍(lán)江林卩等采用平板分離純化芭蕉、威廉斯蕉和野生蕉植株內(nèi)牛細(xì)菌，利用 細(xì)菌脂肪酸鑒定技術(shù)進(jìn)行鑒定，共獲得內(nèi)半細(xì)菌笛屬14種，其中野牛:蕉植株分離得到9種，威廉 斯蕉植株7種，芭蕉植株3種。付業(yè)勤等從從香蕉健康植株的根、假莖、葉柄、葉片等組織中分離 獲得386份內(nèi)生細(xì)菌分離物，這些分離物的基礎(chǔ)住物學(xué)特性的分類地位初步歸屬為不動桿菌屬(acinetobacter)、芽

28、他桿菌丿肉(bacillus)、範(fàn)桿菌丿肉(brev/bacfe加力)、產(chǎn)堿桿菌丿肉(alcaligenes)和 伯克霍爾徳菌屬(burkholderia)細(xì)菌。脂肪酸生物標(biāo)記技術(shù)己經(jīng)廣泛用于細(xì)菌的鑒定和多樣性研究屮【20】木研究采用相似性指數(shù)高于0.5 的細(xì)菌鑒定的結(jié)果，能可靠地反映細(xì)菌鑒定的種類【2嘰從香蕉植株的根部、假莖、葉片分離獲得26 株內(nèi)生細(xì)菌,分屬21個屬,結(jié)果更為豐富。其中微桿菌屬(microbacterium)國、泛菌屬(pantoea)曲 作為植物內(nèi)生細(xì)菌，已從不同的植物組織屮分離到并有一定的研究。對于其它的種類的內(nèi)生細(xì)菌， 也有和關(guān)的文獻(xiàn)研究，如短波單胞菌屬(brevun

29、dimonassp.)、紅球菌屬(rhodococcus)來源于土壤砂冏, 棒桿菌屬(corynebacterium sp.)來源于污染水體，對于它們在植物體內(nèi)的定殖特性，尚需進(jìn)一步 的研究證實。生物多樣性是衡量牛態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定和健康的一個重要指標(biāo)【27】，reite等研究表明，馬鈴薯內(nèi)生細(xì)菌 的群落結(jié)構(gòu)與病原菌的存在和消失密切相關(guān)，受erwinia carotovora subsp. atroseptica侵染的馬鈴薯病株 內(nèi)牛細(xì)菌的群落多樣性要高于健康植株冏。本研究表明，香蕉病株的內(nèi)牛細(xì)菌群落多樣性要高于香 蕉健株，健株共分離獲得9株內(nèi)生細(xì)菌，分屬9個屬，6種細(xì)菌分布在根部，莖部分離到2種，葉

30、部 分離到8種細(xì)菌。香蕉病株共分離獲得17株內(nèi)生細(xì)菌，分屬15個屬，從根部分離到3種細(xì)菌，莖 部分離到0種，葉部共分離到6種。就內(nèi)生細(xì)菌的含量來看，香蕉健株根部的內(nèi)生細(xì)菌含赧最高， 達(dá)519.5x10mu/g,下部葉片內(nèi)牛細(xì)菌的含量最低，僅為0.003x1 omu/go香蕉病株莖部內(nèi)生細(xì)菌的數(shù)量 顯著高于其他部位，達(dá)1.05x10wgo木研究利用分離培養(yǎng)的方法獲得香蕉內(nèi)生細(xì)菌，并通過全自動微生物鑒定系統(tǒng)對內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)行 了初步鑒定，從種類及數(shù)量等方而分析了香蕉植株內(nèi)生細(xì)菌的群落結(jié)構(gòu)特性，研究結(jié)呆尚無法深層 次的揭示香蕉植株內(nèi)生細(xì)菌的種群特性。冇關(guān)內(nèi)生細(xì)菌定殖特性、互作關(guān)系以及在香蕉植株生長代 謝

31、過程的功能等，都冇待進(jìn)一步的研究。4結(jié)論本實驗從香蕉卅i株中共分離內(nèi)生細(xì)菌24種，分屬21屬。其中，香蕉健株共分離到9株內(nèi)生細(xì) 菌，6種細(xì)菌分布在根部，莖部分離到2種，葉部分離到8種細(xì)菌。香蕉病株共分離獲得仃株內(nèi)生 細(xì)菌,分屬15個屬,從根部分離到3種細(xì)菌,莖部分離到笛種，葉部共分離到6種。就內(nèi)生細(xì)菌的 含量來看，香蕉健株根部的內(nèi)生細(xì)菌含量最高，達(dá)5.195x10mu/g,下部葉片內(nèi)生細(xì)菌的含量最低， 僅為0.30x1 owgo香蕉病株莖部內(nèi)生細(xì)菌的數(shù)量顯著高于其他部位，達(dá)1.05x107cfu/go結(jié)果表明香蕉 植株在不同生長狀態(tài)下內(nèi)生細(xì)菌的種類結(jié)構(gòu)和數(shù)量都存在顯苦多樣性，參考文獻(xiàn)1. 周璇

32、，周寶利，李志文，董春鳳.抑制茄子黃萎病菌的植物提取物的篩選j.生態(tài)學(xué)朵志，2007, 26(8)： 1217-1221.zhou xuan, zhou b l, li z w, dong c f screening of plant extracts against eggplant verticillium dahliae3 chinese journal of ecology. 2007, 26 (8)： 1217-1221. (in chinese)2. 曹理想，田新莉，周世寧.香蕉內(nèi)生真菌、放線菌類群分析j中山大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2003, 42 (2)： 70-73.cao l

33、x, tian xl, zhou s n isolatio nofen dophytic fungi a nd actinomycetes from ba nana (musa pared/sbcm) plantj acta scientiarum naturalium universitatis sunyatseni, 2003, 42 (2)： 70-73. (in chinese)3. 付業(yè)勤，張科立，潘羨心，蔡吉苗，高宏華，黃貴修.內(nèi)生拮抗細(xì)菌beb2的分子鑒定及其對香蕉枯萎病菌的 抑制作用熱帶作物學(xué)報，2009,30 (1 )： 80-85.fu y q; zhang k l; pa

34、n x x; cai j m; gao h h; huang g x identification of endophytic bacillus and its inhibition reaction to f. oxysporum f. sp. cubense of bananaj chinese journal of tropical crops. 2009,30 (1 )： 80-85. (in chinese)4. steven d. s, nathalie f, anca m, et al. selection of specific endophytic bacterial gen

35、otypes by plants in response to soil contaminationj.appl environ microbiol, 2001, jun, 67 (6) 2469-24755. mocali s, bertelli e, di cello f, et al fluctuation of bacteria isolated from elm tissues during different seasons and from different plant organsj. microbiol. 2003 mar;154 (2) :105-14.6. keel c

36、, defago g. interactions between beneficial soil bacteria and root pathogens： mechanisms and ecological impact(edns. a. c. gange, v. k. brown) m. multitrophic interactions in terrestrial system. oxford： blackwell science. 1997. 27-477. 藍(lán)江林，朱冇菁，蘇明星，葛慈斌，劉蕓，劉波.水葫蘆內(nèi)生細(xì)菌的分離與鑒定j.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報，200& 27(6) : 2

37、423-2429.lan j ln, zhu y jr su m x, ge c b, liu y, liu b. isolation and identification of the endophyte bacteria from eichhornia crassipe (mart. ) solms. journalofagro-environmentscience (j. agro-environ. sci.)： 2008, 27 (6) : 2423-2429(in chinese)8. 王秋紅，陳亮，林背志，朱育菁,藍(lán)江林，楊淑佳，劉波.福建省青枯雷爾氏菌脂肪酸多態(tài)性研究中國 農(nóng)業(yè)科

38、學(xué)，2007, 39 (8)： 1675-1687.wangqh, chen l, lin yz, zhu y j, lan jl, yang s j, liu b polymorphism of fatty acid of ralstonia solanacearum in fujian provincej. scientiaagricultura sinica, 2007, 39 (8)： 1675-1687(in chinese)9. 藍(lán)江林，劉波，陳璐，等.芭蕉屬植物內(nèi)生細(xì)菌磷脂脂肪酸(plfa)生物標(biāo)記特性研究j.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010,43 (10)： 2045-2055.lan

39、j l, liu b, chen l, xiao r f, shi h, su m x. characteristics of plfa biomarkers for the endophyte bacteria inside musa plantsj. scientiaagricultura sinica, 2010, 43 (10)： 2045-2055(in chinese)10. 王剛，李志強(qiáng).小麥內(nèi)生細(xì)菌的分離及其對小麥紋枯病的旅抗作用j.微生物通報，2005, 32 (2) : 20-24.wang g,li z q. isolation of endophytic clolniz

40、ing bacteria from wheat and its antagonism on the wheat pathogenic fungi of rhizoctonia cerealis. microbiologyj> microbiology,2005, 32 (2)： 2024. (in chinese)11. 沈徳龍，馮永君，宋未.成團(tuán)腸桿菌的生物功能多樣性及其分類最新進(jìn)展j.微生物學(xué)雜志，2002, 22 (1):40-42, 50.shen d lffeng y j,song w. biological function diversity of enterobacter

41、 agglomerans and its newest advance in classification. journal of microbiology. 2002, 22 (1 )： 40-42» 50.12. 羅明，蘆云，張祥林.棉花內(nèi)生細(xì)菌的分離及生防益菌的篩選j.新媼農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004, 41 (5) : 277-282.luo mrlu y,zhang x l.lsolation of endophytic bacteria from cotton and screening of antagonistic bacteriaj. xinjiang agricultura

42、lsciences, 2004, 41 (5)： 277-28213. 宋子紅，丁立孝，馬們軍，李文澤，梅汝鴻花生內(nèi)生菌的種群及動態(tài)分析j植物保護(hù)學(xué)報,1999, 26 (4): 309-314.songzh, ding lx, ma b j, li wz, mei rh studies on the population and dynamic analysis of peanut endophytesj journal of plant protection, 1999, 26 (4)： 309-314.14. 黎起秦，盧繼英，林緯，陳永寧，盧亭君，謝義靈，韋文亮.辣椒內(nèi)生菌拮抗細(xì)菌的篩選

43、j.廣四農(nóng)業(yè)生物科 學(xué)，2004, 23 (4) : 304-306.li q q, lu j y, lin w, chen y n, lu t j, xie y l, wei w l. isolation of pepper endophyte antagonists against ralstonia solanacearumj journal of guangxi agricultural and biological science. 2004, 23 (4)： 304-306(in chinese)15. 周嬪，高增貴,何秀玲,莊敬華,張小飛，吳海云.甜瓜枯萎病拮抗內(nèi)生細(xì)菌篩選研究j

44、.北方園藝,2008 (2): 225-227.zhou j, gao z g, he x l, zhuang j h, zhang x f, wu h y selection of endophytic bacteria for suppression of melon wilt caused by fusarium oxysporumj northern horticulture, 2008 (2)： 225-227. (in chinese)16. fernando e.vega,monica pava-ripolltfrancisco posada,et al.endophytic b

45、ateria in coffea arabica lj.basic microbiol.2005,45(5) :371-380.17. 付業(yè)勤，蔡吉苗，劉先寶，黃貴修.香蕉內(nèi)生細(xì)菌分離、活性評價及數(shù)量分布j熱帶作物學(xué)報，2007, 28 (4): 78-83.fu y q, cai j m, liu x b, huang g x.lsolation, bioactivity evaluation and quantity distribution of endophytic bacteria in bananaj. c/)/nese journal of tropical crops. 200

46、7, 28 (4)： 78-83. (in chinese)18. 孫義,用正英，林玲，楊啟銀,周益軍.茄子黃萎病生防內(nèi)生細(xì)菌29j2發(fā)酵條件的初步研究j江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報.2008, 24 (4) .425-430sun y, ju z y丄in l.yang q y,zhou y j. fermentation conditions of endophytic bacterium strain 29-12 biocontrolling eggplant verticillium dahliaej. jiangsu journal of agricultural sciences .200&

47、; 24 (4) .425-430 (in chinese)19. angela st birgit r, gabriele b.endophytic bacterial communities of field-grown potato plants and their plant-growth-promoting and antagonistic abilities. microbiol. 2004,50:239-249.20. 彭細(xì)橋，周國生，鄧正平，匡傳富，羅寬，劉紅艷.煙草青枯病內(nèi)生拈抗菌的篩選、鑒定及其防效測定j.植 物病理學(xué)報,2007,37 (6) : 670-674.peng

48、 x q.zhou g s,deng z rkuang c f,luo kjiu h yscreeningjdentification and control efficacy of tobacco antagonistic endophytic bacteria against ralstonia solanacearum3. acta phytopathologica sinica, 2007,37(6) : 670-674.(in chinese)21. 吳愉萍，徐建明,汪海珍，胡寶蘭，吳建軍.sherlock mis系統(tǒng)應(yīng)用于土壤細(xì)菌鑒定的研究j土壤學(xué)報,2006,43(4) :642-647.wu y p, xu j m, wang h z, hao b l,wu j j. application of sherlock mis in identification of soil bacteriaj. acta pedologica s/n/ca.2006,43 (4) :642-647. (in chinese)22. midi