莪術(shù)油對(duì)宮頸癌血管生成相關(guān)因子的研究

1、    莪術(shù)油對(duì)宮頸癌血管生成相關(guān)因子的研究    周俊【摘要】目的：莪術(shù)揮發(fā)油對(duì)人宮頸癌裸鼠移植瘤的治療作用。方法：建立人宮頸癌hela細(xì)胞荷瘤裸鼠模型，采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)hif-1、ifn-的蛋白表達(dá)。結(jié)果：莪術(shù)油高、中、低劑量組hif-1的表達(dá)較模型組降低顯著，莪術(shù)油高、中劑量組ifn-的表達(dá)較模型組升高。結(jié)論： 莪術(shù)油可降低hif-1，上調(diào)ifn-的表達(dá)，產(chǎn)生抗宮頸癌血管生成的作用?！娟P(guān)鍵詞】莪術(shù)油 ;血管生成hif-1 ifn-r197.3【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】a1005-0019（2019）04-015-01宮頸癌中的新生血管的形成對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)

2、和轉(zhuǎn)移具有重要意義。腫瘤新生血管的形成是一個(gè)連續(xù)的過(guò)程，腫瘤細(xì)胞必須具有血管生成表型后才能啟動(dòng)血管生成，因此誘導(dǎo)血管生成因子過(guò)多的產(chǎn)生是血管生成的首要環(huán)節(jié)1。莪術(shù)油在抗腫瘤、抗血栓方面成效顯著 2。 本研究利用天然藥物化學(xué)的提取技術(shù)獲得莪術(shù)揮發(fā)油，通過(guò)人宮頸癌裸鼠移植瘤模型治療實(shí)驗(yàn)，初步探討莪術(shù)油有效提取物的動(dòng)物體內(nèi)抗宮頸癌的治療作用。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)材料 人宮頸癌hela細(xì)胞株，購(gòu)自武漢大學(xué)保藏中心。balb/c-nu品系裸鼠，購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司， 溫莪術(shù)藥材購(gòu)于四川雙流縣溫郁金基地，經(jīng)鑒定為姜科植物溫郁金（curcuma wenyujin y.h.chen et c.

3、ling）的干燥根莖。采取壓榨粗油經(jīng)水蒸汽精制法制備莪術(shù)揮發(fā)油。hif-1兔抗人多克隆抗體，購(gòu)于北京中杉金橋，ifn-兔抗人單克隆抗體，購(gòu)于博士德生物公司。1.2實(shí)驗(yàn)方法將hela單細(xì)胞懸液接種于裸鼠皮下。對(duì)裸鼠隨機(jī)分為莪術(shù)油高、中、低、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組在和陰性對(duì)照組 6個(gè)實(shí)驗(yàn)組。 取腫瘤組織標(biāo)本，采用pv二步法免疫組化技術(shù)檢測(cè)hif-1、ifn-的陽(yáng)性表達(dá)均定位于宮頸癌細(xì)胞的胞漿，并呈棕黃色顆粒，根據(jù)平均透光度進(jìn)行測(cè)評(píng)。1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用spss17.0軟件系統(tǒng)對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)資料進(jìn)行分析，計(jì)量資料用x±s表示，各組間兩兩比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，p<

4、0.05時(shí)認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1hif-1的表達(dá)結(jié)果莪術(shù)油高、中、低劑量組hif-1平均透光度的結(jié)果與模型組比較顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（見(jiàn)表1）。2.2ifn-的表達(dá)結(jié)果莪術(shù)油高劑量組ifn-平均透光度的結(jié)果與模型組比較顯著增加;莪術(shù)油中劑量組ifn-平均透光度的結(jié)果與模型組比較明顯增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;莪術(shù)油低劑量組ifn-平均透光度的結(jié)果與模型組比較略有增加，差異無(wú)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（見(jiàn)表2）。3討論缺氧誘導(dǎo)因子-1（hif-1）廣泛存在于各種腫瘤組織中，對(duì)維持腫瘤細(xì)胞的能量代謝、腫瘤血管生成、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移起著重要作用。在低氧條件下藥物干預(yù)后，hela 細(xì)胞vegf

5、 的mrna 和hif-1 的mrna蛋白的表達(dá)較常氧狀態(tài)下明顯增加，這與下調(diào)宮頸癌hela 細(xì)胞hif-1 的合成與表達(dá)有關(guān)3-4。干擾素-（ifn-）的表達(dá)可使腫瘤血管生成活性受到抑制。采用的不同藥物濃度的ifn-均能抑制宮頸癌細(xì)胞hela 的生長(zhǎng) 5。本實(shí)驗(yàn)研究中莪術(shù)油高、中、低劑量組hif-1平均透光度的結(jié)果與模型組比較顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;莪術(shù)油高、中劑量組ifn-的表達(dá)較模型組顯著增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示莪術(shù)油能抑制宮頸癌hela的增殖，其機(jī)制可能是降低上游hif-1和上調(diào)ifn-的表達(dá)，從而影響下游vegf的表達(dá)，從而產(chǎn)生抗宮頸癌血管生成的作用，發(fā)揮其治療作用。調(diào)控血

6、管生成的因子眾多，就vegf通路上的其他因子的調(diào)控還有待研究。參考文獻(xiàn)1弓唯一，董竟成. 腫瘤細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子表達(dá)調(diào)控的研究進(jìn)展j.醫(yī)學(xué)綜述，2011，17（4）：530-533.2王奇巍，楊國(guó)紅，林夢(mèng)感等. 植物來(lái)源抑制血管生成的活性成分研究進(jìn)展j.中草藥，2010，4（5）：3-8.3張俊松，汪宏，吳立勝.cd105、cd133在人肝癌細(xì)胞株hepg-2的表達(dá)情況及生物學(xué)性狀的體外研究j.肝膽外科雜志，2013，21（2）：133-136.4袁志平，牟華平，王秋等.地高辛抑制hif-1 下調(diào)宮頸癌hela 細(xì)胞vegf 表達(dá)的研究j.西南國(guó)防醫(yī)藥，2013，23（10）：1052-1054.