2017-2018學(xué)年高中生物第一部分微生物的利用實驗2分離以尿素為氮源的微生物自我小測浙_第1頁
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文檔簡介

1、第一部分 微生物的利用 實驗 2 分離以尿素為氮源的微生物1 本實驗中的尿素培養(yǎng)基屬于()A.選擇培養(yǎng)基B .鑒別培養(yǎng)基C.半固體培養(yǎng)基D .無氮培養(yǎng)基2 涂布分離細菌時使用的玻璃刮刀應(yīng)保存在70%酉精中,取出后又要放在酒精燈火焰上灼燒,這 2 步分別屬于什么技術(shù)()A.滅菌、滅菌B .消毒、消毒C.稀釋分離法 D .選擇分離法6 脲酶的化學(xué)本質(zhì)是()A.脲 B .蛋白質(zhì)C.尿素 D .核酸J伏J7 下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是(8 有脲酶的細菌菌落周圍出現(xiàn)著色環(huán)帶的原因是()外泌的脲酶將尿素水解成氨,氨為堿性,使酚紅變?yōu)榧t色A.KHPO、NMPQ MgSO7fOB. KHPQ、Na2

2、HPQ MgSQ7HbOC.KHPQ、Na2HPQ MgSQ7H2QD.KHPQ、Na2HPQ MgSQ7H2O葡萄糖、尿素、瓊脂糖、水葡萄糖、瓊脂糖、水尿素、瓊脂糖、水牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水C.滅菌、消毒 D .消毒、滅菌3 尿素又稱脲, 它是什么有機物降解的產(chǎn)物(A.核酸 B .蛋白質(zhì)C.淀粉D .脂4 本實驗的土樣最好取自(A.有大量植物生長的地方取B.臨水的地方取C.有哺乳動物排泄物的地方取D. 干燥、空曠的地方取5 分離以尿素為氮源的微生物所采用的分離方法是A.涂布分離法 B .劃線分離法A.9 將下列的實驗步驟按正確的順序排列()1將培養(yǎng)皿倒置于恒溫箱中培養(yǎng)2448 h 土壤取樣

3、觀察菌落數(shù)樣品稀釋B.外泌的脲酶呈堿性使酚紅變?yōu)榧t色C. 外泌的脲酶將酚紅分解成呈紅色的物質(zhì)D. 酚紅與脲酶反應(yīng)后生成了呈紅色的物質(zhì)3制備細菌懸液將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上A.B .C.D .10 分析下面培養(yǎng)基的配方:KH2PQ、NQHPQ MgSO- 7H2O、葡萄糖、尿素、瓊脂糖。請完成問題:(1)在該培養(yǎng)基的配方中,為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是_和12本題探究如何從土壤中將自生固氮菌分離出來。請據(jù)題完成以下問題。(1)實驗原理: 自生固氮菌是一種能利用空氣中的2 做為氮源的細菌。若用無菌培養(yǎng)基進行培養(yǎng),其培養(yǎng)基不需要添加 _這類營養(yǎng)要素,而其他細菌則不行。農(nóng)田的表

4、層土壤中,自生固氮菌的含量比較多。 將用表層土制成的稀泥漿, 接種到無菌 培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。 在這種情況下,只有自生固氮菌才能生長繁殖。用這種方法,可以將自生固氮菌與其他細菌分離開來。(2) 材料用具:農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛9 mL 無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛90 mL 無菌水的錐形瓶、恒溫箱。(3) 方法步驟:倒平板:分別將無菌培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板,操作過程應(yīng)在火焰旁。2制備土壤稀釋液:取土樣10 g 加入盛有 90 mL 無菌水的錐形瓶中,充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液 1 mL,轉(zhuǎn)至 9 mL 的無菌水的大試管中,依次稀釋到

5、10稀釋度。3涂布:按照由 107103稀釋度的順序分別吸取 0.1 mL 進行平板涂布,每個稀釋度下,無氮培養(yǎng)基應(yīng)至少涂布 _個平板,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布1 個平板。4培養(yǎng):放入恒溫箱內(nèi),在 2830C下培養(yǎng) 34 天。(2)想一想這種培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,又是如何進行選擇的?11 請將稀釋液的稀釋度在下圖中加以準(zhǔn)確標(biāo)注:5AL_45細菌的計數(shù):當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時, 選取菌落數(shù)在 _ 的平板進行計數(shù)。如果測試的平均值為 50,則每克樣品中的菌落數(shù)是 _ 。(稀釋度是 10 J5(4)預(yù)測結(jié)果:相同稀釋度下,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板上的菌落數(shù)應(yīng)多于無氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。請說明原

6、因:_13(2009 上海高考,39)氯苯化合物是重要的有機化工原料,因其不易降解,會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案(圖 1)篩選出能高效降解氯苯的微生物SP1 菌。培養(yǎng)基配方如表 1。圖 1表 1 培養(yǎng)基的組成液體培養(yǎng)基蛋白胨牛肉膏氯苯氯化鈉硝酸銨無機鹽(無碳)蒸餾水I號10 g5 g5 mg5 g1 Ln號50 mg5 g3 g話量1 L川號一一20 80mg5 g3 g話量1 L(1)配制n號固體培養(yǎng)基時,除添加n號液體培養(yǎng)基成分外,還應(yīng)添加1%勺_ 。(2) 培養(yǎng)基配制時,滅菌與調(diào)pH 的先后順序是 _ 。(3) 從用途上來說,i號培養(yǎng)基和n號培養(yǎng)基分別屬于 _培養(yǎng)基和_ 培養(yǎng)基

7、。在n號培養(yǎng)基中,為SP1 菌提供氮源的成分是 _ 。(4) 在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時,SP1 的菌體會變成一個圓形的休眠體,這種休眠體被稱為_。(5) 將 SP1 菌接種在含不同濃度氯苯的川號培養(yǎng)液中培養(yǎng),得到生長曲線(如圖 2)。從圖 2 可知,SP1 菌在_ 培養(yǎng)條件下最早停止生長,其原因是6圖 27參考答案1 答案:A 解析:尿素培養(yǎng)基可以將能利用尿素的微生物從別的微生物中選擇出來, 所以 A 正確。2 答案:D 解析:消毒和滅菌是不同的。往往消毒比較溫和,僅僅消滅危害健康的致 病菌;而滅菌就比較強烈,如高壓鍋、灼燒等,它是去除一切菌。本題前者屬消毒,后者屬 滅菌。3 答案:B 解析:蛋

8、白質(zhì)可降解為尿素(主要是脫氨基),即脲。所以選 B。4 答案:C 解析:由于人和其他哺乳動物如家畜的尿中都含有尿素,因此含有哺乳動 物排泄物的土壤中就可能存在以尿素為氮源的微生物。5 答案:A 解析:微生物的分離方法多種多樣,本實驗使用了涂布分離法。Vj6 答案:B 解析:酶既有蛋白質(zhì),又有 RNA 但脲酶屬于蛋白質(zhì)。7 答案:A 解析:能分解尿素的微生物不需要再添加除尿素外的其他氮源,因此A 是正確的。B 選項缺少氮源,C 中缺少了葡萄糖一一碳源;D 中是一個任何微生物都能存活的培養(yǎng)基,無法達到分離出能分解尿素的微生物的目的。8 答案:A 解析:本題考查到了顯色反應(yīng)的原理,這也是鑒別的原理。

9、具體是有脲酶的細菌將脲酶分泌到細菌外,隨后脲酶將培養(yǎng)基中的尿素水解成氨,氨為堿性,遇酚紅變紅色。9 答案:D 解析:本實驗的實驗步驟,具體順序為,故選Db10 解析:碳源是提供碳元素的物質(zhì),氮源是提供氮元素的物質(zhì)。所以碳源是葡萄糖,氮源是尿素。絕大多數(shù)生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,所以這種培養(yǎng)基對微生物有選擇作用。選擇的對象是能夠利用尿素的微生物。答案:(1)葡萄糖 尿素(2)有選擇作用。因為此配方中尿素是唯一氮源,因此,只有能夠利用尿素的微生物才 能夠生長。11 解析:由課本稀釋過程引申而來,1 mL 菌液+ 9 mL 無菌水=10 mL 溶液。丄卑 =101

10、0 mL1,所以 A: 101,以此類推 B、C。12 解析:統(tǒng)計菌落數(shù)目的原則是:選出菌落數(shù)在30300 的平板進行計數(shù)。根據(jù)計算57方法“每克樣品中的菌落數(shù)=(C + V)XM, 則(50 十 0.1)X10 = 5X10。無氮培養(yǎng)基里沒有 氮源,只允許固氮菌生存,屬于選擇培養(yǎng)基,可分離出土壤中的固氮菌。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基營養(yǎng)全面,幾乎允許土壤中所有菌類生存。答案:(1)氮源(3)3303005X107(4) 無氮培養(yǎng)基上能生存繁殖的僅是土壤中的固氮菌,而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允 許土壤中答案:A: 10B: 102C:108所有菌類生存。13 解析: (1) 固體培養(yǎng)基是在制作培養(yǎng)基時加入瓊脂制成的。 (2) 在培養(yǎng)基的配制過程中,調(diào) pH 時可能會使培養(yǎng)基污染,所以應(yīng)在調(diào)pH 之后進行滅菌。(3)I號培養(yǎng)基中加入了大多數(shù)異養(yǎng)微生物可以利用的牛肉膏和蛋白胨,屬于通用培養(yǎng)基;而H號培養(yǎng)基中沒有這兩種成分而且氯苯的量增至50 mg

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