補(bǔ)體C3免疫比濁法

1、項(xiàng) 目補(bǔ)體 c3方 法免疫比濁法目 錄1檢測原理2標(biāo)本采集與處理2.1 受檢者的準(zhǔn)備2.2 靜脈采血2.3 抗凝劑2.4 標(biāo)本處理3試劑3.1 試劑3.2 校準(zhǔn)血清3.3 試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性4儀器5操作6計(jì)算7操作性能7.1 精密度7.2 準(zhǔn)確度7.3 靈敏度7.4 可報(bào)告范圍7.5 特異性7.6 干擾8參考值9臨床意義附錄 a: 參數(shù)1. 檢測原理340nm 樣本中 c3 + 試劑中的 c3 抗體 - 大分子免疫復(fù)合物在 340nm 監(jiān)測生成的復(fù)合物的濁度變化，與樣本中c3 含量成正比。2. 標(biāo)本采集與處理2.1 受檢者的準(zhǔn)備：病人空腹 12h ，不飲酒 24h 后采集血樣。體檢對象抽血

2、前應(yīng)有兩周的的正常狀況記錄。注意有無應(yīng)用影響測試項(xiàng)目的藥物。此外，對于體檢者，采血的季節(jié)都應(yīng)做相關(guān)記錄，因?yàn)闃颖局懈黜?xiàng)目的含量有季節(jié)性變動(dòng)，為了前后比較應(yīng)在每年同一季節(jié)檢驗(yàn)。應(yīng)囑體檢對象在抽血前24 小時(shí)內(nèi)不做劇烈運(yùn)動(dòng)。2.2 靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時(shí)取坐位。體位影響水分在血管內(nèi)外的分布，會影響測試項(xiàng)目的濃度。在采血前至少應(yīng)靜坐5 分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時(shí)間不超過1 分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3 抗凝劑：不使用抗凝劑。2.4 標(biāo)本處理：血標(biāo)本室溫放置30min 45min 后離心分離血清或血漿，在兩小時(shí)內(nèi)檢測完畢；如兩小時(shí)內(nèi)不能檢測完畢，將離心分離血清或

3、血漿置潔凈試管加蓋2-8 保存。3試劑3.1 試劑：本科使用湖南永和陽光科技有限責(zé)任公司c3 試劑盒，為液體雙試劑，各組分如下：r1：peg4 緩沖劑：含高分子強(qiáng)化劑的磷酸鹽緩沖劑。含有0.095% 的疊氮化鈉。r2：c3 抗血清，含有0.095% 的疊氮化鈉。3.2：校準(zhǔn)血清使用湖南永和陽光科技有限責(zé)任公司提供的多項(xiàng)免疫類標(biāo)準(zhǔn)液。其中包含c3 定值。校準(zhǔn)頻次：空白定標(biāo)：每日需做試劑空白定標(biāo)。全點(diǎn)定標(biāo)：試劑換批號使用時(shí)或質(zhì)控結(jié)果超過規(guī)定的2sd 范圍，需要全點(diǎn)定標(biāo)。3.3 試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性：原包裝試劑儲存在2-8 至標(biāo)簽所示失效日期。試劑開瓶后，在儀器中至少可保存30 天。試劑儲存在 1

4、8-22 穩(wěn)定 28 天，試劑應(yīng)避免污染。試劑r1 顏色為無色，試劑r2 顏色為無色至淺黃色，當(dāng)試劑變色，按照試劑失效處理。多項(xiàng)免疫類標(biāo)準(zhǔn)液儲存在2-8 至標(biāo)簽所示失效日期。第一次開啟后，不要冷凍。在2-8 下將瓶蓋擰緊保存，標(biāo)準(zhǔn)品可以儲存長達(dá)6 個(gè)星期的時(shí)間。4儀器konelab 30 型號儀器。性能：波長 340nm ，儀器測定吸光度的靈敏度應(yīng)達(dá)到0.001abs以上。5操作樣品為血清。本法為免疫比濁法。參數(shù)見后附，附錄a。試劑參數(shù)設(shè)置、定標(biāo)操作以及樣本檢測常規(guī)操作，見儀器操作規(guī)程。6計(jì)算計(jì)算吸光度的差值（od2 od1 ），并建立標(biāo)準(zhǔn)液吸光度濃度工作曲線。計(jì)算標(biāo)本的吸光度差值，并在工作曲

5、線上讀取濃度值（mg/dl ）。如標(biāo)本的吸光度值大于標(biāo)準(zhǔn)液的最大值，則需稀釋標(biāo)本后，重新測量。7操作性能7.1 精密度：批內(nèi) cv 2.01% ，批間 cv 3.14% 。7.2 準(zhǔn)確度：檢測結(jié)果的相對不準(zhǔn)確度10% 。7.3 靈敏度：補(bǔ)體 c3 濃度為 72.0 mg/dl 時(shí)，顯色吸光度a340約 0.1930.235 。7.4 可報(bào)告范圍：血清與試劑用量之比為1:150 時(shí)，測定下限為20 mg/dl 。7.5 特異性：測量值在給定值的90%-110 范圍內(nèi)。7.6 干擾：內(nèi)源性干擾物溶血為1000mg/ml 、脂血 2000mg/ml 、黃疸 30mg/ml 、抗壞血酸 300mg/ml 對測試結(jié)果無明顯影響。8參考值75-135 mg/dl 9臨床意義補(bǔ)體 c3 是典型和替換補(bǔ)體的核心。它是補(bǔ)體c5 轉(zhuǎn)化酶的成分之一。c3 的激化分裂的產(chǎn)品具有重要的生物功能。 c3b 是一種在免疫系統(tǒng)中起作用的調(diào)理素。c3a 是一種補(bǔ)過敏毒素和化學(xué)毒素。c3 水平的升高常見于急性發(fā)炎癥狀。其水平的降低常見于并發(fā)癥（complex disease ），免疫系統(tǒng)因發(fā)熱病