MRSA耐藥機制及檢測方法

1、1會計學(xué)MRSA耐藥機制及檢測方法耐藥機制及檢測方法之間，具有位置特異性之間，具有位置特異性1femA和和femB為兩個相為兩個相連的開放閱讀框，對細連的開放閱讀框，對細菌細胞壁的五甘氨酸側(cè)菌細胞壁的五甘氨酸側(cè)鏈以及肽間橋的生物合鏈以及肽間橋的生物合成是必需的。當(dāng)其失活成是必需的。當(dāng)其失活時，時， MRSA對對-內(nèi)酰內(nèi)酰胺酶類抗生素以及多種胺酶類抗生素以及多種其它類抗生素的耐藥性其它類抗生素的耐藥性降低降低2femC的作用引起谷氨的作用引起谷氨酰胺合成酶基因酰胺合成酶基因glnA轉(zhuǎn)錄和活化及異谷氨酰轉(zhuǎn)錄和活化及異谷氨酰胺的酰胺化，其失活時胺的酰胺化，其失活時，糖肽的交叉連接降低，糖肽的交叉連接

2、降低，MRSA對對-內(nèi)酰胺酶內(nèi)酰胺酶類抗生素耐藥性降低類抗生素耐藥性降低 2femF基因的編碼產(chǎn)物基因的編碼產(chǎn)物涉及涉及L-賴氨酸與胞壁酰賴氨酸與胞壁酰二肽鏈的連接，其突變二肽鏈的連接，其突變失活時引起的耐藥性的失活時引起的耐藥性的改變得具體機制還有待改變得具體機制還有待研究。研究。femD和和femE對細菌的對細菌的確切作用還未闡明確切作用還未闡明 藥物敏感試驗方法藥物敏感試驗方法 NCCLS推薦使用藥推薦使用藥敏紙片法、苯唑西林敏紙片法、苯唑西林(oxacillin)鹽瓊脂篩鹽瓊脂篩查法、查法、-內(nèi)酰胺酶檢內(nèi)酰胺酶檢測、測、E-test 試驗和試試驗和試管雙倍稀釋法等管雙倍稀釋法等 缺點缺

3、點：易受培養(yǎng)基成：易受培養(yǎng)基成分影響，較耗時，且分影響，較耗時，且錯誤應(yīng)用抗生素會引錯誤應(yīng)用抗生素會引起更為嚴重耐藥的耐起更為嚴重耐藥的耐藥菌株的出現(xiàn)藥菌株的出現(xiàn) 快速乳膠快速乳膠(Latex) 凝集凝集法法PBP2a 單克隆抗體單克隆抗體致敏的乳膠顆粒與致敏的乳膠顆粒與MRSA 的膜蛋白提取的膜蛋白提取物作用物作用,產(chǎn)生肉眼可見產(chǎn)生肉眼可見的凝集顆粒的凝集顆粒,證實有證實有PBP2a 的存在的存在,以此以此判斷該菌為判斷該菌為MRSA 此法簡便、快速、準此法簡便、快速、準確確,檢測檢測1 份標(biāo)本只需份標(biāo)本只需15 min，和，和PCR法一法一樣有極高的靈敏度和樣有極高的靈敏度和特異性，有較好

4、的應(yīng)特異性，有較好的應(yīng)用前景用前景 免疫學(xué)方法免疫學(xué)方法基質(zhì)輔助激光解吸電基質(zhì)輔助激光解吸電離離-飛行時間質(zhì)譜飛行時間質(zhì)譜 可可簡易分析低純度的固簡易分析低純度的固體混合物樣品體混合物樣品, 檢測檢測范圍可到范圍可到350 KD 。根據(jù)細菌的全細胞圖根據(jù)細菌的全細胞圖譜差異，鑒定未知細譜差異，鑒定未知細菌。耗時少，重復(fù)性菌。耗時少，重復(fù)性高高 缺點：要求特殊儀器缺點：要求特殊儀器，結(jié)果處理方法復(fù)雜，結(jié)果處理方法復(fù)雜，不適于普遍開展，不適于普遍開展 分型方法分型方法傳統(tǒng)方法是噬菌體分型技術(shù)傳統(tǒng)方法是噬菌體分型技術(shù),根據(jù)分離根據(jù)分離菌株對各噬菌體的敏感性和噬菌體裂菌株對各噬菌體的敏感性和噬菌體裂解

5、情況進行分型。目前采用的一些分解情況進行分型。目前采用的一些分子生物學(xué)進行基因分型的方法有：脈子生物學(xué)進行基因分型的方法有：脈沖場凝膠電泳沖場凝膠電泳(pulsed field gel electrophoresis , PFGE)、逆向凝膠、逆向凝膠電泳電泳(field inversion gelelectrophoresis ,FIGE) 、隨機擴、隨機擴增多態(tài)性增多態(tài)性DNA（random amplified polymorphic DNA，RAPD）、）、 多位多位點序列分型（點序列分型（multilocus sequencing typing，MLST）等）等 mecA 基因高度保守

6、基因高度保守,根據(jù)其核根據(jù)其核苷酸序列設(shè)計不同的引物苷酸序列設(shè)計不同的引物,用用PCR對菌株中對菌株中PBP2a 靶靶DNA 特定片段特定片段mecA 進行擴增進行擴增,以以mecA 基因存在與否判定是否基因存在與否判定是否為為MRSA 菌株，不受藥敏實驗菌株，不受藥敏實驗條件的影響條件的影響,因而特異性高因而特異性高,被被公認為是其診斷的公認為是其診斷的金標(biāo)準。金標(biāo)準。mecA和和femB 基因表達均為陽基因表達均為陽性性,方能確診為方能確診為MRSA 目前臨床濫用抗目前臨床濫用抗生素的現(xiàn)象，對生素的現(xiàn)象，對MRSA的流行起的流行起了一定的擴散作了一定的擴散作用用 ，第三代頭孢，第三代頭孢菌素的長期使用菌素的長期使用與與MRSA的出現(xiàn)的出現(xiàn)率呈平行關(guān)系率呈平行關(guān)系 醫(yī)護人員檢查病醫(yī)護人員檢查病人前后要嚴格洗人前后要嚴格洗手消毒，有條件手消毒，有條件應(yīng)用一次性口罩應(yīng)用一次性口罩、帽子、手套，、帽子、手套，醫(yī)療用品要固定醫(yī)療用品要固定，以防院內(nèi)交叉，以防院內(nèi)交叉感染感染 合理使用抗生素合理使用抗生素 早期檢出帶菌者早期檢出帶菌者 加強消毒制度加強消毒制度 醫(yī)院應(yīng)加強對新入醫(yī)院應(yīng)加強對新入院及院及MRSA易感者易感者的檢查，尤其是燒的檢查，尤其是燒傷病區(qū)、傷病區(qū)、ICU、呼吸、呼吸病房、血液科和