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1、1會計(jì)學(xué)RNA的生物合成與加工的生物合成與加工RNA的生物合成包括轉(zhuǎn)錄和RNA的復(fù)制3、大腸桿菌RNA聚合酶結(jié)構(gòu)與功能:酶的形狀象一個(gè)多突起的橢球體(1)亞基位于酶的一端,功能是:酶的組裝和識別啟動子并與之結(jié)合并使轉(zhuǎn)錄起始。(2)和/亞基,是最大的兩個(gè)亞基,形狀象螃蟹的前螯,功能是:與模板DNA結(jié)合,結(jié)合核苷酸底物,催化磷酸二酯鍵形成,是酶的催化中心。(3)-亞基,窄而長,分為4個(gè)區(qū),2區(qū)與啟動子的-10序列結(jié)合并解開雙螺旋,4區(qū)與啟動子的-35序列結(jié)合,1區(qū)和3區(qū)起調(diào)節(jié)作用。轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)左邊的序列叫起始點(diǎn)上游序列,在上游序列中有啟動子,右邊的序列叫下游序列,即轉(zhuǎn)錄區(qū).以轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)以合成第一個(gè)核苷酸
2、為界(有的書以啟動子為界),上游的DNA堿基記為負(fù)(-),下游的記為正(+).-35序列提供了RNA聚合酶的識別信號,-10區(qū)域有助于解開雙螺旋。啟動子的序列多種多樣,具有共有序列是常見的結(jié)構(gòu),但最弱的啟動子沒有-35序列1、轉(zhuǎn)錄合成的RNA,叫原初轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,原初RNA經(jīng)過一定程度的加工和修飾,才能變?yōu)槌墒斓膍RNA.。mRNA作為蛋白質(zhì)的合成模板,一個(gè)mRNA可以為一條多肽鏈編碼,也可為多條多肽鏈編碼,為一條多肽鏈編碼的mRNA叫單順反子,為二條或多條多肽鏈編碼的為多順反子。1970年Temin和Mizufani等人分別從致癌病毒中發(fā)現(xiàn)了以RNA為模板催化合成DNA的酶叫逆轉(zhuǎn)錄酶,也叫RNA
3、指導(dǎo)得DNA聚合酶.當(dāng)逆轉(zhuǎn)錄病毒感染宿主細(xì)胞時(shí),單鏈RNA病毒和酶一起進(jìn)入宿主細(xì)胞.(2)逆轉(zhuǎn)錄酶也是多功能酶,主要包括以下幾種活性: DNA聚合酶活性;以RNA為模板,催化dNTP聚合成DNA的過程。反轉(zhuǎn)錄酶不具有35外切酶活性,因此沒有校正功能,所以由反轉(zhuǎn)錄酶催化合成的DNA錯(cuò)誤率比較高,一般每加20000個(gè)脫氧核苷酸就會出現(xiàn)一個(gè)錯(cuò)誤的核苷酸,所以單鏈RNA病毒突變率高。 核糖核酸酶H(RNase H)的活性;由逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成的cDNA與模板RNA形成的雜交分子,將由RNase H從RNA5端水解掉RNA分子。(1)逆轉(zhuǎn)錄病毒的RNA、引物和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶和整合酶)進(jìn)入宿主細(xì)胞,在宿主細(xì)胞
4、的胞質(zhì)中發(fā)生逆轉(zhuǎn)錄作用,先形成cDNA。(2)cDNA進(jìn)入宿主細(xì)胞核,在整合酶幫助下整合到宿主細(xì)胞的染色體DNA上,叫前病毒,前病毒隨宿主細(xì)胞染色體DNA復(fù)制而復(fù)制,只有整合的前病毒DNA轉(zhuǎn)錄的mRNA才能指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。逆轉(zhuǎn)錄過程復(fù)雜:RNA的生物合成包括轉(zhuǎn)錄和RNA的復(fù)制3、大腸桿菌RNA聚合酶結(jié)構(gòu)與功能:酶的形狀象一個(gè)多突起的橢球體(1)亞基位于酶的一端,功能是:酶的組裝和識別啟動子并與之結(jié)合并使轉(zhuǎn)錄起始。(2)和/亞基,是最大的兩個(gè)亞基,形狀象螃蟹的前螯,功能是:與模板DNA結(jié)合,結(jié)合核苷酸底物,催化磷酸二酯鍵形成,是酶的催化中心。(3)-亞基,窄而長,分為4個(gè)區(qū),2區(qū)與啟動子的-10序列結(jié)合并解開雙螺旋,4區(qū)與啟動子的-35序列結(jié)合,1區(qū)和3區(qū)起調(diào)節(jié)作用。1970年Temin和Mizufani等人分別從致癌病毒中發(fā)現(xiàn)了以RN
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