廣東《黃花倒水蓮組培育苗技術(shù)規(guī)程》(報(bào)批稿)編制說(shuō)明

1、廣東省地方標(biāo)準(zhǔn)黃花倒水蓮組培育苗技術(shù)規(guī)程編制說(shuō)明一、任務(wù)來(lái)源任務(wù)來(lái)源于2018 年度廣東省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化專(zhuān)項(xiàng)資金，文件號(hào)粵財(cái)農(nóng) 2018 50 號(hào)，項(xiàng)目編號(hào) 2018-DB-13。二、編制背景、目的和意義黃花倒水蓮（ Polygala fallaxHemsl. ）為遠(yuǎn)志科遠(yuǎn)志屬下灌木或小喬木， 高可達(dá) 3 米；根粗壯， 葉片膜質(zhì)， 單葉互生， 葉面深綠色，背面淡綠色，總狀花序頂生或腋生，花瓣正黃色，龍骨瓣盔狀，雞冠狀附屬物具柄， 花藥卵形； 子房圓形， 蒴果闊倒心形至圓形， 綠黃色，種子圓形，種阜盔狀，花果期 5-10 月。是南方地區(qū)的珍貴藥材，全株入藥。小花成串倒吊在樹(shù)枝上，因此有黃花倒水蓮或倒

2、吊王、吊吊黃等稱(chēng)號(hào)。民間藥材，喜用來(lái)做藥膳湯，具有補(bǔ)益氣血。健脾利濕、活血調(diào)經(jīng)，用于產(chǎn)后體虛、急慢性肝炎、腰腿酸痛、鐵打損傷等。在藥學(xué)界已從其植株中提取出免疫抗炎成分物質(zhì)。 黃花倒水蓮喜林下溫暖濕潤(rùn)的環(huán)境生長(zhǎng)，種植 2 至 3 年能獲得經(jīng)濟(jì)效益，是林區(qū)的新經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)點(diǎn)，對(duì)林業(yè)的可持續(xù)發(fā)展起重要作用。黃花倒水蓮自身繁衍能力差，結(jié)果少，種子發(fā)芽低。加上人們對(duì)其“見(jiàn)之必采”，目前亂采亂挖現(xiàn)象嚴(yán)重，消耗大量的野生植物資源， 導(dǎo)致了瀕危甚至滅絕的現(xiàn)象，使其成為瀕危急缺中藥材。 利用組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行引種馴化繁育為當(dāng)務(wù)之急，為保護(hù)黃花倒水蓮的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。有必要制定“黃花倒水蓮組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程”，

3、有利于順利進(jìn)行黃花倒水蓮苗木繁育推廣種植。國(guó)內(nèi)外尚未有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。黃花倒水蓮喜濕潤(rùn)氣候，忌干旱及強(qiáng)光，適合廣東及整個(gè)南方地區(qū)種植。它不獨(dú)自占有林地但能充分利用林業(yè)用地，使林相更整齊，層次更分明，提高林業(yè)經(jīng)濟(jì)效益。 所以它又是一個(gè)林下經(jīng)濟(jì)藥材樹(shù)種。項(xiàng)目組已成功對(duì)其組織培養(yǎng)，具有大批量繁殖的能力。為規(guī)范黃花倒水蓮組培苗生產(chǎn)，有必要制定其生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程，有利于大批量苗木生產(chǎn)及推廣種植。三、編制思路和原則1、主要工作過(guò)程2018 年 5 月，項(xiàng)目下達(dá)后，梅州市林業(yè)科學(xué)研究所于2018 年 7月 10 日成立黃花倒水蓮組培苗生產(chǎn)技術(shù)工作小組；經(jīng)進(jìn)行調(diào)查、研究試驗(yàn)后，于 2018 年 7 月 20 日編寫(xiě)出黃

4、花倒水蓮組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程草稿。經(jīng)于 2018 年 11 月 5 日上報(bào)省林業(yè)廳提出修訂后，形成征求意見(jiàn)稿，經(jīng)于 2018 年 12 月 15 日征求意見(jiàn)后，綜合各征求意見(jiàn)單位所提出的意見(jiàn)， 經(jīng)討論修改后形成送審稿。 2019 年 5 月 8 日，廣東省市場(chǎng)監(jiān)督管理局組織評(píng)審專(zhuān)家在廣東省林業(yè)科學(xué)研究院對(duì)該標(biāo)準(zhǔn)送審稿進(jìn)行了審定，項(xiàng)目組根據(jù)評(píng)審專(zhuān)家所提意見(jiàn)進(jìn)行了修改，然后再函詢(xún)每位審定專(zhuān)家意見(jiàn)，根據(jù)審定會(huì)后專(zhuān)家反饋意見(jiàn)再修改，最后形成報(bào)批稿。2、標(biāo)準(zhǔn)主要起草人及其承擔(dān)的責(zé)任本標(biāo)準(zhǔn)起草小組由梅州市林業(yè)科學(xué)研究所蔡梅玲（工程師）、饒衛(wèi)芳（高級(jí)工程師） 、肖臘興（高級(jí)工程師） 、唐國(guó)濤（高級(jí)工程師） 、

5、范秀瓊（工程師）、朱昔嬌（工程師）、黃錦榮（高級(jí)工程師）、王志龍（助理工程師）組成。主要負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)的編制、征求意見(jiàn)、修訂、驗(yàn)證、送審等編制過(guò)程的一系列工作。3、標(biāo)準(zhǔn)的編制原則本標(biāo)準(zhǔn)提出的各項(xiàng)指標(biāo)與措施，以技術(shù)上先進(jìn)、經(jīng)濟(jì)上合理、生產(chǎn)上可行為原則。標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容力求具有指導(dǎo)性和可操作性，適合廣東省的自然條件和社會(huì)經(jīng)濟(jì)條件，符合國(guó)內(nèi)現(xiàn)行的林業(yè)生產(chǎn)規(guī)范。四、編制過(guò)程與內(nèi)容1、標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容及其論據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容有：優(yōu)良品種選擇、建立母本園、外植體選擇、外植體滅菌、初代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、組培苗煉苗移栽、營(yíng)養(yǎng)杯苗生產(chǎn)管理、建檔等技術(shù)要求做了明確的闡述，可以指導(dǎo)和規(guī)范黃花倒水蓮組培苗生產(chǎn)，促進(jìn)

6、黃花倒水蓮的推廣，促進(jìn)我省林業(yè)產(chǎn)業(yè)發(fā)展。2、主要技術(shù)指標(biāo)2.1 外植體選取及消毒方法經(jīng)過(guò)幾年來(lái)不同季節(jié)、不同時(shí)間采集外植體的試驗(yàn)分析得出，外植體采集宜在3 5 月芽茂盛時(shí)期且連續(xù)晴天2d 以上上午 9 時(shí) 12 時(shí)進(jìn)行，外植體的污染較輕。 處理后的外植體反復(fù)消毒試驗(yàn)得出，用 75%乙醇浸泡10s 后，再用 1 HgCl2 浸沒(méi)、輕搖、消毒812min 后，污染率低且對(duì)外植體的殺傷力也較低。2.3 初代培養(yǎng)經(jīng)過(guò)多種不同激素NAA、IAA、IBA 及不同濃度、不同光照條件下的對(duì)比試驗(yàn)中，初代培養(yǎng)，在MS基本培養(yǎng)基，添加1 mg/L 3 mg/L的 6-BA 和 0.1 mg/L 0.2 mg/L的

7、 NAA上，在光照強(qiáng)度1200 lux的條件下 12 h/d進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)的不定芽數(shù)及生長(zhǎng)狀況為最佳。表 1 外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)結(jié)果：6-BANAAIBA2.4-Dm外 植 體萌芽數(shù)誘導(dǎo)增殖數(shù)增殖倍mg/Lmg/Lmg/Lg/L數(shù)率 %數(shù)0.50.2151067291.90.50.113431100.810.0115747201.310.1151387412.720.1151493463.110.0513754231.82.4 增殖培養(yǎng)經(jīng)過(guò)了反復(fù)試驗(yàn)，轉(zhuǎn)接在增殖培養(yǎng)基中，MS基本培養(yǎng)基，添加1mg/L 3 mg/L 的 6-BA 和 0.1 mg/L 0.2 mg/L 的 NAA進(jìn)行增殖，誘導(dǎo)出的愈

8、傷組織能夠分化為不定芽，其他的則難以形成不定芽。表 2 不定芽的增殖培養(yǎng)結(jié)果：6-BA mg/LNAA mg/L接種芽數(shù)增殖芽數(shù)增殖倍數(shù)生長(zhǎng)狀況10.120623.1苗粗壯1.50.120874.4苗粗壯1.50.217734.3苗粗壯20.118905苗細(xì)20.220944.7苗細(xì)弱2.5 生根培養(yǎng)生根培養(yǎng)基： 1/2MS 基本培養(yǎng)基，添加1 mg/L 2 mg/L的 IBA和 0.1 mg/L 0.2 mg/L 的 NAA，進(jìn)行生根培養(yǎng)， 2000lux 3000lux光照條件下培養(yǎng)，生根效果最佳。表 3 不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑生根結(jié)果:植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑生根率（ %）平均生根數(shù)量NAA0.15m

9、g/LIBA1.5mg/L95.2 ±5.924.6 ±0.53IBA1.5mg/L76.9 ±6.352.7 ±0.68NAA0.15mg/LIAA1.5mg/L90.7 ±4.753.7 ±0.50NAA1.5mg/L40.8 ±8.171.7 ±0.61NAA1.65mg/L37.5 ±11.201.5 ±0.52IBA1.65mg/L41.78 ± 8.111.7 ±0.602.6 瓶苗移栽基質(zhì)采用泥炭土和黃心土按體積比（2:8 ）的混合基質(zhì)作種植基質(zhì)處理的生長(zhǎng)指標(biāo)優(yōu)

10、勢(shì)明顯，遠(yuǎn)高于其他兩項(xiàng)基質(zhì)處理的生長(zhǎng)指標(biāo)。表 4 不同基質(zhì)黃花倒水蓮組培苗移栽成活率統(tǒng)計(jì)特征值%基質(zhì)最小值最大值均值變異系數(shù)泥炭土：黃心土76.0680.278.3 ± 7.82b0.092:8純黃心土70.9379.875.4± 3.64ab0.04火燒土：黃心土56.773.967.5± 7.84ba0.092:8表 5 不同基質(zhì)黃花倒水蓮移栽苗的生長(zhǎng)指標(biāo)差異基質(zhì)地徑 /cm苗高 /cm主根長(zhǎng) /cm泥炭土：黃心土 2:8純黃心土火燒土：黃心土2:80.32 ± 0.045b13.2 ±1.76b14.5± 2.08c0.26 &

11、#177; 0.045a8.9 ±0.73a10.9± 0.86a0.32 ± 0.034b12.6 ±0.82b12.3± 0.99b2.7 營(yíng)養(yǎng)袋苗管理（ 1）育苗棚保持溫度 1525，濕度 70% 80%，營(yíng)養(yǎng)袋基質(zhì)保持濕潤(rùn)防積水。只用清水噴射，禁施任何肥料。要保持移苗場(chǎng)所清潔，防止病菌滋生。具體按 GB/T8321 執(zhí)行。（以上 2.1 至 2.7 點(diǎn)的技術(shù)指標(biāo)均由這幾年來(lái)反復(fù)研究試驗(yàn)得出的數(shù)據(jù)）（ 2）容器小苗分級(jí)小苗級(jí)、級(jí)苗為出圃合格苗，同一批苗木、級(jí)苗百分率不得低于 95%。分級(jí)的依據(jù)來(lái)源于多年生產(chǎn)實(shí)踐，一年生營(yíng)養(yǎng)袋苗95%以上均

12、能達(dá)標(biāo)，其中級(jí)苗合格率占80%，級(jí)苗合格率占15%，僅5%的苗木不能達(dá)標(biāo)。二年生營(yíng)養(yǎng)袋苗97%以上均能達(dá)標(biāo)，其中級(jí)苗合格率占 90%，級(jí)苗合格率占8%，僅 1%的苗木不能達(dá)標(biāo)。3、主要試驗(yàn)（或者驗(yàn)證）的分析、綜述報(bào)告，技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證，預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果。（ 1）標(biāo)準(zhǔn)起草小組在組培苗木生產(chǎn)和移栽地點(diǎn)進(jìn)行調(diào)查分析，對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)的主要技術(shù)指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證。（ 2）在瓶苗移栽中幼苗培育、袋苗質(zhì)量分級(jí)，主要參考廣東省區(qū)域性農(nóng)業(yè)示范基地的育苗經(jīng)驗(yàn)；在病蟲(chóng)害防治藥劑選用及用量上，參考 GB4285農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)。（ 3）經(jīng)試驗(yàn)和生產(chǎn)實(shí)踐應(yīng)用本技術(shù)生產(chǎn)的苗木質(zhì)量較好，抗病強(qiáng)。（ 4）預(yù)期經(jīng)濟(jì)效果主要有三個(gè)方面：其一，能夠

13、提高苗木的出品率；其二，可以提前、集中回收生產(chǎn)投入和獲益；其三，減少勞動(dòng)投入的時(shí)間，從而減少雇工費(fèi)用。4、采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)外先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)的程度，以及與國(guó)際、國(guó)外同類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)水平的對(duì)比情況，或與測(cè)試的國(guó)外樣品、樣機(jī)有關(guān)數(shù)據(jù)對(duì)比情況。目前尚未查到該品種的國(guó)際技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。5、重大分歧意見(jiàn)的處理經(jīng)過(guò)和依據(jù)黃花倒水蓮組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程（征求意見(jiàn)稿）廣泛征求了有關(guān)農(nóng)林、科研機(jī)構(gòu)、高校、管理及生產(chǎn)單位的意見(jiàn)，發(fā)送征求意見(jiàn)稿 3 份。收到反饋意見(jiàn)和建議共 23 條，主要關(guān)于整體、范圍、術(shù)語(yǔ)和定義、規(guī)范性引用文件、 瓶苗生產(chǎn)、組培生產(chǎn)設(shè)施與操作、瓶苗移植、包裝與運(yùn)輸?shù)确矫娴慕ㄗh，分別為：整體 1 條、范圍 3 條、瓶苗生

14、產(chǎn) 7 條、 瓶苗移植 4 條、包裝與運(yùn)輸 1 條 。經(jīng)起草小組會(huì)議討論其中采納修改了 18 條建議， 5 條未予采納。 未予采納內(nèi)容和理由如下：（ 1）內(nèi)容：整體將“建立組培育苗技術(shù)檔案” 改為“技術(shù)檔案” 。不采納理由： “建立組培育苗技術(shù)檔案”更為直觀(guān)明了。（ 2）內(nèi)容：“改為： 3.1 黃化倒水蓮 3.2 組織培養(yǎng)”。不采納理由：“黃化倒水蓮組織培養(yǎng)”屬整體專(zhuān)屬名詞（ 3）內(nèi)容：“刪除 3 術(shù)語(yǔ)和定義”不采納理由：留與刪各有意見(jiàn)。（ 4）內(nèi)容：“刪除 段前標(biāo)點(diǎn)符號(hào)”。不采納理由：沒(méi)找到該標(biāo)點(diǎn)符號(hào)。（ 5）內(nèi)容： “6.1 移植基質(zhì)與容器 1 ：1 改為 1；1（冒號(hào)改為分號(hào)）”。不采納

15、理由：大部分人習(xí)慣用冒號(hào)。6、對(duì)評(píng)審會(huì)上專(zhuān)家所提意見(jiàn)的處理情況黃花倒水蓮組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程評(píng)審會(huì)上，專(zhuān)家所提意見(jiàn)和建議共18 條，主要關(guān)于規(guī)范性引用文件、外植體采集、培養(yǎng)基配制、煉苗、瓶苗移植、 營(yíng)養(yǎng)袋苗質(zhì)量要求、 環(huán)境條件、 術(shù)語(yǔ)和定義、瓶苗生產(chǎn)、組培生產(chǎn)設(shè)施與操作、主要病蟲(chóng)害防治、肥水管理、附錄的建議，分別為：規(guī)范性引用文件2 條、外植體采集 1 條、煉苗 2 條、移植 1 條、主要病蟲(chóng)害防治1 條、培養(yǎng)基配制1 條、環(huán)境條件1 條、瓶苗生產(chǎn)1 條、術(shù)語(yǔ)和定義組培生產(chǎn)設(shè)施與操作1 條、初代培養(yǎng)1條、營(yíng)養(yǎng)袋苗質(zhì)量要求2 條、移植基質(zhì)與容器1 條、培養(yǎng)溫度1 條、肥水管理 1 條、附錄 1 條。經(jīng)起草小組會(huì)議討論采納修改18 條建議。五、內(nèi)容說(shuō)明（一）關(guān)于適用范圍黃花倒水蓮（ Polygala fallax Hemsl. ）喜熱帶濕潤(rùn)氣候，適合廣東及整個(gè)南方地區(qū)種植，忌干旱及強(qiáng)光照射。本標(biāo)準(zhǔn)適用于有設(shè)備條件與技術(shù)力量的科研單位與企業(yè)執(zhí)行使用。（二）關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)屬性本標(biāo)準(zhǔn)不涉及有關(guān)國(guó)家安全、保護(hù)人體健康和人身財(cái)產(chǎn)安全等有關(guān)強(qiáng)制性地方標(biāo)準(zhǔn)或強(qiáng)制性條文等的八項(xiàng)要求之一，因此建議本標(biāo)準(zhǔn)作為推薦性標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，并在執(zhí)行過(guò)程中不斷補(bǔ)充、修改和完善相關(guān)條款。（三）與現(xiàn)有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系。本標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用了LY/T1882林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程、DB44/T1790 黃花倒水蓮栽培技