典型性印染廢水生物急性毒性水平分析

1、    典型性印染廢水生物急性毒性水平分析    摘要：采用明亮發(fā)光細(xì)菌t3（photobacterium p. t3）和dxy-2型生物毒性測(cè)試儀對(duì)22類(lèi)典型性印染廢水樣品的急性毒性效應(yīng)進(jìn)行測(cè)定，綜合分析印染生產(chǎn)中印染前處理廢水、染色廢水、印花廢水以及印染處理廢水的生物急性毒性水平。關(guān)鍵詞：印染廢水;污水毒性;毒物質(zhì)中途分類(lèi)號(hào)：x83 ：a ：2095-672x（2019）12-0-03abstract： the bright luminescent bacteria t3 （photobacterium p. t3） and dxy-2 type b

2、iotoxicity tester were used to determine the acute toxicity effects of 22 typical printing and dyeing wastewater samples. a comprehensive analysis of printing and dyeing wastewater， dyeing wastewater， and printing biological acute toxicity levels of wastewater and wastewater from printing and dyeing

3、 processes.keywords： printing and dyeing wastewater; sewage toxicity; toxic substances土壤和污水毒性的測(cè)定主要有理化方法和生物學(xué)方法。傳統(tǒng)的理化分析方法只能定量分析環(huán)境中有限污染物種類(lèi)的含量，而不能直接反映各種有毒物質(zhì)的綜合毒性，生物毒性測(cè)試能夠彌補(bǔ)理化方法的不足。1995 年中國(guó)制定并頒布了利用發(fā)光細(xì)菌測(cè)定水質(zhì)毒性的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)gb /t 15441-1995水質(zhì)急性毒性的測(cè)定發(fā)光細(xì)菌法1。該標(biāo)準(zhǔn)介紹了明亮發(fā)光細(xì)菌t3的來(lái)評(píng)價(jià)生物毒性的檢測(cè)方法。明亮發(fā)光細(xì)菌t3菌（photobacterium phosphor

4、eum t3）是一類(lèi)非致病的普通細(xì)菌，主要分布在海洋環(huán)境中，在正常的生理?xiàng)l件下能夠發(fā)射出可見(jiàn)光，當(dāng)環(huán)境條件不佳或有毒物質(zhì)存在時(shí)，發(fā)光細(xì)菌的熒光素酶活性或細(xì)胞呼吸受到抑制，其發(fā)光能力受到影響，導(dǎo)致發(fā)光強(qiáng)度減弱，且其減弱程度與毒性大小呈正相關(guān)，因此通過(guò)發(fā)光率的改變來(lái)顯示有毒物質(zhì)對(duì)生物體的毒性作用。本研究采用明亮發(fā)光細(xì)菌t3（photobacterium p. t3）和dxy-2型生物毒性測(cè)試儀對(duì)22個(gè)污水樣品的急性毒性效應(yīng)進(jìn)行了測(cè)定和分析。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 菌株將明亮發(fā)光細(xì)菌t3（photobacterium p. t3）凍干粉（中國(guó)科學(xué)院院南京土壤研究所提供）用3% nacl

5、溶液溶解復(fù)蘇，轉(zhuǎn)接到新鮮斜面上培養(yǎng)后轉(zhuǎn)接于50ml的液體培養(yǎng)基中，在25，180r·min -1條件下培養(yǎng)12-14h。將培養(yǎng)后的菌液立即用3% nacl溶液洗滌后在5000r·min -1下離心8min，后將菌液用3% nacl溶液稀釋備用。1.1.2 待測(cè)樣品試驗(yàn)所測(cè)的22個(gè)水樣編號(hào)分別為sh1sh22;采樣時(shí)間為2019年2月28日。水樣來(lái)源：蘇州某集團(tuán)印染廠(chǎng)廢水。對(duì)于其中含有固體懸浮物的樣品，事先經(jīng)過(guò)過(guò)濾去除后再進(jìn)行檢測(cè)。1.1.3 主要儀器dxy-2型生物毒性測(cè)試儀，南京土壤研究所研制。1.2 實(shí)驗(yàn)方法生物毒性測(cè)試儀提前開(kāi)機(jī)預(yù)熱30 min，將10ml待測(cè)樣品與0

6、.3gnacl充分振蕩混勻，吸取1.8ml混合液于玻璃測(cè)試管中，加入200 l 菌液，加塞上下振蕩5次，靜置15 min 后測(cè)試發(fā)光度（每管在加菌液的當(dāng)時(shí)精確計(jì)時(shí)，精確到秒）。每個(gè)檢測(cè)樣品采用3 個(gè)平行，實(shí)驗(yàn)同時(shí)添加3個(gè)平行的對(duì)照（3% nacl溶液）以保證實(shí)驗(yàn)的有效性并以此為基礎(chǔ)計(jì)算樣品液的相對(duì)發(fā)光率和相對(duì)發(fā)光抑制率。1.3 樣品檢測(cè)1.3.1 樣品液的稀釋樣品液預(yù)實(shí)驗(yàn)：將10 ml 待測(cè)樣品與0.3 g nacl 充分振蕩混勻，吸取1.8 ml混合液于玻璃測(cè)試管中，加入200l 菌液，加塞上下振蕩5次，靜置15 min 后測(cè)試發(fā)光度。每個(gè)檢測(cè)樣品采用3 個(gè)平行，實(shí)驗(yàn)同時(shí)添加3個(gè)平行的對(duì)照（

7、3% nacl溶液）以保證實(shí)驗(yàn)的有效性并以此為基礎(chǔ)計(jì)算相對(duì)發(fā)光抑制率。將相對(duì)發(fā)光抑制率大于零的樣品進(jìn)行樣品稀釋。1.3.2 樣品液稀釋濃度的選擇：探測(cè)試驗(yàn)：將樣品液按對(duì)數(shù)系列稀釋成5個(gè)濃度：100%、10%、1%、0.1%、0.01%（它們的對(duì)數(shù)依次為0，-1，-2，-3，-4），按以上方法所述初測(cè)一遍視1%100%相對(duì)發(fā)光度落在哪一個(gè)濃度范圍。1.3.3 樣品檢測(cè)在1%100%相對(duì)發(fā)光度所落在的濃度范圍內(nèi)增配69個(gè)濃度，并測(cè)定對(duì)應(yīng)發(fā)光度，繪制濃度和發(fā)光度的相關(guān)曲線(xiàn)。2 數(shù)據(jù)處理2.1 計(jì)算樣品相對(duì)發(fā)光率、相對(duì)發(fā)光抑制率（%），并算出平均值相對(duì)發(fā)光率（%）×100%相對(duì)發(fā)光抑制率（%

8、）×100%相對(duì)發(fā)光率平均值（%）×100%2.2 建立并檢驗(yàn)樣品稀釋濃度（c）與其相對(duì)發(fā)光度（t）%均值的相關(guān)方程，繪制關(guān)系曲線(xiàn)（1）求出一元一次線(xiàn)性回歸方程的a（截距）、b（斜率、回歸系數(shù)）和r（相關(guān)系數(shù)），列出方程：t=a+bc。（2）根據(jù)建立的上述方程繪制關(guān)系曲線(xiàn)。將t=90和50代入上式，分別求出樣品的ec10和ec50值。ec10和ec50值以樣品的稀釋濃度（百分濃度）表示。2.3 毒性等級(jí)劃分根據(jù)行業(yè)廢水毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)/發(fā)光菌2， 把水質(zhì)生物毒性分為五個(gè)等級(jí)用于本次水質(zhì)毒性評(píng)價(jià)。3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析3.1 樣品預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)試結(jié)果表明：22個(gè)水樣中的9個(gè)樣品顯示對(duì)t

9、3細(xì)菌的活性無(wú)抑制作用，sh4水樣對(duì)t3菌的相對(duì)抑制率為1.4%，毒性等級(jí)為級(jí);sh14水樣的相對(duì)發(fā)光抑制率為35.1%，毒性級(jí)別為中毒，毒性等級(jí)為級(jí);其他12個(gè)樣品包括sh1、sh2、sh4、sh8sh13、sh18、sh21原始樣品的相對(duì)發(fā)光抑制率為100%，毒性級(jí)別為劇毒，毒性等級(jí)為級(jí)。3.2 樣品稀釋相關(guān)曲線(xiàn)對(duì)初步測(cè)定試驗(yàn)中12個(gè)相對(duì)發(fā)光率低于90%的樣品（即相對(duì)抑制率大于10%的樣品）進(jìn)行稀釋實(shí)驗(yàn)，通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定相對(duì)發(fā)光率在1100%時(shí)，樣品所在的濃度范圍后，增加濃度梯度求得樣品的稀釋濃度c-相對(duì)發(fā)光率的一元一次方程曲線(xiàn)。如下圖所示，所有樣品的稀釋濃度相對(duì)發(fā)光率的相關(guān)系數(shù)（r2）在0

10、.90380.9886之間，具有較好的線(xiàn)性關(guān)系。3.3 計(jì)算結(jié)果通過(guò)以上圖1線(xiàn)性方程，求得樣品的ec10和 ec50值如下表。4 總結(jié)本次采樣共采得印染廢水22個(gè)樣品，其中9個(gè)樣品顯示對(duì)t3細(xì)菌的活性無(wú)抑制作用，sh4水樣對(duì)t3菌的相對(duì)抑制率為1.4%，毒性等級(jí)為級(jí);sh14水樣的相對(duì)發(fā)光抑制率為35.1%，毒性級(jí)別為中毒，毒性等級(jí)為級(jí);其他11個(gè)樣品包括sh1、sh2、sh4、sh8sh13、sh18、sh21原始樣品的相對(duì)發(fā)光抑制率為100%，毒性級(jí)別為劇毒，毒性等級(jí)為級(jí)。12個(gè)水樣（包括sh1、sh2、sh4、sh8sh13、sh18、sh21及sh14）的ec10的樣品稀釋濃度范圍為0.11%35.5%;sh14原始樣品的抑制率為35.1%，不存在ec50值，其余11個(gè)樣品ec50值為0.16%55.3%。參考文獻(xiàn)1國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局.gb/t 154411995 水質(zhì)急性毒性的測(cè)定發(fā)光細(xì)菌s北京： 中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，1995.2farré m