臨床檢驗(yàn)技師考試輔導(dǎo)(163)

1、第九章細(xì)菌的培養(yǎng)與分離技術(shù)本章內(nèi)容一、基本條件二、細(xì)菌的接種與分離技術(shù)三、細(xì)菌培養(yǎng)的方法四、細(xì)菌的生長現(xiàn)象五、細(xì)菌L 型的檢查基本條件（一）細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室：生物安全柜。（二）無菌實(shí)驗(yàn)室（三）基本設(shè)備和器具：溫箱、 CO2培養(yǎng)箱、厭氧培養(yǎng)設(shè)備；顯微鏡；高壓蒸汽滅菌器、干烤箱；接種環(huán)和接種針；火焰燈或酒精燈；平皿、試管、吸管等玻璃器皿，以及離心機(jī)、天平等。細(xì)菌的接種與分離技術(shù)平板劃線分離法：分散生長，各自形成菌落。連續(xù)劃線法：雜菌不多。分區(qū)劃線法：雜菌多。斜面接種法：單個(gè)菌落純培養(yǎng)、保存菌種或觀察細(xì)菌的某些特性。液體接種法：多用于一些液體生化試驗(yàn)管的接種。穿刺接種法：半固體培養(yǎng)基，接種針。傾注平板法：

2、測定牛乳、飲水和尿液等標(biāo)本細(xì)菌數(shù)。 將標(biāo)本適當(dāng)稀釋后，取一定量加入已滅菌的平皿內(nèi)，再傾入已溶化并冷卻至 45左右的定量培養(yǎng)基，混勻，待凝固后倒置、培養(yǎng)。涂布接種法：常用于紙片法藥物敏感性測定，也可用于被檢標(biāo)本中的細(xì)菌計(jì)數(shù)。細(xì)菌的培養(yǎng)方法第 1 頁培養(yǎng)條件：根據(jù)臨床初步診斷及待檢細(xì)菌的種類，選用不同環(huán)境條件進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)菌的生長現(xiàn)象分離培養(yǎng)基上菌落的生長現(xiàn)象觀察菌落的大小、形狀、突起、邊緣、顏色、表面、透明度等。血瓊脂上的溶血： 溶血：菌落周圍出現(xiàn)綠色環(huán)狀，紅細(xì)胞外形完整無缺。 溶血：菌落周圍形成一個(gè)完全清晰透明的環(huán)，紅細(xì)胞溶解。 溶血：沒有溶血，紅細(xì)胞無溶解。雙環(huán)：菌落周圍完全溶解的暈圈外有一個(gè)

3、部分溶血的第二圓圈。氣味液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象肉湯培養(yǎng)基的混濁度、沉淀、菌膜，氣味和色素等。細(xì)菌數(shù)量達(dá)106 107CFU/ml，培養(yǎng)肉湯才見混濁。血液培養(yǎng)的檢查和傳代培養(yǎng)：肉眼觀察其生長現(xiàn)象，如溶血、產(chǎn)生氣體或混濁度等。半固體培養(yǎng)基中細(xì)菌的動(dòng)力有動(dòng)力的細(xì)菌除了在穿刺接種的穿刺線上生長外，在穿刺線的兩側(cè)均可見混濁或細(xì)菌生長的小菌落。細(xì)菌 L 型的檢查1. 標(biāo)本采集： 無雜菌污染的組織或體液標(biāo)本應(yīng)加 20%蔗糖無菌溶液保持高滲； 血液標(biāo)本應(yīng)接種高滲肉湯增菌培養(yǎng)。2. 分離培養(yǎng)：標(biāo)本接種到高滲肉湯增菌培養(yǎng)1 7d，然后轉(zhuǎn)種 L 型平板和血平板 37培養(yǎng) 27d。3. 生長現(xiàn)象： 常有油煎蛋樣菌落（

4、典型 L 型菌落）、 顆粒型菌落（ G型）和絲狀菌落（ F 型）三種類型。平板分區(qū)劃線的目的A. 使細(xì)菌獲得充分的營養(yǎng)B. 減少細(xì)菌間的相互抑制C. 獲得足夠的單個(gè)菌落D. 利于細(xì)菌的大量生長E. 加快細(xì)菌的生長速度正確答案 C第 2 頁答案解析平板劃線分離法：分散生長，各自形成菌落。連續(xù)劃線法：雜菌不多。分區(qū)劃線法：雜菌多。在臨床細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)中，含菌量較多的標(biāo)本如糞便，接種方法適宜用A. 平板傾注培養(yǎng)法B. 平板連續(xù)劃線法C. 平板分區(qū)劃線法D. 斜面接種法E. 半固體穿刺接種法正確答案 C答案解析對于含菌量較多的標(biāo)本適宜用平板分區(qū)劃線法。關(guān)于傾注平板法，錯(cuò)誤的是A. 可用于尿液、牛乳等標(biāo)本的

5、計(jì)數(shù)B. 所用培養(yǎng)基預(yù)先滅菌后溶化C. 先取一定量標(biāo)本加入無菌平皿內(nèi)，再加入培養(yǎng)基混勻D. 先取一定量標(biāo)本與培養(yǎng)基混勻后，再倒入無菌平皿內(nèi)E. 培養(yǎng)基溫度以 45左右為宜正確答案D答案解析傾注平板法應(yīng)先取一定量標(biāo)本加入無菌平皿內(nèi)，再加入培養(yǎng)基混勻。不屬于細(xì)菌形態(tài)學(xué)觀察的是A. 平板分區(qū)劃線觀察單個(gè)菌落B. 革蘭染色觀察細(xì)菌染色性C. 鞭毛染色觀察細(xì)菌的動(dòng)力D. 光鏡觀察細(xì)菌E. 暗視野顯微鏡觀察細(xì)菌動(dòng)力正確答案A答案解析平板分區(qū)劃線觀察單個(gè)菌落屬于細(xì)菌生長現(xiàn)象，不是細(xì)菌形態(tài)學(xué)。平板劃線分離細(xì)菌成功的標(biāo)志是A. 區(qū)和區(qū)不相連B. 有明顯的三區(qū)劃線C. 培養(yǎng)出單個(gè)菌落D. 不能劃破培養(yǎng)基E. 不能有污染菌生長正確答案C答案解析平板劃線分離細(xì)菌成功的標(biāo)志是培養(yǎng)出單個(gè)菌落。觀察細(xì)菌動(dòng)力最常使用A