夏建川生物治療及在臨床腫瘤治療中的應用

1、結直腸癌結直腸癌 患者女患者女 70歲住院號：歲住院號：127551介入科介入科 入院診斷：直腸癌，肝轉移入院診斷：直腸癌，肝轉移 2003.7.202003.7.20第一次入院行直腸癌第一次入院行直腸癌Dixon切除術，手術后三周切除術，手術后三周第二次住院，對肝臟的病灶進行射頻消融，射頻消融后第二次住院，對肝臟的病灶進行射頻消融，射頻消融后2003.8.16-2004.12.16 進行進行8次次CIK細胞免疫細胞免疫治療治療, 出院情況：出院情況：80分；分； 第三次入院：第三次入院：2004.1.25-2004.3.26 行行4次自體次自體NK細胞治療；細胞治療；目前一般情況好，肝腎功能

2、正常，小便正常目前一般情況好，肝腎功能正常，小便正常, KPS 90分。分。到目前為此，共做到目前為此，共做3030次細胞免疫治療。次細胞免疫治療。20112011年年8 8月月2424號復號復查未見復發(fā)。患者查未見復發(fā)?；颊呙磕甑轿覀冡t(yī)院每年到我們醫(yī)院接受接受6 68 8次細胞免疫治次細胞免疫治療。療。乳腺癌（病例一）乳腺癌（病例一） 病人，女，69歲，左乳腺癌術后患者?；颊咭蜃笕橄倌[物3年于2004-7-29行左乳癌改良根治術，用環(huán)磷酰胺+阿霉素+5-氟脲嘧啶方案化療2程，2004-10-22至2004-12-17行NK細胞回輸6次,2005年4-9月行CIK細胞回輸6次每年接受8次體細胞

3、免疫治療。2007-11-20 PET-CT示未見復發(fā)。 2011-10-18 PET-CT檢查未見復發(fā)。目前，患者每年接受68次細胞免疫治療。病人病人 女女 5050歲歲 2009.3.17 PET-CT2009.3.17 PET-CT提示左乳腫物提示左乳腫物2009.3.20 2009.3.20 左乳區(qū)段切除左乳區(qū)段切除+ +左腋窩淋巴結清掃術左腋窩淋巴結清掃術術后病理：大小為術后病理：大小為2x1.5x1.5cm2x1.5x1.5cm，浸潤性導管癌，浸潤性導管癌，級，級，ER(-)ER(-)，PR(-)PR(-)，Her-2(-)Her-2(-)術后分期：術后分期：T1N1M0T1N1M

4、0，AA期期2009.4.10-09.8.7 2009.4.10-09.8.7 行劑量密集型行劑量密集型“ACTACT”化療各化療各4 4程程2009.8.31-09.10.14 2009.8.31-09.10.14 左乳左乳+ +左鎖骨上放療左鎖骨上放療2009.6-10.8 2009.6-10.8 細胞免疫治療共細胞免疫治療共2424次，其中次，其中NK 8NK 8次，次，D-CIK D-CIK 1212次，次，CIK 4CIK 4次，療程間無長時間間隔。次，療程間無長時間間隔。2011.82011.8至今至今 病情穩(wěn)定，一般情況良好。病情穩(wěn)定，一般情況良好。乳腺癌（病例二）乳腺癌（病例二

5、）病人 男 50歲 盲腸癌 （Dukes D, 肝轉移） 200.12 CEA200.12 CEA升高，腸鏡病理：腺癌升高，腸鏡病理：腺癌級，級，PET-CTPET-CT：盲腸癌并肝轉移瘤采用手術和化療、生物治療的綜合治盲腸癌并肝轉移瘤采用手術和化療、生物治療的綜合治療方案：術前新輔助化療療方案：術前新輔助化療3 3次，術后輔助化療次，術后輔助化療9 9次，手術次，手術化療期間均配合化療期間均配合C225C225及細胞免疫治療，之后進行以細胞及細胞免疫治療，之后進行以細胞免疫治療為主的治療。免疫治療為主的治療。 具體過程：具體過程：08.1.7-08.2.4 08.1.7-08.2.4 XEL

6、OXXELOX化療化療3 3次次 2008.2.22 2008.2.22 右半肝切除術右半肝切除術+ +肝內一個轉移瘤切除術肝內一個轉移瘤切除術+ +區(qū)域區(qū)域淋巴結清掃術淋巴結清掃術 2008.3.11 2008.3.11 肝內另一個轉移瘤射頻消融治療肝內另一個轉移瘤射頻消融治療 2008.3.18 -08.7.8 CR+5Fu2008.3.18 -08.7.8 CR+5Fu化療化療1 1次，次，F(xiàn)OLFIRIFOLFIRI化療化療8 8次次 2008.1-09.1 2008.1-09.1 細胞免疫治療細胞免疫治療2222次，其中次，其中NK 6NK 6次，次，D-CIK 5D-CIK 5次，

7、次，CIK 10CIK 10次，次， D-T 1D-T 1次次 2009.1- 2009.1- 至今至今 病情暫穩(wěn)定病情暫穩(wěn)定肺癌肺癌 （病例一）（病例一） 患者男患者男70歲住院號：歲住院號：151182綜合科綜合科入院診斷：左上肺腺癌入院診斷：左上肺腺癌第一次住院行誘導化療，后先后行第一次住院行誘導化療，后先后行gamma刀治療及射刀治療及射頻消融治療，并于頻消融治療，并于2005.12.6-2007.6.21 共行共行CIKCIK治療：治療：2626次；次；DC-CIKDC-CIK治療：治療：1515次。出院時一般情況好，腫瘤次。出院時一般情況好，腫瘤標志物無升高，腦無占位，肺部病灶及縱

8、隔淋巴結均標志物無升高，腦無占位，肺部病灶及縱隔淋巴結均無活性無活性, ,到現(xiàn)在無瘤生存已到現(xiàn)在無瘤生存已3636個月，這個病人是綜合個月，這個病人是綜合治療的范例。治療的范例。 男，男，7676歲，非小細胞肺癌術后歲，非小細胞肺癌術后 20092009年年7 7月右側胸腔出現(xiàn)胸水月右側胸腔出現(xiàn)胸水 20092009年年8 8月開始鏈式月開始鏈式-CIK-CIK細胞免疫治療細胞免疫治療 8 8月月3 3日第一次抽血（病人日第一次抽血（病人50-60 ml50-60 ml） 8 8月月1010日開始第一程鏈式日開始第一程鏈式-CIK-CIK回輸回輸 到到1212月月2 2日，共抽血培養(yǎng)日，共抽血

9、培養(yǎng)9 9次，回輸次，回輸2727次次 每次回輸細胞數(shù)量每次回輸細胞數(shù)量8.238.2310107 74.84.810108 8 20092009年年1010月月1616日日CTCT證實胸水明顯減少，病人一般情況良證實胸水明顯減少，病人一般情況良好，自覺較前改善。好，自覺較前改善。肺癌肺癌 （病例二）（病例二） 女，女，6565歲，非小細胞肺癌歲，非小細胞肺癌 20092009年年8 8月開始鏈式月開始鏈式-CIK-CIK細胞免疫治療細胞免疫治療 8 8月月3 3日第一次抽血（病人日第一次抽血（病人50-60ml50-60ml） 8 8月月1010日開始第一程鏈式日開始第一程鏈式-CIK-CI

10、K細胞免疫回輸（靜脈細胞免疫回輸（靜脈/ /皮下）皮下） 到到1212月月2 2日，共抽血培養(yǎng)日，共抽血培養(yǎng)8 8次，回輸次，回輸2424次次 每次回輸細胞數(shù)量每次回輸細胞數(shù)量5 510107 72210108 8 目前病灶穩(wěn)定，似較前略有縮小，病人一般情況良好，目前病灶穩(wěn)定，似較前略有縮小，病人一般情況良好，自覺較前改善。自覺較前改善。肺癌肺癌 （病例三）（病例三）腫瘤細胞腫瘤細胞惡性增殖惡性增殖免疫逃逸免疫逃逸三、腫瘤的免疫基因治療三、腫瘤的免疫基因治療Immuno-gene therapy of cancer從廣義上講，根據(jù)免疫學的理論技術而建立的基因治從廣義上講，根據(jù)免疫學的理論技術而

11、建立的基因治療方案，均屬免疫基因治療（療方案，均屬免疫基因治療（Immune gene therapy或或Immunogene therapy） 。I ：493項項I/II: 160項項II : 118項項II/III: 7項項III: 19項項腫瘤的免疫腫瘤的免疫基因治療基因治療抗抗 原原 180 項項細胞因子細胞因子 247 項項500項項美國美國FDAFDA批準批準Provenge (sipuleucel-T)Provenge (sipuleucel-T)，一種治療晚，一種治療晚期前列腺癌的患者免疫活性細胞，這標志進入新癌癥期前列腺癌的患者免疫活性細胞，這標志進入新癌癥治療：自身免疫活性

12、細胞治療。（治療：自身免疫活性細胞治療。（2010.4.292010.4.29） PROVENGE由自身外周血單核細胞組成，包括在確定的由自身外周血單核細胞組成，包括在確定的培養(yǎng)期間用一種重組人蛋白，培養(yǎng)期間用一種重組人蛋白，PAP-GM-CSF已被活化的抗原已被活化的抗原提呈細胞提呈細胞(APCs)；前列腺酸性磷酸酶；前列腺酸性磷酸酶(PAP)，在前列腺癌組織，在前列腺癌組織中高表達的一種抗原，連接至免疫細胞激活劑粒中高表達的一種抗原，連接至免疫細胞激活劑粒-巨噬細胞集巨噬細胞集落刺激因子落刺激因子(GM-CSF組成組成)。刺激自體的。刺激自體的T淋巴細胞。將這些淋巴細胞。將這些經(jīng)體外刺激的

13、細胞回輸給前列腺癌患者，經(jīng)體外刺激的細胞回輸給前列腺癌患者， 從而達到治療前列從而達到治療前列腺癌患者的目的。腺癌患者的目的。Sipuleucel-T成為成為FDA歷史上歷史上第一個批準第一個批準上上市市的腫瘤疫苗的腫瘤疫苗。前列腺癌是一個比較理想前列腺癌是一個比較理想的生物治療模型的生物治療模型發(fā)病率高發(fā)病率高病情進展病情進展緩慢緩慢腫瘤相關腫瘤相關抗原表達抗原表達化療療效化療療效有限有限“非必需非必需”組織組織前列腺癌細胞免疫治療獲得成功的原因前列腺癌細胞免疫治療獲得成功的原因PSA、PAP等等內分泌治療無效的患者，此時內分泌治療無效的患者，此時腫瘤負荷較小，機體具有一定腫瘤負荷較小，機體

14、具有一定的抗腫瘤能力的抗腫瘤能力Nat Rev Immunol. 2010, 10: 580-593. 腫瘤侵潤性腫瘤侵潤性T T細胞受體免疫基因治療細胞受體免疫基因治療 免疫基因治療在的腫瘤臨床中的應用免疫基因治療在的腫瘤臨床中的應用Science. 2006 Oct 6;314(5796):126-9. Epub 2006 Aug 31 經(jīng)基因修飾的自體經(jīng)基因修飾的自體DCDC細胞激活的細胞激活的T T淋巴淋巴細胞的制備細胞的制備T淋巴細胞淋巴細胞成熟成熟DC細胞細胞DC細胞刺激的自體細胞刺激的自體T淋巴細胞（淋巴細胞（DC-T）腫瘤抗原腫瘤抗原共培養(yǎng)共培養(yǎng)負載腫瘤抗原的負載腫瘤抗原的AA

15、V感染感染負載負載CEA CEA 抗原的抗原的DCDC刺激的刺激的T T淋巴細胞的表型淋巴細胞的表型一些抗原與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關一些抗原與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關1. Viral antigens:Primary hepatic carcinoma: Hepatitis B virus, Hepatitis C virusCervical cancer :Human papillomavirus: E6, E7.2. Self-antigens:Lung cancer: k19, Her-2/neu, etc.Primary hepatic carcinoma: -FP.Breast can

16、cer: Her-2/neu, BA46, etc.Prostate cancer: PSA, PSMA自體自體DC-TDC-T淋巴細胞在惡性腫瘤淋巴細胞在惡性腫瘤治療中的策略治療中的策略腫瘤患者外周血（腫瘤患者外周血（80-100ml）患者（一個月患者（一個月2次）次）特異性殺傷腫瘤細胞特異性殺傷腫瘤細胞抑制腫瘤的復發(fā)和轉移抑制腫瘤的復發(fā)和轉移前列腺癌前列腺癌 患者，男，年齡：68歲 2007年4月，常規(guī)體檢時，發(fā)現(xiàn)PSA顯著升高，100ng/L穿刺活檢提示：前列腺癌，Gleason評分：10分。胸部CT: 未見異常。 行內分泌治療：諾雷德 Zoladex（goserelin）+康士得/Ca

17、sodex （Bicalutamide）。PSA迅速下降，9個月后降至0.2以下，繼續(xù)維持9個月后，選擇了間斷治療（停用這兩種藥物），PSA迅速上升，6個月后升至16，繼續(xù)內分泌治療，PSA迅速降至0.16，以后就逐步上升，倍增時間1416周。自2010年9月開始出現(xiàn)全身骨痛，以左髖部明顯，胸腹部CT：椎體及髂骨廣泛轉移灶， 全身骨掃描：中軸骨廣泛轉移。左髖臼及多處肋骨轉移。 2011.2-13: PSA: 1376 ng/ml ， 2011.3-28開始進行生物治療，回輸兩次DCT，2011.4.25 PSA: 737 ng/ml，2011.5.25回輸四次DCT（負載PSA抗原的DC刺激的

18、自體T淋巴細胞）,一星期后檢測 PSA 561 ng/ml?，F(xiàn)在患者感覺精神改善，無明顯副反應。生活能夠完全自理，能夠自由下床活動，左髖部不適改善，疼痛不明顯，無需止痛藥物。飲食可，精神可。 DCT 細胞細胞免疫治療免疫治療用負載前列腺癌細胞高表達抗原用負載前列腺癌細胞高表達抗原PSA和和PSMA負載自體負載自體DC刺激的自刺激的自體體T淋巴細胞對前列腺癌患者治療后，外周血中淋巴細胞對前列腺癌患者治療后，外周血中PSA水平明顯下降水平明顯下降PSA: 1376 ng/mlPSA 561 ng/ml三、如何制定出適合病人的個體化體細胞免三、如何制定出適合病人的個體化體細胞免疫治療方案。疫治療方案

19、。腫瘤體細胞免疫治療與常規(guī)治療有機結合腫瘤體細胞免疫治療與常規(guī)治療有機結合的治療策略的治療策略惡性腫瘤惡性腫瘤手術治療手術治療放化療敏感（常規(guī)放化療）放化療敏感（常規(guī)放化療）疾病穩(wěn)定期疾病穩(wěn)定期 ?？浦委煂？浦委?不能手術（不能手術（期，期，期）復發(fā)者期）復發(fā)者 可手術可手術 放化療不敏感放化療不敏感 細胞免疫治療細胞免疫治療 化療敏感化療敏感 化療后化療后 細胞免疫治療細胞免疫治療聯(lián)合?？浦委熉?lián)合?？浦委煟ò邢蛑委煟ò邢蛑委煟┘毎庖咧委熉?lián)合內細胞免疫治療聯(lián)合內分泌或靶向治療分泌或靶向治療 細胞免疫治療細胞免疫治療（微創(chuàng)介入）（微創(chuàng)介入）（卵巢癌，乳腺癌，小細胞肺癌等）（卵巢癌，乳腺癌，小

20、細胞肺癌等）放化療間隙聯(lián)合細胞免疫治療（腎癌，前列腺癌，黑色素瘤等）（腎癌，前列腺癌，黑色素瘤等） （乳腺癌，卵巢癌，神經(jīng)母細胞瘤，小細胞（乳腺癌，卵巢癌，神經(jīng)母細胞瘤，小細胞肺癌等）肺癌等）化療不敏感化療不敏感 （原發(fā)性肝癌，腎癌，前列腺癌等）（原發(fā)性肝癌，腎癌，前列腺癌等）疾病穩(wěn)定期疾病穩(wěn)定期 （一）針對老年腫瘤晚期患者，體質弱、免疫功能極（一）針對老年腫瘤晚期患者，體質弱、免疫功能極度低下采取抽少量血多次回輸?shù)闹委煼桨付鹊拖虏扇〕樯倭垦啻位剌數(shù)闹委煼桨赋檠?0ml第1天先抽血30ml進行下個療程治療；同時進行第3次CIK回輸?shù)?次CIK回輸?shù)?次CIK回輸?shù)?天第8天第12天第14天第

21、16天開始下一個療程的治療( (二）細胞免疫治療與化療有機結合二）細胞免疫治療與化療有機結合化療前1天抽血，免疫細胞分離培養(yǎng)第一周第二周7天開始化療第2次開始化療回輸CIK、NK、D-CIK等細胞化療前1天抽血，免疫細胞分離培養(yǎng)（三）體細胞免疫治療聯(lián)合放療的增效方案（三）體細胞免疫治療聯(lián)合放療的增效方案放療前抽靜放療前抽靜脈血脈血50ml，上午上午放療放療放療放療放療放療上午放療后，上午放療后，下午回輸免疫下午回輸免疫細胞細胞第第2天天周二周二第第3天天周三周三第第1天天周一周一第第4天天周四周四第第6天天周六周六第第7天天周日周日第第5天，天，周五下午回周五下午回輸培養(yǎng)的輸培養(yǎng)的CIK、NK

22、、D-CIK等細胞等細胞休息休息休息休息（四）抗腫瘤效應細胞交替使用方案（四）抗腫瘤效應細胞交替使用方案第一周第一周NKNK第二周第二周D-CIK第三周第三周NK第四周第四周D-CIK抽血抽血30ml回輸?shù)谌剌數(shù)谌苤躈K抽血抽血50ml抽血抽血30ml，回輸?shù)谝恢芑剌數(shù)谝恢躈K抽血抽血50ml，回書第二周回書第二周D-CIK第五周第五周第六周第六周回輸?shù)谒闹芑剌數(shù)谒闹蹹-CIKThreshold for tumor regressionImmunestimulation/inflammationSpontaneous release of immune modulatorsby tumor

23、 cellsSpontaneous regression/response totherapyTumor progressionAntigen-specific Immunization，生物靶向藥物 （抗腫瘤抗體和小分子化合物）Non-specific immune stimulationNK cells，CIK cells，D-CIK,IL-2.IFN-采用的治療方案采用的治療方案Threshold for tumor regressionImmunestimulation/inflammationSpontaneous release of immune modulatorsby tum

24、or cellsSpontaneous regression/response totherapyTumor progressionAntigen-specific Immunization，生物靶向藥物 （C225, Iressa）Non-specific immune stimulationNK cells，CIK cellsIL-2. IFN-惡性腫瘤發(fā)生轉移的示意圖惡性腫瘤發(fā)生轉移的示意圖Induction of anti-tumor immunization in human with DC Vaccination體細胞治療在臨床腫瘤治療中的作用體細胞治療在臨床腫瘤治療中的作用Che

25、ster Southam: 在五十年代首次給志愿者注射活的癌細胞在五十年代首次給志愿者注射活的癌細胞結果結果:注射的癌細胞在注射的癌細胞在健康人健康人體內不生長體內不生長.注射的癌細胞在注射的癌細胞在癌癥病人癌癥病人體內可長成大腫瘤。體內可長成大腫瘤。結論：結論：癌癥病人體內失去健康人所具有廣譜抗癌活性。癌癥病人體內失去健康人所具有廣譜抗癌活性。研究項目受到倫理學及法律的極大挑戰(zhàn)。研究項目受到倫理學及法律的極大挑戰(zhàn)。研究結果為抗癌界帶來極大提示，研究結果為抗癌界帶來極大提示，1968年被推選成全美抗癌學會主席。年被推選成全美抗癌學會主席。Science，1957年年 一月一月 125: 158

26、-160 首次證明人體內天然抗癌活性的存在首次證明人體內天然抗癌活性的存在非粒細胞非粒細胞單核細胞單核細胞粒細胞粒細胞血漿血漿紅細胞紅細胞人體白細胞分離人體白細胞分離離心離心人體粒細胞抗腫瘤的研究人體粒細胞抗腫瘤的研究中性粒細胞中性粒細胞嗜堿性粒細胞嗜堿性粒細胞嗜酸性粒細胞嗜酸性粒細胞淋巴細胞淋巴細胞單核細胞單核細胞/巨噬細胞巨噬細胞人體內白細胞分類人體內白細胞分類粒粒細細胞胞非非粒粒細細胞胞接觸病原接觸病原自然免疫自然免疫:自然殺傷細胞自然殺傷細胞巨噬細胞巨噬細胞中性粒細胞中性粒細胞補體補體(需要幾小時或幾天需要幾小時或幾天)獲得免疫獲得免疫：B 淋巴細胞淋巴細胞 (抗體抗體)T 淋巴細胞淋巴細胞(需要幾星期需要幾星期)免疫系統(tǒng)的兩大分支免疫系統(tǒng)的兩大分支12.525.037.550.075.062.587.5100.00正常小鼠正常小鼠五十歲以上五十歲以上的癌癥病人的癌癥病人抗癌小鼠抗癌小鼠五十歲以上的五十歲以上的正常人正常人年青人年青人人體人體T T淋巴細胞的體外殺癌活性淋巴細胞的體外殺癌活性 ( (明標實驗法）明標實驗法）對對人人宮宮頸頸癌癌細細胞胞(Hela)殺殺傷傷率率（%）020406080100天然抗癌活性在不同人群中不同分布（雙盲試驗法）天然抗癌活性在不同人群中不同分布（雙盲試驗法）癌癌細細胞胞殺殺傷傷活活性性（%）健健康康人人小小于于50歲歲