杜仲舒筋丸急性毒性實驗探究

1、杜仲舒筋丸急性毒性實驗探究杜仲舒筋丸是由牛膝、當(dāng)歸、肉桂、馬錢子粉、熾自然銅、桂枝、防風(fēng)、麻黃、陳皮、甘草、杜仲、醋乳香等組成，具有祛風(fēng)除濕，舒筋活血之功效。臨床應(yīng)用于風(fēng)寒濕痹，四肢麻木，筋骨疼痛，行步艱難等。為了對本品的安全性做出客觀、 科學(xué)的評價,進一步指導(dǎo)臨床用藥，故進行杜仲舒筋丸對小鼠 的急性毒性實驗研究o1實驗材料 1.1動物:昆明種小鼠，spf級，雌雄各半，體重(20 ±2) g,由黑龍江腫瘤防治研究所提供，飼養(yǎng)溫度：(24 ±2) 9,相對濕度:45% -60% ,以顆粒飼料喂養(yǎng)，自由飲水。an1.2藥物:杜仲舒筋丸，黑棕色的大蜜丸，味辛，微甜。用前以蒸館水研

2、磨成混懸液進行口服灌胃。2.試驗方法 2.1半數(shù)致死量(ld50)預(yù)試驗:在進行正式試驗之前，首先做預(yù)試驗。以便為正試實驗提供依據(jù)，將12只小鼠隨機分 供灌胃的最大濃度(60% )，小鼠灌胃可承受的最大體積(每 10g體重0.4ml ) 一次灌胃杜腫舒筋丸沉溶液。給藥后常規(guī) 飼養(yǎng)，觀察3d,空白組灌胃等量蒸憎水，方法同給藥組，結(jié) 果小鼠全部存活。處死后尸檢觀察各鼠主要臟器（肝、心、脾、 肺、腎）未發(fā)現(xiàn)任何異常改變。因此，無法測出本品的半數(shù)致 死量（ld50 ），提示該中藥復(fù)方制劑藥是安全的，故進行小鼠 最大耐受量試驗。為兩組，雌雄各半，灌胃前禁食不禁水16ho給藥組：以可22最大耐受量實驗預(yù)試

3、驗時，無法測出ld50，故做最大耐受量試驗,以進一步評價其安全性。將40只小鼠隨機分為空白組20只，杜仲 舒筋丸組20只，每組雌雄各半。試驗前禁食16h ,正常飲 水。藥物組每只小鼠按0.4g/10g的劑量灌胃60%濃度的杜 仲舒筋丸溶液（已達最高濃度，最大給藥濃度），一日內(nèi)連 續(xù)灌服3次，間隔時間為4小時，空白組灌胃等體積的蒸懾 水，給藥后連續(xù)觀察7日，每天稱取其體重并觀察動物反應(yīng)。 給藥后常規(guī)飼養(yǎng)，室溫（20 - 24°c ），濕度50%o試驗第8 天稱取體重后，處死小鼠，解剖觀察其心、肝、脾、肺、腎 等主要器官的組織變化。2.3觀察項目（1）給藥前和給藥后的第1-8天，測量小鼠

4、體 重。（2）觀察給藥后小鼠的外在表現(xiàn)，反射活動,飲水量，大、小 便,存活情況等。2.4實驗結(jié)果及統(tǒng)計學(xué)處理:實驗計量資料以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差（x ±s）表示，用統(tǒng)計軟件spss1410處理，結(jié)果見表1、2o2.5毒性反應(yīng)情況 小鼠每天最大給藥量相當(dāng)于72g/kg 為成人臨床推存用量的280倍，小鼠灌胃給藥后，即刻出現(xiàn)閉眼、臥伏等現(xiàn)象，自主活動明顯減少，食欲有所下降，糞 便呈黑褐色，以上體征均在給藥后2h4h內(nèi)基本恢復(fù)正常。 此外，藥物組小鼠無叫聲異常、震顫、驚厥、運動失調(diào)、流 口、流淚、流鼻涕、呼吸困難、心跳過強或過弱、腹瀉、便 秘、腹脹氣等現(xiàn)象發(fā)生；小鼠皮毛光澤；給藥8d內(nèi)小鼠未 出現(xiàn)

5、死亡情況。2.6給藥前后體重變化情況空白給與藥物給小鼠體重增 長比較無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05 ）,動物均增重。提示杜仲舒 筋丸對小鼠的急性毒性反應(yīng)不明顯。2.7內(nèi)臟結(jié)構(gòu)觀察試驗第8天稱重后逐只處死并解剖,肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、卵巢、子宮、精囊、前列腺、睪丸、胃、腸及胸腔、腹腔，各器官均無異 常。3討論 實驗表明：（1）從表1可以得出:給藥前、給藥后的8天內(nèi)兩組小鼠體同時期內(nèi)比較無顯著性差異（p> 0.05），說 明該中藥復(fù)方制劑對小鼠消化吸收功能影響不大；（2）從表2 可以看出:空白組觀察指標(biāo)均為正常,而給藥組小鼠岀現(xiàn)了 24 h內(nèi)自發(fā)活動減少、反應(yīng)遲鈍及48 h內(nèi)有少數(shù)幾只大便不成形的現(xiàn)象,說明滿負荷灌胃給藥對小鼠自主神經(jīng)系統(tǒng)有一定 的刺激作用，且對消化吸收功能有輕微的不良影響；（3） 般 認為，按體重計算，小鼠1日內(nèi)最大給藥量相當(dāng)于成人臨床日 用量的100倍以上是較為安全的口。通過灌胃給藥無法測 出杜仲舒筋丸的ld50，其1日最大給藥量相當(dāng)于72 g/kg