積雪草苷藥理作用及其機(jī)制探究進(jìn)展

1、積雪草昔藥理作用及其機(jī)制探究進(jìn)展摘要：積雪草昔是傳統(tǒng)中藥積雪草中主要的活性成分，現(xiàn) 代藥理學(xué)研究證實(shí)其具有抗腫瘤、抗靜脈機(jī)能不全、抗?jié)儭?促創(chuàng)傷愈合、抗抑郁、以及恢復(fù)神經(jīng)功能等多種藥理活性， 同時(shí)還顯現(xiàn)出在心血管、免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗病毒等方面的 藥理作用，臨床應(yīng)用表明了確實(shí)的療效。對(duì)積雪草昔豐富的 藥理作用及其作用機(jī)制進(jìn)行綜述。關(guān)鍵詞：積雪草昔；藥理作用；作用機(jī)制；研究進(jìn)展中圖分類(lèi)號(hào)：r285文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：a 文章編號(hào)：1673-7717(2008)01-0215 -04積雪草(centella asiatica)為傘形科積雪草屬植物， 作為傳統(tǒng)藥用植物在我國(guó)有著悠久的歷史以及廣泛的應(yīng)用， 成

2、分多為三菇類(lèi)化合物，其中積雪草昔(asiatieoside, at) 以其藥理活性豐富，臨床作用廣泛，成為積雪草中的主要活 性成分，應(yīng)用前景大，極具有開(kāi)發(fā)價(jià)值。近年來(lái)，大量的研 究證實(shí)at具有抗腫瘤、抗靜脈機(jī)能不全、抗?jié)?、促?chuàng)傷 愈合、抗抑郁以及恢復(fù)神經(jīng)功能等多種藥理活性，同時(shí)還顯 現(xiàn)出在心血管、免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗病毒等方面的藥理作用。 本文就近年來(lái)對(duì)at進(jìn)行的豐富藥理作用及其作用機(jī)制研究 進(jìn)行了綜述。1抗腫瘤作用腫瘤是現(xiàn)代人類(lèi)生命和生活質(zhì)量的一大殺手，研究證明 at對(duì)多種癌細(xì)胞都有明顯的藥理作用，且機(jī)制多樣。1.1抑制腫瘤細(xì)胞異常增殖并且協(xié)同增強(qiáng)長(zhǎng)春新堿等 抗腫瘤藥物的活性mtt法測(cè)定at

3、對(duì)幾種癌細(xì)胞株增殖抑制 作用的研究結(jié)果顯示，在亞細(xì)胞毒性濃度下，at使b細(xì)胞淋 巴瘤磷酸化水平高于正常細(xì)胞，因而對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖呈抑 制性效果，專(zhuān)一性很強(qiáng)，并且在這一抑制過(guò)程中，出現(xiàn)一種 新的活性細(xì)胞蛋白酶，說(shuō)明其中很可能存在著一種全新的抑 制機(jī)制。at和長(zhǎng)春新堿聯(lián)合用藥表現(xiàn)出了強(qiáng)烈的協(xié)同效應(yīng)， 聯(lián)合用藥所產(chǎn)生的抗腫瘤效果比單純使用長(zhǎng)春新堿或at的 作用都強(qiáng)。1.2誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡發(fā)揮抗腫瘤作用研究發(fā)現(xiàn)，at 能夠降低人黑色素瘤細(xì)胞sk-mel-2成活力，能在特定時(shí) 期和特定計(jì)量下誘導(dǎo)其凋亡。同時(shí)，at能明顯增加細(xì)胞內(nèi)活 性氧濃度，提高bax在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)，以劑量依賴性的方式 誘導(dǎo)激活細(xì)胞凋亡蛋

4、白酶活性。值得注意的是，at并不提高 存在于sk-mel-2細(xì)胞突變體中的p53核內(nèi)蛋白的水平。 這些結(jié)果表明，at誘導(dǎo)細(xì)胞死亡是通過(guò)ros增殖介導(dǎo)的，改 變bax/bcl-2的比例和半胱天冬酶的活性，并不依賴p-53, 在人類(lèi)皮膚癌臨床治療中顯示了良好的前景。1.3阻斷腫瘤細(xì)胞dna合成以發(fā)揮抗腫瘤作用at對(duì) 氧化偶氮甲烷誘導(dǎo)產(chǎn)生的變體小囊病灶(acf)和f344雄性小 鼠腸腫瘤的抑制作用機(jī)制研究表明，大腸癌早期acf的數(shù)量 顯著降低，而甲基化的dna加和物濃度沒(méi)有降低，而在之后 一階段，伴隨著acf的降低，5澳代一2脫氧尿昔標(biāo)記物 也降低并且增加了結(jié)腸黏膜細(xì)胞的凋亡。在一次性給予 at(1

5、0mg/kg體重)的情況下。小腸腺癌的新生細(xì)胞的發(fā)病率 和新生腫瘤的尺寸比單獨(dú)給予氧化偶氮甲烷要小，且具有顯 著性的差異(p0.05),而100mg/kg體重的濃度下，小腸內(nèi) 的多種新生細(xì)胞均顯示顯著性降低(p<0. 05) o這種結(jié)果表 明，at通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞dna的合成，從而發(fā)揮抑制氧化偶 氮甲烷誘導(dǎo)的acf生成，從而引發(fā)腫瘤細(xì)胞增殖速度的減緩, 達(dá)到抑制癌變趨勢(shì)，對(duì)結(jié)腸腫瘤的發(fā)生有防治作用。at豐富的抗腫瘤藥理作用及其機(jī)制隨著研究的深入，越 來(lái)越顯示出一條新穎的途徑，相信隨著研究的深入，會(huì)有更 加可喜的前景。2抗靜脈機(jī)能不全慢性靜脈功能不全(cvi)是靜脈血流量不足導(dǎo)致的常見(jiàn) 疾

6、病，通常發(fā)生在下肢，可引起多種不適，如下肢疼痛、瘙 癢、疲勞且患者還經(jīng)常伴有浮腫和潰瘍。at對(duì)慢性靜脈功能 不全有明顯的治療效果。口服10-15天后，浮腫的現(xiàn)象就 有了明顯改善，下肢腫脹感、沉重感、痙攣、疼痛、下肢腫 脹和皮膚色素沉著及潰瘍形成等其他一些臨床癥狀也獲得 了好轉(zhuǎn)，且副作用很輕微，安全有效。口服給與at還能改 善微循環(huán)，疏通毛細(xì)血管，降低血管緊張度，強(qiáng)化血管周?chē)?結(jié)締組織，延長(zhǎng)病發(fā)時(shí)間，緩解疼痛以及減少靜脈曲張和痔 瘡的合并癥。經(jīng)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，通過(guò)改善微循環(huán)系統(tǒng)，高 血壓和靜脈微血管病癥狀能夠得到明顯的改善，并且沒(méi)有發(fā) 現(xiàn)副作用。為了進(jìn)一步研究at在改善糖尿病性微血管病的 微循環(huán)

7、缺陷方面的機(jī)制，incandela等設(shè)計(jì)了一組對(duì)照實(shí)驗(yàn)。 將患者分為兼患有糖尿病性微血管病并伴有神經(jīng)病變和水 腫的；只患有微血管病而沒(méi)有神經(jīng)病變的；以及健康受試者， 并隨機(jī)分成治療組和對(duì)照組，以多普勒激光和毛細(xì)管濾過(guò)作 用為指標(biāo)。治療組給予at,對(duì)照組服用相似的片劑。治療過(guò) 程中耐藥性良好，無(wú)副作用。在患有神經(jīng)病變的兩組，觀測(cè) 到rf和ras值顯著性降低(p<0. 05) o ras的降低和浮腫的消除有不同微循環(huán)流量的相關(guān)性(38%), var(38%)與小鼠踝關(guān)節(jié)腫脹降低(28%)有相關(guān)性(p<0. 05)。在非神經(jīng)病變組12個(gè)月中微循環(huán)流量降低22%,而var升高22. 7%,

8、 ras降低 9.5%,非治療組病情加重，因而得出結(jié)論：毛細(xì)管透過(guò)作 用降低、浮腫等癥狀得以改善，這對(duì)神經(jīng)病變的恢復(fù)有積極 作用，at對(duì)糖尿病性微血管病和神經(jīng)病變?cè)缙陔A段的臨床治 療有很重要的意義o ceorane等用相同的實(shí)驗(yàn)方法研究得出, at改善微循環(huán)的作用有利于緩解慢性靜脈高血壓，且治療作 用明顯。英國(guó)歐文實(shí)驗(yàn)室也做過(guò)類(lèi)似的實(shí)驗(yàn)，不同的是其目 的是為了改善在長(zhǎng)途飛行過(guò)程中出現(xiàn)的微循環(huán)障礙和浮腫, 但都同樣證明了 at對(duì)微血管病的卻有良好的療效。3抗?jié)冏饔貌煌瑒┝康腶t(5 10mg/kg體重)灌胃給與醋酸誘導(dǎo)的胃潰瘍小鼠藥理模型的追蹤性研究表明，at在治療胃潰瘍過(guò) 程中對(duì)誘生型一氧化

9、氮合酶(inos)的表達(dá)和活性起抑制性 作用，在第3、7天發(fā)現(xiàn)潰瘍面不斷減小，并伴有在潰瘍組 織髓過(guò)氧化物酶活性降低，同時(shí)還能促進(jìn)上皮細(xì)胞增殖和血 管的生成?；镜某衫w維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的表達(dá)，是一個(gè)重要 的血管生成的因素，也在at的治療下得到了正調(diào)節(jié)。這些 結(jié)果進(jìn)一步證明了 at的抗?jié)冏饔?。離體胃腔模型的胃跨膜電位差(pd)在應(yīng)用50%乙醇刺激后降低，而at能促進(jìn)胃 黏膜的恢復(fù)。在給予酒精之前，灌胃給藥at就能夠明顯抑 制胃黏膜損傷的發(fā)生(減少58%82%)并且劑量依賴性地 降低胃黏膜髓過(guò)氧化物酶(mpo)活性。這些結(jié)果表明，at能 通過(guò)加強(qiáng)胃黏膜屏障作用以及降低自由基損傷效應(yīng)來(lái)防治 胃潰瘍。

10、目前的研究結(jié)論顯示，at對(duì)由于酒精、阿斯匹林、 冷刺激、壓力和幽門(mén)結(jié)扎引起的胃潰瘍都有療效?？诜o藥 每天兩次，每次200600mg/kg體重，共5天，效果明顯 優(yōu)于硫糖鋁(相同劑量)，其對(duì)胃酸蛋白分泌作用較小，但大 劑量能顯著增加胃液黏蛋白分泌和黏膜細(xì)胞糖蛋白，減少胃 壁細(xì)胞脫落，強(qiáng)化黏膜屏障。中國(guó)和印度廣泛在臨床上應(yīng)用at于胃潰瘍治療，具有很廣闊的現(xiàn)實(shí)意義。4促創(chuàng)傷愈合作用以at逐步增加劑量法(teca)治療創(chuàng)傷在歐洲已經(jīng)有幾 百年的歷史了。試驗(yàn)顯示，用不銹鋼插入小鼠皮下造成傷口， 連續(xù)注射at,在第7、14、21、28天收集其創(chuàng)傷處細(xì)胞進(jìn)行 生物化學(xué)檢查或者是組織學(xué)檢查，結(jié)果表明，細(xì)胞干

11、重、dna 表達(dá)、總蛋白質(zhì)，膠原質(zhì)和糖醛酸含量都有增加。at能夠以 低劑量刺激膠原化合物生長(zhǎng)，對(duì)葡萄糖胺聚糖生長(zhǎng)也有促進(jìn) 作用，通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞周期加快，促進(jìn)人類(lèi)真皮成纖維細(xì)胞中 膠原組織的生成。at對(duì)創(chuàng)傷的療效引發(fā)了對(duì)其在分子和基因 表達(dá)水平上的作用機(jī)制的研究：cdna微點(diǎn)陣技術(shù)研究表明， 在離體培養(yǎng)下給予30卩g/ml,人類(lèi)真皮成纖維細(xì)胞的基因表 達(dá)外形的改變具有顯著性，基因外形、mrna、蛋白質(zhì)產(chǎn)生都 有明顯的相關(guān)性，而且細(xì)胞抗氧化水平的提高，也能促進(jìn)膠 原組織和血管的生成。目前的研究顯示at能夠在治療的最 初時(shí)期誘導(dǎo)增加抗氧化物的含量，這是其在治療過(guò)程中起作 用的重要原因。5抗抑郁作用研究

12、表明at作為積雪草中最主要的抗焦慮活性藥效物質(zhì)，還有值得深入研究的方面。為了研究其抗抑郁作用機(jī)制, 劑量的at,在固定時(shí)間通過(guò)強(qiáng)制性游泳耐力實(shí)驗(yàn)，用熒光光 譜測(cè)量血清中的腎上腺酮水平，用電化學(xué)監(jiān)測(cè)器hplc進(jìn)行 測(cè)定單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的含量及其在大腦皮層的一代謝產(chǎn)物 等。結(jié)果顯示，積雪草昔顯著地降低了血清中腎上腺酮的水 平，而增加了 5ht、ne以及da的含量。在小鼠的大腦中 均監(jiān)測(cè)到了它們的代謝產(chǎn)物5-hiaa以及mhpg的增量表達(dá)。 從中，可以得出一定的結(jié)論：at的抗抑郁作用是基于hpa的 功能以及增加了單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的含量，5-ht失調(diào)性的降 低，進(jìn)一步證實(shí)了 at的抗抑郁活性。將小鼠隨機(jī)的

13、分成對(duì)照組、模型組和治療組,灌胃給與不同6恢復(fù)神經(jīng)功能在印度草藥醫(yī)學(xué)中。at早已經(jīng)被用作神經(jīng)滋補(bǔ)品服用。 口服可以加速神經(jīng)再生，有體外增加軸突伸長(zhǎng)的作用。軸突 的再生對(duì)于受損的神經(jīng)功能的恢復(fù)有至關(guān)重要的作用。據(jù)研 究顯示，在神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)因子存在下，at在100mg/kg體重 時(shí)，就能引出人sh-sysy細(xì)胞軸突顯著增長(zhǎng)。在雄性wistar 大鼠的飲水中加入at（每天300330mg/kg）,與對(duì)照組相比 證明軸突生長(zhǎng)加速而且功能得到迅速恢復(fù)。這一顯著性的作 用必將能為臨床提供很有意義的指導(dǎo)。7其它藥理功能7.1心血管方面的作用增強(qiáng)心肌氧化應(yīng)激作用： 阿霉素進(jìn)行多重治療時(shí)容易導(dǎo)致心肌病和充血性心

14、力衰竭， 通過(guò)口服灌胃給與at能顯著增加氧化應(yīng)激和缺乏抗氧化作用，能起到顯著地改善作用。研究表明，在阿霉素2. 5mg/kg體重給藥而造成的小鼠心肌缺血性損傷藥理模型中。at(200 mg/kg體重)就可對(duì)心肌起明顯的保護(hù)作用，血漿中 的標(biāo)識(shí)酶(乳酸脫氫酶、肌酸磷酸激酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙 轉(zhuǎn)氨酶)在抗氧化物酶的上較阿霉素引發(fā)的損傷模型具有顯 著性差異(p<0. 05),并能將血漿指標(biāo)恢復(fù)到正常水平。治 療心肌損傷：通過(guò)測(cè)量在心臟和血漿中的梗塞面積和脂類(lèi)多 氧化物水平來(lái)研究at的活性研究表明，at在缺血一再灌注 引發(fā)的心肌梗塞模型中具有心腦血管的保護(hù)性作用。在 1001000mg/kg體重

15、的劑量范圍內(nèi)，at呈現(xiàn)劑量依賴性地 降低左心室由于缺血引發(fā)的壞死率，同時(shí)還能降低其中的過(guò) 氧化脂蛋白的水平，表明其在缺血一再灌注導(dǎo)致的心肌損傷 臨床救治中將發(fā)揮極大的作用。7.2免疫調(diào)節(jié)功能 人外周血單核細(xì)胞(pbmcs)培養(yǎng) 模型中，at能夠明顯的增加il-2和tnf-alpha的生成， 用at(100mg/kg體重)處理的balb/c小鼠對(duì)初級(jí)和次級(jí)bsa 都表現(xiàn)出較高的應(yīng)答反應(yīng)。目前的研究顯示at的免疫調(diào)節(jié) 活性與非特異細(xì)胞和體液免疫反應(yīng)相關(guān)。在5種劑量下，碳 清除法、抗體滴定法和環(huán)磷酰胺免疫抑制法實(shí)驗(yàn)結(jié)果均顯 示°at可以顯著增加吞噬細(xì)胞指數(shù)和白細(xì)胞數(shù)目，呈現(xiàn)劑量 依賴性。7. 3抗炎作用 活性巨嗜細(xì)胞產(chǎn)生的一氧化氮(n0)在 炎癥過(guò)程和抗炎過(guò)程中都起著重要作用。研究表明at主要 通過(guò)抑制腫瘤壞死因子，從而顯著性降低巨噬細(xì)胞所產(chǎn)生的 一氧化氮(