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文檔簡介
1、選修一生物技術(shù)理論 知識(shí)點(diǎn)總結(jié)專題一1、發(fā)酵:利用微生物或其他生物的細(xì)胞在有氧或無氧條件下繁殖或積存其代謝產(chǎn)物的過程。類型:1依據(jù)是否必必需要氧氣分為:必必需氧發(fā)酵和厭氧發(fā)酵。2依據(jù)產(chǎn)生的產(chǎn)物可分為:酒精發(fā)酵、乳酸發(fā)酵、醋酸發(fā)酵等酵母菌是兼性厭氧微生物。在有氧條件下,酵母菌進(jìn)展有氧呼吸,大量繁殖 c6h12o66h2o6o2酶6co212h2o能量 在無氧條件下,酵母菌能進(jìn)展酒精發(fā)酵 c6h12o6酶2c2h5oh2co2酵母菌
2、有氧呼吸時(shí),產(chǎn)生能量多,可大量繁殖;無氧呼吸時(shí),產(chǎn)生能量少,僅能滿足自身代謝,根本不繁殖;所以利用酵母菌進(jìn)展工業(yè)消費(fèi)時(shí)先進(jìn)展通氣再密封。2、20左右最適宜酵母菌繁殖酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18-253、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮外表的野生型酵母菌.在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的進(jìn)步,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒浮現(xiàn)深紅色.在缺氧、 呈酸性的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。4、醋酸菌是一種好氧細(xì)菌。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時(shí),醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿帷?c2h
3、5oho2酶ch3coohh2o5、醋酸菌最適生長溫度為3035。6、酒精檢驗(yàn):果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生,可以用酸性重鉻酸鉀來檢驗(yàn)。在酸性條件下,重鉻酸鉀與酒精凡響浮現(xiàn)灰綠色。7、裝置各部位的作用充氣口:在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)展充氣。排氣口:排出酒精發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生的co2。出料口:是用來取樣的。與瓶身相連的長而彎曲的膠管:加水后防止空氣中微生物的污染。該裝置的使用方法:使用該裝置制酒時(shí),應(yīng)該關(guān)閉充氣口;留1/3的空間的目的是防止發(fā)酵時(shí)汁液溢出。制醋時(shí),應(yīng)將充氣口連接氣泵,輸入氧氣無菌空氣8、過程:9、多種微生物參加了豆腐的發(fā)酵,如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真
4、菌。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是異養(yǎng)必必需氧型。生殖方式是孢子生殖。營腐生生活。10、原理:毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。11、實(shí)驗(yàn)流程:讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制12、注意:毛霉的生長:條件:將豆腐塊平放在籠屜內(nèi),將籠屜中的控制在1518,并堅(jiān)持一定的濕度。來源:1.來自空氣中的毛霉孢子,2. 直接接種合格毛霉菌種時(shí)間:5天豆腐生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲加鹽腌制:將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地?cái)[放在瓶中,同時(shí)逐層加鹽,隨著層數(shù)的加高而增加鹽量,接近瓶口外表的鹽要鋪
5、厚一些。加鹽腌制的時(shí)間約為8天左右。用鹽腌制時(shí),注意控制鹽的用量:鹽的濃度過低,缺乏以抑制微生物的生長,可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì);鹽的濃度過高會(huì)影響腐乳的口味食鹽的作用:1.抑制微生物的生長,防止腐敗變質(zhì)2.析出水分,是豆腐變硬,在后期制作過程中不易酥爛3.調(diào)味作用,給腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。配制鹵湯:鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。酒的作用:1.防止雜菌污染以防腐2.與有機(jī)酸結(jié)合形成酯,賦予腐乳風(fēng)味3.酒精含量的上下與腐乳后期發(fā)酵時(shí)間的長短有很大關(guān)系,酒精含量越高,對蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長
6、;酒精含量過低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質(zhì)的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊。香辛料的作用防止雜菌污染:用來腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時(shí),操作要迅速當(dāng)心。整齊地?cái)[放好豆腐、參加鹵湯后,要用膠條將瓶口密封。封瓶時(shí),最好將瓶口通過酒精燈的火焰,防止瓶口被污染。13、制作泡菜所用微生物是乳酸菌 ,乳酸菌是厭氧細(xì)菌。在無氧條件下,將葡萄糖分解為乳酸 。常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于消費(fèi)酸奶。 c6h12o6酶2c3h6o3+能量14、亞硝酸鹽檢測:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化凡響后,與n1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形
7、成玫瑰紅色染料。 專題二1、培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中參加凝固劑瓊脂后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基外表生長,可以形成肉眼可見的菌落。依據(jù)菌落的特征可以推斷是哪一種菌。2、培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中參加凝固劑瓊脂是從紅藻中提取的一種多糖,在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基外表生長,可以形成肉眼可見的菌落。依據(jù)菌落的特征可以推斷是哪一種菌。液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活消費(fèi),固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物的別離和鑒定,半固體培養(yǎng)基那么常用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)及菌種保藏等。按
8、照成分培養(yǎng)基可分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基是用成分的化學(xué)物質(zhì)配制而成,其中成分的種類比例明確,常用于微生物的別離鑒定。天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而成,常用于實(shí)際工業(yè)消費(fèi)。按照培養(yǎng)基的用途,可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中參加某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不必必需要的微生物生長,促進(jìn)所必必需要的微生物的生長抗生素除去細(xì)菌,儲(chǔ)存真菌。鑒別培養(yǎng)基是依據(jù)微生物的特點(diǎn),在培養(yǎng)基中參加某種指示劑或化學(xué)藥品伊紅-美藍(lán)鑒定大腸桿菌,剛果紅鑒定分解纖維素的細(xì)菌配制而成的,用以鑒別不同類別的微生物。3、培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括水 、碳源 、 氮源和無機(jī)鹽 。碳源:能為微
9、生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如co2、nahco3等無機(jī)碳源;糖類、石油、花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。氮源:能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如n2、nh3、no3-、nh4+無機(jī)氮源蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨有機(jī)氮源等。只有固氮微生物才干利用n2。4、培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對ph、特別營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)必必需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時(shí)須將培養(yǎng)基的ph調(diào)至酸性,培養(yǎng)細(xì)菌是必必需要將ph調(diào)至中性或微堿性,培養(yǎng)厭氧型微生物是那么必必需要提供無氧的條件5、無菌技術(shù):獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,要注意以下幾個(gè)
10、方面選修一教材p151對實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的穿著和手,進(jìn)展清潔和消毒。2將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)展滅菌。3為防止四周環(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰四周進(jìn)展。4實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)防止已經(jīng)滅菌處理的材料用具與四周的物品相接觸。6、消毒是指使用較為溫柔的物理或化學(xué)方法殺死物體外表或內(nèi)部的部分微生物不包括芽孢和孢子。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法還有化學(xué)藥劑消毒如酒精、氯氣、石炭酸等、紫外線消毒。7、滅菌那么是指使用激烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。1接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;2璃器皿
11、、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;3培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。4外表滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈。比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫柔部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌激烈全部微生物能8. 制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1方法步驟:計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。2倒平板操作的步驟:將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰。用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿翻開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基約1020ml倒入培養(yǎng)皿,左手馬
12、上蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。等待平板冷卻凝固,大約必必需510min。然后,將平板倒過來放置,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作的討論培養(yǎng)基滅菌后,必必需要冷卻到50左右時(shí),才干用來倒平板。你用什么方法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)展倒平板了。為什么必必需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。平板冷凝后,為什么要將平板倒置?答:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基外表的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基外表的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。在倒平板的過程
13、中,假設(shè)不當(dāng)心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。1微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。2平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基外表連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的外表。在數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以別離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落。3稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)展一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的外表,進(jìn)展培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。4用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是
14、:使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基外表形成單個(gè)的菌落,以便于純化菌種。5平板劃線法操作步驟:將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán),并翻開棉塞。將試管口通過火焰。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將試管通過火焰,并塞上棉塞。左手將皿蓋翻開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,蓋上皿蓋。注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)皿。灼燒接種環(huán),待其冷卻后,從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。平板劃線操作的討論為什么在操作的第一步以及每次劃線之
15、前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作完畢時(shí),仍然必必需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線完畢后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線完畢后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)展劃線?答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?答:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比
16、線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。6涂布平板操作的步驟:將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取少量菌液,滴加到培養(yǎng)基外表。將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃盡后,冷卻810s。用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基外表。涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰四周進(jìn)展。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進(jìn)展無菌操作?提示:應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)確?!盁o菌。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的間隔 要適宜、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰四周;等等。1關(guān)于頻繁使用的菌種,可以采納臨時(shí)
17、保藏的方法。臨時(shí)保藏方法將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,在適宜的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后,將試管放入4的冰箱中保藏。以后每36個(gè)月,都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新穎的培養(yǎng)基上。缺點(diǎn):這種方法儲(chǔ)存的時(shí)間不長,菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。2關(guān)于必必需要長期儲(chǔ)存的菌種,可以采納甘油管藏的方法。在3ml的甘油瓶中,裝入1ml甘油后滅菌。將1ml培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在20的冷凍箱中儲(chǔ)存。11、尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,尿素并不能直接被農(nóng)作物利用。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后,才干被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素,是因?yàn)樗麄兡芎铣呻迕?。選擇性培養(yǎng)基在微生物
18、學(xué)中,將同意特定種類的微生物生長,同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱作選擇培養(yǎng)基。配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)依據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)參加某種物質(zhì)以到達(dá)選擇的目的。例如,培養(yǎng)基中不參加有機(jī)物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物;培養(yǎng)基中不參加氮元素,可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物;參加高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目1測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。2稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基外表生長的一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活細(xì)菌。為了確保結(jié)果準(zhǔn)確,一般設(shè)置3
19、5個(gè)平板,選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)展計(jì)數(shù),并取平均值。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低,因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。3樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實(shí)際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)展培養(yǎng),以確保獲得菌落數(shù)在30300之間、適于計(jì)數(shù)的平板。測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量,一般選用104 105 106測定放線菌的數(shù)量,一般選用103 104 105測定真菌的數(shù)量,一般選用102 103 1044如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)?
20、統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值每克樣品中的菌落數(shù)=c/v*m 其中,c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù),v代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積ml,m代表稀釋倍數(shù)設(shè)置對照設(shè)置對照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,進(jìn)步實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。對照實(shí)驗(yàn)是指除了被測試的條件以外,其他條件都一樣的實(shí)驗(yàn),其作用是比照試驗(yàn)組,排除任何其他可能原因的干擾,證實(shí)確實(shí)是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。隨機(jī)選取假設(shè)干滅菌后未接種的平板先培養(yǎng)一段時(shí)間,檢驗(yàn)平板滅菌是否合格。12、纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶,前
21、兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長提供營養(yǎng)。纖維素分解菌的挑選1挑選方法:剛果紅染色法??梢酝ㄟ^顏色凡響直接對微生物進(jìn)展挑選。2剛果紅染色法挑選纖維素分解菌的原理剛果紅是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種凡響。當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中參加剛果紅時(shí),剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣,我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來挑選纖維素分解菌。別離分解纖維素的微生
22、物的實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣選擇培養(yǎng)此步是否必必需要,應(yīng)依據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定梯度稀釋將樣品涂布到鑒別剛果紅纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落剛果紅染色法種類一種是先培養(yǎng)微生物,再參加剛果紅進(jìn)展顏色凡響,另一種是在倒平板時(shí)就參加剛果紅疑難解答1為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?由于生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對進(jìn)步,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于一般環(huán)境。2將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10
23、cm左右腐殖土壤中。3兩種剛果紅染色法的比較方法一是傳統(tǒng)的方法,缺點(diǎn)是操作繁瑣,參加剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜;其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色凡響根本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便,不存在菌落混雜問題,缺點(diǎn)是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以使可以產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性凡響。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊,因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)是:有些微生物具有降解色素的才干,它們在長時(shí)間培養(yǎng)過程中會(huì)降解剛果紅形成顯然的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。4為什么選擇培養(yǎng)可以“濃縮所必必需的微生物?在選
24、擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些可以適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮的作用。 專題三1、植物組織培養(yǎng)1原理:植物細(xì)胞的全能性。2由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程,稱為植物細(xì)胞的脫分化,或者叫做去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織持續(xù)進(jìn)展培養(yǎng),又可以重新分化成根或芽等器官,這個(gè)過程叫做再分化。再分化形成的試管苗,移栽到地里,可以發(fā)育成完好的植物體。2、植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基是ms培養(yǎng)基,其中含有的大量元素,微量元素,有機(jī)物等。在配制好的ms培養(yǎng)基中,經(jīng)常必必需要添加植物激素。接種前培養(yǎng)基必必需要用高壓蒸汽滅菌,外植體
25、必必需要消毒常用酒精和氯化汞消毒時(shí)既要合計(jì)藥劑的消毒效果,又要合計(jì)植物的耐受性。3、植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長素存在的狀況下,細(xì)胞分裂素的作用浮現(xiàn)強(qiáng)化趨勢。4、進(jìn)展菊花的組織培養(yǎng),每日用日光燈照耀12h。5、被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小孢子四分體時(shí)期、單核期花藥離體培養(yǎng)選擇該時(shí)期和雙核期等階段。6、通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株即單倍體植株一般有兩種途徑,這兩種途徑之間并沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比見第3條表格。7、不同植物的誘導(dǎo)成功率很不一樣。親本的生理狀況:花期早期時(shí)的花藥比后期的更容易產(chǎn)生花粉植株,選擇月季的初花期。
26、 適宜的花粉發(fā)育時(shí)期:一般來說,在單核期靠邊期,花藥培養(yǎng)成功率最高。 花蕾:選擇完全未開放的花蕾8、選擇花藥時(shí),一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于單核期。確定花粉發(fā)育時(shí)期的最常用的方法是醋酸洋紅法,花粉細(xì)胞核染成紅色。某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色,必必需采納焙花青-鉻礬法,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色 9、培養(yǎng)過程不必必需要光照,幼小植株形成后才必必需要光照。10.1被子植物的花粉發(fā)育被子植物的雄蕊通常包涵花絲、花藥兩部分?;ㄋ帪槟覡顦?gòu)
27、造,內(nèi)部含有許多花粉。花粉是由花粉母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的,因此,花粉是單倍體的生殖細(xì)胞。被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小孢子四分體時(shí)期、單核期和雙核期等階段。在小孢子四分體時(shí)期,4個(gè)單倍體細(xì)胞連在一起,進(jìn)入單核期時(shí),四分體的4個(gè)單倍體細(xì)胞彼此別離,形成4個(gè)具有單細(xì)胞核的花粉粒。這時(shí)的細(xì)胞含濃重的原生質(zhì),核位于細(xì)胞的中央單核居中期。隨著細(xì)胞不斷長大,細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)單核靠邊期,并分裂成1個(gè)生殖細(xì)胞核和1個(gè)花粉管細(xì)胞核,進(jìn)而形成兩個(gè)細(xì)胞,一個(gè)是生殖細(xì)胞,一個(gè)是營養(yǎng)細(xì)胞。生殖細(xì)胞將在分裂一次,形成兩個(gè)精子。注意:成熟的花粉粒有兩類,一類是二核花粉粒,其花粉粒中只含花粉管細(xì)胞核和生殖細(xì)胞核,二核
28、花粉粒的精子是在花粉管中形成的;另一類是三核花粉粒,花粉在成熟前,生殖細(xì)胞就進(jìn)展一次有絲分裂,形成兩個(gè)精子,此花粉粒中含有兩個(gè)精子核和一個(gè)花粉管核營養(yǎng)核花粉發(fā)育過程中的四分體和動(dòng)物細(xì)胞減數(shù)分裂的四分體不同?;ǚ郯l(fā)育過程中的四分體是花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂形成的4個(gè)連在一起的單倍體細(xì)胞;而動(dòng)物細(xì)胞減數(shù)分裂過程中的四分體是聯(lián)會(huì)配對后的一對同源染色體,由于含有四條染色單體而稱為四分體。同一生殖細(xì)胞形成的兩個(gè)精子,其基因組成完全一樣。2產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株即單倍體植株一般有兩種途徑,一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植物,另一種是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織,再將其誘導(dǎo)分化成植株
29、。這兩種途徑之間并沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。注意:無論哪種產(chǎn)生方式,都要先誘導(dǎo)生芽,再誘導(dǎo)生根胚狀體:植物體細(xì)胞組織培養(yǎng)過程中,誘導(dǎo)產(chǎn)生的形態(tài)與受精卵發(fā)育成的胚非常類似的構(gòu)造,其發(fā)育也與受精卵發(fā)育成的胚類似,有胚芽、胚根、胚軸等完好構(gòu)造,就像一粒種子,又稱為細(xì)胞胚。3影響花藥培養(yǎng)的因素誘導(dǎo)花粉能否成功及誘導(dǎo)成功率的上下,受多種因素影響,其中材料的選擇與培養(yǎng)基的組成是主要的影響因素親本的生理狀況:花粉早期是的花藥比后期的更容易產(chǎn)生花粉植株,選擇月季的初花期。適宜的花粉發(fā)育時(shí)期:一般來說,在單核期,細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期,花藥培養(yǎng)成功率最高花蕾:選擇完全未開
30、放的花蕾親本植株的生長條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種密度等對誘導(dǎo)成功率都有一定影響材料的選?。哼x擇花藥時(shí),一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時(shí)期的最常用的方法是醋酸洋紅法。但是,某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色,必必需采納焙花青-鉻礬法,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色接種和培養(yǎng):滅菌后的花蕾,要在無菌條件下除去萼片和花瓣,并立馬上花藥接種到培養(yǎng)基上。在剝離花藥時(shí),要盡量不損傷花藥否那么接種后容易從受傷部位長生愈傷組織,同時(shí)還要徹底去除花絲,因?yàn)榕c花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成,通常每瓶接種花藥710個(gè),培養(yǎng)溫度控制在25左右,不必必需要光照.幼小植株形成
31、后才必必需要光照.一般經(jīng)過2030天培養(yǎng)后,會(huì)發(fā)現(xiàn)花藥開裂,長出愈傷組織或形成胚狀體。將愈傷組織及時(shí)轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上,以便進(jìn)一步分化出再生植株。假設(shè)花藥開裂釋放出胚狀體,那么一個(gè)花藥內(nèi)就會(huì)產(chǎn)生大量幼小植株,必必需在花藥開裂后盡快將幼小植株分開,分別移植到新的培養(yǎng)基上,否那么這些植株將很難分開。還必必需要對培養(yǎng)出來的植株做進(jìn)一步的鑒定和挑選。植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的一樣之處是:培養(yǎng)基配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等根本一樣。兩者的不同之處在于:花藥培養(yǎng)的選材非常重要,必必需事先探究時(shí)期適宜的花蕾;花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時(shí)改換培養(yǎng)基;花藥培養(yǎng)對培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格。這
32、些都使花藥培養(yǎng)的難度大為增加。 專題四1、果膠是植物細(xì)胞壁以及胞間層的主要組成成分之一,不溶于水,在果汁加工中不僅會(huì)影響出汁率還會(huì)使果汁渾濁。2、果膠酶是一類酶的總稱,包括多聚半乳糖醛酸酶,果膠分解酶和果膠酯酶等。果膠酶可以分解果膠,瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層使榨取果汁變得更容易,也使得渾濁的果汁變得澄清。3、酶的活性與影響酶活性的因素參照必修一p78-85注意實(shí)驗(yàn)制定的一般原那么,注意自變量、因變量、無關(guān)變量。選修一p43-441酶的活性是指酶催化一定化學(xué)凡響的才干。酶活性的上下可以用在一定條件下,酶所催化的某一化學(xué)凡響的凡響速度來表示。在科學(xué)研究與工業(yè)消費(fèi)中,酶凡響速度
33、用單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中凡響物的減小量或產(chǎn)物的增加量來表示。2影響酶活性的因素包括溫度 、ph、酶的抑制劑等。3在探究溫度對酶活性的影響的實(shí)驗(yàn)制定中,自變量是溫度;依據(jù)單一變量原那么,應(yīng)確保各實(shí)驗(yàn)組一樣的變量無關(guān)變量有:底物的量及濃度、酶的用量和濃度、混合物的ph、水浴時(shí)間、實(shí)驗(yàn)器材等等。只有這樣才干確保只有溫度一個(gè)變量對果膠酶的活性產(chǎn)生影響。在實(shí)驗(yàn)中將果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理,確保了底物和酶在混合時(shí)的溫度是一樣的。4在探究ph對酶活性的影響的實(shí)驗(yàn)中,只須將上述實(shí)驗(yàn)的溫度梯度改成ph梯度,并選定一個(gè)適宜的溫度進(jìn)展水浴加熱。凡響液中的ph可以通過體積分?jǐn)?shù)為0.1%的氫氧化鈉或鹽酸溶
34、液進(jìn)展調(diào)節(jié)。此實(shí)驗(yàn)中不同的ph梯度之間進(jìn)展互相對照。5在探究果膠酶的用量的實(shí)驗(yàn)中,果膠酶的用量是建立在最適溫度和最適ph根底之上的。此時(shí)研究的變量是果膠酶的用量,其他因素都應(yīng)堅(jiān)持不變。實(shí)驗(yàn)時(shí)可以配制不同濃度的果膠酶溶液,也可以只配制一種濃度的果膠酶溶液,然后使用不同的體積即可。6果膠酶將果膠分解為可以通過濾紙的小分子物質(zhì),因此蘋果汁的體積大小凡響了果膠酶的催化分解果膠的才干。在不同的溫度和ph下,果膠酶的活性越大,蘋果汁的體積就越大。4、討論加酶洗衣粉的洗劑效果1加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉,目前常用的酶制劑有四類:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶,其中,應(yīng)用最廣泛、效果最顯然的是堿性蛋白
35、酶和堿性脂肪酶,前者能將血漬、 奶漬等含有大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡容易從衣物上脫落,所以蛋白類纖維織物羊毛、蠶絲等不能用加酶洗衣粉來洗滌。脂肪酶可以將脂肪分解成甘油和脂肪酸;淀粉酶可以將淀粉分解成可溶性麥芽糖和葡萄糖,纖維素酶可以將纖維素分解成葡萄糖,以到達(dá)去污的目的。衣物的洗滌不僅要合計(jì)到洗滌效果,還要合計(jì)衣物的承受才干、洗滌本錢等因素。實(shí)驗(yàn)制定要遵循單一變量原那么、對照原那么和等量原那么,比方探究一般洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果有何不同時(shí),自變量是不同種類的洗衣粉,其他條件應(yīng)完全一致;同時(shí)等量的一般洗衣粉與加酶洗衣粉處理一樣的污漬物形成對照實(shí)驗(yàn)。2加酶
36、洗衣粉可以降低外表活性劑和三聚磷酸鈉的用量,使洗滌劑朝低磷無磷方向展開,減少對環(huán)境的污染。3不同種類的酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果的實(shí)驗(yàn)原理是:不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有專一性 ,所以對不同污漬的洗滌效果不同。4比較一般洗衣粉和加酶洗衣粉去污原理的異同 一般洗衣粉加酶洗衣粉一樣點(diǎn)外表活性劑可以產(chǎn)生泡沫,將油脂分子分散開,水軟化劑可以分散污垢等不同點(diǎn)酶可以將大分子有機(jī)物分解為小分子有機(jī)物,小分子有機(jī)物易溶于水,從而與纖維分開5、酵母細(xì)胞的固定化高果糖漿是指果糖含量為42%的糖漿,作為蔗糖的替代品,高果糖漿不會(huì)像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、糖尿病、齲齒和心血管病,對人類的安康更有益
37、。將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的酶是葡萄糖異構(gòu)酶。酶對高溫、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿及有機(jī)溶劑等條件非常敏感,容易使分子構(gòu)造遭到破壞而失活。1固定化酶技術(shù)是將酶固定在不溶于水的顆粒狀載體上裝到一個(gè)凡響柱內(nèi)。消費(fèi)過程中,將葡萄糖溶液從凡響柱的上端注入流過凡響柱,與葡萄糖異構(gòu)酶接觸,轉(zhuǎn)化成果糖從凡響柱的下端流出。凡響柱能連續(xù)使用半年,降低了消費(fèi)本錢,進(jìn)步了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。2固定化酶只能固定一種酶,而化學(xué)凡響往往是一序列酶促凡響過程,使用固定化細(xì)胞技術(shù)使微生物的發(fā)酵過程變成連續(xù)的酶促凡響,且對酶活性的影響較小。3固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)。包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。
38、一般來說,酶更適宜采納化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定,而細(xì)胞多采納包埋法固定化,這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大,而酶分子很小。固定化酶優(yōu)點(diǎn):酶能與凡響物接觸,又能與產(chǎn)物別離,還可以被反復(fù)利用。固定化細(xì)胞優(yōu)點(diǎn):本錢更低,操作更容易,可以催化一系列的化學(xué)凡響。4包埋法固定化細(xì)胞馬上微生物細(xì)胞均勻包埋在不溶于水的多孔性載體中,常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。5酵母細(xì)胞的固定化實(shí)驗(yàn)操作包括制備固定化酵母細(xì)胞和用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵兩個(gè)步驟。2溶液、配制海藻酸鈉溶液、海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合、固定化酵母細(xì)胞五個(gè)步驟。在缺水狀態(tài)下,微生物處于休眠狀態(tài)。酵母細(xì)胞的活化是指加蒸餾水使其代謝加快恢復(fù)
39、正常生活狀態(tài)的過程。加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán),要注意小火連續(xù)加熱并不斷攪拌,防止焦糊。凝膠珠是否制備成功可用用手?jǐn)D壓,假設(shè)不破裂,沒有液體流出,就說明凝膠珠的制作成功;也可在實(shí)驗(yàn)桌上用力摔打,假設(shè)很容易彈起,也說明凝膠珠的制備的是成功的。假設(shè)制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色,說明海藻酸鈉的濃度偏低,固定的酵母細(xì)胞數(shù)目較少;假設(shè)形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,那么說明海藻酸鈉的濃度偏高,制作失敗,必必需要再作嘗試。利用固定的酵母細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)生酒精,可以看到產(chǎn)生了很多氣泡,同時(shí)會(huì)聞到酒味 。 專題五提取生物大分子的根本思路:是選用一定的物理或化學(xué)方法別離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物
40、大分子。一、dna的粗提取1、原理:1思路:dna與rna、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取dna去除其它雜質(zhì)。2dna的溶解性:dna和蛋白質(zhì)等其它成分在不同的nacl溶液中溶解度不同,利用這一特點(diǎn),選用適當(dāng)?shù)臐舛染湍苁筪na充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以到達(dá)別離目的。3dna對酶、高溫柔洗滌劑的耐受性原理選修一p542、dna的鑒定:在沸水浴的條件下,dna與二苯胺凡響浮現(xiàn)藍(lán)色。3、過程選修一教材p55-p56二、多聚酶鏈?zhǔn)椒岔憯U(kuò)增dna片段1.pcr全稱為多聚酶鏈?zhǔn)椒岔?,它是指一種體外迅速擴(kuò)增dna片段的技術(shù)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。擴(kuò)增是在pcr自動(dòng)擴(kuò)增儀中進(jìn)展的,具體凡響過程包括
41、3個(gè)凡響步驟即變性,復(fù)性,和延伸。3. pcr體外擴(kuò)增dna的過程類似細(xì)胞內(nèi)dna的復(fù)制的過程,兩者都必必需要dna模板,引物,四種脫氧核苷酸,dna聚合酶都必必需要能量,所不同的是體內(nèi)解鏈?zhǔn)强縟na聚合酶,體外解鏈?zhǔn)强孔冃?,引物是一小段dna或rna,它能與dna母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對三、血紅蛋白的提取和別離蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì):形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別,由此提取和別離各種蛋白質(zhì)。1、凝膠色譜法分配色譜法:1原理:是依據(jù)相對分子質(zhì)量的大小別離蛋白質(zhì)的有效方法,所用的凝膠實(shí)際上是一些微小的多孔性球體,分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)分子通過多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,
42、流動(dòng)快;分子量小的蛋白質(zhì)分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長,流動(dòng)慢。相對分子質(zhì)量不的蛋白質(zhì)分子因此得以別離。2別離過程:混合物上柱洗脫大分子流動(dòng)快、小分子流動(dòng)慢搜集大分子搜集小分子 3作用:別離蛋白質(zhì),測定生物大分子分子量,蛋白質(zhì)的脫鹽等。2、凝膠電泳法:1原理:許多重要的生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸等,具有可解離的基團(tuán),在一定的ph下,這些基團(tuán)會(huì)帶上正電或負(fù)電。在電場的作用下這此帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極挪動(dòng)。電泳利用了待別離樣品中不同蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)、電量、形狀和大小不同,在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同,導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運(yùn)動(dòng)方向和運(yùn)
43、動(dòng)速度不同。2別離方法:瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳sds。3別離過程:在一定ph下,使蛋白質(zhì)基團(tuán)帶上正電或負(fù)電;參加帶負(fù)電荷多的sds,形成“蛋白質(zhì)sds復(fù)合物,使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小。3.血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分,負(fù)責(zé)血液中o2和co2的運(yùn)輸。血紅蛋白由四條肽鏈組成,每條肽鏈圍繞一個(gè)亞鐵血紅素基團(tuán)。4.緩沖溶液能在一定范圍內(nèi)抵抗外界的酸和堿對溶液ph的影響,模擬細(xì)胞內(nèi)的ph環(huán)境,維持蛋白質(zhì)正常的構(gòu)造與功能。血紅蛋白的提取和別離所用的為20mmol/l磷酸緩沖液ph為7.0。5.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。許多重要的生物大分子,如多肽、
44、核酸等都具有可解離的基團(tuán),在一定的ph下,這些基團(tuán)會(huì)帶上正電和負(fù)電,在電場的作用下,這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極挪動(dòng)。電泳利用了待別離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的別離。6.樣品的處理及粗別離包括:1紅細(xì)胞的洗滌:洗滌的目的是去除雜蛋白。2血紅蛋白的釋放:加蒸餾水和甲苯,紅細(xì)胞破裂,釋放血紅蛋白。3別離血紅蛋白溶液:離心分層,取紅色透明液體,就是血紅蛋白水溶液4透析:把血紅蛋白裝入透析袋,置于20mmol/l磷酸緩沖液ph為7.0中,除去分子量較小的雜質(zhì)。7.用緩沖液平衡好的凝膠裝填色譜柱時(shí),要盡量嚴(yán)
45、密,以降低凝膠顆粒之間的空隙。裝填凝膠柱時(shí)不能有氣泡存在,否那么會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低別離效果。假設(shè)洗脫過程中紅色區(qū)帶均勻一致地挪動(dòng),說明色譜柱制作成功。8.血紅蛋白提取和別離的程序可分為四大步,包括:樣品處理、粗別離、純化和純度鑒定。首先通過洗滌紅細(xì)胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作搜集到血紅蛋白溶液,即樣品的處理;再經(jīng)過透析去除分子量較小的雜質(zhì),即樣品的粗別離;然后通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量較大雜質(zhì)蛋白除去,即樣品的純化;最后經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)展純度鑒定。 專題六1、植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取。2、水蒸氣蒸餾法是植物芳香油提取的常用方法。它
46、的原理是利用水蒸汽將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來形成油水混合物,冷卻后,混合物又會(huì)重新分出油層和水層??煞譃樗姓麴s、水上蒸餾、水氣蒸餾。有些原料不適宜于水中蒸餾,如柑橘、檸檬等易焦糊,有效成分容易水解。通常用壓榨法。萃取法是將粉碎、枯燥的植物原料用有機(jī)溶劑浸泡,使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中的方法。芳香油溶解于有機(jī)溶劑后,只必必需蒸發(fā)出有機(jī)溶劑,就可以獲得純潔的植物芳香油。有機(jī)溶劑必必需事先精制,除去雜質(zhì),否那么會(huì)影響芳香油的品質(zhì)3、玫瑰精油的提取過程:1玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,能隨水蒸汽一同蒸餾,可用水汽蒸餾法和萃取法提取。用于提煉玫瑰精油的玫瑰花要在花開的盛花期采收,在此階段花朵含油最高。2參加nacl:使油水
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