沈萍微生物學(xué)第八章

1、長(zhǎng)出長(zhǎng)出s菌菌只長(zhǎng)只長(zhǎng)r菌菌10分鐘后分鐘后用搗碎器用搗碎器使空殼脫離使空殼脫離吸附吸附離心離心三三. 朊朊病毒病毒的發(fā)現(xiàn)與思考的發(fā)現(xiàn)與思考tnpaacgtacgttttgcatgcaa復(fù)制性轉(zhuǎn)座復(fù)制性轉(zhuǎn)座cab c dehfgitjklmynprsuus免疫整合復(fù)制頭尾基因宿主基因轉(zhuǎn)座遺傳學(xué)效應(yīng)轉(zhuǎn)座遺傳學(xué)效應(yīng)1.引起插入突變2.產(chǎn)生染色體畸變3.產(chǎn)生新的基因-基因移動(dòng)與重排5-bu在在dna復(fù)制時(shí)摻入并引起堿基轉(zhuǎn)換復(fù)制時(shí)摻入并引起堿基轉(zhuǎn)換 （buk為酮式為酮式5-bu；bue為烯醇式為烯醇式5-bu） 光復(fù)活酶光復(fù)活酶復(fù)制復(fù)制重組修復(fù)重組修復(fù)dnadna聚合酶、連接酶聚合酶、連接酶（4 4）

2、 sossos修復(fù)修復(fù)1946年年j.lederberg等等采用采用e.coli的兩的兩株?duì)I養(yǎng)缺陷型株?duì)I養(yǎng)缺陷型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)hfr菌株菌株中中f因子因子的整合、的整合、斷裂和轉(zhuǎn)斷裂和轉(zhuǎn)移移 hfr的接合中的接合中斷實(shí)驗(yàn)斷實(shí)驗(yàn)接合的結(jié)果轉(zhuǎn)性低，染色體基接合的結(jié)果轉(zhuǎn)性低，染色體基因重組率高因重組率高h(yuǎn)fr的中斷雜交實(shí)驗(yàn)dna測(cè)序方法 1、雙脫氧核苷酸終止法 2、化學(xué)修飾法dnapol4種種dntpddntp5/3/標(biāo)記的引物標(biāo)記的引物標(biāo)記的引物5/3/ctgacttcgacaattgtcgaagtcagttgtcgaagtcattgtcgttgtcgaagtcttgtcgaattgtcgatt

3、gtcgaagttgtcgaagtttgtcttgttttttg3/5/5/3/g g反應(yīng)反應(yīng)g+a反應(yīng)反應(yīng)c+t反應(yīng)反應(yīng)c反應(yīng)反應(yīng)g+ac+tc5* gatcactactg5* gatcactact5* gatcactac5* gatcact5* gatcacta5* gatcac5* gatca5* gatc5* gat5* ga5* g紙片紙片1:氨基酸混合液氨基酸混合液;紙片紙片2:維生素混合液維生素混合液;紙片紙片3: 核酸水解液核酸水解液;紙片紙片4: 酵母水解液酵母水解液項(xiàng)目進(jìn)化速度進(jìn)化對(duì)象進(jìn)化周期影響對(duì)象突變效率常規(guī)定向進(jìn)化緩慢進(jìn)化整個(gè)基因組多年完整基因組低dnashuffling快速進(jìn)化特定基因/操縱子/病毒幾天部分基因組高dna shuffling與常規(guī)定向進(jìn)化的比較類 型示 例特 性活性增加倍數(shù)潛在應(yīng)用領(lǐng)域抗 體 人源抗體親和性400生物制藥酶天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶催化特異性10，000生物制藥 -內(nèi)酰胺酶抗生素抗性32，000抗生素枯草桿菌蛋白酶e耐熱性65耐熱時(shí)間17200工業(yè)酶細(xì)胞因子人類干擾素抗病毒285，000基因治療腫瘤抑制因子p53 37半衰期12基因治療代