丹參素鈉的物質(zhì)檢查的實驗研究

1、丹參素鈉的有關(guān)物質(zhì)檢查的實驗研究丹參素鈉的有關(guān)物質(zhì)檢查的實驗研究甲組甲組組員：張迪組員：張迪 孔周楊孔周楊 劉清劉清 胡建軍胡建軍 王鵬王鵬 丁璇丁璇指導(dǎo)教員：趙衛(wèi)權(quán)指導(dǎo)教員：趙衛(wèi)權(quán)一一.實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康耐ㄟ^通過hplchplc研究丹參素鈉中可能混有的雜質(zhì)，研究研究丹參素鈉中可能混有的雜質(zhì)，研究丹參素鈉的固有性質(zhì)，貯藏條件，考察影響原料丹參素鈉的固有性質(zhì)，貯藏條件，考察影響原料藥和制劑質(zhì)量的貯藏條件，為貯藏、處方和加工藥和制劑質(zhì)量的貯藏條件，為貯藏、處方和加工工藝提供資料。工藝提供資料。 二二.實驗儀器與試劑實驗儀器與試劑本實驗采用本實驗采用hplchplc法測定法測定色譜柱：色譜柱：diam

2、onsiltmdiamonsiltm c18 c18 規(guī)格：規(guī)格：5m,4.65m,4.6200mm 200mm 流動相：甲醇流動相：甲醇- -水（含水（含1%1%乙酸）緩沖溶液（乙酸）緩沖溶液（5:955:95）流速：流速：1.0ml/min 檢測波長：檢測波長：280nm 供試品：丹參素鈉原料溶于流動相的溶劑供試品：丹參素鈉原料溶于流動相的溶劑三三.實驗思路實驗思路3.1 3.1 利用利用hplchplc測驗檢測丹參素鈉中可能混有的結(jié)構(gòu)類似物質(zhì)。測驗檢測丹參素鈉中可能混有的結(jié)構(gòu)類似物質(zhì)。3.2 3.2 考察影響丹參素鈉原料藥和制劑成分的影響因素，為考察影響丹參素鈉原料藥和制劑成分的影響因素

3、，為貯藏提供信息。貯藏提供信息。3.3 3.3 在雜質(zhì)可以分離提取的情況下，分離出雜質(zhì)并且在雜質(zhì)可以分離提取的情況下，分離出雜質(zhì)并且對其進行分析，確定雜質(zhì)成分。（還未完成）對其進行分析，確定雜質(zhì)成分。（還未完成）四四.實驗過程實驗過程4.2 4.2 供試品的配制供試品的配制 精密量取本品丹參素鈉精密量取本品丹參素鈉14.14mg14.14mg，取流動相，取流動相5ml5ml溶解本品，稀釋溶解本品，稀釋1010倍作為供試品。倍作為供試品。 4.1 4.1 流動相的配制流動相的配制 取去離子水洗凈的取去離子水洗凈的500ml500ml棕色試劑瓶，精密量取甲棕色試劑瓶，精密量取甲醇醇20ml20ml

4、，再用，再用500ml500ml量筒取蒸餾水量筒取蒸餾水380ml380ml，用，用10ml10ml量筒取乙量筒取乙酸酸4ml4ml，混合搖勻后，放入超聲儀，除氣泡，混合搖勻后，放入超聲儀，除氣泡10min10min。 4.3 4.3 供試品處理供試品處理 用塑料樣品管取少量供試品，分別進行光照、燈照、用塑料樣品管取少量供試品，分別進行光照、燈照、3030加熱、加熱、5050加熱、加熱、7070加熱、加熱、9090加熱等處理。加熱等處理。4.4 hplc4.4 hplc試驗試驗 利用所選的色譜柱和流動相對未處理的供試品以及處利用所選的色譜柱和流動相對未處理的供試品以及處理后的供試品進行洗脫，記

5、錄色譜圖。理后的供試品進行洗脫，記錄色譜圖。4.5 4.5 色譜圖分析處理色譜圖分析處理 分組比較色譜圖的主峰以及雜質(zhì)峰，得出結(jié)論。分組比較色譜圖的主峰以及雜質(zhì)峰，得出結(jié)論。五五. .實驗結(jié)論實驗結(jié)論5.1 5.1 供試品供試品hplchplc測試得出圖譜測試得出圖譜t=13.773t=13.773時，出現(xiàn)最大峰時，出現(xiàn)最大峰t=18.248t=18.248時，出現(xiàn)含量最高的雜質(zhì)峰時，出現(xiàn)含量最高的雜質(zhì)峰5.2 5.2 比較比較3030、50 50 、70 70 和和90 90 加熱加熱40min40min后后hplchplc測試后得到的色譜圖。測試后得到的色譜圖。 30 30加熱加熱40mi

6、n 5040min 50加熱加熱40min40min 70 70加熱加熱40min 9040min 90加熱加熱40min40min 分析：分析：名稱名稱t1t1峰面積峰面積t2t2峰面積峰面積303015.97315.9732237589.1002237589.100 21.96521.965 126810.102126810.102505015.88215.8822284040.0002284040.000 21.80721.807 128375.797128375.797707015.64815.6482154601.5002154601.500 21.53221.532 133112.

7、000133112.000909015.76515.7652372821.2502372821.250 21.66521.665 164736.953164736.953結(jié)論：隨著溫度升高，主雜質(zhì)結(jié)論：隨著溫度升高，主雜質(zhì)a a含量升高。丹參素鈉本品含量升高。丹參素鈉本品應(yīng)該在低溫處保存。應(yīng)該在低溫處保存。 5.3 5.3 比較比較9090加熱加熱3.53.5小時、小時、4.54.5小時和小時和5 5小時的色譜圖，小時的色譜圖，以及冷卻以及冷卻2 2天后繼續(xù)加熱的色譜圖。天后繼續(xù)加熱的色譜圖。 90 90加熱加熱3.53.5小時小時 90 90加熱加熱4.54.5小時小時 9090加熱加熱5

8、5小時小時 名稱名稱t1峰面積峰面積t2峰面積峰面積t3峰面積峰面積3.53.5小時小時 13.640 2619930.25018.273 123294.29721.507 13120.0004.54.5小時小時 14.323 3154075.50019.190 146609.12521.927 89245.7195 5小時小時14.315 2291581.75019.240 102740.70323.007 120617.898分析分析9090加熱加熱5 5小時冷卻后小時冷卻后9090繼續(xù)加熱繼續(xù)加熱1 1小時小時 90 90加熱加熱2 2小時小時結(jié)論：高溫加熱時間長出現(xiàn)新的雜質(zhì)結(jié)論：高溫加

9、熱時間長出現(xiàn)新的雜質(zhì)b b（t3t3峰），且隨著峰），且隨著加熱時間的增加雜質(zhì)的含量增加，冷卻后此雜質(zhì)減少甚加熱時間的增加雜質(zhì)的含量增加，冷卻后此雜質(zhì)減少甚至消失，再次加熱后又會產(chǎn)生，可能為丹參素鈉熱分解至消失，再次加熱后又會產(chǎn)生，可能為丹參素鈉熱分解產(chǎn)生。產(chǎn)生。名稱名稱t1t1峰面積峰面積t2t2峰面積峰面積9090加熱后冷卻加熱后冷卻 13.23213.232 9812465.0009812465.000 17.66517.665 176151.297176151.297繼續(xù)加熱繼續(xù)加熱1 1小時小時12.89812.898 9280839.0009280839.000 17.13217.

10、132 501651.844501651.844繼續(xù)加熱繼續(xù)加熱2 2小時小時13.03213.032 8673404.0008673404.000 17.39817.398 519512.688519512.688分析分析5.4 5.4 比較供試品光照和燈照后的色譜圖比較供試品光照和燈照后的色譜圖日照日照7 7小時小時燈照燈照2424小時小時燈照燈照4545小時小時分析分析名稱名稱t1t1峰面積峰面積t2t2峰面積峰面積日照日照7 7小時小時13.76513.7652267644.0002267644.000 18.19818.1986531.0006531.000燈照燈照2424小時小時

11、13.79813.7982234676.2502234676.250 18.30718.30715239.20015239.200燈照燈照4545小時小時 13.77313.7732053741.7502053741.750 18.24818.24821620.19921620.199結(jié)論：供試品中雜質(zhì)結(jié)論：供試品中雜質(zhì)a含量隨光照時間增加而增加。含量隨光照時間增加而增加。5.5 5.5 實驗結(jié)論實驗結(jié)論 丹參素鈉原料藥在高溫時會出現(xiàn)新的雜質(zhì)，丹參素鈉原料藥在高溫時會出現(xiàn)新的雜質(zhì)，雜質(zhì)雜質(zhì)b b含量隨溫度升高而升高，充分冷卻后新含量隨溫度升高而升高，充分冷卻后新出現(xiàn)的雜質(zhì)出現(xiàn)的雜質(zhì)b b會消失

12、。原料藥中的主雜質(zhì)會消失。原料藥中的主雜質(zhì)a a含量含量會隨溫度升高而升高。丹參素鈉中主要成分會會隨溫度升高而升高。丹參素鈉中主要成分會隨光照時間增長而降低。由以上可知丹參素鈉隨光照時間增長而降低。由以上可知丹參素鈉原料藥應(yīng)置于低溫避光處保存。原料藥應(yīng)置于低溫避光處保存。六六. .實驗中問題討論實驗中問題討論6.1 6.1 流動相的酸度對保留時間的影響流動相的酸度對保留時間的影響6.2 6.2 對于高溫下出現(xiàn)的對于高溫下出現(xiàn)的b b雜質(zhì)的研究雜質(zhì)的研究6.3 6.3 實驗中不足實驗中不足6.1 6.1 流動相酸度對保留時間的影響流動相酸度對保留時間的影響實驗的流動相定的乙酸含量是實驗的流動相定

13、的乙酸含量是1%1%，保留時間是，保留時間是13.5min13.5min左右，但是仍有小峰難以分離出來，而有一次實驗中，左右，但是仍有小峰難以分離出來，而有一次實驗中，配制流動相時我們錯誤地少加了乙酸，此時的保留時配制流動相時我們錯誤地少加了乙酸，此時的保留時間是間是16min16min左右，分離效果更佳，因此接下來的實驗可左右，分離效果更佳，因此接下來的實驗可以采用低酸度來增加保留時間提高分離效果。以采用低酸度來增加保留時間提高分離效果。6.2 6.2 關(guān)于關(guān)于b b雜質(zhì)雜質(zhì)1.1.高溫加熱后高溫加熱后b b雜質(zhì)的含量增加，此時，供試品溶液雜質(zhì)的含量增加，此時，供試品溶液放置后顏色發(fā)生變化，出現(xiàn)淡粉紅色，可能為放置后顏色發(fā)生變化，出現(xiàn)淡粉紅色，可能為b b物質(zhì)物質(zhì)溶解后帶的顏色。溶解后帶的顏色。2.2.高溫后出現(xiàn)大量高溫后出現(xiàn)大量b b雜質(zhì)并且丹參素鈉主峰的峰面積雜質(zhì)并且丹參素鈉主峰的峰面積減少，而冷卻后減少，而冷卻后b b雜質(zhì)峰減小主峰增大，因此，雜質(zhì)峰減小主峰增大，因此，b b雜質(zhì)雜質(zhì)可能是丹參素鈉熱分解產(chǎn)生。可能是丹參素鈉熱分解產(chǎn)生。6.3 6.3 實驗中不足實驗中不足1.1.流動相是每次實驗前配制，去離子水以及乙酸的量不流動相是每次實驗前配制，去離子水以及乙酸的量不精確，可能會對供試品的洗脫造成一定的影響。精確，可能會對供試品