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文檔簡介
1、第一章 尿液干化學分析原理1、 空白塊:尿在測試塊上分布的狀態(tài)以及尿本身的顏色都會給測定帶來誤差,設置空白塊就是為了排除這些產(chǎn)生誤差的因素。各個項目使用同一個空白塊。2、 白細胞:0 Cell/L。根據(jù)酯酶法的原理,粒細胞漿內(nèi)含有酯酶,這種酶個水解一種3-羥基吲哚酚酯類底物,釋放出酚從而與重氮劑反應生成紫紅色化合物。3、 酮體:0 mmol/L。根據(jù)硝普酸鈉法原理,硝普酸鈉和酮體(乙酰乙酸)在堿性條件下相互作用,呈現(xiàn)紫色,特別是乙酰乙酸對此特別靈敏。4、 亞硝酸鹽:0 mol/L。反應依賴于尿中革蘭氏陰性菌把硝酸鹽還原成亞硝酸鹽,亞硝酸鹽與對氨基苯砷酸反應生成重氮化合物,重氮化合物再與萘基乙二
2、胺二鹽酸結合,呈現(xiàn)桃紅色。5、 尿膽原:3.216 mol/L。根據(jù)偶氮結合法的原理,尿膽原在強酸條件下和重氮鹽偶聯(lián)成胭脂紅色素。6、 膽紅素:0 mmol/L。根據(jù)偶氮結合法的原理,2,4-二氯苯胺重氮鹽與膽紅素進行特異性反應,并與膽紅素濃度相對應產(chǎn)生不同的顏色。7、 蛋白質:<0.15g/L。根據(jù)燃料結合的蛋白質誤差原理,蛋白質與染料結合形成復合物產(chǎn)生色變,特別是對白蛋白的反應比對球蛋白、血紅蛋白、本-周蛋白和黏蛋白更為靈敏。8、 葡萄糖:<2.8 mmol/L。根據(jù)葡萄糖氧化酶法反應原理,葡萄糖氧化酶特異性氧化-D葡萄糖,生成葡萄糖醛酸盒過氧化氫,過氧化氫在過氧化物酶作用下,
3、使指示劑氧化產(chǎn)生紅色。9、 尿比重:1.0101.025。利用多聚電解質法,尿中電解質與聚電解質發(fā)生離子交換的原理。陽離子存在時,多聚物氫離子通過交換釋出,使溴百里酚藍指示劑發(fā)生顏色變化,由藍色經(jīng)過藍綠色最紅變成黃色。10、 酸堿度:5.57.5。通過PH指示劑測定5.09.0范圍內(nèi)的PH值11、 隱血:根據(jù)血紅蛋白接觸活性法原理,通過血紅蛋白的類過氧化物酶樣作用催化分解過氧化氫,使四甲基聯(lián)苯胺氧化呈色。12、 維生素C:0 mmol/L。根據(jù)Tillmans Reagent的原理,維生素C將染料由藍色還原成紅色。本項目的測定目的是為了給使用者提供樣本中維生素C含量,以判斷其可能存在的干擾。1
4、3、 肌酐:2.022.0mmol/L。根據(jù)置換反應原理,肌酐將金屬氯化物酸性染料復合物中的染料置換出來,顏色由綠色變成黃色。14、 微白蛋白:<20mg/L。根據(jù)染料結合法,微量白蛋白與染料結合形成粉色復合物從而產(chǎn)生色變,對白蛋白反應特別靈敏。第二章 尿干化學報告解讀第一節(jié) 尿白細胞、紅細胞測定臨床意義近年來,干化學尿液自動化分析逐步在國內(nèi)普及,但不少操作者由于對干化學缺乏嚴格的過篩標準旬質量控制措施,往往造成實驗誤差,甚至延誤疾病的診斷。目前較為突出的是,只看干化學檢查的白細抱、紅細胞結果,而忽視顯微鏡檢查的傾向。由于干化學法檢查與顯微鏡檢查是兩種不同的實驗方法,很雄找出完全對應的關
5、系,本節(jié)著重討論檢驗工作中常見的一些問題。 一、干化學法測定的原理 尿紅細胞測定試劑帶膜塊中的主要特性見表324。其測試原理是:尿液中的血紅蛋白或其破壞釋敦的游離血紅蛋白均含有亞鐵血紅素,后者具有過氧化氫酶樣活性,可使過氧化物分解釋放出新生態(tài)氧能使無色的鄰甲聯(lián)苯胺(或四甲替聯(lián)苯胺)變成藍色的鄰甲聯(lián)苯胺(或四甲替聯(lián)苯胺)物質。 尿白細胞試劑帶測定膜塊中的主要成分(表325)是吲哚酚酯、重氮鹽兩種,其測定原理基于粒細胞胞漿內(nèi)含有酯酶,此酶可作用于膜塊中的吲哚酚酯,使其產(chǎn)生吲哚酚,后者與重氮鹽反應形成紫色縮合物(圖319),其顏色深淺與細胞的多少呈比例關系。二、干化學法檢查注意事項(一)試劑帶的批間
6、差異試劑帶不同而引起同1份標本測定結果的差異。 (二)標本對結果的影響尿液標本必須新鮮,留尿后盡量立即測定,以免紅、白細胞破壞,導致干化學法與鏡檢法的人為實驗誤差。干化學法既可測定完整的細胞成分,又能測定因細胞破壞胞漿內(nèi)涵物來辨別細胞的有無(通過特異或非特異性酯酶檢測白細胞,通過血紅蛋白的過氧化物酶樣反應檢測紅細胞),因此報告時要了解臨床診斷,綜合分析,排除相互結果的干擾。某些腎病患者的終尿,由于各種原因使細胞裂解,可導致儀器壬與目測法的差異。筆者認為,此類標本最好不使用干化學法。(三)干擾物對紅、白細胞測定的影響1.對白細胞試驗的干擾干化學法檢查尿內(nèi)白細胞的原理,是基于粒細胞漿內(nèi)含有酯酶,可
7、作用于試劑帶膜塊中的吲哚酚酯,操作時應注意:應了解此法只能測定粒細胞,不與淋巴細胞反應,在腎移植病人發(fā)生排異反應尿中二淋巴細胞為主時,會出現(xiàn)陰性結果,此類病人不應用干化學法檢驗,應該以顯微鏡檢查法為準。尿液污染甲醛,或高濃度膽紅素,或使用某些藥物(如呋喃咀啶)時,可產(chǎn)生假陽性;尿蛋白>5gL,或尿液含有大劑量先鋒IV、慶大霉素等藥物時,可使結果偏低或出現(xiàn)假陰性。低比重尿、堿性尿的白細胞容易溶解,造成干化學結果高于鏡檢結果。室溫低于20時可造成白細胞測定結果偏低或者假陰性。頭孢氨芐、先鋒霉素、四環(huán)素均可抑制反應造成假陰性。2對紅細胞試驗的干擾 尿液中含有對熱不穩(wěn)定酶、肌紅蛋白或菌尿,可引起
8、干化學法測定尿紅細胞的假陽性;易使檢測紅紐胞出現(xiàn)假陽性的原因主要是熱不穩(wěn)定過氧化物酶的干擾。筆者對690例尿液進行了分析,其中113例化學陽性,鏡檢陰性,進一步用金標法抗Hb單克隆抗體檢查也為陰性;但將尿液加熱煮沸后再進行一化學檢查,結果為陰性,說明假陽性是由于存在不耐熱的過氧化物酶所致。尿液中大量維生素C的存苧,可競爭性抑制反應致使干化學法產(chǎn)生假陰性,應予警惕。為了探討何種方式用藥可對試驗有干擾,筆舌使用了前述的方法(見第四節(jié)),發(fā)現(xiàn)靜脈滴注維生素C5h后才能達到不影響尿紅細胞測定的水平。百此靜脈滴注后,原則上在5h內(nèi)不要留尿液標本進行檢測;不同廠家的儀器和試劑帶對維生素C的影碉程度也不同(
9、表326)。儀器1的試劑帶中含有破壞維生素C的酶,尿內(nèi)維生素C濃度高達1 000mg時,也不干擾紅細胞的檢測;儀器2、儀器3及配套試劑帶則較差,維生素C濃度分別在200mgL和omgL時即有干擾。為了避免這個問題,目前國外有多種抵抗維生素C干擾的試劑帶,或使用可同時檢測維生素C的試劑帶,在檢測尿液病理成分的同時監(jiān)測尿維生素C的濃度。 (四)細胞破壞造成的“假陰性”現(xiàn)象所述“假陽性”、“假陰性”現(xiàn)象,是以顯微鏡檢查為基礎的。由于干化學法是檢測細胞胞漿內(nèi)涵物來Q別細胞的有無(通過特異或非特異性酯酶檢測白細胞,通過血紅蛋白的過氧化物酶樣反應檢測紅細墅,在實際工作中可能存在下列問題:由于尿液在膀胱貯存
10、時間過長或標本放置時間延長,導致白細眶破壞,酯酶釋放到尿液中,造成干化學法陽性、鏡檢陰性的所謂“假陽性”現(xiàn)象。腎病患者的紅細胞在腎蛀或泌尿道破壞,或尿比重過低、尿pH偏高,均易造成紅細胞破壞,血紅蛋白放出并出現(xiàn)尿中,造成謂紅細胞干化學檢查的“假陽性”現(xiàn)象。因此在干化學法結果與顯微鏡下所見出現(xiàn)矛盾時,要結合臨床綜合分析,甚至要動態(tài)觀察,切不可一概否定干化學法結果。(三)鏡檢法與干化學法的相應關系 有作者報道了干化學與鏡檢兩種方法檢查尿紅細胞實驗結果的對應關系,發(fā)現(xiàn)這兩種方法雖然結Q沒有明顯的對應關系,但每一等級尿分析儀結果對應鏡檢紅細胞計數(shù)有較好的百分比范圍,特別是干學“neg”檔,<3H
11、P占100,紅細胞101,鏡檢正常占9982,35HP占018。鑒于此種現(xiàn)象筆者認為在排除上述病理或其他干擾因素存在下,儀器結果為“紅細胞10Pl”時,可以省略顯微鏡喧查,而其他檔次(25l、50P1、1501和250P1)均有較大的交叉,必須鏡檢。 由于尿液分析儀白細胞檢測與顯微鏡下計數(shù)實驗原理截然不同,報告方式是兩種不同的概念,很難找出兩者的對應關系,迄今還沒有一種直接的換算方式。屢有文獻報道了計算板計數(shù)與儀器結果的內(nèi)在聯(lián)系,Alwall報道每高倍視野白細胞數(shù)大約是儀器法報告(白細胞數(shù)FAl)數(shù)的11;Loosyt等指出,白細胞Pl是白細胞高倍視野的108倍,筆者的實驗結果是8,7倍,因此
12、儀器法白細胞檢查只是一個篩選實驗,決不可代替顯微鏡檢查。三、干化學過篩的標準 所謂過篩,就是在儀器、試劑帶質量合格,檢驗人員相對穩(wěn)定的條件下制定一個標準,達到此標準可視為尿沉渣成分在正常范圍內(nèi),免除進一步顯微鏡檢查。一般認為,鏡檢結果白細胞數(shù)在o5HP、紅細胞數(shù)在03HP和透明管型在01LP的范圍內(nèi),為尿沉渣參考范圍。如果一個標本經(jīng)過兩種方法檢查,干化學結果符合過篩標準,鏡檢結果在正常范圍,說明過篩是正確的。干化學結果不符合過篩標準,鏡檢結果也異常,說明過篩是正確的。干化學結果異常,鏡檢結果正常,視為假陽性;反之干化學結果正常,鏡檢結果異常,視為假陰性。由于過篩的目的是篩出正常、鏡檢病理性標本
13、,因此過篩的原則是不能出現(xiàn)假陰性,否則就耍漏診。干化學結果假陽性的標本經(jīng)過鏡檢后即可得到糾正。雖假陽性不如假陰性那么重要,但假陽性結果過多,鏡檢量過多,達不到過篩的目的。為了探討過篩標準,筆者利用雙盲法同時對6349例尿液標本采用干化學法(寶靈曼公司生產(chǎn)的MiditronR型尿液分析儀和配套試劑帶)和顯微鏡檢查方法進行對比分析。結果顯示:如果以干化學檢查結果白細胞陰性、紅細胞1011、亞硝酸鹽陰性及尿蛋白陰性四項指標聯(lián)合作為過篩鏡檢的標準,白細胞檢查假陰性率僅為0,80,紅細胞檢查假陰性率僅為013,在360份有各類管型的尿液中,只有29例含有透明管型為。一1LP(在參考范圍內(nèi))的尿液標本漏檢
14、,證明以此作為過篩標準是可行的。為了證實其他尿液分析儀篩選時也可應用這個標準,筆者使用德國寶靈曼公司生產(chǎn)的MiditronR型,美國Ames公司生產(chǎn)的ClinitekR 200型,德國BehringwerkeAG公司生產(chǎn)的Urimac三種尿液分析型及相應配套的試劑帶,同時進行了1 000例干化學法與顯微鏡鏡檢的相關分析,結果顯示此標準也同樣適用于上述兩種尿液分析儀(Clinitek“200型、Urimac型)。(四)、千化學過篩適用范圍的局限性(1)腎科及泌尿系科病人的尿液不適合于干化學過篩顯微鏡檢查。(2)以鏡檢結果作為診斷依據(jù)(如結石、結晶和腫瘤細胞)或觀察療效時,不宜使用干化學方法作為過
15、篩。 -(3)由于干化學分析干擾因素較多且不可避免的有一定的假陰性率,因此要結合臨床表現(xiàn)判斷結果,決不可只看干化學分析,忽視鏡檢。 (4)尿液的外觀(特別是顏色、濁度)與尿沉渣有一定的相關關系。當尿液外觀異常時,應注意顯微鏡檢查。 (5)干化學試劑帶的質量、穩(wěn)定性及質量控制與過篩的準確性密切相關。儀器及干化學試劑帶一定要符合要求。儀器的正常運轉和質量合格試劑帶是實驗結果的基本保證。筆者制定上述標準使用的是寶靈曼公司的Miditronu型尿液分析儀及ComburTestM配套試劑帶。每個實驗室使用過篩標準時,首先必須做對照觀察(所用干化學試劑帶與顯微鏡對比),確認儀器試劑帶的敏感性與特異性是否符
16、合過篩標準的要求,如不符合,應制定相應的標準或更換試劑帶,以達到過篩的要求,切不可不顧具體情況硬行引用過篩標準。第二節(jié):尿酮體的測定一、干化學法測定的原理二、干化學法測定尿酮體的注意事項 (1)由于尿酮體中的丙酮和乙酰乙酸都具有揮發(fā)性,乙酰乙酸更易受熱分解成丙酮,尿液被細菌污誕虧,酮體消失。因此,尿液必須新鮮,及時送檢,以免因酮體的揮發(fā)或分解,出現(xiàn)假陰性結果或偏低籌吳: (2)干化學法對乙酰乙酸的敏感性為50100mgL,對丙酮的敏感性為400700mgL,不與p羥三鬟發(fā)生作用。但各大廠家生產(chǎn)的試劑帶存在差異,對酮體測定成分不同,應加以注意。注意干化學法與酮體粉法的敏感度差異,同一病理標本,兩
17、種方法可能出現(xiàn)截然不同的結果,分析結果時應特別注意。(3)不同病程酮體成分的變化會給檢測結果帶來差異。不同病因引起的酮癥其酮體的成分可不同,即使同一病人在不同病程也可有差異。在糖尿病酮癥酸中毒早期,酮體的主要成分是伊羥丁酸,乙酰乙酸很少或缺乏,此時測量可導致對總酮體量估計不足;在糖尿病酮癥酸中毒癥狀緩解之后,乙酰乙酸含量反而比急性期初始含量高。因此檢驗人員必須注意病程發(fā)展,與臨床醫(yī)生共同分析實驗結果的可靠性,這就是分析后質控的重要內(nèi)容。 三、尿酮體測定的臨床意義 正常情況下,由肝臟產(chǎn)生的酮體經(jīng)血液運送到其他組織,氧化成二氧化碳和水并產(chǎn)生能量。當糖代謝發(fā)生障礙時,脂肪的分解代謝增多,這時肝內(nèi)酮體
18、產(chǎn)生的速度超過肝外組織利用的速度,血中酮體增加,稱酮血癥;過多的酮體從尿排出,稱酮尿,可大概分為以下4種情況。 (一)糖尿病酮癥酸中毒 由于糖利用減少,分解脂肪產(chǎn)生酮體增加而引起酮癥。未控制或治療不當?shù)奶悄虿〕霈F(xiàn)筍中毒或昏迷時,尿酮體檢查極有價值。應與低血糖、心腦疾病酸中毒或高血糖滲透性糖尿病昏迷相區(qū)別。酮癥酸中毒時尿酮體陽性,而后者尿酮體一般不增高。但應注意糖尿病酮癥者腎功能嚴重損傷而腎閾值增高時,尿酮體亦可減少,甚至完全消失。 (二)非糖尿病性酮癥 如感染性疾病(肺決、傷寒、敗血癥、結核等發(fā)熱期),嚴重嘔吐、腹瀉,長期饑餓、禁食,全身麻醉后等,均可出現(xiàn)酮癥,這些情況相當常見。婦女孕期因妊娠
19、反應嘔吐、進食少,體脂降解代謝明顯增多,發(fā)生酮癥而致酮尿。(三)中毒如氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等(四)服用雙胍類降糖藥服用降糖靈時,由于藥物有抑制細胞呼吸的作用,可出現(xiàn)血糖正常、尿酮體陽性的現(xiàn)象三、干化學測尿酮體的局限性試紙塊不與-羥丁酸反應,假陽性見于含大量左旋多巴代謝物的尿液。尿亞硝酸鹽測定干化學試劑帶法檢驗尿液亞硝酸鹽是尿液自動化分析儀設置的多項檢測之一,主要用于尿路感染的快速過篩試驗,方法簡便易行,得到廣泛應用。 一、干化學法測定的原理 干化學試劑帶法測定尿亞硝酸鹽試劑帶膜塊中,主要含有氨基磺胺(或氨基苯砷酸)和1,2,3,4四氫并喹啉3酚(或N萘基乙二胺)物質(表322),而大多數(shù)尿
20、路感染是由大腸埃希氏菌引起,正常人尿液中含有來自食物或蛋白質正常代謝產(chǎn)物的硝酸鹽。 當尿液中有大腸埃希氏菌增加時,可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,其可將膜塊中的氨基磺胺(或氨基苯砷酸)重氮化而成重氮鹽,后者與1,2,3,4四氫并喹啉3酚(或N萘基乙二胺)偶聯(lián),使膜塊產(chǎn)生圖316、圖317),借以診斷患者是否被腸桿菌科細菌感染。其檢出敏感度為0306mgL。 二、實驗注意事項 (一)尿路感染的病原微生物種類 尿亞硝酸鹽檢查先決條件是尿液中的致病菌必須含有硝酸鹽還原酶。從尿路感染患者尿液分離出巧病原微生物有:大腸假單胞菌、變形假單胞菌、克雷伯氏桿菌、糞鏈球菌、葡萄球菌、綠膿假單胞菌、厭氧菌(如消化球菌、
21、消化鏈球菌、韋榮氏球菌、擬桿菌)、酵母菌(如白色念珠菌、圓球擬酵母菌)、支原體刃人型支原體、酵母支原體)等。急性尿路感染單純由大腸桿菌引起者占85,而慢性腎炎由大腸桿菌引起者占52,有些則是大腸桿菌與其他細菌(如葡萄球菌、腸球菌)的混合感染。腸菌科的大腸桿菌、虱大腸桿菌、變形桿菌、產(chǎn)氣桿菌÷綠膿桿菌及部分厭氧菌皆含硝酸鹽還原酶,可使尿亞硝酸鹽測定呈陽蘭反應。而糞鏈球菌因缺乏此酶可出現(xiàn)陰性反應。用婦女陰道及宮頸部分離出的多種真菌進行了還原適酸鹽實驗研究,結果表明短密青霉菌還原硝酸鹽陽性率很高,約為7273,五峰霉菌為67,65,酵母及假絲酵母屬真菌還原陽性率低。白曲霉、土曲霉、黃柄曲霉
22、、屢地青霉、產(chǎn)紫青霉及磚紅酵母還原陽吃率很高。尿路感染的病原微生物種類見表323。(二)體內(nèi)適量硝酸鹽的存在尿液中需有適量硝酸鹽,一是來源于食物中的硝酸鹽,如加工肉制品及某些地區(qū)飲水也是硝酸鹽的來源,二是來源于體內(nèi)蛋白質正常代謝產(chǎn)物的硝酸鹽;三是體內(nèi)可由氨內(nèi)源性合成硝酸鹽。尿硝酸鹽排泄增加不是因體內(nèi)硝酸鹽分解代謝降低,而是加速硝酸鹽的生物合成所致。體內(nèi)缺乏硝酸鹽,盡管有細菌也將出現(xiàn)假陰性結果。 (三)尿液標本留取的時間 尿液應在膀胱停留間隔4h以上,使細菌有充分的作用時間,故以早晨留取第一次尿液為宜。間隔時間過短,試驗易呈假陰性反應。留取尿液樣杯應清潔,并應盡快檢測,否則易出現(xiàn)假陽性。 (四)
23、藥物的影響 使用利尿劑可使尿中硝酸鹽含量不高,本試驗呈假陰性;硝基呋喃可能降低亞硝酸鹽反應的靈敏性;非那吡啶可引起假陽性;使用抗生素細菌被抑制時,可出現(xiàn)假陰性;使用大量維生素C(250mgL或以上)時,可出現(xiàn)假陰性結果等。高比重尿可使本試驗敏感性降低;若尿液中含亞硝酸鹽離子lmg兒,可出現(xiàn)假陰性。 三、尿亞硝酸鹽測定的臨床意義 (1)參考范圍,尿亞硝酸鹽定性試驗,一般為陰性。 (2)尿亞硝酸鹽陽性常見于大腸埃希氏菌引起的泌尿系感染,其檢出敏感度為0306mgL。同時符合以下三個條件:感染的細菌含有硝酸鹽還原酶;食物中含有適量的硝酸鹽;尿液標本在膀胱停留間隔4h以上,并除外藥物等干擾因素。此實驗
24、診斷大腸埃希氏菌感染的符合率為80,反之呈陰性結果。且本實驗只與含有亞硝酸鹽還原酶的細菌反應,且人體內(nèi)也會有硝酸鹽的存在,因此,本實驗陰性并不能排除菌尿的可能;同樣,亞硝酸鹽陽性也不能完全肯定泌尿系統(tǒng)感染,標本放置過久或污染可呈假陽性,應結合其他尿液檢查結果綜合分析,得出正確的判斷。 (3)文獻報告,單一測定亞硝酸鹽診斷尿路感染的敏感性比干化學檢查白細胞25Pl低,而比白細胞100Pl高;按白細胞100P1診斷尿路感染的特異性,比亞硝酸鹽陽性及白細胞25P1要高;同時用干化學法測定亞硝酸鹽及白細胞時,亞硝酸鹽陽性+白細胞251組合方式診斷尿路感染,比亞硝酸鹽陽性+白細胞100山診斷尿路感染可靠
25、性大。用亞硝酸鹽+白細胞組合,敏感性和特異性分別為898和92o,陰性預測值986,說明陽性不能肯定為菌尿,但陰性基本可除外菌尿。檢出革蘭氏陰性桿菌尿優(yōu)于革蘭氏陽性菌尿。當白細胞25弘1時,亞硝酸鹽反應陰性,靈敏度835,陰性預測值970。當白細胞500P1時,亞硝酸鹽反應陽性,靈敏度40,陽性預測值為100。在聯(lián)合應用亞硝酸鹽+白細胞測定5218份尿液,對10m1的菌尿敏感性為792,特異性為81,0。 (4)亞硝酸鹽+干化學白細胞檢查+顯微鏡檢查的組合,靈敏度和陰性預測值100,此時的亞硝酸鹽特異性和陽性預測值100。 (5)亞硝酸鹽+干化學白細胞檢查+尿培養(yǎng)用于診斷產(chǎn)科病人的尿路感染,尿
26、培養(yǎng)陽性證實亞硝酸鹽和白細胞的敏感性分別為43和77,特異性為99和96,兩個試驗組合的敏感性和特異性為92和95。 (6)亞硝酸鹽+干化學白細胞檢查+蛋白質試劑帶檢測新生兒和嬰兒尿路感染,陽性預測值很低,陰性預測值為994,男、女性別之間無差異。由此認為,試劑帶有助于嬰兒尿路感染的診斷;可避免進行昂貴的培養(yǎng)。 綜上所述,亞硝酸鹽可作為尿路感染的過篩試驗。但由于亞硝酸鹽單一試驗影響因素較多,如將亞硝酸鹽十干化學白細胞檢查組合觀察,必要時用未離心尿標本直接涂片進行革蘭氏染色油鏡檢查,可大大提高尿路感染診斷的可靠性。第六節(jié) 尿膽紅素、尿膽原檢查膽紅素是血紅蛋白分解代謝的中間產(chǎn)物,是膽汁中的主要成分
27、,其代謝產(chǎn)物有尿(糞)膽原等。當各種原因造成膽紅素產(chǎn)生過多,或肝細胞攝取、結合及排泄等過程發(fā)生障礙時,均可導致血、尿、糞便中膽紅素及其代謝產(chǎn)物(尿膽原等)的改變。對這些物質進行檢驗,可協(xié)助臨床診斷。 一、干化學法測定的原理 尿膽紅素試劑帶的主要組成見表319。其測定原理,是在強酸介質中直接膽紅素與二氯苯胺重氮鹽起偶聯(lián)反應生成紅色的復合物(圖312);其反應過程,是重氮鹽作用膽紅素中央使其裂開,再結合形2分子的偶氮膽紅素而呈現(xiàn)顏色變化。尿膽原測定原理:根據(jù)干化學試劑帶組成的不同,其測定方法有所差異。試劑帶的組成及其特性見。美國Ames公司采用,在強酸條件下尿膽原和對二甲氨基苯甲醛發(fā)生醛化反應,生
28、成櫻紅色縮靶圖313);德國寶靈曼公司采用,在強酸條件下尿膽原和對甲氧基苯重氮四氟化硼發(fā)生重氮鹽偶生成胭脂紅色化合物。二、干化學法測定的注意事項 (1)標本必須新鮮,以免膽紅素在陽光照射下成為膽綠素,尿膽原氧化成尿膽素。 (2)尿液中含高濃度維生素C和亞硝酸鹽時,抑制偶氮反應,使尿膽紅素呈假陰性;當患者接受大劑量氯丙嗪治療或尿中含有鹽酸苯偶氮吡啶的代謝產(chǎn)物時,可呈假陰性。 (3)尿液中一些內(nèi)源性物質如膽色素原、吲哚、膽紅素等,可使尿膽原檢查結果出現(xiàn)假陽性,一些藥物(如吩噻嗪)也可產(chǎn)生顏色,干擾實驗。 (4)正常人尿膽原排出量每天波動很大,夜間和上午量少,午后則迅速增加,在午后24時達最高峰;同
29、時尿膽原清除率與尿pH,相關,pH50時,清除率為2mlmin,pH80時,增加至25m1min。因此有學者提倡預先給患者服用碳酸氫鈉堿化尿液,收集午后24時(2h排出量)進行測定,以提高檢出率。 (5)對于阻塞性黃疸尿膽原減少的病人,不能使用干化學法進行測定,因為大多數(shù)尿液試劑帶都沒有設制檢測尿膽原陰性這一項。三、尿膽紅素、尿膽原檢查的臨床意義 膽色素(bilepigments)是指血紅素的一系列代謝產(chǎn)物,包括膽紅素、膽綠素、膽素原族和膽素族化合物。膽素原族和膽素族化合物種類較多,命名交叉重復,臨床上常簡化為:凡是糞便中的膽素原族化合物統(tǒng)稱為糞膽原;其氧化產(chǎn)物膽素族化合物統(tǒng)稱為糞膽素;存在于
30、尿液中的同類化合物,則相應地稱為尿膽原和尿膽素。 膽紅素是血紅蛋白的代謝產(chǎn)物,衰老紅細胞破壞后釋放出的血紅蛋白經(jīng)分解產(chǎn)生的膽紅素約占膽紅素總量的80,其余20來自其他血紅素蛋白,包括肌紅蛋白、過氧化物酶、過氧化氫酶及大多數(shù)細胞色素等的分解代謝。正常成人每天形成250300mg的膽紅素。 膽紅素在肝;脾及骨髓的網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞中產(chǎn)生。這些細胞將衰老的紅細胞破壞,釋出血紅蛋白,血素與其結合的珠蛋白分開。在微粒體血紅素加氧酶系催化下,血紅素原卟啉環(huán)上的。次甲基橋從碳膈子的兩側斷裂,從而產(chǎn)生相等克分子的CO、鐵及膽綠素。這一步驟是需氧反應,并需有NADPH的參刃。膽綠素進一步在可溶性的膽綠素還原酶(其輔酶
31、亦為NADPH)的催化下,迅速被還原為膽綠素,老者很快被還原為膽紅素。 在生理pH條件下,膽紅素是難溶于水的脂溶性物質。在網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞內(nèi)生成的膽紅素進入血液乏。即與血漿清蛋白或。球蛋白(以清蛋白為主)結合成復合體。這種結合又限制了膽紅素自由透過各種主物膜,使其對組織細胞不致發(fā)生毒性作用。正常人每100ml血漿中的血漿蛋白能與2025mg膽紅蓑豸合,而正常人血漿膽紅素濃度只不過110mg兒,所以正常情況下不致有大量游離膽紅素進入組豢而產(chǎn)生毒性作用。 咀紅素在血中以膽紅素一清蛋白的形式運輸,但因其尚未經(jīng)過肝細胞轉化結合,故稱為未結合膽紅囂或游離膽紅素。此種膽紅素隨血液循環(huán)至肝臟,很快就被肝細胞攝取
32、。一旦膽紅素進入肝細胞,就與韁胞中的膽紅素結合蛋白質結合,于是不再返回越出細胞膜,從而促使膽紅素不斷向肝細胞內(nèi)透入。進殲細胞內(nèi)的膽紅素主要與葡萄糖醛酸結合,生成葡萄糖醛酸膽紅素酯(在肝內(nèi)主要是1分子膽紅素結蘭:分子葡萄糖醛酸,形成雙葡萄糖醛酸膽紅素),也有少部分與硫酸根、甲基、乙酰基、甘氨酸或葡萄糖磺萋等相結合。此種膽紅素也稱為結合膽紅素。 結合膽紅素自肝細胞釋放至毛細膽管,成為膽汁的一種特殊組成成分。膽紅素隨膽汁排出腸道,自畫插末端起在腸道細菌作用下進行水解和還原反應,脫去了葡萄糖醛酸和加氫成無色的膽素原族化合櫥包括中膽素原、糞膽素原及尿膽素原等。所形成的膽素原族化合物基本上隨糞便排出(正常
33、成人每天入糞便中排出膽素原族化合物約40280mg),約有10一20可被腸粘膜重吸收,再經(jīng)門靜脈轉入肝鱉。構成膽素原的腸肝循環(huán),僅有極少部分膽素原進入體循環(huán)而由尿排出(正常成人每日從尿中排出尿躚原約0540mg)。進入血液的膽素原族約80與血漿蛋白質結合,僅有一小部分可以通過腎小球濾出。在腎近曲小管中可被重吸收一部分,在遠曲小管中又可排出一部分。尿中膽素原族的排出量與下列因素有關。1尿液pH 酸性尿中膽素原族趨于不解離狀態(tài),具脂溶性,易被腎小管重吸收,故排出量減少;反之,在堿性尿中膽素原族趨于解離狀態(tài),水溶性,不易被腎小管重吸收,故排出量增多。 2膽紅素的形成量 當膽紅素的來源增加,如患溶血性
34、黃疸時,隨膽汁排出的膽紅素增加,在腸道形成的膽素原族也增多,故重吸收并進入體循環(huán)而自尿中排出的膽素原族的量也增多;而當膽紅素形成減少,如再生障礙性貧血時,尿中膽素原族的排出量減少。3肝細胞功能 由于膽素原族的腸肝循環(huán)中逸入體循環(huán)的量直接取決于肝臟清除膽素原族的功能,因此尿中膽素原排出量增多,可較敏感地反映肝細胞損傷。臨床經(jīng)驗表明,在病毒性肝炎早期未出現(xiàn)黃疸之前往往已可發(fā)現(xiàn)尿中膽素原族增多。4,膽道梗阻 患梗阻性黃疸時,膽紅素不能順利排入腸腔,膽素原族形成減少,尿中膽素原族的量也相應減少;在膽道完全梗阻時,尿中膽素原族完全消失。 正常人血漿中膽紅素的總量不超過10mg幾,其中未結合膽紅素占45。
35、膽紅素代謝異常而致體內(nèi)積蓄,遂成黃疸,其特征為血漿中膽紅素水平升高,皮膚、鞏膜及粘膜黃染。黃疽大致分成三大類。 (1)肝前性黃疸 或稱溶血性黃疸,系敗血癥、蠶豆病、瘧疾、異型輸血等使紅細胞大量破壞,血紅蛋白釋出過多所致。 (2)肝原性黃疸 或稱肝細胞性黃疸,是指在感染(如病毒性肝炎)、中毒及肝硬化等肝病時,由于肝細胞內(nèi)或肝內(nèi)毛細膽管廣泛性病變,使肝細胞對膽紅素攝取、結合、轉運及排泄障礙所致。 (3)肝后性黃疸 或稱梗阻性黃疸,由于結石、腫瘤或先天性膽道閉鎖等原因造成總膽管梗阻所致。(2)肝原性黃疸 或稱肝細胞性黃疸,是指在感染(如病毒性肝炎)、中毒及肝硬化等肝病時,由于肝細胞內(nèi)或肝內(nèi)毛細膽管廣
36、泛性病變,使肝細胞對膽紅素攝取、結合、轉運及排泄障礙所致。5、已知的對Herlich有干擾的物質對此實驗均有干擾,某些藥物如非那吡啶可在酸性介質中顯示紅色,導致假陽性。6、試紙塊反應能隨著溫度的升高而增強,反應最佳溫度為2226.甲醛可以抑制反應。7、在低PH值情況下,一些藥物代謝會出現(xiàn)假陽性結果,如吲哚硫酸等。第七節(jié) 尿蛋白測定的臨床意義尿液蛋白質的測定方法采用的是指示劑蛋白質誤差法,即在一定的條件下(PH為.時),溴酚藍產(chǎn)生出陰離子,與帶陽離子的蛋白質(主要是白蛋白)結合發(fā)生顏色變化,參考范圍:尿蛋白定性試驗一般為陰性。(一)試紙塊對白蛋白的反應,比對其他蛋白如球蛋白、血紅蛋白、本周蛋白、
37、黏蛋白要靈敏,因此陰性結果并不能排除尿中這些蛋白的存在。 (二)生理性蛋白尿或無癥狀性蛋白尿 生理性蛋白尿,指泌尿系統(tǒng)并無器質性病變,而是由于各種體內(nèi)環(huán)境因素只怔常機體的影響所導2的尿蛋白含量增多,可分為功能性蛋白尿和體位性(直立性)蛋白尿。 1功能性蛋白尿功能性蛋白尿是指機體劇烈運動、發(fā)熱、低溫刺激、精神緊張、交感神經(jīng)興奮等所致的,暫時性、輕度白尿。其形成機理可能是由于上述諸因素使腎血管痙攣或充血,導致腎小球毛細血管壁的通透性增一旦誘發(fā)因素消失,尿蛋白也迅速消失,此類蛋白尿定性試驗一般不超過陽性(牛),定量試驗5g24h尿,多見于青少年。2體位性蛋白尿體位性蛋白尿又稱直立性蛋白尿,是指由于直
38、立位或腰部前突時引起的輕度或中度蛋白尿。其特點ZI司尿蛋白定性為陰性,起床活動若干時間后出現(xiàn)蛋白尿,再平臥后又轉為陰性。常發(fā)生于青少年,一直年齡增長而消失。此種蛋白尿的發(fā)生機理尚不完全明了,可能與直立時前突的脊柱壓迫腎靜脈;直才由于腎向下移動,腎靜脈被動扭曲,而使腎臟處于暫時瘀血狀態(tài),與淋巴血流受阻有關。此類蛋白尿試驗陽性可達什,甚至卅,但臥床休息后可消夫。(三)病理性蛋白尿:病理性蛋白尿指泌尿系統(tǒng)因器質性病變,尿內(nèi)持續(xù)出現(xiàn)蛋白而盲。導致蛋臼尿的原因很多,通??傻鬄橐韵?種。1腎小球性蛋白尿腎小球性蛋白尿是由于腎小球濾過膜受損而使通透性增加,濾出較多的血漿蛋白,超過了腎小管重工能力。此型蛋白尿
39、最為常見,蛋白尿以白蛋白為主,也含有一些分子量較大的球蛋白,分子量4萬以吁蛋白質含量極少。2腎小管性蛋白尿腎小管性蛋白尿是由于炎癥或中毒引起近曲小管對低分子量蛋白質的重吸收障礙而導致的以低分曼蛋白質為主的蛋白尿。此類的特點是以p:微球蛋白、溶菌酶等增多為主,白蛋白正?;蜉p度增多。3混合性蛋白尿混合性蛋白尿是由于腎病同時累及腎小球和腎小管而產(chǎn)生的蛋白尿。此類特點是白蛋白和pz微球三司時增多。4溢出性蛋白尿溢出性蛋白尿主要是血循環(huán)中出現(xiàn)低分子量蛋白質(如游離血紅蛋白、肌紅蛋白)或本周氏蛋白過寄小球濾過及腎小管重吸收功能均正常而溢出尿液中。此類主要見于骨髓瘤、骨骼肌嚴重創(chuàng)傷及大嘰梗塞等。5組織性蛋白
40、尿組織性蛋白尿是指在尿液形成過程中,腎小管代謝產(chǎn)生的和腎組織破壞分解的蛋白質,以及炎癥或嚴刮激泌尿系統(tǒng)分泌的蛋白(如TatumHorsfall糖蛋白等)。上述蛋白尿可分為腎前性、腎性及腎后性蛋白尿。本周蛋白尿、血紅蛋白尿、肌紅蛋白尿、溶菌酶尿籬哥前性蛋白尿。腎性蛋白尿見于腎小球或腎小管疾病,可因炎癥、血管病(高血壓病)、中毒(藥物、重曝車)等原因引起。腎后性蛋白尿則見于腎盂、輸尿管、膀胱、尿道的炎癥、腫瘤、結石。動態(tài)觀察尿蛋,對上述疾病的診斷、病情觀察、判斷療效和及時了解是否出現(xiàn)藥物副作用等均有一定意義。 (四)蛋白尿的分類 至白尿可按尿中蛋白含量的多少分為輕、中、重三類。輕度蛋白尿:尿蛋白含
41、量<05g24h,可見苷,管及腎小球病變的非活動期、腎盂腎炎、體位性蛋白尿等;中度蛋白尿:尿蛋白含量在o54;乙除腎炎外,見于高血壓腎動脈硬化、多發(fā)性骨髓瘤等;重度蛋白尿:尿蛋白>4g24h,可見于噔蘭腎小球腎炎及紅斑狼瘡性腎炎、腎病綜合征等。以上分類是相對的,當病變同時累及腎小球及腎虧;乙低分子量、高分子量蛋白質均增多,此時動態(tài)觀察24h尿蛋白量有助病程觀察及療效判斷。(五)蛋白尿的選擇性叫。年Blainly等首先提出了蛋白尿選擇性的概念作為判斷腎小球損傷嚴重程度的指標。選擇性學法測定尿中的中分子量蛋白質和高分子量蛋白質的比值來確定的。有關選擇性蛋白尿、非選擇性蛋白尿及選擇性蛋白
42、尿指數(shù)(SPl)將在以下章節(jié)介紹。第八節(jié) 尿糖測定嚴格地說,尿糖測定應該是尿葡萄糖測定。正常人尿內(nèi)可有微量葡萄糖,尿內(nèi)含糖量為o565mmol24h,定性試驗為陰性。尿糖定性試驗常用班氏法、葡萄糖氧化酶法和干化學法。 一、干化學法測試的原理 干化學試劑帶法測定尿糖的膜塊中主要含有葡萄糖氧化酶、過氧化物酶和色源及其他物質。不同家采用色源有異(表313),主要有兩類:采用碘化鉀作色源(如美國Ames公司的Clinitek“200型采用聯(lián)甲苯胺作色源(如德國寶靈曼公司的MiditronR型)。測定尿糖的原理是:膜塊內(nèi)葡萄糖氧化酶(GOD)作用于尿液中葡萄糖,使其形成葡萄糖醛酸和過氧化氫(H20:),
43、后者再被過氧化氫酶(POD)售化釋放出O,后者使色源呈現(xiàn)不同的顏色變化。強氧化劑可出現(xiàn)假陽性。三、尿糖測定的臨床意義尿糖一般是指尿液中葡萄糖而言,其來源于血液中的葡萄糖。正常人腎臟的腎糖閾值是90180mgd1)。一般情況下血糖濃度相對比較恒定,空腹血糖為444666mmolL,進食必一999mmo兒,由腎小球濾過的葡萄糖幾乎全部可被腎小管重吸收,只有極微量部分由尿北為056167mmol,濃度為028083mmolL,用任何常規(guī)性檢查均不能測出。葡萄糖是否會出現(xiàn)于尿中,一是要看血糖濃度,二是要看腎小管重吸收的能力,即腎糖閾值。 尿中是否出現(xiàn)葡萄糖取決于三個因素:C動脈血液由葡萄糖濃度;每分鐘
44、流經(jīng)腎小球的血漿量;近端腎小管上皮細胞重吸收葡萄糖的能力,即腎糖團:弩糖團可隨腎小球濾過率和腎小管葡萄糖重吸收率的變化而變化。當腎小球濾過率減低時,可導致·腎糖闊·提高;而腎小管重吸收率減少時,則可引起腎糖閾降低。葡萄糖尿除可因血糖濃度過高引起外,也可因腎小管重吸收能力降低引起,后者血糖可正常。 (一)生理性糖尿生理性糖尿為一過性糖尿,是暫時性的,排除生理因素后恢復正常。1飲食性糖尿 短時間內(nèi)食用大量糖所致,糖的同化存在著個體差異,但健康人一次進食葡萄糖200g以上即可產(chǎn)生糖尿。 , 2應急性糖尿 又稱一過性糖尿。原因是顱腦外傷、腦血管意外、情緒激動等情況下,延腦血糖中樞受
45、刺激,導致腎上腺素、胰高血糖素大量釋放,因而可出現(xiàn)暫時性高血糖和糖尿。 3妊娠性糖尿 以妊娠中末期多見,由于腎小球濾過增加,腎小管的重吸收相對減少;另外,妊娠末期和哺乳期間可因乳腺產(chǎn)生乳糖過多而至乳糖尿。 (二)病理性糖尿 1真性糖尿 真性糖尿是由于胰島素絕對或相對不足,血糖濃度超過腎糖閾值而從尿中排出所致。尿糖檢查不僅是診斷糖尿病的重要依據(jù),也是指導臨床醫(yī)生胰島素使用量的依據(jù)之一,判斷療效的主要指標之一。但如果并發(fā)腎小球硬化癥,則腎小球濾過減少,腎糖閾升高,此時血糖雖已超過÷般的腎糖閾值,尿糖卻表現(xiàn)為陰性。但于進食后2h由于負載增加,則可見血糖升高,尿糖陽性。對于此類糖尿病患者,不
46、但需同時做空腹血糖、尿糖檢查,進食后2h尿糖檢查,還需進一步做糖耐量試驗等檢查,以明確診斷。 2腎性糖尿 · 。 腎性糖尿是由于腎小管對葡萄糖的重吸收功能減退,腎糖閾降低而引起的糖尿。如家族性糖尿(先天性近曲小管重吸收功能缺陷),無明顯癥狀。新生兒糖尿是因近曲小管功能尚未完善。以上均應與真性糖尿病相區(qū)別,其鑒別要點為腎性糖尿時空腹血糖及糖耐量試驗結果均正常。 3其他糖尿 生長激素、甲狀腺素、腎上腺素、皮質醇、胰高血糖素都可使血糖濃度上升而引起糖尿。甲狀腺功能亢進,甲狀腺素分泌過多,使消化道腸壁的血流加速和糖的吸收增快,因而在飯后血糖增高,出現(xiàn)糖尿;肢端肥大癥,可因生長激素分泌旺盛而致
47、血糖升高,出現(xiàn)糖尿;嗜鉻細胞瘤,可因腎上腺素和去腎上腺素大量分泌,致使磷酸化酶活性增強,促使肝糖原降解為葡萄糖,引起血糖升高而出現(xiàn)糖尿;興氏(Cushing)綜合征,可因皮質醇分泌增多,使糖原異生旺盛,抑制己糖激酶和對胰島素作用,因而二理糖尿。此外,肝功能障礙時血糖升高也可見糖尿。第九節(jié) 尿比重(比密)測定尿液比重(比密)(specificgravity,SG)是指尿液與純水的重量之比,是尿中溶解物質濃度的指標。溶解于尿液中的固體物質,主要是尿素和氯化鈉,前者反映食物中的蛋白質含量,后者反映食物中的含鹽量,在正常生理情況下,尿比重與排出的水分、鹽類和尿量有關。尿比重測定可以估計腎臟濃縮功能。由
48、于尿比重還受年齡、飲水量、出汗等因素的影響,故多次測定比單次測定更能反映腎臟濃縮功能。 一、干化學法測試的原理 干化學試劑帶法測定尿比重的膜塊中主要含有兩種成分(表32):一種是電解質共聚體,即甲氧乙面丁烯二酸(methoxyethylenemaleic acid)共聚合體(圖31);另一種是酸堿指示劑溴麝香草酚藍(PH6.o76)。除這兩種物質外,還含有其他物質如緩沖劑等。其測試原理模式見圖32。二、干化學法尿比重檢查注意事項 (1)尿液標本必須新鮮,不能含有強堿、強酸等物質(如奎寧、嘧啶等藥物),這些物質的存在都會直接影響試劑帶測定尿比重。當尿液pH70時,應該在干化學法測定結果的基礎上增
49、加0005作為由強堿尿損失的補償。其補償機理是:當尿液pH7o時,尿液必將存在著氫氧根離子(OH),它的存在會中和掉由尿液離子成分使電解質聚合體釋放出來的氫離子(H),導致氫離子不與酸堿指示劑反應,結果偏低。在強酸性尿液時,干化學法測定尿比重結果明顯偏高,但在一般情況下尿液不可能呈強酸性,所以影響不如堿性尿那么直接。表33顯示不同尿pH對尿比重的影響。(2)尿比重計法、折射儀法和干化學法是采用不同的原理測定尿液比重,測定的結果必將有一定的定鮑差距,如尿液中非離子型化合物(如葡萄糖、造影劑等),可導致比重計和折射法測定結果偏 (3)尿蛋白濃度增高時,由于蛋白分子本身是兩性電解質,即本身既有電荷又
50、有固體量,所以對三下按都有影響,以干化學法最為明顯,折射儀法次之,。比重計法影響最小。教科書規(guī)定,每增加logL質,折射儀法應在原測定值的基礎上減去o005,比重計法碎去0003。尿蛋白干擾干化學法測定原指示劑呈現(xiàn)顏色而使結果偏高。表35顯示不同濃度尿蛋白對尿比重的影響。(4)干化學法不宜用于新生兒尿比重檢查,這可能是由于新生兒尿比重太低,僅在1002004之間的緣故。 (5)由于干化學法所測尿比重結果間隔較大,不能反映較小的比重變化,因此只能用于過高或過低汞比重病人的篩選,對于病理性特別是系統(tǒng)觀察的病例仍以折射儀法更為理想。NCCLS建議以折射儀法作為干化學法測定尿比重的參比方法,浮標法(比
51、重計法)測定尿比重不再使用。折射儀法可用去離子水或蒸餾水和已知濃度溶液監(jiān)測其測量結果是否準確,如蒸餾水比重應為000;0513mol兒氯化鈉溶液,比重應為1015;0856mol兒氯化鈉溶液,比重應為1022';263mol兒蔗糖溶液,比重應為1034。(6)尿比重試紙不受尿中非離子物質如尿素、葡萄糖等的影響,高蛋白、高PH或低PH值會影響測定結果,高PH值情況下,比重結果偏低,反之偏高。 三、尿比重檢查的臨床意義 尿比重的參考值在10151025之間,早晨第一次尿標本的比重最高,通常>1020;在多次隨機尿標本中,尿比重在1025以上,提示腎濃縮功能正常。(1)尿比重的高低主要
52、取決于腎臟的濃縮功能,它與尿內(nèi)所含溶質的多少成正比,而與尿量成反比,并與尿液的顏色深淺平行。尿比重增高:表示尿液濃縮,見于急性腎炎、蛋白尿、糖尿病、高熱、大量出汗、脫水、心功能不全、流行性出血熱少尿期等。尿比重減低:表示腎臟濃縮機能減退,見于尿崩癥、慢性腎炎、精神性多飲多尿癥、原發(fā)性醛固酮增多癥、流行性出血熱多尿期及恢復期。尿比重比較固定:尿比重變化不大,一般固定在1010左右,呈等張尿,表示腎實質有嚴重損害。(2)用尿比重和尿量的動態(tài)變化來監(jiān)測腎結石病人的尿物理變化,可用于指導病人飲食習慣,預防病人結石的再次形成。(3)尿比重的高低不僅直接反映腎臟濃縮功能,而且還能監(jiān)測全自動尿沉渣分析儀對紅
53、細胞形態(tài)析是否受尿比重的影響(尿比重偏低,可使紅細胞形態(tài)由均一性向多形性轉變)。第十節(jié) 尿PH檢查的原理是采用酸堿指示劑法,其測試膜塊區(qū)含有甲基紅(pH4.66.2)和溴麝香草酚藍(pH6.07.6)。兩種酸堿指示劑適量配合可反映尿pH4.59.0的變異范圍。二、干化學法檢查尿pH的注意事項 (1)檢測時尿標本必須新鮮,放置過久細菌分解尿液成分可導致pH改變,大多數(shù)細菌如變形等,分解尿素產(chǎn)生氨,可使尿液呈堿性;但在少數(shù)情況下,細菌也分解尿液成分產(chǎn)生酸性物質,使尿q偏酸。(2)當腎臟分泌的尿液含有過多的碳酸氫鹽和碳酸緩沖對時,如果尿液放置時間過久,尿液中?氧化碳會自然擴散到空氣中,使尿pH增高。
54、3)在測定過程中,應嚴格按規(guī)定的時間將試劑帶浸泡尿液標本中,浸尿時間過長,尿pH呈減低4)在使用多項試劑帶進行測定時,要認真閱讀使用說明,嚴格按說明書進行操作,試劑帶上不能浸量的尿液標本,防止試劑帶相互之間的“溢出"(runover)現(xiàn)象,影響尿pH測定。5)尿液pH主要反映腎臟在維持血漿和細胞外液正常氫離子濃度方面的能力,而干化學法測定只4半定量的實驗結果。因此在臨床觀察結果時,不要單從尿pH測定值分析,要結合臨床其他資料駐數(shù)據(jù),綜合分析才能得出正確的判斷。方法原理:干化學法尿pH檢查的原理是采用酸堿指示劑法,其測試膜塊區(qū)含有甲基紅(pH4.66.2)和溴麝香草酚藍(pH6.07.
55、6)。兩種酸堿指示劑適量配合可反映尿pH4.59.0的變異范圍。臨床意義:1、尿pH檢測了解體內(nèi)酸堿平衡情況在代謝性酸中毒、痛風、糖尿病、腎結石、型腎小管酸中毒、白血病和壞血病時,常有強酸性尿。堿中毒及原發(fā)性醛固酮增多癥、腎小管酸中毒(、型)、泌尿系變形桿菌感染時,可呈堿性尿。2、觀察尿pH變化,指導臨床用藥,預防腎結石的形成和復發(fā),減輕泌尿系微生物的感染研究證明,某些腎結石的形成與尿pH變化密切相關,如在尿pH降低時容易形成酸性結石;而在尿PH增加時容易形成堿性結石。因此,臨床對于某些患者有形成酸性結石(如尿酸和胱氨酸結石)傾向S時如果給藥使尿pH保持堿性或至少尿pH在6.5以上,就不會形成
56、酸性結石。相反,臨床對于某些患者有形成堿性結石(如磷酸鈣結石)傾向時,如果給藥使尿pH保持酸性,也就不會形成堿性結石。此外,堿性尿可促進某些微生物的生長發(fā)育,同樣使尿液呈酸性也可預防細菌的生長,減少泌尿系統(tǒng)的感染。尿pH檢測不僅可了解體內(nèi)酸堿平衡情況,還可監(jiān)控尿pH變化對其他膜塊區(qū)反應的干擾作用,如尿蛋白測定、尿比重檢查受尿pH影響很大,因此,當尿pH明顯升高或減低時,要考慮同時檢測尿比重、尿蛋白結果:是否可靠或用其他方法進行檢測。 第三章 干化學法測定尿蛋白的注意事項干化學法測定尿蛋白操作簡單快速、敏感性高,但該法是利用尿蛋白與某些染料相結合而產(chǎn)生的歹色變化來測定蛋白含量,因此在使用中,無論用哪一種方法進行尿蛋白定性檢查,都必須重視下列問題。(一)尿液pH 尿液標本必須新鮮,變質的尿液會使尿pH發(fā)生變化,或者尿液本身過酸、過堿都會影響實驗結吳當病人服用奎寧、奎寧丁和嘧啶等藥物時,引起尿液呈強堿尿(pH9o),超過了試劑帶本身的緩沖耄力,會使干化學法出現(xiàn)假陽性結果;而用磺基水楊酸法和加熱乙酸法作尿蛋白定性時,因尿液過堿,遠熏蛋白質的等電點出現(xiàn)假陰性結果。鑒別方法是用稀醋酸將尿液pH調至56后再進行實驗,借以區(qū)爺是否由于強堿尿而導致干化學法的假陽性,或磺基水楊酸法和加熱乙酸法的假陰性。同樣,當尿滯pH<30時,也會引起尿蛋白定性試驗的假陰性。表38顯示不同pH
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