紫外使用方法

1、UVPROBE簡易操作手冊第1章：初始畫面第2章：裝置的連接第3章：測定第4章：光譜測定方式 4-1參數和顯示的設置 4-2光譜測定 4-3數據處理功能 1波長范圍和縱軸范圍的變更 2峰谷檢測 3光譜線色彩的改變等 4面積計算 5數據計算 6其他第5章：光度分析方式 5-l參數和顯示的設置 5-2定量測定第6章：動力學方式第1章：初始畫面啟動UVPROBE以后，出現(xiàn)上示的對話窗口，需要輸入設定的用戶名和密碼，然后點擊確定健。第2章：裝置的連接首先從下拉式菜單的儀器項上追加需要的儀器。操作完畢如下圖所示，加裝了UV-1650、UV- 2550、UV- 2450以及UV- 3150；使用時點擊實際

2、連接的儀器，例如下圖的UV- 2450，然后點擊上圖的連接鍵，這樣裝置與PC機連接（當然，中間的通訊電纜的連接、通訊口的指定等都是必須的，此處不再贅述）并開始下示的初始化面。初始化大約需要5分鐘左右，進行一系列的檢查和初置，如一切順利通過就可以開始測定。 第3章：測定首先選擇測定的方式，在主菜單上能發(fā)現(xiàn)右圖所示的各鍵，自左至右分別為：1報告生成器：用于制作各種格式的報告。2動力學測定方式：一般測定吸收值隨時間的變化，通常用于酶反應隨時間的變化。3光度測定（定量）方式：可進行多波長、單波長、峰高或峰面積定量。校準曲線可使用多點、單點、K因子等方法。由于具有自定義方程的功能，DNA/蛋白質測定等以

3、前需要特殊選購的軟件才能進行的工作，使用UVPROBE可自編程序進行測定。4光譜測定方式：可進行紫外可見區(qū)的光譜測定。 第4章光譜測定方式4-1參數和顯示的設置1參數的設定點擊菜單欄上的鍵，即可出現(xiàn)如下圖所示的選擇測定條件的畫面：在此對話框中可選擇波長測定的范圍、掃描的速度、采樣間隔等條件。點擊圖中試樣準備標簽，可輸入重量、體積、稀釋因子、光程長等信息。點擊圖中儀器參數標簽，可選擇測定種類（吸收值、透射率、能量、反射率）以及通帶（狹逢）等條件。但是UV-16001700的通帶分別固定為2nm/lnm不可選擇。如果使用多聯(lián)地或注射式抽吸裝置等附件時，可點未附件標簽，在此設置各附件相關的參數條件。

4、2，顯示設置點擊主菜單上的鍵，可分別開關圖象面板（圖中的左鍵）、數據處理面板（中）以及方法面板（右鍵）。數據處理面板方法面板圖象面板4-2光譜測定 首先點擊上圖的進行基線校正，然后點擊波長設置到500nm，再點擊自動調零。為何要如此做？原因非常簡單，由于一般的分光光度計的能量在500nm左右最強，在此自動調零可得到最正確的基線。通常上述操作在開機后進行一次就足夠了。此后，設置樣品點擊鍵即可開始測定。4-3數據處理功能1波長范圍以及縱軸范圍的變更變更范圍十分簡單，只需在點擊圖象上最大和最小的位置，然后輸入適當的數字即可。這表示可以隨意地放大和縮小圖象的標尺。點擊需要變更的位置，然后輸入需要的數值

5、就可改變范圍得到新設置范圍的光譜此外，在圖象上點擊鼠標右鍵，在出現(xiàn)的快捷菜單上選擇自動標尺也能使標尺設置到適當的大小。2峰谷檢測點擊主菜單上的數據處理峰值檢測，出現(xiàn)如下畫面。此處的數據處理面板中出現(xiàn)峰谷的表，需要說明的是該結果使用了上一次設置的檢測條件，當然用戶還可根據自己的需要加以改變。如果圖中有多條光譜的話，這些光譜的峰谷表都將出現(xiàn)在數據處理的面板中，點擊表格下的標簽，即可切換。在數據處理面板上點擊鼠標右鍵，出現(xiàn)快捷菜單，在此菜單中可選擇是否在圖象中顯示峰谷的標記等等，左下圖，在快捷菜單上點擊屬性，出現(xiàn)右下圖。 在屬性對話框中可設置閾值，改變峰谷檢測的靈敏度。如果點未峰的標簽，出現(xiàn)下圖：用

6、戶可選擇在圖中標注的內容和形式。下圖是上述選擇后的圖象。圖中峰谷都有編號，而且分別用向下和向上的箭頭表示其位置。3光譜顏色的變更在圖象面板上點擊鼠標右鍵，出現(xiàn)如左下菜單，如果在其中選擇自定義后，將出現(xiàn)右下圖： 由右上圖可見，光譜的顏色、線的類型、線的粗細等等均可自由地設置，十分方便。如果在快捷菜單上選擇十字游標，光譜面板中出現(xiàn)十字游標，可自由移動，便于讀取峰谷的位置及強度。如果選取圖例的話，圖中就可出現(xiàn)光譜的圖例。如下圖：4面積計算如果要計算光譜的面積，請在主菜單中選擇數據處理面積計算讀數條上圖是讀數條，左右移動決定光譜面積計算的范圍，是計算結果的顯示。上圖中積分區(qū)域的圖象格式及色彩可以改變，

7、點擊圖中所指的區(qū)域出現(xiàn)下圖：在此，即可選擇顏色和網格等格式。面積計算可反復進行，沒有限制。如果計算面積的區(qū)域想刪除，可在欲刪除的區(qū)域中點擊鼠標右鍵，從出現(xiàn)的菜單中選擇刪除。此外，上圖中面積計算到了基線，如果希望改變，從菜單上選擇屬性：在基線到零的選擇框中取消標記，圖象和數據處理面板上的結果都將改變。5數據處理測定得到的光譜可進行各種計算。從主菜單上選擇數據處理計算即可：如果圖象上不止一條光譜，需先選擇需要處理的數據集，然后選擇運算的算符及常數，最后點擊計算鍵。輸入保存結果的文件名，點擊確定鍵，新的經過計算的光譜（數據集）將重疊顯示在圖象面板中。 6其他選點檢測選點檢測可以從已經得到的光譜中選取

8、任意多個點的數據，選擇時只要拖動讀數條或在下圖的波長列中手動鍵入波長值即可。數據打印測定的光譜可使之數字化（表格化）表格的數據與實際采集的范圍和間隔相同。如果想改變，點擊鼠標右鍵調出屬性菜單，然后可設置表格的范圍以及顯示的間隔。此外，無論是數據面板上的表格或圖象面板內的光譜都可用復制粘貼的辦法將數據或圖象轉移到其他市售的軟件中去，例如MS WORD和Excel等。如果打開的光譜較多，既可以全部一起顯示也可以選擇顯示，選擇時在數據面板上點擊鼠標右鍵，然后選擇屬性，在此取舍顯示與否。見下圖： 先點擊要隱藏的數據集，然后按隱藏鍵即可。注意，此操作只從圖象上消除了該數據集，實際上數據集仍然在計算機的內

9、存中。圖象面板上圖象的刪除欲刪除圖象面板中的圖象，先在主菜單上選擇文件屬性。得到下圖：改變坐標軸的顯示位數選擇顯示設置出現(xiàn)下圖，可在圖中的劃圈部分改變位數。第5章光度測定方式5-l參數及顯示的設置1參數的設置點擊菜單欄中的鍵，出現(xiàn)下圖：測定的方式選擇測定波長的列名選擇和登錄波長登錄后的波長顯示區(qū)此處顯示的波長類型是“點”表示測定高度，如果選擇的是范圍，則需輸入起始和結束波長，并可選擇最大、最小、峰、谷或面積等作為定量的依據。無論如何選擇，波長都是必須的，并要加入以后才有效。2顯示設置在某單欄上有右列各鍵，點擊以后分別出現(xiàn)標準表（最左）、樣品表（左2）、工作曲線圖（右2）和樣品圖（最右）。樣品圖

10、工作曲線樣品表標準表5-2定量測定1光度測定首先如前所述，選擇了點及波長，然后在方法中選擇校準，在此決定用工作曲線法定量，并選擇多點、單點或K因子法等。關閉方法畫面后出現(xiàn)如下圖象進行定量測定也需要基線校正和自動調零，方法如前面所述。此后，樣品室內逐個放入標準，點擊上圖下方的讀數鍵即可。注意，無論是測定標準或未知樣品，必須輸入名稱才有效。標準測定完畢，工作曲線自動顯示。接下去就可測定未知樣品的濃度了。有時不測定濃度，只測定某些波長的讀數，則在校準方法中選擇“原始數據”，在登錄時選擇若干需要的波長，即可測定各波長的讀數。在工作曲線圖象上點擊鼠標右鍵，選擇屬性，可從該圖象上得到許多有用的信息，見下圖

11、：只需在這些顯示的項目中做標記，相應的信息即出現(xiàn)在工作曲線圖象的左下方。見下圖的劃圈部分：2K因子法所謂K因子法實際上可稱為已知工作曲線法（而且不局限于直線），即工作曲線回歸方程的系數和次數已知，故而只要輸入這些系數以及工作曲線的次數。這一方法對工作曲線較為穩(wěn)定的日常分析非常有效。設置方法見下圖：第6章動力學6-1參數和顯示的設置1參數的設置在菜單欄中點擊方法鍵，得到如下圖象：此處的計時方式選擇的是“自動”，時間總量中需手動設置測定的時間。由于是自動計時方式，所以采樣步長（圖中為時間周期）和讀數次數將根據時間總量自動設置。此外可設置波長以及活度計算的開始和結束時間。設置大短的活度范圍會出現(xiàn)錯誤信息。相反，如果計時方式選擇的是手動的話，則可輸入時間周期和讀取次數，而時間總量（測定時間）會根據輸入的時間周期和讀取次數自動計算得到?；疃确秶糜诿阜磻S時間的變化，如果單純進行時間掃描的話，則可不考慮活度范圍。測定的波長欄內可選擇單波長