《生物化學(xué)》實驗教學(xué)指導(dǎo)

1、生物化學(xué)實驗教學(xué)大綱課程編號：課程名稱：（生物化學(xué)/biochem istry ）課程總學(xué)時：72實驗總學(xué)時：18實驗課性質(zhì)：（獨立設(shè)課）適用專業(yè)：五年制中醫(yī)、針灸推拿專業(yè)承擔(dān)實驗室（或教研室）：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院西醫(yī)綜合實驗室一、課程實驗教學(xué)簡介生物化學(xué)實驗教學(xué)作為醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、生物學(xué)及相關(guān)學(xué)科的必設(shè)環(huán)節(jié),它應(yīng)用化學(xué)的 方法和手段來研究生物有機體的物質(zhì)組成及變化。其作用是使學(xué)生在生化實驗技術(shù)、儀 器的使用、分析和解決問題能力等方而冇所捉高；同時使學(xué)生掌握一般生物化淫實驗屮 的實驗原理和操作方法；在實驗過程中可使學(xué)生的創(chuàng)新能力和綜合素質(zhì)得以提高，并結(jié) 合理論課所學(xué)內(nèi)容相應(yīng)地安排實

2、驗課，力求實驗內(nèi)容與理論教學(xué)內(nèi)容相協(xié)調(diào)。二、課程實驗教學(xué)的目的和基本要求生物化學(xué)是一門實驗性學(xué)科，其所有知識均來口于實驗。本課程著眼于學(xué)生學(xué)習(xí)和 掌握生物化學(xué)課程的基本理論、基本知識以及實驗技能，培養(yǎng)學(xué)生具冇初步分析問題和 解決問題的能力。生物化學(xué)實驗教學(xué)以學(xué)生在實驗室實踐為主，發(fā)揮學(xué)生的主體作用，教師只作必要 的實驗原理和注意事項的講解，并注意引導(dǎo)學(xué)生拓展所學(xué)的內(nèi)容，通過實驗內(nèi)容的學(xué)習(xí) 了解生物化學(xué)技術(shù)的原理和操作要點，捉高學(xué)生的實踐能力和創(chuàng)新能力。三、學(xué)生應(yīng)掌握的實驗技術(shù)和基本技能1. 熟練掌握以下各項生物化學(xué)實驗的基本操作技能：各種常用玻璃儀器的洗滌和使用：滴管、吸量管、微量加樣器的使用

3、。離心機、分光光度計、紫外檢測儀、ph值試紙、層析系統(tǒng)、凝膠成像系統(tǒng)、搖床、 水浴箱、電泳儀系統(tǒng)等的使用。各種試劑的配制：2. 掌握以下各項生化實驗基本技術(shù)和基本原理蛋口質(zhì)的顏色反應(yīng)、比色分析法和紫外分光光度法測定蛋口質(zhì)的含量。醋纖膜電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血漿脂蛋白 血液葡萄糖的測定方法。酶的性質(zhì)以及酶促反應(yīng)動力學(xué)有關(guān)方法（底物濃度、ph對反應(yīng)速度的影響）。 質(zhì)粒dna的抽提與鑒定的方法。3. 熟悉生物化學(xué)實驗技術(shù)的有關(guān)理論分光光度法及比色分析法基本原理。離心理論。層析技術(shù)理論。電泳技術(shù)理論。核酸朵交、基因重組等部分分了生物學(xué)實驗技術(shù)理論。生物大分子分離、純化的一般實驗設(shè)計相關(guān)理論。 實

4、驗誤差、數(shù)據(jù)處理、有效數(shù)字相關(guān)理論。精密度、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)、回收率概念及理論。四、實驗項目名稱、性質(zhì)和學(xué)時分配序號實驗項冃名稱實驗性質(zhì)學(xué)時數(shù)必做/選做01酶的性質(zhì)驗證性、應(yīng)用性3必做02血糖測定（福林一吳法）驗證性、應(yīng)用性3必做03血清總膽固醇的測定（硫磷鐵法）驗證性、應(yīng)用性3必做04轉(zhuǎn)氨基作川（紙層析法）驗證性、應(yīng)用性、綜合性3必做05酵母rna的提取和鑒定驗證性、應(yīng)用性3選一06m一一酚法提取純化重組大腸桿菌 核酸及瓊脂糖凝膠電泳鑒定、紫外分 光光度法鑒定及定量驗證性、應(yīng)川性、綜合性307血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳驗證性、應(yīng)用性3必做注：實驗性質(zhì)是指驗證性、應(yīng)用性、設(shè)計性、綜合性、創(chuàng)新性實

5、驗等。五、各單項實驗的具體內(nèi)容和要求（包括實驗分組人數(shù)要求）:（-）實驗名稱：酶的性質(zhì)實驗內(nèi)容：1、酶的專一性2、ph對酶促反應(yīng)速度的影響3、溫度對酶促反應(yīng)速度的影響4、激活劑對酶促反應(yīng)速度的影響5、酶的競爭性抑制實驗?zāi)康囊螅?、掌握通過實驗現(xiàn)象了解酶的性質(zhì)的定性實驗技能2、通過蔗糖酶和唾液淀粉酶的催化反應(yīng)特點熟悉酶作用專一性原理3、通過ph和激動劑對唾液淀粉酶活性的影響加深理解酶促反應(yīng)動力學(xué)理論4、通過丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制加深理解酶的競爭性抑制作用理論（二）實驗名稱：血糖測定（福林一吳法）實驗內(nèi)容：1、制備無蛋白血濾液2、測血糖3、計算結(jié)果實驗?zāi)康囊螅?、掌握血糖測定（福林一吳法）

6、的方法。2、熟悉分光光度計的原理和基本操作方法3、了解其他幾種血糖測定方法的原理4、通過血糖測定實驗了解臨床檢測糖代謝是否止常的方法（三）實驗名稱:血清總膽固醇的測定（硫磷鐵法）實驗內(nèi)容：1. 制備膽固醇的乙醇抽提液2比色法測定膽固醇標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液和乙醇抽提液的吸光度。三支，編號。3.結(jié)果計算實驗?zāi)康囊螅?、掌握血清總膽固醇的測定（硫磷鐵法）的方法。2、進一步熟悉分光光度計操作方法。3、熟悉離心技術(shù)原理和操作方法。4、通過血清總膽同醇的測定實驗了解臨床檢測血清總膽固醇的意義。（四）實驗名稱：轉(zhuǎn)氨基作用（紙層析法）實驗內(nèi)容：1、人白兔肌勻漿的制備（曲實驗室準(zhǔn)備室制備）2、傳氨基反應(yīng)3、氨基酸的紙層

7、析分析實驗?zāi)康囊螅?、掌握紙層析法分離分析氨基酸的方法2、通過實驗熟悉轉(zhuǎn)氨基作用的生化理論知識3、通過實驗了解層析技術(shù)的原理和應(yīng)用（五）實驗名稱：酵母rna的提取和鑒定實驗內(nèi)容：1. rna的提取2. rna的鑒定實驗?zāi)康囊螅?、掌握堿法提取rna的操作2、熟悉rna鑒定的原理和方法3、了解分離提純完整的rna分了的方法及操作注意事項（六）：肌酚法提取純化重組大腸桿菌核酸及瓊脂糖凝膠電泳鑒定、紫外分光光度法 鑒定及定量實驗內(nèi)容：1. 過夜培養(yǎng)重組大腸桿菌。2. 將組織塊用勻漿器磨成勻漿。3. 用異硫氧肌和重蒸平衡酚混合液抽提rnao3. 用酚氯仿抽提純化rnao4. 用無水乙醇沉淀rnao

8、5. 沉淀te溶解后做鑒定定量。6. 瓊脂糖凝膠電泳7. 應(yīng)用紫外分光光度計定量實驗?zāi)康囊?、掌握呱酚法提取純化完整rna的方法，掌握瓊脂糖凝膠電泳的方法以及對核酸 分子大小、完整性、純度的判斷方法，掌握紫外分光光度法定量雙鏈dna、單鏈dna、 rna的原理與方法2、熟悉苯酚抽提的原理和操作3、了解防范rnase降解rna的方法 （七）血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳 實驗內(nèi)容1 血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳。2. 血清蛋口染色。 實驗?zāi)康囊?、掌握醋酸纖維薄膜電泳分離分析血清蛋口的原理和方法2、熟悉電泳技術(shù)的原理和應(yīng)用3、通過實驗了解測定血清蛋口含量的臨床意義六、考核（考試）方式：1. 靠勤;2. 實驗報告：每次實驗上交實驗報告，學(xué)期末匯總平均分數(shù)。七、實驗教材