成都中醫(yī)藥大學--中藥化學重點

1、中藥有效成分的提取分離方法（1） 溶劑提取法原理：溶劑穿投入藥材的細胞膜，溶解可溶性物質，形成細胞內外溶質濃度差，將溶質深處細胞膜，達到提取目的。溶劑的選擇： 溶劑分三類：親脂性有機溶劑，親水性有機溶劑，和水極性強弱順序： 石油醚<四氯化碳<苯<二氯甲烷<氯仿<乙醚<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<水溶劑選擇原則：1.根據(jù)相似相溶原則，以最大限度提取所需化學成分，而對共存雜質的溶解度盡可能小。 2.溶劑不能與重要成分發(fā)生化學反應，即使反應也應屬于可逆性。 3.溶劑應該沸點適中，易回收，低毒安全，廉價易得。提取方法：（一）溶劑

2、提取法：1.煎煮法：中藥粗粉加水加熱煮沸提取。 適用于：中藥的大多數(shù)成分。優(yōu)點：簡便易操作 缺點：對含揮發(fā)性成分及加熱易破壞的成分不宜使用。多糖類成分含量高的重要加熱后藥液粘稠度大，不易過濾。2浸漬法： 優(yōu)點：不用加熱，適用于遇熱易破壞或揮發(fā)性成分的提取，也適用于淀粉或黏液質含量較多的重要成分的提取。 缺點：提取時間長，效率低。3滲漉法：優(yōu)點：過程中隨時保持較大的濃度梯度，故提取效率高于浸漬法。4回流提取法： 優(yōu)點：效率高于滲漉法 缺點：受熱易破壞的成分不宜使用。5連續(xù)回流提取法：優(yōu)點：容積消耗量小，操作簡便，提取效率高。 在實驗室連續(xù)回流提取常采用索氏提取器或回流提取裝置。（2） 水蒸氣提取

3、法：適用于：提取能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞的難溶于水的成分。原理：這類成分有揮發(fā)性，在100時有一定的蒸汽壓，當水沸騰時，該類成分一并隨水蒸氣帶出，再用油水分離器或者有機溶劑萃取法，將這類成分自餾出液中分離。（3） 超臨界流體萃取法 常用溶劑： 原理：超臨界流體具有液體和氣體的雙重特性，密度與液體相似，黏度與氣體相近，擴散系數(shù)為液體的100倍。物質的溶解過程包括分子間的相互作用和擴散作用，與溶劑密度和擴散系數(shù)成正比，與黏度成反比，所以超臨界流體對許多物質有很強的溶解能力。優(yōu)點：可以在接近室溫下進行工作，防治某些對熱不穩(wěn)定的成分被破壞或逸散，萃取過程幾乎不用有機溶劑，萃取物中無有機溶劑殘留，對環(huán)境

4、無公害，提取效率高，節(jié)約能耗。色譜分離法優(yōu)點：分離效能高，快速簡便。1，吸附色譜：原理：利用吸附劑對被分離化合物分子的吸附能力的差異，實現(xiàn)分離。 常用吸附劑：硅膠，氧化鋁，活性炭，聚酰胺硅膠：應用廣泛，中藥各類化學成分大多可以用其分離氧化鋁：主要用于堿性或中性親脂性成分的分離，如生物堿，甾，萜類等成分活性炭：主要用于分離水溶性物質，如氨基酸，糖類及某些苷類。聚酰胺：以氫鍵作用為主，主要用于酚類，醌類如黃酮類，蒽醌類及鞣質類成分的分離。2凝膠過濾色譜：原理：分子篩作用，根據(jù)凝膠的孔徑和被分離化合物分子的大小而達到分離目的 常用凝膠：葡聚糖凝膠，羥丙基葡聚糖凝膠3離子交換色譜：基于混合物中各成分解

5、離度差異進行分離。離子交換劑有離子交換樹脂，離子交換纖維素，離子交換凝膠三種4大孔樹脂色譜：大孔樹脂是一類沒有可解離基團，具有多孔結構，不溶于水的固體高分子物質。它可以通過物理吸附有選擇的吸附有機物質而達到分離的目的。5分配色譜 原理：利用被分離成分在固定相和流動相之間的分配系數(shù)的不同而達到分離。 分為：正相色譜法 和 反相色譜法中藥有效成分的波普測定紅外光譜（IR） 用于測 官能團 紫外光譜（UR） 用于測 共軛體系核磁共振光譜（NMR） 用于測 H,C的數(shù)目位置，相互關系質譜（MS）用于測 分子量苷鍵的裂解：苷鍵具有縮醛結構，在稀酸或酶的作用下，苷鍵可發(fā)生斷裂，水解為苷元和糖1. 酸催化水

6、解：苷鍵易被稀酸催化水解，反應一般在水或稀醇中進行，所用酸有鹽酸，硫酸，乙酸和甲酸等。原理：苷鍵原子首先發(fā)生質子化，然后苷鍵斷裂生成苷元和糖的陽碳離子中間體，在水中陽碳離子中間體經(jīng)溶劑化，再脫去氫離子形成糖分子六點規(guī)律！ （1）按苷鍵原子的不同，苷類化合物酸水解速率的順序為：N-苷>O-苷>S-苷>O-苷 （2）呋喃糖苷較吡喃糖苷易水解 （3）酮糖苷較醛糖苷易水解 （4）吡喃糖苷中，吡喃環(huán)上的取代基越大越難水解。順序為：五碳糖苷>甲基五碳糖苷>六碳糖苷>七碳糖苷>糖醛酸苷 （5）氨基糖苷較羥基糖苷難于水解，而羥基糖苷又比去氧糖苷（尤其2-去氧糖苷）難水

7、解。（6）芳香族苷因苷元部分有供電子結構，其水解比脂肪族苷容易得多。苷類的顯色反應和沉淀反應苷類化合物的共性在于都含有糖基部分，因此，苷類化合物可發(fā)生與糖相同的顯色反應和沉淀反應，但苷元中的糖為結合糖，需要先水解成為游離糖后才能進行顯色反應和沉淀反應。糖的顯色反應和沉淀反應1.-萘酚反應（Molish反應）單糖在濃酸作用下失去三分子水，生成的糠醛及其衍生物可與-萘酚試劑反應（在此條件下，低聚糖或多糖先水解成單糖再脫水。）2. 菲林反應（Fehling反應）還原糖能與堿性酒石酸酮試劑反應，使高價銅離子被還原為低價銅離子，因而產(chǎn)生氧化亞銅的磚紅色沉淀。3. 多倫反應（Tollen）還原性糖能與氨性

8、硝酸銀試劑反應，使銀離子還原，生成銀鏡或黑褐色的銀沉淀。 注：單糖均為還原性糖，低聚糖分為還原性糖和非還原性糖，多糖均無還原性。4. 碘呈色反應 碘分子或碘離子排列進入多糖螺環(huán)通道中形成的有色包結化合物產(chǎn)生的呈色反應，所呈色調與多糖的聚合度有關，糖淀粉聚合度為300-350.遇碘呈藍色，膠淀粉聚合度為3000左右，遇碘呈紫紅色 醌類物質的顏色反應1. ）Feigl反應 醌類衍生物在堿性條件下加熱能迅速與醛類及鄰二硝基苯發(fā)生反應，生成紫色化合物。機理見課本 過程：取醌類化合物的水或苯溶液1滴，加入25%碳酸鈉水溶液，4%甲醛及5%鄰二硝基苯的苯溶液各一滴，混合后，置水浴上加熱，在1-4分鐘內產(chǎn)生

9、顯著的紫色。2. ）無色亞甲藍顯色反應 無色亞甲藍溶液為苯醌類及萘醌類的專用顯色劑， 配置方法：將亞甲藍100mg溶于乙醇100ml中，再加入乙酸1ml及鋅粉1g，緩緩振搖至藍色消失后備用。 此反應在PC或TLC上進行，樣品在PC或TLC上呈藍色斑點，可與蒽醌類化合物相區(qū)別。3. ）bornträger反應 羥基醌類在堿性溶液中發(fā)生顏色改變，會使顏色加深。多呈橙，紅，紫紅及藍色。 機理見課本過程：用本法檢驗中藥中是否含有蒽醌類成分時，可取樣品粉末約0.1g，加10%硫酸水溶液5ml，置水浴上加熱2-10分鐘趁熱過濾，濾液冷卻后加乙醚2ml振搖，靜置后分取醚層溶液，加入5%氫氧化鈉水溶

10、液1ml，振搖。如有羥基蒽醌存在，醚層則由黃色褪為無色，而水層則顯紅色。4. ）Kesting-Craven反應 苯醌類及萘醌類化合物當其醌環(huán)上有未被取代的位置時，可在堿性條件下與一些含有活性亞甲基試劑的醇溶液反應，生成藍綠色或藍紫色。5. ）與金屬離子反應 在蒽醌類化合物中，如果有-酚羥基或鄰二酚羥基結構時，則可與等金屬離子形成絡合物。6. ）對亞硝基二甲苯胺反應 9位或10位未取代的羥基蒽醌類化合物，尤其是1，8-二羥基衍生物，其羰基對位的亞甲基上的氫很活潑，可與0.1%對亞硝基二甲苯胺吡啶溶液反應縮合而產(chǎn)生各種顏色。（1，8-二羥基均呈綠色。）此反應可以用于蒽酮化合物的定性檢查，通常用紙

11、色譜，以吡啶-水-苯（1：3：1）的水層為展開劑，以對亞硝基二甲苯胺的乙醇溶液作為顯色劑，在濾紙上發(fā)生顏色變化。如大黃酚蒽酮-9在濾紙上開始為藍立即變綠色。蘆薈大黃素蒽酮-9在濾紙上開始呈綠色很快變藍。 內酯的堿水解 香豆素類分子中具有內酯結構，堿性條件下可水解開環(huán)，生成順式鄰羥基桂皮酸的鹽，順式鄰羥基桂皮酸鹽的水溶液經(jīng)酸化至中性或酸性即閉環(huán)恢復為內置結構。香豆素的顯色反應（1） 異羥肟酸鐵反應 香豆素類成分具有內酯結構，在堿性條件下開環(huán)，與鹽酸羥胺縮合生成異羥肟酸，在酸性條件下再與三價鐵離子絡合而顯紅色。（2） 酚羥基反應 香豆素類成分常具有酚羥基取代，可與三氯化鐵溶液反應產(chǎn)生綠色至墨綠色沉

12、淀。若其酚羥基的鄰位，對位無取代基，可與重氮化試劑反應而顯紅色至紫紅色。（3） Gibb's反應 香豆素類成分在堿性條件（pH=9-10）下內酯環(huán)水解生成酚羥基，如果其對位無取代基，則能與2，6-二氯（溴）苯醌氯亞胺（Gibb's試劑）反應而顯藍色。（可用于判斷碳六位有無取代基）（4） Emerson反應 香豆素類成分如在6位無取代基，內酯環(huán)在堿性條件下開環(huán)后與Emerson試劑（4-氨基安替比林和鐵氰化鉀）反應生成紅色 （可用于判斷碳六位有無取代基）1 香豆素理化性質檢識 熒光 香豆素類化合物在紫外uang（365nm）照射下一般顯藍色或紫的熒光。 7-羥基香豆素-藍色熒光，

13、加堿后，熒光更強，變?yōu)榫G色。 羥基香豆素醚化，或導入非羥基取代基往往使熒光強度減弱，色調變紫， 多烷氧基取代的呋喃香豆素類-黃綠色或褐色熒光。黃酮類化合物的溶解性 1游離黃酮類化合物：一般難溶于水，易溶于甲醇，乙醇，乙酸乙酯，氯仿，乙醚等有機溶劑及稀堿水溶液中。 黃酮，黃酮醇，查爾酮-平面型分子-難溶于水 二氫黃酮，二氫黃酮醇-非平面分子-水中溶解度稍大 異黃酮類化合物-非平面分子，親水性比平面性分子增加 花色素類雖然是平面型結構，但以離子形式存在，有鹽的通性，親水性強，水溶性大。 黃酮類化合物如果分子中引入的羥基增多，則水溶性增大，脂溶性降低，而羥基被甲基化后，則脂溶性增加。 2黃酮苷類：黃

14、酮類化合物的羥基苷化后，水溶性增加，脂溶性降低。黃酮苷一般易溶于水，甲醇，乙醇，等強極性溶劑中，但難溶活不溶于苯，氯仿，乙醚等有機溶劑。 多糖苷比單糖苷水溶性大，3-羥基苷比相應的7-羥基苷水溶性大。黃酮苷的顯色反應1還原反應（1）鹽酸-鎂粉反應 將樣品榮譽甲醇或乙醇1ml中，加入少許鎂粉振搖，再滴幾滴濃鹽酸，1-2分鐘內（必要時微熱）即可顯色。 多數(shù)黃酮，黃酮醇，二氫黃酮及二氫黃酮醇類化合物顯紅紫紅色，少數(shù)顯藍色或綠色，分子中特別是當-環(huán)上有-OH或-OHC3時呈現(xiàn)的顏色亦隨之加深。 查爾酮，橙酮，兒茶素類則無該顯色反應。（2）鈉汞齊還原反應在樣品乙醇溶液中加入鈉汞齊，放置數(shù)分鐘至數(shù)小時或加

15、熱，過濾，濾液用鹽酸酸化，則黃酮，二氫黃酮，異黃酮，二氫異黃酮類顯紅色，黃酮醇類顯黃淡紅色，二氫黃酮醇類顯棕黃色。（3） 四氫硼鈉還原反應 此反應可在試管中貨濾紙上進行，取樣12mg溶于甲醇中，加10mg，再滴加1%鹽酸，或先在濾紙上噴2%的甲醇溶液，1分鐘后熏濃鹽酸蒸氣。2與金屬鹽類試劑的絡合反應（1） 三氯化鋁反應 3-羥基，4-羰基或5-羥基，4-羰基或鄰而酚羥基結構的黃酮類化合物都可以顯色。此反應可在濾紙，薄層上或試管上進行，將樣品的乙醇溶液和1%三氯化鋁溶液反應，生成的絡合物多呈黃色，置紫外燈下顯鮮黃色熒光。但4-羥基黃酮醇或7，4-二羥基黃酮醇顯天藍色光。（2） 鋯鹽-枸櫞酸反應

16、鑒別黃酮類化合物分子中3-或5-羥基的存在與否。 取樣品0.51mg，用甲醇10mg溶解，加2%二氯化鋯甲醇溶液1ml，若出現(xiàn)黃色，說明3-或5-羥基與鋯鹽生成了絡合物。再加入2%枸櫞酸甲醇溶液，如黃色不減退，示有3-羥基或3，5-羥基，如果黃色顯著減退，示有5-羥基，但無3-羥基。（3） 氨性氯化鍶反應 黃酮類化合物的分子如果有鄰二酚羥基，則可與氨性氯化鍶試劑反應，取少量樣品置小試管中，加入甲醇1ml溶解，再加0.01mol氯化鍶的甲醇溶液3滴和被氨氣飽和的甲醇溶液三滴，如產(chǎn)生綠色至棕色乃至黑色沉淀，則表示有鄰二酚羥基。（4） 三氯化鐵反應 酚羥基可與三氯化鐵水溶液或醇溶液發(fā)生顯色反應。呈現(xiàn)

17、紫綠藍等不同顏色。3.硼酸顯色反應4.堿式試劑反應 黃酮類在冷和熱的氫氧化鈉水溶液中 產(chǎn)生 黃橙色 查耳酮或橙酮類在堿液中生成紅或紫色。二氫黃酮類在冷堿中呈黃橙色，放置一段時間后變深紅紫紅色。5. 與五氯化銻反應 用于區(qū)別查耳酮和其他酮類 將樣品510mg溶于無水四氯化碳5ml中，加2%五氯化銻的四氯化碳溶液1ml.查耳酮類生成紅或紫紅色沉淀，黃酮，二氫黃酮及黃酮醇類顯黃色至橙色。 堿性水或堿性稀醇溶液提取法 原理：黃酮類成分大多含有酚羥基，因此可用堿性水或堿性稀醇提取，提取液經(jīng)過酸化后黃酮類化合物被游離，可沉淀析出或用有機溶劑萃取。143頁 聚酰胺柱色譜 聚酰胺的吸附作用是通過其酰胺羥基與黃

18、酮類化合物分子上的酚羥基形成氫鍵締合而產(chǎn)生的，其吸附強度主要取決于黃酮類化合物分子中酚羥基的數(shù)目與位置等及溶劑與黃酮類化合物或與聚酰胺之間形成的氫鍵締合能力的大小。溶劑分子與聚酰胺或黃酮類化合物形成氫鍵締合的能力越強，則聚酰胺對黃酮類化合物的吸附作用將越弱。洗脫規(guī)律：1.黃酮類化合物分子能形成氫鍵的基團數(shù)目，即酚羥基數(shù)目越多則吸附能力越強，在色譜柱上越難被洗脫。2.當分子中酚羥基數(shù)目相同時，酚羥基的位置對吸附也有影響，如果酚羥基所處位置易于形成分子內氫鍵，則其與聚酰胺的吸附力減小，易被洗脫下來。3.分子內芳香化程度越高，共軛雙鍵越多，則吸附能力越強。4.不同類型黃酮類化合物，被吸附強弱的順序：

19、黃酮醇>黃酮>二氫黃酮醇>異黃酮5.游離黃酮與黃酮苷的分離，若以含水移動相做洗脫劑，黃酮苷比游離黃酮顯洗脫下來，切洗脫的先后順序一般是：叁糖苷>雙糖苷>單糖苷>游離黃酮；若以有機溶劑做洗脫劑，結果則相反，游離黃酮比苷先洗脫下來。6.洗脫溶劑的影響。聚酰胺與各類化合物在水中形成氫鍵的能力越強，在有機溶劑中較弱，在堿性溶劑中最弱。因此，各種溶劑在聚酰胺色譜柱上的洗脫能力右弱至強的順序為：水<甲醇或乙醇<丙酮<稀氫氧化鈉水溶液或氨水<甲酰胺<二甲基甲酰胺（DMF）<尿素水溶液。171頁 萜類的含義及分類 分類依據(jù)萜類化合物為一類

20、由甲戊二羥基衍生而成，基本碳價多具有2個或2個以上異戊二烯單位（C5）結構特征的化合物。分類：萜類化合物分子中異戊二烯單位的多少。類別碳原子數(shù)異戊二烯單位數(shù)半萜51單帖=萜102倍半萜153二萜204二倍半萜255三萜306四萜408多萜7.5*103至3*105>8環(huán)烯醚萜類 顯色反應 環(huán)烯醚萜類的苷易被水解，生成的苷元為半縮醛結構，其化學性質活潑，容易進一步聚合，難以得到結晶性的苷元。苷元遇酸、堿、羧基化合物和氨基酸等都能變色。如車葉草苷與稀酸混合加熱，能被水解、聚合產(chǎn)生棕黑色樹脂狀聚合物沉淀；若用酶水解，則顯深藍色。游離的苷元遇氨基酸并加熱，即產(chǎn)生深紅色至藍色，最后生成藍色沉淀。因

21、此，與皮膚接觸，也能使皮膚成藍色。苷元溶于冰乙酸溶液中，加少量銅離子，加熱顯藍色。柱色譜法分離硝酸銀-硅膠或硝酸銀-氧化鋁做吸附劑進行絡合吸附。分離機制：利用硝酸銀可與雙鍵形成絡合物，而雙鍵數(shù)目、位置及立體構型不同的萜在絡合情況程度及絡合物穩(wěn)定性方面有一定的差異，利用此差異可進行色譜分離。205頁 揮發(fā)油理化性質 1.性狀：常溫下大多為無色或淡黃色的油狀液體，少數(shù)有其他顏色。 2.揮發(fā)性：常溫下可自由揮發(fā)。 3.溶解性：不溶于水，易溶于有機溶劑。 4.物理常數(shù) *5.不穩(wěn)定性：與空氣、光線經(jīng)常接觸會逐漸氧化變質，使揮發(fā)油的相對密度增加，顏色變淺深，失去原有香味，形成樹脂樣物質，不能隨水蒸氣蒸餾

22、。揮發(fā)油組成成分常含有雙鍵、醇羥基、醛、酮、酸性基團、內酯等結構，故相應的能與溴及亞硫酸氫鈉發(fā)生加成反應、與肼類產(chǎn)生縮合反應，并有銀鏡反應，異羥肟酸鐵反應、皂化反應及遇堿成鹽反應。揮發(fā)油的分離方法 1.冷凍析晶法 2.分餾法 3.化學分離法 4.色譜分離法三萜類化合物結構特點和分類根據(jù)三萜類化合物在生物體內的存在形式、結構和性質，可分為三萜皂苷及其苷元和其他三萜類（包括樹脂、苦味素、三萜生物堿及三萜醇等）兩大類。但一般是根據(jù)三萜類化合物碳環(huán)的有無和多少進行分類，目前已發(fā)現(xiàn)的三萜類化合物，多數(shù)為四環(huán)三萜和5環(huán)三萜，也有少數(shù)為鏈狀、單環(huán)、雙環(huán)三環(huán)三萜。分類 1.鏈狀三萜 2.單環(huán)三萜 3.雙環(huán)三萜

23、 4.三環(huán)三萜 5.四環(huán)三萜 6.五環(huán)三萜 溶血作用皂苷能溶血，是因為大多數(shù)皂苷能與膽甾醇結合生成不溶性的分子復合物。當皂苷水溶液與紅細胞接觸時，紅細胞壁上的膽甾醇與皂苷結合，生成不溶于水的復合物沉淀，破壞了紅細胞的正常滲透，使細胞內滲透壓增加而發(fā)生崩解，從而導致溶血現(xiàn)象，因此膽甾醇能解除皂苷的溶血毒性。人參總皂苷沒有溶血現(xiàn)象，但經(jīng)分離后，B型和C型人參皂苷具有顯著的溶血作用，而A型人參皂苷則有抗溶血作用。 255頁 強心苷水解反應強心苷的苷鍵可被酸或酶催化水解，分子中的內酯環(huán)和其他酯鍵能被堿水解。*酸水解1. 溫和酸水解：用稀酸0.020.05mol/L的鹽酸或硫酸，在含水醇中經(jīng)短時間加熱回

24、流，可使型強心苷水解為苷元和糖。因為苷元和-去氧糖之間、-去氧糖與-去氧糖之間的糖苷鍵極易被水解，在此條件下即可斷裂。而-去氧糖與-羥基糖、-羥基糖與-羥基糖之間的苷鍵在此條件下不易斷裂，常常得到二糖或三糖。由于此水解條件溫和，對苷元的影響較小，不致引起脫水反應，對不穩(wěn)定的-去氧糖亦不致分解。2. 強烈酸水解：型和型強心苷的結構特點是與苷元直接相連的均為羥基糖，由于糖的2-羥基阻礙了苷鍵原子的質子化，使水解較為困難，用溫和酸水解無法使其水解，必須增高酸的濃度（3%5%的鹽酸或硫酸），延長作用時間或同時加壓，才能使-羥基糖定量地水解下來，但常引起結構的改變，即苷元失去一分子或數(shù)分子水形成脫水苷元

25、。3. 氯化氫-丙酮法：將強心苷置于含1%氯化氫的丙酮溶液中，20放置兩周。因糖分中C2羥基與丙酮反應，生成丙酮化物，進而水解，可得到原生苷元和糖衍生物。259頁 強心苷的檢識 結構理化檢識 1，C17位上不飽和內酯環(huán)的顏色反應 用于區(qū)分甲，乙型強心苷。  C-17位不飽和內酯環(huán)的顏色反應   甲型強心苷在堿性醇溶液中，雙鍵由20（22）轉移到20（21），生成C-22活性亞甲基，能與下列活性亞甲基試劑作用而顯色。乙型強心苷在堿性醇溶液中不能產(chǎn)生活性亞甲基，故無此類反應。此類反應不僅可用于強心苷類的檢識，還可用來區(qū)別甲型和乙型強心苷。其反應均呈

26、深紅色。   （1）Legal反應：試劑為亞硝酰鐵氰化鈉和氫氧化鈉醇溶液。    （2）Raymond反應：試劑為間二硝基苯和氫氧化鈉醇溶液。   （3）Kedde反應：試劑為3，5-二硝基苯甲酸和氫氧化鈉醇溶液。    （4）Baljet反應：試劑為苦味酸和氫氧化鈉醇溶液。2，-去氧糖的顏色反應   （1）Keller-Kiliani（K-K）反應：-去氧糖的顯色反應，試劑包括冰醋酸、濃硫酸和三氯化鐵。若在此條件下，能水解出游離的-去氧糖，醋酸

27、層漸呈藍色。需要注意的是，這一反應是-去氧糖的特征反應，但只對游離的-去氧糖或-去氧糖與苷元連接的強心苷呈色。-去氧糖和葡萄糖或其他羥基糖連接的雙糖、叁糖及乙酰化的-去氧糖，由于在此條件下不能水解出的-去氧糖而不呈色。   （2）占噸氫醇反應：該反應為-去氧糖的顯色反應，只要分子中有-去氧糖即可呈紅色。試劑包括冰醋酸、濃鹽酸和占噸氫醇。   （3）過碘酸-對硝基苯胺反應   （4）對-二甲氨基苯甲醛反應  甾體皂苷的結構類型依照螺甾烷結構中C25的構型和F環(huán)的環(huán)合狀態(tài)，將其分為四種類型。1. 螺

28、甾烷醇型：由螺甾烷衍生的皂苷。2. 異螺甾烷醇型：由異螺甾烷衍生的皂苷。3. 呋甾烷醇型:由F環(huán)裂環(huán)而衍生的皂苷。4. 變形螺甾烷醇型。306頁 （一）判斷堿性大小 pKa越大，堿性越強。生物堿分子中堿性基團pKa值大小順序：胍基季銨堿>N-烷雜環(huán)>脂肪胺>芳香胺N-芳雜環(huán)>酰胺吡咯堿性大小和分子結構關系309頁 生物堿的沉淀反應生物堿在酸性水或稀醇中與某些試劑生成難溶于水的復鹽或絡合物的反應。碘化鉍鉀試劑：橘紅色至黃色無定形沉淀。碘化汞鉀試劑：類白色沉淀。硅鎢酸試劑：類白色或淡黃色沉淀。碘-碘化鉀試劑：紅棕色無定形沉淀。苦味酸試劑：黃色沉淀雷氏銨鹽試劑：紅色沉淀或結晶

29、315頁 生物堿的檢識 薄層色譜 1 吸附薄層色譜法 2 分配薄層色譜法紙色譜高效液相色譜苷的提取方法：1中藥粉末【沸水或乙醇等極性大的溶液提取，回收溶劑】 2總提取物【加水攪散，石油醚脫脂】3.1 石油醚層（非極性物質） 3.2水層【氯仿或乙酸乙酯提取】4.2.1氯仿或乙酸乙酯層（苷元，極性小的苷）4.2.2 水層【水飽和正丁醇提取】5.2.2.1正丁醇層（苷類化合物）5.2.2.2水層（無機鹽，糖，多肽，蛋白質等）游離蒽醌分離方法 （pH梯度提取法）1藥材【乙醇提取】 2乙醇浸膏【乙醚溶解】 3.1不溶物 3.2乙醚溶液【5%碳酸氫鈉】 4.2.1碳酸氫鈉溶液【酸化】-沉淀【重結晶】-結晶（含-COOH或二個-OH） 4.2