紅細(xì)胞體積分布寬PPT課件

1、一、檢測(cè)參數(shù)n 三分類血細(xì)胞分析儀的18項(xiàng)參數(shù)n 五分類血細(xì)胞分析儀新增的一些參數(shù)第1頁(yè)/共142頁(yè)（一）白細(xì)胞系列參數(shù)序號(hào)序號(hào)英文縮寫英文縮寫中文全稱中文全稱1 1WBC白細(xì)胞數(shù)白細(xì)胞數(shù)2 2NEUT#中性粒細(xì)胞數(shù)中性粒細(xì)胞數(shù)3 3LYMPH#淋巴細(xì)胞數(shù)淋巴細(xì)胞數(shù)4 4MONO#單核細(xì)胞數(shù)單核細(xì)胞數(shù)5 5LYMPH%淋巴細(xì)胞百分率淋巴細(xì)胞百分率6 6MONO%單核細(xì)胞百分率單核細(xì)胞百分率7 7NEUT%中性粒細(xì)胞百分率中性粒細(xì)胞百分率第2頁(yè)/共142頁(yè)（二）紅細(xì)胞系列參數(shù)序號(hào)序號(hào)英文縮寫英文縮寫中文全稱中文全稱1 1RBCRBC紅細(xì)胞數(shù)紅細(xì)胞數(shù)2 2HGBHGB血紅蛋白量血紅蛋白量3 3HC

2、THCT紅細(xì)胞壓積紅細(xì)胞壓積4 4MCVMCV平均紅細(xì)胞體積平均紅細(xì)胞體積5 5MCHMCH平均紅細(xì)胞血紅蛋白量平均紅細(xì)胞血紅蛋白量6 6MCHCMCHC平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度7 7RDWRDW紅細(xì)胞體積分布寬度紅細(xì)胞體積分布寬度第3頁(yè)/共142頁(yè)（三）血小板系列參數(shù)序序號(hào)號(hào)英文縮寫英文縮寫中文全稱中文全稱1 1PLT血小板數(shù)血小板數(shù)2 2MPV平均血小板容積平均血小板容積3 3PDW血小板體積分布寬度血小板體積分布寬度4 4PCT血小板壓積血小板壓積第4頁(yè)/共142頁(yè)（一）新增分類參數(shù)序序號(hào)號(hào)英文縮寫英文縮寫中文全稱中文全稱1 1EO#嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)2 2

3、BASO#嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)3 3EO%嗜酸性粒細(xì)胞百分率嗜酸性粒細(xì)胞百分率4 4BASO%嗜堿性粒細(xì)胞百分率嗜堿性粒細(xì)胞百分率第5頁(yè)/共142頁(yè)（二）新增網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)序號(hào)序號(hào)英文縮寫英文縮寫中文全稱中文全稱1Retic#網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)2Retic%網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率3LFR低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率4MFR中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率5HFR高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率第6頁(yè)/共142頁(yè)二、 檢測(cè)參數(shù)的臨床應(yīng)用紅細(xì)胞系列參數(shù)血小板系列參數(shù)白細(xì)胞系列參數(shù)第7頁(yè)/共142頁(yè)一）RBC系列參數(shù)第8頁(yè)/

4、共142頁(yè)1 .鑒別缺鐵性貧血和-輕型海洋性貧血：1）共同點(diǎn)：小細(xì)胞性貧血，峰左移。2）鑒別點(diǎn)： aRDW增高，峰底寬 bRDW正常，峰底窄（一）：紅細(xì)胞體積分布寬度（RDW）bNfl100 200 a第9頁(yè)/共142頁(yè)2診斷缺鐵性貧血為小細(xì)胞低色素性貧血，伴有RDW異常增高者（RDW正?？膳懦?.進(jìn)行貧血的新的形態(tài)學(xué)分類（MCV/RDW）大細(xì)胞不均一性正細(xì)胞不均一性小細(xì)胞不均一性異常大細(xì)胞均一性正細(xì)胞均一性小細(xì)胞均一性正常RDW增 高正 常減 低MCV第10頁(yè)/共142頁(yè)（二）網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)1.未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞比率（IRF）:用網(wǎng)織紅細(xì)胞分析骨髓造血狀態(tài)優(yōu)于白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血小板計(jì)數(shù)。（1）骨

5、髓抑制：HFR和MFR的減低早于中性粒細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)。骨髓恢復(fù)時(shí)， HFR和MFR迅速增高。第11頁(yè)/共142頁(yè)（2）放療和化療時(shí)：長(zhǎng)期化療， HFR和MFR減低早于LFR。而HFR和MFR的迅速增高是骨髓恢復(fù)的征象。（3）IRF與Ret的變化在不同的疾病中不同：見(jiàn)P125的表319。第12頁(yè)/共142頁(yè)2. 網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白量（Ret-He）: 反映Ret的質(zhì)量變化，達(dá)30.5 pg為患者需要補(bǔ)充鐵的最佳臨界值，與CHr有很好的相關(guān)性。第13頁(yè)/共142頁(yè)3. 網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（CHr）：29pg/細(xì)胞是患者補(bǔ)鐵指標(biāo)，為缺鐵性貧血的靈敏指標(biāo)，代表體內(nèi)鐵蛋白代謝的最新進(jìn)展。第14頁(yè)

6、/共142頁(yè)4. 網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積（MRV）和球形細(xì)胞平均體積（MSCV）: 正常人的MSCV比MCV大，當(dāng)MSCV93.3%.MRV是觀察EPO療效一個(gè)穩(wěn)定且較靈敏的指標(biāo)。第15頁(yè)/共142頁(yè) HDW是反映周圍血紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量異質(zhì)性參數(shù)。HDW和RDW明顯增高：見(jiàn)于遺傳性球紅細(xì)胞增多癥。另外，HDW對(duì)鐮形細(xì)胞貧血、 -輕型海洋性貧血有一定診斷意義。（三）血紅蛋白分布寬度（HDW）第16頁(yè)/共142頁(yè)二）血小板系列參數(shù)第17頁(yè)/共142頁(yè)（1） 鑒別PLT減低時(shí)的病因：MPV正?；蛟龈撸篒TP、脾亢、SLE MPV正?；驕p低：AA。 MPV減低：急性白血病、艾滋病。1.血小板平均體積（

7、MPV）第18頁(yè)/共142頁(yè)（2） 評(píng)價(jià)骨髓造血功能恢復(fù)情況：局部炎癥：MPV正常；敗血癥：MPV減低。白血病緩解：MPV增高。MPV和PLT持續(xù)減低：骨髓造血衰竭；骨髓功能恢復(fù)：MPV增高。第19頁(yè)/共142頁(yè)（3） MPV與血小板功能關(guān)系：明顯相關(guān)，大血小板代謝活躍，粘附聚集力強(qiáng)。（4） MPV與PLT：兩者呈非線性負(fù)相關(guān)，隨PLT計(jì)數(shù)增高，MPV變??；骨髓受抑時(shí)，MPV減低早于PLT減少；骨髓受抑恢復(fù)時(shí)，MPV增高又早于PLT增高。第20頁(yè)/共142頁(yè)IPF反映骨髓增生狀態(tài)，更新血小板的速度和細(xì)胞動(dòng)力學(xué)變化，在血小板減少癥的鑒別診斷中有重要意義。骨髓造血功能良好：IPF增高，可見(jiàn)于血栓性

8、血小板減少性紫癜。骨髓造血受抑：IPF減低，可見(jiàn)于AA。2. 未成熟血小板比率（IPF）第21頁(yè)/共142頁(yè)3. 血小板分布寬度（PDW）：鐮形紅細(xì)胞性貧血時(shí)PDW升高。4. 血小板成分平均濃度（MPC）：反映血小板內(nèi)的密度，減低表示血小板激活，與反映血小板活化的表面抗原CD62P定量（金標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)）有很好的相關(guān)性。第22頁(yè)/共142頁(yè)三）白細(xì)胞系列參數(shù)第23頁(yè)/共142頁(yè)1、中間細(xì)胞群（MID）:包括正常時(shí)的M、E、B；病理時(shí)的各種原始幼稚細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞等。MID異常，必須進(jìn)行復(fù)檢。2、未成熟粒細(xì)胞（IG）:主要包括桿狀核、早幼、中幼和晚幼粒，但不包括原始粒細(xì)胞。IG3，提示敗血癥

9、。第24頁(yè)/共142頁(yè)三、結(jié)果顯示數(shù) 據(jù)圖 形報(bào) 警第25頁(yè)/共142頁(yè)（一）數(shù)據(jù) 化驗(yàn)單姓名 ：程實(shí) 性別：男 年齡：30歲科室：內(nèi)科 結(jié)果臨床診斷：肺炎？ RBC 4.51012/L送檢標(biāo)本：血 Hb 150g/L送檢目的：血常規(guī) WBC 12109/L DC： N 80% L 14% E 3% M 2% B 1%送檢醫(yī)師 羅春麗 報(bào)告醫(yī)師：吳明送檢日期：2007-8-2 報(bào)告日期：2007-8-2 第26頁(yè)/共142頁(yè)（二）圖形血細(xì)胞分析儀常用的圖形有兩類：直方圖和散點(diǎn)圖，分別對(duì)應(yīng)不同的原理。分析這些圖形的變化，不僅可以評(píng)估儀器的工作狀態(tài)或儀器是否受非檢測(cè)成分的干擾，而且可提示各類細(xì)胞比

10、率的變化或血液內(nèi)出現(xiàn)非正常血細(xì)胞。第27頁(yè)/共142頁(yè)1.電阻法細(xì)胞體積分布直方圖分析 細(xì)胞分析儀根據(jù)各類細(xì)胞大小為橫坐標(biāo)，以縱坐標(biāo)表示一定體積細(xì)胞的相對(duì)頻率，從而獲得RBC、WBC和PLT的直方圖。相對(duì)數(shù)表示在Y軸上，體積表示在X軸上，以飛升（fl)為單位。第28頁(yè)/共142頁(yè)（1）白細(xì)胞直方圖WBC通過(guò)計(jì)數(shù)小孔時(shí)，儀器計(jì)算機(jī)部分可以將WBC體積從35450fL分為256個(gè)通道，每個(gè)通道為1.64fL。細(xì)胞根據(jù)其大小被分別放在不同的通道中，從而得到白細(xì)胞體積分布直方圖。第29頁(yè)/共142頁(yè)三分群：小細(xì)胞群：成熟淋巴細(xì)胞中間細(xì)胞群：?jiǎn)魏思?xì)胞，嗜酸粒細(xì)胞，嗜堿粒細(xì)胞大細(xì)胞群： 中性粒細(xì)胞，桿狀核

11、細(xì)胞，中性晚幼粒細(xì)胞兩分群：小細(xì)胞群：淋巴細(xì)胞 大細(xì)胞群： 粒細(xì)胞第30頁(yè)/共142頁(yè).正常WBC直方圖血液分析儀在35450fL范圍內(nèi)分析白細(xì)胞，可以看到三個(gè)明顯的細(xì)胞分區(qū)。第31頁(yè)/共142頁(yè)左側(cè)又高又陡的峰，跨越在3590fL，為淋巴細(xì)胞峰，主要為成熟淋巴細(xì)胞。最右側(cè)又低又寬的峰從160450fL，定位中性粒細(xì)胞峰，以N為主要細(xì)胞，也包含桿狀和晚幼粒細(xì)胞。第32頁(yè)/共142頁(yè)兩峰之間的平坦區(qū)：90160fL，定為單個(gè)核細(xì)胞峰，以單核細(xì)胞為主，也含E、B等。第33頁(yè)/共142頁(yè).直方圖分析應(yīng)注意的問(wèn)題溶血?jiǎng)┨幚淼腤BC體積與其自然體積無(wú)關(guān)，儀器法M體積小于中性粒細(xì)胞原因。各廠家血液分析儀所

12、用的稀釋液、溶血?jiǎng)┏煞植煌耆嗤?，?duì)白細(xì)胞膜的作用程度不同，同一份血液在不同儀器直方圖形狀有所不同，分群的設(shè)置點(diǎn)不同，因此必須使用配套試劑第34頁(yè)/共142頁(yè) 影響體積出入的因素：溶血?jiǎng)?白細(xì)胞計(jì)數(shù)池除加入一定量的稀釋液之外還要加入溶血?jiǎng)?，紅細(xì)胞膜溶解同時(shí)白細(xì)胞膜通透性改變，白細(xì)胞質(zhì)滲出，使細(xì)胞膜緊裹在細(xì)胞核或存在的顆粒物質(zhì)周圍，所以經(jīng)溶血?jiǎng)┨幚砗蠛蓄w粒的粒細(xì)胞比無(wú)顆粒的單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞體積大些。第35頁(yè)/共142頁(yè)WBC體積直方圖不完全相同，但電阻抗法各類儀器白細(xì)胞直方圖病理變化趨勢(shì)是一致的，因此，在分析各種病理變化的圖形之前，必須先掌握自己實(shí)驗(yàn)室所擁有的白細(xì)胞正常直方圖。第36頁(yè)/共1

13、42頁(yè) 報(bào)警如果被檢測(cè)的標(biāo)本異常，不能滿足實(shí)驗(yàn)室已設(shè)定的各項(xiàng)規(guī)則，則儀器出現(xiàn)報(bào)警。此時(shí)，工作人員必須特別注意復(fù)核標(biāo)本?？傊?，檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)報(bào)警，意味著儀器檢測(cè)結(jié)果可靠性已經(jīng)明顯降低，需復(fù)核確認(rèn)。第37頁(yè)/共142頁(yè)（1）報(bào)警來(lái)源：主要有檢測(cè)結(jié)果超出實(shí)驗(yàn)室設(shè)定的檢測(cè)項(xiàng)目參考值，復(fù)檢標(biāo)本，臨床疾病標(biāo)本異常和患者人群變異。（2）報(bào)警有效性：儀器以參考方法檢測(cè)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，判斷儀器的檢測(cè)性能指標(biāo)包括：靈敏度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、和陰性預(yù)測(cè)值總效率。第38頁(yè)/共142頁(yè)（3）報(bào)警形式：符號(hào)（表示增高，表示降低），顏色（如紅色表示增高，藍(lán)色表示降低），或直接用文字（在結(jié)果旁注明“增高” 、 “降低” ，或標(biāo)以

14、R1、R2、R3、R4等）第39頁(yè)/共142頁(yè)L峰左側(cè)區(qū)域異常（R1）：可能有血小板聚集、巨大血小板、有核紅細(xì)胞、未溶解紅細(xì)胞、白細(xì)胞碎片、蛋白質(zhì)或脂類顆粒。L峰與單個(gè)核細(xì)胞峰之間區(qū)域異常（R2）:可能有異淋,漿細(xì)胞,原始細(xì)胞，E、B增多。第40頁(yè)/共142頁(yè)單個(gè)核細(xì)胞區(qū)與N峰區(qū)之間區(qū)域異常（R3） ：可能有未成熟N、異常細(xì)胞亞群，E、B增多，核左移。中性粒細(xì)胞峰右側(cè)區(qū)域異常（R4）：可能中性粒細(xì)胞絕對(duì)增多。第41頁(yè)/共142頁(yè)（4）報(bào)警內(nèi)容紅細(xì)胞系列：RBC大小不均、高/低色素細(xì)胞、大/小紅細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片、紅細(xì)胞異常分布、血紅蛋白缺乏等。第42頁(yè)/共142頁(yè)白細(xì)胞系列：桿狀核細(xì)

15、胞、異型淋巴細(xì)胞、過(guò)氧化物酶染色異常、核左移、未成熟粒細(xì)胞等。血小板系列：血小板聚集、大血小板、血小板分布異常、紅細(xì)胞碎片等。骨髓造血：原始細(xì)胞、幼稚細(xì)胞等。第43頁(yè)/共142頁(yè)異常白細(xì)胞直方圖舉例中性粒細(xì)胞比例增高（L比例降低圖1）：特征是N峰明顯增大，L峰明顯減少。血涂片檢查以N為主，可達(dá)90，L只占510。第44頁(yè)/共142頁(yè)圖1中性粒細(xì)胞比例增高第45頁(yè)/共142頁(yè)中性粒細(xì)胞比例減低（L比例增高圖2）：特征是L峰明顯增大，N峰明顯減少。血涂片檢查以L為主，可達(dá)6070，N只占30左右。第46頁(yè)/共142頁(yè)圖2中性粒細(xì)胞比例減低第47頁(yè)/共142頁(yè)單個(gè)核細(xì)胞增多特征：在直方圖90150f

16、L區(qū)域出現(xiàn)一個(gè)明顯的細(xì)胞峰。第48頁(yè)/共142頁(yè)原始、幼稚白細(xì)胞增多特征：在直方圖上單核細(xì)胞區(qū)出現(xiàn)一個(gè)高大的細(xì)胞峰，并與淋巴細(xì)胞峰融合，粒細(xì)胞峰變小。白總數(shù)明顯增高。第49頁(yè)/共142頁(yè)原始、幼稚細(xì)胞增多第50頁(yè)/共142頁(yè) 聚集血小板干擾 P108,圖345特征：直方圖左側(cè)起點(diǎn)高，離橫坐標(biāo)約0.8cm，血小板計(jì)數(shù)值明顯減低并伴有血小板直方圖的圖形異常。第51頁(yè)/共142頁(yè)（2）紅細(xì)胞直方圖 分析紅細(xì)胞直方圖時(shí)，要注意觀察曲線峰的增高降低、左移右移、單峰雙峰，曲線寬窄，曲線起始高低尾部抬高延伸等變化。第52頁(yè)/共142頁(yè) 正常紅細(xì)胞直方圖是一個(gè)近似正態(tài)分布的單個(gè)峰的光滑曲線，通常位于36360

17、fL, X軸表示紅細(xì)胞體積，Y軸表示不同體積紅細(xì)胞出現(xiàn)的頻率。 . 正常紅細(xì)胞直方圖 第53頁(yè)/共142頁(yè)異常紅細(xì)胞直方圖小細(xì)胞不均一性 特征：直方圖上波峰左移，峰底變寬。血涂片鏡檢：紅細(xì)胞大小不一，以小細(xì)胞為主。第54頁(yè)/共142頁(yè)大細(xì)胞不均一性特征：直方圖上波峰右移，峰底變寬。血涂片鏡檢：紅細(xì)胞大小不一，以大細(xì)胞為主第55頁(yè)/共142頁(yè)巨幼細(xì)胞性貧血治療有效直方圖 雙峰圖特征：由于治療以后，貧血的病情得到了改善 ，外周血中出現(xiàn)了較多的正常細(xì)胞，使血中存在兩群紅細(xì)胞，導(dǎo)致紅細(xì)胞直方圖顯示為雙峰。波峰右移，峰底變寬。第56頁(yè)/共142頁(yè)第57頁(yè)/共142頁(yè)（3）血小板直方圖 血小板隨紅細(xì)胞一起

18、在一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)中檢測(cè)，根據(jù)不同的閾值，計(jì)算機(jī)可區(qū)分出血小板和紅細(xì)胞。血小板直方圖范圍在230fL之間。分析PLT直方圖的變化對(duì)了解PLT的體積變化、血液的抗凝情況及某些干擾因素具有一定的意義。第58頁(yè)/共142頁(yè). 血小板正常直方圖血液分析儀在230fL范圍內(nèi)分析PLT。直方圖上正常血小板主要集中在220fL范圍內(nèi)，呈偏態(tài)分布。第59頁(yè)/共142頁(yè) 如果標(biāo)本中存在較多的小紅細(xì)胞、巨大血小板或血小板聚集塊等，血小板直方圖會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化， 例如：異常：右移-巨大血小板 窄峰-血小板減少 血小板異常直方圖第60頁(yè)/共142頁(yè)大血小板增多 特征：直方圖曲線右移，在35fL處接近X軸，血涂片上可見(jiàn)較多

19、大血小板。第61頁(yè)/共142頁(yè)2. 散點(diǎn)圖 散點(diǎn)圖對(duì)應(yīng)的是應(yīng)用光散射原理。通常，平面散點(diǎn)圖是二維的（X、Y軸）圖象，而三維（X、Y、Z軸）圖則顯示立體圖象。在二維坐標(biāo)系，X軸和Y軸分別代表一種檢測(cè)原理或檢測(cè)角度的細(xì)胞信息。在坐標(biāo)象限中的任何一個(gè)散點(diǎn)反映的就是X軸和Y軸的綜合信息。第62頁(yè)/共142頁(yè)觀察和分析散點(diǎn)圖時(shí)要注意坐標(biāo)上的散點(diǎn)所在象限平面圖上的位置或散點(diǎn)群的疏密。第63頁(yè)/共142頁(yè)7 血液分析儀檢測(cè)結(jié)果顯微鏡涂片及復(fù)檢規(guī)則第64頁(yè)/共142頁(yè)2005年，國(guó)際血液學(xué)組織提出了顯微鏡復(fù)檢的41條建議性標(biāo)準(zhǔn)。注意防止兩種傾向：一是過(guò)分相信儀器，不鏡檢；而是過(guò)分不信任儀器，高鏡檢率。第65頁(yè)

20、/共142頁(yè)8 質(zhì)量保證、儀器較準(zhǔn)和性能評(píng)價(jià)第66頁(yè)/共142頁(yè)一、質(zhì)量保證第67頁(yè)/共142頁(yè)（一）分析前質(zhì)量保證1. 做好操作人員崗前培訓(xùn) 包括（1）上崗前應(yīng)仔細(xì)閱讀儀器說(shuō)明書或接受良好的培訓(xùn)。（2）注意分析前、中、后每一個(gè)質(zhì)控步驟。（3）必須具有高度的責(zé)任和事業(yè)心，必須抓好醫(yī)德醫(yī)風(fēng)的建設(shè)。第68頁(yè)/共142頁(yè)2. 按照儀器說(shuō)明書的要求，選擇合適的儀器安裝環(huán)境。 血液分析儀系精密電子儀器，對(duì)安裝環(huán)境有特殊要求，要滿足對(duì)空間、溫度（1525）、濕度（80%）、電源、抗電磁、抗熱源、光線、通風(fēng)等基本條件。第69頁(yè)/共142頁(yè)3. 做好儀器的鑒定工作。儀器安裝或每次維修后，必須安照ICSH公布的

21、血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià)方案對(duì)儀器的技術(shù)性能進(jìn)行測(cè)試公布。4.做好儀器的校正工作。可參照公布的關(guān)于血液分析儀較準(zhǔn)規(guī)范化的建議進(jìn)行。第70頁(yè)/共142頁(yè)5. 標(biāo)本的采集和運(yùn)送盡可能采用靜脈血，不用皮膚穿刺血。保證血液質(zhì)量和充足用量。采血容器：盡可能用真空采血系統(tǒng)?？鼓齽和扑]用EDTA-K2（1.52mg/mL）。第71頁(yè)/共142頁(yè)血液貯存：血液的稀釋：稀釋血液后應(yīng)盡快測(cè)定。6. 注意受檢者生理狀態(tài)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響第72頁(yè)/共142頁(yè)1.試劑的合理使用 原則上應(yīng)使用原儀器配套的試劑。注意測(cè)試時(shí)試劑的作用溫度和時(shí)間。2.標(biāo)本要求：血樣要符合實(shí)驗(yàn)要求，采血管清潔，標(biāo)本要充分混勻。（二）分析中質(zhì)量控制第7

22、3頁(yè)/共142頁(yè)3.認(rèn)真作好室內(nèi)質(zhì)控4.注意儀器的半堵孔現(xiàn)象（1）判斷：完全堵孔，不能計(jì)數(shù)，不出結(jié)果，有些儀器會(huì)提示“Clog”. 不完全堵孔：觀察計(jì)數(shù)時(shí)間：延長(zhǎng)看示波器波形：異常波形聽(tīng)儀器聲音：不規(guī)則間斷聲看計(jì)數(shù)指示燈閃爍：不規(guī)律閃動(dòng)。第74頁(yè)/共142頁(yè)（2）檢測(cè)堵孔的原因及預(yù)防原因：血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)器的微孔，直徑100m，深70m，構(gòu)成一個(gè)圓柱形孔道，任何微小的贓物混入標(biāo)本中，均易造成堵孔。采血時(shí)擦Hb吸管的棉花纖維。第75頁(yè)/共142頁(yè) 采血部位溫度低或穿刺過(guò)淺，出血不暢，擠壓造成纖維蛋白絲形成甚至是小血凝塊。 標(biāo)本杯未蓋好，落入灰塵。 使用后小孔管清洗不夠，節(jié)日期間，儀器長(zhǎng)時(shí)間不用，

23、試劑中水分蒸發(fā)，鹽類結(jié)晶堵孔。第76頁(yè)/共142頁(yè)用專用小毛刷輕刷幾次微孔。邊按儀器的反沖裝置邊刷小孔。卸下檢測(cè)器，裝入水后用吸耳球從頂端輕輕加壓沖洗。將檢測(cè)器內(nèi)裝入少量次氯酸鈉（3%5%）并浸泡5分鐘左右，然后用吸耳球清洗，再用水把檢測(cè)器清洗干凈。處理方法第77頁(yè)/共142頁(yè) 采血：穿刺部位溫度、深度應(yīng)適宜。 用精細(xì)的衛(wèi)生紙代替棉花擦Hb吸管。 工作環(huán)境應(yīng)無(wú)塵，標(biāo)本杯應(yīng)注意防塵。 假日之前把儀器清洗干凈。 定期按不同方式清洗干凈檢測(cè)小孔。預(yù)防第78頁(yè)/共142頁(yè)5. 注意某些病理因素對(duì)血液分析儀檢測(cè)結(jié)果的影響多發(fā)性骨髓瘤、白血病、糖尿病等可導(dǎo)致WBC、 PLT計(jì)數(shù)值假性增高。WBC顯著增多會(huì)

24、影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)，有核紅細(xì)胞出現(xiàn)影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)。高脂血癥可使Hb假性升高。第79頁(yè)/共142頁(yè)1.保留標(biāo)本備查。2.重視室內(nèi)質(zhì)控。3.加強(qiáng)質(zhì)控小組的責(zé)任。4.分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果各參數(shù)間關(guān)系。5.加強(qiáng)與臨床聯(lián)系。6.積極參加室內(nèi)質(zhì)控。（三）分析后質(zhì)量控制第80頁(yè)/共142頁(yè)二、 儀器校準(zhǔn)n 概述（校準(zhǔn)物、質(zhì)控物概念）n 血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)的一般要求n 校準(zhǔn)方法第81頁(yè)/共142頁(yè)（一）概述在血細(xì)胞分析儀全面質(zhì)量控制過(guò)程中，校準(zhǔn)物和質(zhì)控物是兩種必不可少的物質(zhì)。校準(zhǔn)物是指“一種用于校準(zhǔn)、分度或修正測(cè)量值的物質(zhì)或裝置”。這種物質(zhì)或裝置必須跟蹤國(guó)家或國(guó)際的參考制劑或參考物。第82頁(yè)/共142頁(yè)對(duì)于血液分析儀來(lái)說(shuō)，

25、校準(zhǔn)物有兩種：一種是標(biāo)準(zhǔn)的儀器，另一種是經(jīng)用參考方法確定的血液或其他人工微粒制品。第83頁(yè)/共142頁(yè)質(zhì)控物不同于校準(zhǔn)物，它是“一種用于常規(guī)工作中核查分析過(guò)程（或儀器）準(zhǔn)確性的物質(zhì)。該物質(zhì)在性質(zhì)方面類似被分析的標(biāo)本并隨病人樣本一起進(jìn)行分析”。第84頁(yè)/共142頁(yè)（二）血液分析儀校準(zhǔn)的一般要求1、儀器安裝時(shí)必須由廠家進(jìn)行校準(zhǔn)并提供校準(zhǔn)紀(jì)錄，否則不能用于臨床。2、更換部件進(jìn)行維修后，可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性有影響時(shí)需校準(zhǔn)。第85頁(yè)/共142頁(yè)3、室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果顯示系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果有漂移時(shí)（排除儀器故障和試劑的因素后）。4、對(duì)于開(kāi)展常規(guī)檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室，要求每6個(gè)月至少進(jìn)行一次校準(zhǔn)。第86頁(yè)/共142頁(yè)5、實(shí)

26、驗(yàn)室應(yīng)按建議要求建立適合本實(shí)驗(yàn)室使用的血液分析儀校準(zhǔn)程序并寫成文件。6、校準(zhǔn)后的儀器，必須開(kāi)展室內(nèi)質(zhì)控以監(jiān)測(cè)儀器檢測(cè)結(jié)果是否發(fā)生漂移。第87頁(yè)/共142頁(yè)（三）校準(zhǔn)方法n 利用儀器配套校準(zhǔn)物來(lái)校準(zhǔn)n 利用定值的新鮮血作為校準(zhǔn)物來(lái)校準(zhǔn)。第88頁(yè)/共142頁(yè)1、利用該儀器配套校準(zhǔn)物來(lái)校準(zhǔn) 使用藥監(jiān)局注冊(cè)登記的國(guó)際公認(rèn)質(zhì)量可靠的儀器檢測(cè)系統(tǒng)，才能使用該儀器制造商規(guī)定的配套校準(zhǔn)物，同時(shí)嚴(yán)格按儀器說(shuō)明書規(guī)定操作。第89頁(yè)/共142頁(yè)（1）儀器的準(zhǔn)備 先用清潔劑對(duì)儀器內(nèi)部各通道及測(cè)試室處理30分鐘。確認(rèn)儀器的背景計(jì)數(shù)、精密度及攜帶污染在說(shuō)明書規(guī)定的范圍內(nèi)時(shí)，才可進(jìn)行校準(zhǔn)，否則須查找原因，必要時(shí)請(qǐng)維修人員進(jìn)

27、行檢修。 第90頁(yè)/共142頁(yè)將校準(zhǔn)物從冰箱內(nèi)(28C)取出后，要求在室溫(1825)條件下放置15分鐘，使其溫度恢復(fù)至室溫。檢查校準(zhǔn)物是否超出效期，是否有變質(zhì)或污染。（2）校準(zhǔn)物的準(zhǔn)備第91頁(yè)/共142頁(yè)輕輕地將校準(zhǔn)物反復(fù)顛倒混勻，并置于兩手掌間慢慢搓動(dòng)，使校準(zhǔn)物充分混勻。打開(kāi)瓶塞時(shí)，應(yīng)墊上紗布或軟紙，使濺出的血液被吸收。將兩瓶校準(zhǔn)物合在一起，混勻后再分裝于2個(gè)瓶?jī)?nèi)。第92頁(yè)/共142頁(yè)取1瓶校準(zhǔn)物，連續(xù)檢測(cè)11次，第1次檢測(cè)結(jié)果不用，以防止攜帶污染。儀器若無(wú)自動(dòng)校準(zhǔn)的功能，則將第211次的各項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果用手工記錄在工作表格中，計(jì)算出均值，均值的小數(shù)點(diǎn)后數(shù)字保留位數(shù)較日常報(bào)告結(jié)果多一位。有自動(dòng)

28、校準(zhǔn)功能的儀器可直接得出均值。（3）用校準(zhǔn)物進(jìn)行儀器校準(zhǔn)第93頁(yè)/共142頁(yè)各參數(shù)均值與定值（說(shuō)明書中提供）的差異全部等于或小于表中的第一列數(shù)值時(shí)，儀器不需進(jìn)行調(diào)整，記錄檢測(cè)數(shù)據(jù)即可 。計(jì)算公式：(均值定值)定值100 第94頁(yè)/共142頁(yè)表一 血細(xì)胞分析儀校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)表參數(shù)參數(shù)一列差異（）一列差異（） 二列差異（）二列差異（）WBC1.51.51010RBC1 11010Hb1 11010HCT2 21010MCV1 11010PLT3 31010第95頁(yè)/共142頁(yè)若各參數(shù)均值與定值的差異大于表中的第二列數(shù)值時(shí)，需請(qǐng)維修人員核查原因并進(jìn)行處理 。若各參數(shù)均值與定值的差異在表中第一列與第二列數(shù)值

29、之間時(shí)，需對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)整，調(diào)整方法可按說(shuō)明書的要求進(jìn)行。 第96頁(yè)/共142頁(yè)若儀器無(wú)自動(dòng)校準(zhǔn)功能，則將定值除以所測(cè)均值，求出校準(zhǔn)系數(shù)，將儀器原來(lái)的系數(shù)乘以校準(zhǔn)系數(shù)即為校準(zhǔn)后的系數(shù)，將校準(zhǔn)后的系數(shù)輸人儀器更換原來(lái)的系數(shù) 。第97頁(yè)/共142頁(yè)將第2管未用的校準(zhǔn)物充分混勻，在儀器上重復(fù)檢測(cè)11次，去除第1次結(jié)果，計(jì)算第211次檢測(cè)結(jié)果的均值，再次與表中的數(shù)值對(duì)照。如各參數(shù)的差異全部等于或小于第一列數(shù)值，證明校準(zhǔn)合格。如達(dá)不到要求，須請(qǐng)維修人員進(jìn)行檢修。 （4）校準(zhǔn)結(jié)果的驗(yàn)證第98頁(yè)/共142頁(yè)2.利用定值的新鮮血作為校準(zhǔn)物進(jìn)行校準(zhǔn)第99頁(yè)/共142頁(yè)（1）使用新鮮血作為校準(zhǔn)物 的要求用EDTAK

30、2為抗凝劑的真空采血管取健康人新鮮血10ml，每ml血需抗凝劑的濃度為1.52.2mg。要求新鮮血的Hb、WBC、RBC、Hct和Plt檢測(cè)結(jié)果在參考范圍內(nèi)。將新鮮血混勻后分裝于3個(gè)管內(nèi)，每管的血量為3ml。 第100頁(yè)/共142頁(yè)取其中1管，用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)或規(guī)范操作的檢測(cè)系統(tǒng)連續(xù)檢測(cè)11次，計(jì)算第211次檢測(cè)結(jié)果的均值，以此均值為新鮮血的定值（解釋）。其他2管新鮮血作為定值的校準(zhǔn)物，用于儀器的校準(zhǔn)。第101頁(yè)/共142頁(yè) *二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)：直接溯源至參考方法；具備較完善的質(zhì)量保證措施；與國(guó)外具有權(quán)威性的參考實(shí)驗(yàn)室定期進(jìn)行比對(duì)的檢測(cè)系統(tǒng)。 *規(guī)范操作的檢測(cè)系統(tǒng)：使用配套試劑,用配套校準(zhǔn)物

31、定期進(jìn)行儀器校準(zhǔn)；規(guī)范地開(kāi)展室內(nèi)質(zhì)量控制；參加室間質(zhì)量評(píng)價(jià)成績(jī)優(yōu)良；人員經(jīng)過(guò)培訓(xùn)。第102頁(yè)/共142頁(yè)（2）新鮮血如何定值：直接溯源至國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的定值方法：可使用血細(xì)胞分析的參考方法定值，但要建立參考方法的難度較大，在臨床實(shí)驗(yàn)室難以實(shí)施。 第103頁(yè)/共142頁(yè)間接溯源至國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的定值方法：取新鮮血用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)或規(guī)范操作的檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)其進(jìn)行定值，用定值的新鮮血作為常規(guī)校準(zhǔn)物。要求在8小時(shí)內(nèi)(溫度條件為18C25)完成定值及儀器的校準(zhǔn)。 第104頁(yè)/共142頁(yè)（3）利用定值新鮮血的校準(zhǔn)步驟與上述利用該儀器配套校準(zhǔn)物來(lái)校準(zhǔn)的步驟相同（略）。第105頁(yè)/共142頁(yè)三 、性能評(píng)價(jià)（一）血液分析儀總

32、體評(píng)價(jià) 新儀器安裝后，或每次維修后，必須對(duì)儀器的性能進(jìn)行測(cè)試、評(píng)價(jià)。第106頁(yè)/共142頁(yè) 評(píng)價(jià)內(nèi)容包括：儀器基本情況，儀器手冊(cè)，方法學(xué)，評(píng)價(jià)步驟；技術(shù)評(píng)價(jià)計(jì)劃包括：校準(zhǔn)、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品概念，試劑，標(biāo)本及處理（如顛倒混勻），常規(guī)血細(xì)胞計(jì)數(shù)研究參考值，記錄原始結(jié)果，預(yù)評(píng)價(jià)、性能評(píng)價(jià)。第107頁(yè)/共142頁(yè)1.稀釋效應(yīng)：指測(cè)定值與稀釋倍數(shù)是否呈比例關(guān)系。稀釋度應(yīng)覆蓋生理和常見(jiàn)病理范圍。線性關(guān)系范圍越寬越理想。 P 0.01, 非線性相關(guān)； P 0.05，未偏離線性。（二）血液分析儀性能評(píng)價(jià)第108頁(yè)/共142頁(yè)2.準(zhǔn)確性 (accuracy) 準(zhǔn)確性是指測(cè)定結(jié)果與真值一致性的程度。3.總重復(fù)性(o

33、verall repeatability) 指同一份標(biāo)本多次測(cè)量的結(jié)果接近的程度。重復(fù)測(cè)定1份抗凝靜脈血10次，計(jì)算CV值。第109頁(yè)/共142頁(yè)4.精密度 (precision) 批內(nèi)（within-batch）精密度：同一批樣本重復(fù)測(cè)定結(jié)果的評(píng)價(jià)。批間(between-batch)精密度：對(duì)兩批或兩批以上樣本重復(fù)測(cè)定結(jié)果的評(píng)價(jià)。 精確度和準(zhǔn)確度第110頁(yè)/共142頁(yè)5.攜帶污染率(carry over)連續(xù)測(cè)定1份高值樣本3次（i1、i2、i3）再測(cè)定1份低值樣本3次（j1、j2、j3）攜帶污染率（%）（j1-j3）/（i3-J3） 第111頁(yè)/共142頁(yè)6.標(biāo)本老化：指靜脈標(biāo)本采集后，觀

34、察隨時(shí)間增加測(cè)定結(jié)果的變化量。7、儀器對(duì)異常標(biāo)本和干擾物的靈敏度。第112頁(yè)/共142頁(yè)四 、質(zhì)量控制方法n Levey-Jennings質(zhì)控法n Westgard多規(guī)則質(zhì)控法第113頁(yè)/共142頁(yè)1.Levey-Jennings質(zhì)控法本法應(yīng)用非定值質(zhì)控物，以2S（包含95的質(zhì)控結(jié)果）為警告界限，3S（99.7）為失控線的一種質(zhì)控方法，其方法簡(jiǎn)單方便。本法的作用：確定重復(fù)性誤差?？稍u(píng)價(jià)儀器的穩(wěn)定性可檢測(cè)稀釋誤差和試劑的質(zhì)量。第114頁(yè)/共142頁(yè)（1）確定質(zhì)控物：全自動(dòng)血液分析儀可用部分醛化紅細(xì)胞及假白細(xì)胞作質(zhì)控物。半自動(dòng)血液分析儀可用溶血液作Hb、假白細(xì)胞、醛化血小板或膠乳微粒作血小板測(cè)定的

35、質(zhì)控物。第115頁(yè)/共142頁(yè) 對(duì)質(zhì)控物的要求:質(zhì)量要穩(wěn)定，半年內(nèi)不能變質(zhì)且保持結(jié)果不變。同一批次內(nèi)瓶間差異小，Hb質(zhì)控物CV值應(yīng)1%,細(xì)胞計(jì)數(shù)質(zhì)控物CV值應(yīng)OCV.第119頁(yè)/共142頁(yè)（4）繪制Levey-Jennings（L-J）質(zhì)控圖：標(biāo)點(diǎn)：在縱坐標(biāo)軸上標(biāo)記出X、X+2S 、S-2S、 S+3S 的標(biāo)志，并將其具體數(shù)值標(biāo)在左側(cè)標(biāo)尺上。第120頁(yè)/共142頁(yè)畫線：用紅筆畫出X2S，用藍(lán)筆畫出X3S線，即成為一張OCV（RCV）的“空?qǐng)D”。并填齊各種項(xiàng)目，如測(cè)定項(xiàng)目，測(cè)定單位，血清來(lái)源及批號(hào)，起止日期，主要儀器及使用波長(zhǎng)等。第121頁(yè)/共142頁(yè)填項(xiàng)目：在圖紙下方“日期” “測(cè)定值 ” 和

36、“操作者”欄內(nèi)按原始記錄填入相應(yīng)內(nèi)容。未做測(cè)定的節(jié)假日、星期天在圖上作出空格。畫點(diǎn)：畫出每個(gè)檢測(cè)值所對(duì)應(yīng)的圖點(diǎn)，并將各圖點(diǎn)用直線相連。第122頁(yè)/共142頁(yè)正常情況下每天測(cè)定結(jié)果應(yīng)在2S范圍內(nèi)上、下兩側(cè)波動(dòng)。警告線以內(nèi)的結(jié)果為在控結(jié)果，失控線以外的為失控結(jié)果，介于警告線和失控線之間的結(jié)果為警告結(jié)果。（4）結(jié)果分析第123頁(yè)/共142頁(yè)如控制圖中有連續(xù)5、6點(diǎn)都落在均值的上側(cè)或下側(cè)，雖然結(jié)果在控，但說(shuō)明有“定向改變”，提示可能有系統(tǒng)誤差存在。第124頁(yè)/共142頁(yè)如在質(zhì)控圖中有連續(xù)5、6點(diǎn)有持續(xù)增高或減低，說(shuō)明有“傾向改變”，提示應(yīng)檢查試劑或標(biāo)準(zhǔn)液，每月末進(jìn)行質(zhì)控結(jié)果分析，全部進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，CV改變過(guò)大或超出允許范圍，應(yīng)查找原因。第125頁(yè)/共142頁(yè)2. Westgard多規(guī)則質(zhì)控法本法是在Levey-Jennings質(zhì)控基礎(chǔ)上，同時(shí)使用多個(gè)質(zhì)控物和多項(xiàng)規(guī)則來(lái)進(jìn)行質(zhì)量控制的方法。能幫助質(zhì)控管理者